Mutación: una micobacteria resistente tiene mutaciones en su ADN .Estas mutaciones producen alteraciones en la absorción o degradación del antibiótico por la célula. Se conocen mutaciones responsables de resistencia a rifampicina, isoniacida, etambutol,estreptomicina,quinolonas,

pirazinamida En tuberculosis cuando aparece resistencia es

irreversible y la droga será ineficaz

Una cepa resistente es aquella que no muere ante el antimicrobiano en concentraciones adecuadas (CIM)

Existe diversas poblaciones bacterianas en un paciente: Micobacterias en proceso de multiplicación activa, por

ejemplo en las cavidades pulmonares. Micobacterias que se multiplican lentamente (por

condiciones adversas) o que no se multiplican (durmientes),pero puestas en condiciones favorables vuelven a multiplicarse.

Todas las cepas tienen bacilos salvajes resistentes a los tuberculostáticos conocidos.

Selección de mutantes resistentes

REHZ

E

z

CURACION

CEPA MR

En los años 50 se pensó que una cepa resistente a isoniacida era menos virulenta, eso se observaba en la inoculación al cobayo

En la actualidad está demostrado que la alteración del fitness del M.tuberculosis por resistencia es variable y eso dificulta las precisiones sobre la evolución de las epidemias de TBMR.

Hay diversos factores que intervienen en la trasmisión:

1)Perfil de resistencia a las drogas.

2)La combinación de mutaciones que dan resistencia

3)La familia a la que pertenece el M.t

4)Desde el huésped interviene el estado inmunitario y los tratamientos aplicados

Tuberculosis 2007; Palomino. Leão. Ritacco

Primaria o inicial: la que se presenta en un enfermo que no ha recibido tratamiento

Resistencia adquirida: es la que presenta el paciente que ha recibido tratamientos inadecuados o que se ha contagiado de una cepa resistente .

Polirresistencia: resistencia a dos o mas drogas que no son isoniacida y rifampicina asociadas; ej.S+E;H+S.

Multirresistencia (MDR): la cepa es resistente a isoniacida y rifampicina con o sin otras drogas.

Resistencia extendida (XDR): MR + una droga inyectable + quinolona

Cepa totalmente resistente (TDR)

isoniacida rifampicina pirazinamida kanamicina estreptomicina etambutol

Análisis por fingerprinting de ADN (van Embden et al,1993).

Secuencia de inserción IS6110. El genotipo mas hallado entre la cepas

estudiadas fue de ocho bandas y se denominó cepa M .

Diferencia de banda en presencia/posición: subtipos M3 y M5..

Micobacterias atípicas

Micobacterias atípicas Micobacterias atípicas

Anónimas, ambientales, no tuberculosas (MNT);Mycobacteria Anónimas, ambientales, no tuberculosas (MNT);Mycobacteria other than tuberculosis (MOTT) other than tuberculosis (MOTT)

Viven en el medio ambiente, habituales en aguas tratadas o Viven en el medio ambiente, habituales en aguas tratadas o no, tierras húmedas ó cañerías de aguano, tierras húmedas ó cañerías de agua

Pueden crecer rápida o lentamentePueden crecer rápida o lentamente

Difieren entre ellas por los requerimientos culturalesDifieren entre ellas por los requerimientos culturales

Todas son resistentes a las drogas mayores, excepto el M, Todas son resistentes a las drogas mayores, excepto el M, kansasii y el M. marinum que conservan alguna sensibilidad.kansasii y el M. marinum que conservan alguna sensibilidad.

EpidemiologíaEpidemiología

No se transmiten de persona a persona .No se transmiten de persona a persona .

Se hallan en el medio ambiente y por aerosoles llegan Se hallan en el medio ambiente y por aerosoles llegan al pulmón. Otras vías: ingestión, traumasal pulmón. Otras vías: ingestión, traumas

Generalmente predominan en áreas donde el Bacilo de Generalmente predominan en áreas donde el Bacilo de Koch está en descenso.Koch está en descenso.

