Muestra N°419 - �Sospecha Raynaud (3)
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Muestra N°419 - Sospecha RaynaudInmunología clínica 2015
Pablo FagundezSoledad Valsangiacomo
Carolina PerroniRosina Giorgi
Florencia Bentancor
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Fenómeno de Raynaud
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SUPERPOSICIÓN CON OTRAS PATOLOGÍASRAYNAUD 1°
No está asociada a una enfermedad subyacente
RAYNAUD 2°Fenómeno secundario a otras enfermedades
Superposición con múltiples patologías
- Presencia de anticuerpos anti nucleares (ANA) - Capilaroscopia periungueal con anormalidades
- Personas mayores de 30 años- Presenta una prevalencia de 0,4%
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SUPERPOSICIÓN CON OTRAS PATOLOGÍAS
Alteraciones sanguineas
Intoxicación por metales
Efectos secundarios de fármacos
Enfermedades del Sistema NerviosoReumatológicas Enfermedad arterial
oclusiva
Enfermedades del colageno
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MÉTODOS419
IFI
LATEX
ELISA Anti-MPO
LINE BLOT - Núcleo-9-lineMarca ORGENTEC - ALEMANIA
Ac IgG anti MPO?
ANA-HEp2
Auto ac IgM anti IgG?
Ac anti nucleares IgG?
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RESULTADOSIFI(ANAs)
Se utilizaron células Hep-2 las
cuales provienen de una línea
celular humana derivada de un
carcinoma laríngeo epitelial,
para fijar el porta objetos.
El patrón encontrado en la
muestra de suero 419 fue
centrómerico, en el cual se
logró visualizar los centrómeros
dentro de la célula.Figura 1. Detección de anticuerpos antinucleares. Patrón centromérico. Concentración 40x
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IFI.HEp-2Se realizaron 3 diluciones: 1/80; 1/160; y una en 1/320;
Como es una técnica cuantitativa podemos calcular el titulo de los anticuerpos presentes.
Resultado: mayor a 1/320.
Figura 2. Anticuerpos antinucleares. Patrón centromérico. Concentración 100x
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ELISA-ANTI-MPOLos pocillos de la placa de ELISA fueron recubiertos con myeloperoxidase (MPO) extra purificado.
El complejo colorimétrico formado, se midió en el espectrofotómetro y realizó una curva de calibración para luego interpolar nuestros resultados.
El resultado obtenido fue: 0/760 U/ml
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LINE-BLOTAl finalizar la práctica se obtuvo un producto insoluble coloreado en la banda de antígeno señalada siendo este el antígeno CENP-B.
Al obtener en el resultado un color débil y al validar con el control limite el color obtenido, podemos interpretar al resultado como DUDOSO.
Figura 3. Resultado Line Blot
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ENSAYO DE AGLUTINACIÓN EN LÁTEX
Al mezclar la muestra con el reactivo látex FR, se forma una aglutinación de las partículas de látex, si el suero del paciente es positivo.
El resultado fue una no aglutinación y por lo tanto un resultado negativo.
Figura 4. Ejemplo de resultado obtenido por latex.
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DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
IFI ANAs
Control +: patrón homogéneo
Control -: sin fluorescencia
muestra: patrón centromérico
esperable
título: �1/320
se valida
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DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
ELISA-MPO
resultado esperado
control + 37/50 U/ml 25-45 U/ml
control - 1.1/2.2 U/ml menor a 5 U/ml
muestra 0/760 U/ml mayor a 5?
se valida
Muestra: dudosaMPO: Marcador para Vasculitis
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DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
Line Blot
CO/EC/SC: + Validamos es test
se observó banda en CENP-B de intensidad menor o igual al COD
UDOSO Podría esperarse ver reactividad en la banda CENP-B y/o Scl-70
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DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES
Aglutinación: solo se observó aglutinación en el C+ validamos test
Resultado esperado: +/- Asociado a Artritis Reumatoidea
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CONCLUSIÓN
Desde el punto de vista del laboratorio clínico no podemos confirmar la sospecha del paciente. Será necesario repetir el ELISA y el Line blot, y acompañar dichos resultados del historial clínico del paciente para arribar a una confirmación.
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• Clínica• Capiloroscopia• Estudio serológico
RAYNAUD
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international recommendations for the assessment of autoantibodies to cellular antigens referred to al anti nuclear antibodies. Agmon-Levin, N. et al. 2015
• Esclerosis sistémica (SSc)• Raynaud´s
- para Anti-Scl-70
Line Blot• Clinica• Digitoscopia
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Los auto-anticuerpos anti citosol de neutrófilos (ANCA), la mayoría de los casos están dirigidos a la enzima MPO.
Natural and disese associated anti-myeloperoxidasa (MPO) autoantibodies. Guilpain, P. et al. 2008
+ , en 70% vasculitis.
MPA (poliangitis microscópica)GPA (granulomatosis con poliangitis)
PR3 (proteinasa 3) + , asociado a GPA
Artritis Reumatoidea: busca ACPA (anticuerpos anti proteínas citrulinadas) y FR (factor rematoideo). FR -
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Complicaciones de Raynaud
Cianosis local, puede derivar en gangrena del tejido y requerir amputación del miembro afectado.
Ocasionar infecciones en las úlceras dactilares, se recomienda higiene de la zona y uso tópico de antibióticos, pudiendo requerir internación del paciente
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Tratamiento➢ Medidas generales: evitar exposición al frio, mantener temperatura
corporal en especial zonas afectadas. Si posee componente
emocional técnicas de relajación actividades anti estrés
➢ Vasodilatadores: antagonistas de calcio, prostaglandinas
➢ Terapia antiagregante/anticuagulante: aspirina (AAS) dipiraidamol.
➢ Terapia antioxidante: no se encontró evidencia de beneficio, no
tiene efectos adversos, se postula podría ser útil al inicio de la
enfermedad.
➢ Cirugía: simpactectomia, indicado en pacientes con Síndrome de
Raynaud grave, resistente a otras terapias
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