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os diferentes tipos de muestrasque se pueden enviar al labora-torio pueden dividirse en ani-males vivos, fluidos orgánicos,

exudados, raspados cutáneos, heces ymuestras de necropsia.

Animales vivosLos animales vivos deben enviarse sincomida ni agua, en jaulas de tamaño su-ficiente, que impida la salida de mate-rial al exterior.

Fluidos orgánicosEntre los diferentes fluidos orgánicos te-nemos el suero sanguíneo, la sangre ente-ra, líquido cefalorraquídeo y sinovia, le-che, orina y lavado traqueobronquial

Suero sanguíneoEl suero está indicado para análisis se-rológicos y bioquímicos.

El suero procedente de sangre com-pleta (sangre recogida en tubos sin an-ticoagulante) se puede enviar al labo-ratorio a temperatura ambiente y en eltubo de recogida. Por su parte, el sue-ro limpio se puede congelar hasta elmomento del análisis, pero nunca sedeben congelar los sueros con el coá-gulo.

Sangre enteraIndicada para cultivos bacterianos (he-mocultivos), cultivos de células linfoi-des, determinación de gamma-interfe-rón, diagnóstico de hemoparásitos yalgunos análisis bioquímicos.

La sangre debe recogerse en condi-ciones de esterilidad con anticoagulan-te:• EDTA (1 mg/m1). Adecuado para

hemocultivos.• Heparina de sodio. Adecuado para

aislamiento de hemoparásitos (yelaboración de autovacunas), hemo-cultivo (septicemias) y cultivo decélulas.

• Citrato sódico. Adecuado parapruebas de coagulación sanguínea yvelocidad de sedimentación.La sangre debe conservarse refrige-

rada a 4 °C y llegar al laboratorio enlas 24 h posteriores a la recogida.Nunca debe congelarse.

La sangre para el diagnóstico de he-moparásitos debe recogerse de una ve-na marginal y con el animal en fase fe-bril.

Puntos clave en la

toma de muestras

Es frecuente que para apoyar el diagnóstico clínico sedeba remitir muestras al laboratorio. Hay variospuntos importantes a tener en cuenta como son eltamaño de la muestra, la selección de la muestraadecuada y envío, y la solicitud de la técnicadiagnóstica e interpretación de los resultados.Este trabajo se centra en la selección y envío demuestras al laboratorio.

R. Baselga e 1. Albizu

Exopol. Autovacunas yDiagnóstico.San Mateo (Zaragoza).

Foto 1. Muestras leche. Envío correcto, tubos hentticos, identificadoe protegidos de la rotura.Foto 2. Contenedores estériles y de seguridad biológica (evitan derrames). Ideales para el envío de líquidos (orinas, heces, etc.) o depequeñas muestras de órganos.

. oto 3. Hisopos estériles para toma de muestras. El medio de conservación mantiene la viabilidad de las bacterias y conserva las célulasjescamadas para poder realizar estudios inmunocitoquímicos.

.11M

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P.W°1

Foto 5. Envío incorrecto. Caja noadecuada y con pérdida de líquidos.

guante, eliminando las heces antes deintroducir el hisopo. En la toma demuestras genitales, introducir el hisopohasta el cervix, ayudados de un espécu-lo para evitar contaminaciones.

Si la muestra llega al laboratorio en24-48 h no necesita refrigeración.Nunca congelar, ya que los hisopos de-ben llevar un medio de transporte conagar que evite la desecación celular ymantenga la viabilidad bacteriana. Haymedios de transporte generales (Stuart,Amies), especialmente indicados parabacterias anaerobias (Cary Blair) yotros indicados para el transporte de vi-rus que contienen antibacterianos y an-tifúngicos.

Foto 6. Las bolsas de seguridad biológicajievitan el derrame de líquidos y son las

adecuadas para el envío de órganos. .

Raspados cutáneosEn el caso de áreas depiladas, costrosaso escamosas, se raspa con un bisturí es-téril en los bordes del área lesionada,tomando pelo, raspado de piel y pro-fundizando hasta que sangre, en uncontenedor estéril. Los abscesos hayque vaciarlos y raspar con un hisopo lapared interna. Las dermatitis hay quelavarlas con agua y jabón y raspar conun hisopo. Las muestras se pueden en-viar a temperatura ambiente.

