Lisis celular asociada a la pared y membranas celulares

LA PARED BACTERIANA

Las cubiertas que rodean la célula se han identificado por medio de técnicas de tinción y técnicas de aislamiento y caracterización bioquímica de los componentes celulares.

Las principales cubiertas son: cápsulas y limos la pared celular de las bacterias Gram-positivas la pared celular de las bacterias Gram-negativas la membrana plasmática los mesosomas (invaginación de la membrana

plasmática)

La relación topográfica entre la pared celular y la membrana plasmática se observa en esta micrografía electrónica.

A. Microfotografía electrónica de la bacteria Gram positiva Micrococcus lysodeikticus mostrando la gruesa capa de peptidoglicano que conforma la pared celular (cw), por debajo de ella la membrana plasmática (cm), un mesosoma(m), y el nucleoide (n).B. Célula bacteriana procesada mostrando la línea de fractura entre la membrana citoplasmática (m.i.) y la  pared celular (m.e.). Barra = 1 µm.

Dos grupos de bacterias carecen de pared celular: los Mycoplasma que poseen solamente membrana

celular las formas L derivadas de bacterias que perdieron su

habilidad de sintetizar su pared celular

--Gram +--Gram -

Pared celular de peptidoglicanos

-Forma característica

-Provee protección mecánica

LISIS

El mecanismo de lisis es el siguiente:

La destrucción de la pared celular deja al protoplasma de las bacterias rodeado únicamente por la membrana celular ("protoplasto"), lo cual convierte a la bacteria en un organismo extraordinariamente sensible a las variaciones de tonicidad del medio, esta es la base del fenómeno de aclaración que tiene lugar luego de la acción de la lisozima, cuando la solución es hipotónica.

INTERÉS BIOTECNOLÓGICO

• Extracelulares

• Intracelulares

Tipo de metabolito

• La lisis celular

Operación untaría • Selección de

lisis

Tipos de lisis

Cuando son intracelulares

Métodos de lisis

Mecánicos

Molinos de perlas Homogenización

Químicos

Choque osmóticoEnzimasTratamiento alcalinoDisolución lipídica

Digestión enzimática

• Fundamento: Digestión de la pared celular• Ejemplo:

• Sin embargo las bacterias Gram – son mas sensibles a otros métodos de lisis como los molinos de perlas por su membrana externa.

Lisozima Rompen enlaces

Ácido- acetimurámico y N-acetil glucosamina

Choque osmótico

• Ruptura de la membrana

Disolución lipídica

Que es?

• Método químico por el cual se desestabiliza la pared celular por solventes orgánicos.

Fundamento

• El solvente es absorbido por los lípidos de la pared celular , lo que produce la expansión y la ruptura de esta.

Técnica

• El volumen de solvente que sea agrega es aproximadamente igual al 10% de la biomasa .

METODOS MECANICOS

MOLINOS DE PERLAS

MOLIDO EN MOLINO DE PERLAS

Fundamento

Las células son prensadas entre perlas de vidrio

En donde se aplica

Tratamiento de suspensiones celulares a gran escala

Homogenizador

Fundamentos para

selección de lisis

Sistemas celulares de

secreción

Métodos de rompimiento

celular

permeabilización

Estructura de pared celular