María Cecilia Arango Jaramillo Colección, conservación y transporte de muestras microbiológicas.

María Cecilia Arango Jaramillo

Colección, conservación y Colección, conservación y transportetransporte

de muestras de muestras microbiológicasmicrobiológicas


El propósito del estudio Los objetivos Las metodologías Las variables Los procedimiectos de

análisis Las metas a alcanzar.

Para desarrollar un estudio microbiológico es necesario que previamente se conozcan:


TIPOS DE ESTUDIOS

Los estudios microbiológicos se clasifican de acuerdo con sus objetivos y el tiempo de ejecución en tres tipos:

– Estudios baseEstudios base

– Estudios de monitoreoEstudios de monitoreo

– Estudios de evaluaciónEstudios de evaluación


Estudios base

Permite un conocimiento global del sistema y de las comunidades de microorganismos.


Se considera que los ecosistemas dulceacuícolas tropicales manifiestan cambios ambientales y biológicos considerables, dependientes de las temporadas de sequía y lluvia.


CONDICIONES AMBIENTALESFLUCTUANTES

Estrategia r


CONDICIONES AMBIENTALESESTABLES

EstrategiaK


MONITOREOMONITOREO

Se extiende en el tiempo ( a través de los años)

Su propósito: observar periódicamente ecosistemas susceptibles de cambios (positivos o negativos), por alteraciones de origen natural o antrópicas, tanto puntuales como continuos.


Permiten definir: Si la capacidad ambiental de un

ecosistema se está superando O si los tensores están siendo

asimilados adecuadamente por estos– (disolución, dispersión, mezcla,

descomposición, biodegradación, oxidación u otros).

Así mismo, su implementación puede darse para observar la recuperación de ecosistemas deteriorados.


Los programas de monitoreo pueden llevarse a cabo para:Valorar planes de manejo ambientalEvaluar efectos ambientalesSeguimiento continuo a procesos industriales.


Muestreos no programados deben hacerse:

Cuando ocurran cambios importantesimportantes En caso de presentarse condiciones

anómalas que puedan conducir a variaciones en la calidad del medio (positivas o negativas).


A lo largo del programa de monitoreo, se debe mantener contacto contacto permanente con el ecosistema bajo permanente con el ecosistema bajo estudioestudio

Para no llegar a conclusiones erróneas o falsas interpretaciones


El cotejo de resultados de un tiempo con los ya existentes, permite inferir cuales serán las condiciones futuras.


Estudios de evaluaciónEstudios de evaluación

Estos estudios tienen lugar cuando condiciones de contaminación de origen natural o antrópico, se producen en forma esporádica pero en magnitudes importantes, causando un cierto deterioro del ecosistema con cambios en la cambios en la comunidad de microorganismoscomunidad de microorganismos..


DISEÑO DE ESTUDIOSDISEÑO DE ESTUDIOSMICROBIOLÓGICOSMICROBIOLÓGICOS

Evaluación preliminarElección de los microorganismos a muestrearElección de variables físico químicas MuestreoUbicación de estacionesTipo y número de muestras


Evaluación preliminarEvaluación preliminar

La evaluación preliminar es la etapa en la cual se realiza la planificación del estudio y requiere del tiempo necesario para aclarar todos los interrogantes que se presenten.


Paralelamente se debe llevar a cabo un reconocimiento del área con el propósito de:– Precisar los principales gradientes

ambientales naturales– Las variables antropogénicas

presentes– Un premuestreo es necesario para

definir los análisis que se harán y los equipos de muestreo

– Definir el tratamiento numérico que habrá de implementarse con cada variable


La planeación de detallada del estudio evitará resultados inútiles, inútiles, sesgados o erróneossesgados o erróneos, o incrementos no programados de esfuerzo, esfuerzo, costos y tiempo.costos y tiempo.