HecesLas heces deben recogerse directamen-te del recto del animal en un conte- >>

Identificación y envío de muestrasLab muestras remitidas deben acompanarse siempre de un Oltülme clinico, Con datosde necropsia en su caso, con los datos de la explotación, del veterinario y la analíticasolicitada. Si se solicita una analítica muy clara se puede obviar en cierto sentido lainformación que proporcionas al laboratorio, pero si se quiere que el laboratorio orientela analítica y el diagnóstico, debe contar con la máxima información posible.La refrigeración y congelación se debe mantener con acumuladores de frío. No emplearnunca agua congelada.

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oto 4. Envío correcto, el feto está•envuelto en una bolsa de plásticohermética y refrigerado

Líquido cefalorraquídeo y sinoviaSe deben tomar con heparina estéril.Hay que evitar contaminar con sangre.Las muestras se deben refrigerar.LecheSe recogen tras la limpieza y desinfec-ción del pezón, desechando el primerchorro de leche y en tubos estériles,preferentemente de boca estrecha paraevitar contaminaciones. Se envían atemperatura ambiente o refrigerada.

OrinaLa obtención de orina debe hacerse enlas mejores condiciones de esterilidadposibles e idealmente con un catéter oseleccionando el final de la micción. Laorina debe enviarse refrigerada, no sedebe congelar.

Lavado traqueobronquialEsta técnica se describió en una entregaanterior (MG n° 221 - Septiembre2009).

ExudadosEn animales vivos o procedentes de ne-cropsia, se pueden tomar muestras deexudados nasales, traqueobronquiales,auriculares, conjuntivales, vaginales(uterinos) y rectales, así como de diver-sos órganos, empleando hisopos. Paraello hay que limpiar y desinfectar la pielque rodea el orificio natural, o la super-ficie del órgano a muestrear, e introdu-cir profundamente el hisopo con espe-culo o cánula protectora cuando seaposible ya que evita contaminaciones.El hisopo debe raspar suavemente lamucosa o zona interna del órgano paraobtener una buena población celular obacteriana.

Para tomar muestras de mucosa rec-tal, vaciar el contenido rectal con un

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doto 9. Para el envio de liquido articular, se recomienda el uso de tubos con heparina.

41111.11.11>

Prueba a estudio Negativos

PositivosPositivos 180 (a; Positivos

verdaderos)20 (c; Falsosnegativos)

a+cTotal

nedor limpio, bolsa o guante en el casode estudios coprológicos, pero estéril si sepide un cultivo bacteriano. Si se recogenheces del suelo, la proliferación acciden-tal de larvas de vida libre o la posible de-

secación de las heces pueden falsear losresultados. No se deben congelar.

NecropsiaLos animales seleccionados, preferente-mente deben estar vivos o haber muer-to recientemente y deben ser represen-tativos del caso clínico.

La necropsia siempre se debe reali-zar de forma ordenada, sistemática, ycompleta.

La descripción de lesiones macros-cópicas (anatomía patológica) corres-ponde al veterinario que realiza la ne-cropsia. La descripción de lesionesmicroscópicas (histopatología) es com-petencia del laboratorio al que se remi-ten las muestras.

Órganos procedentes de necropsias• Para análisis bacteriológicos hay que

enviar el órgano afectado entero o unzona representativa (especialmenteen el caso de los pulmones), sin la-var, sin sangre y refrigerado, paraevitar la autolisis y la proliferación deflora oportunista contaminante. Lacongelación afecta a la viabilidad demuchas bacterias y supone falsos re-sultados negativos. Los órganos a en-viar dependen del proceso y de loshallazgos de la necropsia, pero si estono está claro, o se duda de los órga-nos diana del proceso, en general sedebe enviar: pulmón con corazón ytráquea, hígado, bazo, riñón e intesti-no. Si el animal necropsiado es degran tamaño podemos seleccionar lazona del órgano que veamos afecta-da, pero siempre enviando trozosgrandes. En el caso del intestino hayque enviar un tramo de cada parte

Plidale una téll diagnósticaLa calidad de una técnica diagnóstica se compara con un número suficientemente altode muestras de referencia, supongamos 200 positivas y 200 negativas, tal y como semuestra en el Cuadro I.