Algunas especies tienen distribución universal: (MAC)Algunas especies tienen distribución universal: (MAC)

Otras regional: Otras regional: M.ulcerans M.ulcerans

Virulencia y patogenicidadVirulencia y patogenicidad

Ratones: por inyección endovenosa , en la mayoría Ratones: por inyección endovenosa , en la mayoría de las especies se replican en hígado y bazo. Lesiones de las especies se replican en hígado y bazo. Lesiones específicas en el ratón por M marinumespecíficas en el ratón por M marinum

Patógenos :MAC y Patógenos :MAC y MM. . kansasii ;M fortuitum, M kansasii ;M fortuitum, M abscessusabscessus: :

Poco patógenos: (Poco patógenos: (M. gastriM. gastri) )

Todos patógenos en inmunodeficientesTodos patógenos en inmunodeficientes

VIH + muy sensibles a infección por MACVIH + muy sensibles a infección por MAC

Clasificación de Timpe y Runyon. 1954

Grupo I. Fotocromógenos: M. kansasii Se colorean, amarillo intenso a naranja, expuestos a la luz

Grupo II. Escotocromógenos: M. scrofulaceum ;M gordonae Bacilo del agua de canilla. Colonias amarillas o anaranjadas sin luz.

Grupo III. No escotocromógenos. Amarillo pálido Con luz no cambia. MAI y MAC

Grupo IV. Crecimiento rápido. M. fortuitum, M chelonae M.smegmatis y otros. Crecen en 5 a 7d.

Patógenos mas comunes

Enfermedad pulmonar MAC; M kansasii.

Linfadenitis M.marinum ;MAC, M. scrofulaceum,

Enfermedad diseminada :MAC.

Piel – Tejidos blandos – Huesos M.abscessus, chelonae, fortuitum, marinum

IdentificaciónIdentificación

a) métodos fenotípicos: color; temperatura; tiempo de desarrollo; reacciones bioquímicas

b) métodos genotípicos :PRA (PCR y restricción con enzimas, corrida en geles que se analizan con un programa);hibridación en fase solida ,en tiras.(Genotype Hain)

c) inmunocromatografia ID (identificación BD) d) cromatografía líquida de alta perfomance (HPLC)

temperatura de desarrollo (37oC)

Algunas micobacteriasdesarrollan a menor temperatura:M.marinum

Pocas a mayor temperatura

tiempo de desarrollo

Lento: mas de 7 días

Rápido : hasta 7 días

fotocromogenicidad

nitratasa

tween

+-

Identificación por inmunocromatografía

PRA (in house)PCR-Restrictión enzyme analysis

Amplificación PCR segmento gen hsp65Restricción enzimática con 2 endonucleasasAnálisis de los polimorfismos de los fragmentosAlgoritmo de referencia: PRASITEwww.hospvd.ch:8005

BstE II Hae III

Identificación en tiras (Genotype)

Criterios diagnóstico de micobacteriosis en Criterios diagnóstico de micobacteriosis en inmunocompetentesinmunocompetentes

aislamientos repetidos en la muestra.aislamientos repetidos en la muestra.

clínica y radiología compatible.clínica y radiología compatible.

no estar asociados a aislamiento de M. tuberculosisno estar asociados a aislamiento de M. tuberculosis

Criterios diagnóstico de micobacteriosis en Criterios diagnóstico de micobacteriosis en inmunodeprimidosinmunodeprimidos

aislamiento único en sangre y/o médula ósea.aislamiento único en sangre y/o médula ósea.

aislamiento en esputo y sangre o médula ósea.aislamiento en esputo y sangre o médula ósea.

aislamiento en otra muestra extrapulmonaraislamiento en otra muestra extrapulmonar

MICOBACTERIOSIS 1999- 2005

Laboratorio Dr Abel Cetrángolo

0,80% 0,74% 0,92% 0,92%

8,00%

11,50% 12,00%

9,20%8,50%

11,10%9,80%

0,32%0,60% 0,45%

0%

3%

6%

9%

12%

15%

1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005

HIV(-) HIV(+)