Validez de los resultados del análisis de aguas

Dependen de El número de muestras que

adecuadamente representen el cuerpo de agua o el efluente.– Calidad estándar– Límites permisibles

Sitios de muestreo y registros previamente planeados y conocidos


Recipientes para la toma de muestras Frascos de muestreoFrascos de muestreo: 125 ml

como mínimo, tapa metálica hermética.

Limpieza:Limpieza:

1. Lavado con detergente y agua caliente

2. Enjuague con agua caliente 3 veces

3. Enjuague con agua destilada


Agente desclorinizador.Agente desclorinizador.– Para muestras tratatadas con cloro.– Tiosulfato de Na al 10%, 0,1 ml por

frasco de 125 mlsuficiente para neutralizar 15 mg de cloro.

Cobertura del frascoCobertura del frasco: papel Kraft, aluminio o película plástica

Esterilización:Esterilización: – Autoclave: 121°C por 15 minutos– Calor seco 170°C por 2 horas


Técnicas de muestreo

Primero las muestras de estaciones menos contaminadas evitar contaminación cruzada

Nunca muestras compuestas Aguas profundas: Botella Kemerer


Aguas superficiales: 15 - 30 cm de profundidad

Siempre en contra de la corriente


Abrir el frasco sólo en el momento del muestreo

Llenado de frascos hasta 2-3 cm antes de la tapapara agitar


Identificación y manejo de muestrasCaracterísticas de las etiquetas: Limpias Impermeables Indelebles Fijas, pero fáciles de remover Tamaño suficiente para consignar los

datos


Muestras sin etiqueta o con etiquetas deficientes no son aceptadas en el laboratorio.


Secretaría de Salud Municipio de El CarmenEstaciónNo. 4

Fecha11-08-01

Hora13:00

Muestra No.2

Antes de la bocatoma Jairo PérezColimetría completa Preservativo:

Tiosulfato de Na 10%Simple Cultivos abonados

con gallinaza hasta laorilla de la quebrada

Nombre de la entidad o del estudioEstaciónNo.

Fecha Hora Muestra No.

Localización de la estación ColectorTipo de análisis a practicar PreservativoTipo de muestra Comentarios


Registro de datos de campo

Registro de datos de campoHoja No. Colectores:

HoraEstación Númerode la

muestra

Fecha decolección Toma Entrega

Otros


Registro de datos de campoHoja No.2/2

Colectores:J avier Trujillo y Sandra Peláez

HoraEstación Númerode la

muestra

Fecha decolección Toma Entrega

Otros

Antesde laescuela

1/3 28- 08- 01 8:00 14:35 Epoca de lluviaBasuras en ellechoAlrededoresabonados congallinazaAgua turbiaRiberaserosionadas


Selección de sitios de muestreo


Lago o represa (recreación)

Piscinasdiariamenteentemporadasde máximouso

AB

C

CC

C

B E

D

B


Abastecimiento de agua

C, a la profundidad de la toma

D

DD

A

A

B

ED


Río de orden mayor

60 m

1 Km


Muestreos en la red

Frecuencia de la toma de muestras:

Tablas de la EPA Legislación vigente Standard Method

Se necesita una cobertura sistemática para:

Detectar averías Contaminación

cruzada


Frecuencia del muestreo:Decreto 475 de 1998, Calidad del agua potable

Población servida Númeromínimo demuestraspor mes

Intervalomáximo por

muestrasconsecutivas

25 a 1.000 1 Mensual1.001 a 2.500 2 Quincenal2.501 a 3.300 3 C/10 días

320.001 a 450.000 180 6 por día450.001 a 600.000 450 7 por día

1.230.001 a 1.520.000 330 11 por día1.230.001 a 1.520.000 360 12 por día

3.020.001 a 3.960.000 450 15 por día3.960.001 o más 480 16 por día


Toma de muestras en la red

FlamearDejar correr el agua

Tomar la muestra

Si utiliza preservativo, no la deje rebosar


Dónde tomar las muestras de la red?