• Seguridad. Es la proporción de resultados correctos, tanto positivos como negativos.Cálculo: (a+d)/(a+b+c+d). En ei ejemplo, 89%.

• Sensibilidad. Muestra la probabilidad de identificar correctamente las muestras posi-tivas. Cálculo: a/(a+c). En el ejemplo, 90%.

• Especificidad. Es la probabilidad de identificar correctamente las muestras negati-vas. Cálculo: d/(b+d). En el ejemplo, 88%.

• Repetitibilidad. Indica el grado en el que la prueba da siempre los mismos resultadoscon las mismas muestras. Una prueba de baja repetibilidad no es útil.No obstante, la utilidad de una técnica en la práctica viene dada por sus valores

predictivos:• Valor predictivo positivo. Es la proporción de muestras que realmente son positivas y

que la técnica empleada da un resultado positivo. Cálculo: a/(a+b). En el ejemplo,88%.

• Valor predictivo negativo. Proporción de muestras realmente negativas que dan unresultado negativo en la prueba. Cálculo: d/(c+d). En el ejemplo, 89%.Los valores predictivos no son una propiedad inherente a la técnica como la

sensibilidad y especificidad, sino una propiedad relativa que varia en función de laprevalencia que tenga la infección en la población sobre la que se aplique la técnica. Amedida que disminuye la prevalencia, disminuye también el valor predictivo delresultado positivo, o lo que es lo mismo, vamos a obtener muchos resultados falsospositivos. Cuando las prevalencias aumentan, lo que disminuye es el valor predictivodel resultado negativo

Cuadro 1.

.11k Prueba de referenciaNegativos Total

24 (b; Falsos a+bpositivos)

176 (d; Negativos c+dverdaderos)

b+d a+b+c+d

Foto 7ama

Foto 7. Trozo de intestino con extremos anudados.

Foto 8. Botes y bolsas de seguridad biológica con las muestras seleccionadas en necropsia y perfectamente identificados.

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La revolucióndel vacuno de leche

En Núter nos hemos reinventado, hemos reinventado la nutrición, el manejo

y la gestión del vacuno de leche gracias a una nueva metodología de

trabajo basada en el concepto de Nutrición Optimizada (o método ON).

miarMOTRIC n 1511.11n Al

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intestinal (yeyuno, ileon e intestinogrueso), con los extremos ligados pa-ra evitar la salida de contenido.

Cada órgano se debe enviar enuna bolsa independiente evitandocontaminaciones entre órganos. Esespecialmente importante aislar elintestino del resto de las muestras.No es necesario utilizar bolsas o reci-pientes estériles, pero sí limpios.

• Para análisis inmunocitoquímico oPCR pueden enviarse órganos ente-ros o pequeños fragmentos que in-cluyan una porción de tejido sano yotra de tejido afectado. Cada órganodebe ir en una bolsa o envase inde-pendiente, refrigerado o congelado,y procurando evitar los procesos deautolisis.

• Para estudios histopatológicos, lasmuestras deben incluir una porciónde tejido sano y otra alterada que de-ben cortarse en fragmentos de un es-pesor aproximado de 1 cm o inferior,y enviarse incluidas en una soluciónde formalina al 10% (900 ml de agua

con 100 ml de formaldehído al40%). La proporción correcta de te-jido en formalina debe ser de 1:10.

• Para estudios toxicológicos los tejidosy líquidos deben ser tan recientes co-mo sea posible. En la conservación,es importante emplear recipientes deplástico, evitando tanto el metal co-mo el vidrio que pueden modificar la

muestra. En todo caso, es importan-te contactar con el laboratorio paraseleccionar la muestra idónea y elcontenedor adecuado, que depende-rá del tipo de tóxico que se quieraanalizar.•

CC El laboratorio dediagnóstico siempre

puede orientar acerca de lasmuestras idóneas a enviar

oopthnizednutrition

alimentación

más saludable

óptimomanejo

gestión eficientey eficaz

incremento real

de rentabilidad