Edificios municipales y públicos Parques Escuelas Estaciones de gasolina Teatros Aeropuertos Restaurantes Plantas industriales Residencias privadas


Transporte de muestras

Refrigeradas, evitar que el hielo las cubra

Fijarlas para evitar roturas


Almacenamiento de muestras

0°C a 4°C 6-12 horas en refrigeración 30 horas aguas tratadas < 6 horas aguas residuales


Seguridad

Parte de la confiabilidad depende de la vigilancia y vigilancia y custodia de custodia de las muestraslas muestras

Ellas son la base de obras o acciones legales

Debe demostrarse posesión física o registros


El colector de las muestras es responsable de ellas hasta su entrega en el laboratorio


El laboratorio: Es responsable de las

muestras que se le entreguen

Debe registrar su entrada y los resultados del análisis, la fecha de entrega de resultados y la de destrucción de la muestra


El laboratorio debe utilizar métodos estándar de acuerdo a la legislación vigente

Los laboratorios que analicen agua para consumo humano deberán llevar un programa de aseguramiento de la calidad que garantice los resultados (Decreto 475/98)


El coordinador del estudio debe recibir copia del registro de laboratorio.

El original queda archivado en el laboratorio


Para tener en cuenta

Manipule la muestra lo menos posiblemuchos microorganismos sufren estrés o mueren

Las muestras deben ser manejadas por el menor número de personas posible


Utilice técnicas de muestreo estándar Use cuaderno de campo para registrar

datos de cada muestra


Fije las etiquetas en el campo antes de tomar antes de tomar la muestrala muestra

La de la tapita oxidada era lade la estación 2 o 3?

La estaré confundiendo conla muestra 12 que tienela tapa rayada?


Sitios de muestreo y polución visible deben ser registrados con fotos


El contacto con el laboratorio

Contacte un laboratorio especializado en análisis microbiológico de aguas: garantiza que tiene estandarizados los análisis

Hable con las personas encargadas sobre el tipo de análisis que necesitará, la frecuencia de muestreo, el propósito y la duración del estudio


Averigüe en el laboratorio: Los días y horas en los que el laboratorio

recibe muestras para análisis microbiológico.

El número de muestras que le pueden recibir simultáneamente

Los requerimientos del laboratorio para la entrega y procesamiento de muestras


Análisis microbiológicos corrientes:

Microorganismos heterótrofos:ufc/100 ml Su presencia se utiliza para indicar la eficiencia en la reducción de microrganismos en procesos de sedimentación, cloración, filtración


NMP coliformes totales: No. /100 ml

Su presencia significa que hay que tratar el agua, pero no significa necesariamente contaminación fecal.

Esta contaminación puede provenir del suelo, el agua, etc.


NMP coliformeds fecales : No. /100 ml

Significan contaminación fecal de origen humano o animal.

Se debe buscar el origen, pero en ambos casos puede haber patógenos

Su número es igual o menos que el de los coliformes totales


NMP enterococos : No. /100 ml

Los estreptococos confirman contaminación fecal cercana y reciente

Los estreptococos menos que los coliformes

Enterovirus : No. Ufc (calvas)/ml

En estudios limnológicos se utiliza el índice de saprobidad


Se recomienda un valor máximo de 100 UFC /100 cm3, para microorganismos mesófilos, como prueba

complementaria de calidad microbiológica del agua

Decreto 475 de 1998, Calidad del agua potableTécnica utilizada

Microorganismosindicadores

Filtración por

membrana

Sustrato definido Tubos múltiples defermentación

“aceptable hasta elaño 2000”

Coliformestotales

0 UFC/100 cm3

0 microorganismos/100 cm3

< 2microorganismos/100 cm3 negativo

Escherichhia coli 0 UFC/100 cm3

0 microorganismos/100 cm3

Ninguna muestrade agua potable

debe contenerla enuna muestra de100

cm3

independdientemente del método


Control de calidad microbiológica del agua potable:

Libro de registro de calidad del agua

% Aceptabilidad = Na X 100Nt

Na = Número de muestrasaceptables: cumplen conrequisitos Art 25

Nt = Número total de muestraspor mes: total de muestrasanalizadas y registradas

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