Práctica 14: Determinación colorimétrica de

amoníaco en una disolución exenta de

interferencias.

FUNDAMENTO

El amoníaco reacciona con el reactivo de Nessler para dar un compuesto de color

marrón anaranjado, que inicialmente permanece en suspensión.

2K2[HgI4] + NH3 → NH2Hg2I2 + 4KI + NH4I

El intenso color del complejo permite la determinación colorimétrica de amonio incluso

en disoluciones extremadamente diluidas. Es posible trabajar a distintas longitudes de onda, y

como consecuencia, a diferentes intervalos de linealidad.

PROCEDIMIENTO

Para poder realizar esta práctica es necesario preparar primeramente la disolución

patrón de NH3 y el reactivo de Nessler.

Para preparar la disolución patrón de NH3 se pesan 0,5477g de NH4Cl que previamente

se ha secado a 100ºC en una estufa, se disuelven en agua desionizada, se introducen en un

matraz aforado de 500ml y se enrasa con agua desionizada (1095µg/ml).

Por otra parte, para preparar el reactivo Nessler se pesan 3,5g de KI y lo disolvemos en

un matraz erlenmeyer con unos mililitros de agua desionizada. Posteriormente esta disolución se

posa sobre un agitador magnético y se le va añadiendo con un cuenta gotas una disolución de

HgCl2 al 4% hasta la aparición de un ligero precipitado rojo. A continuación se le añade 12g de

NaOH disueltos en 25ml de agua desionizada, el precipitado se redisuelve y volvemos a echar

más de la disolución de HgCl2 hasta la aparición de turbidez. Este reactivo se deja reposar

durante un día y se filtra.

A partir de la disolución patrón de NH3 se prepararán 2 disoluciones intermedias;

disolución A 12,5µg/ml (se pipetean 5ml de la disolución patrón y se diluyen a 200ml) y

disolución B 25µg/ml (se pipetean 10ml de la disolución patrón y se diluyen a 200mL). Para

obtener la recta de calibrado se procede de la manera siguiente:

Disol. Patrón 0,25µg/ml → 5ml disol.A + 5ml Nessler → 250ml

Disol. Patrón 0,5 µg/ml → 5ml disol.B + 5ml Nessler → 250ml

Disol. Patrón 0,75µg/ml → 15ml disol.A + 5ml Nessler → 250ml

Disol. Patrón 1 µg/ml → 10ml disol.B + 5ml Nessler → 250ml

Disol. Blanco 0 µg/ml → 5ml Nessler → 250ml

Para preparar las disoluciones problemas, previamente hay que diluir 10 veces la

disolución patrón de NH3, posteriormente se pipetea 1ml y 2ml de dicha dilución, más 5ml de

reactivo Nessler y se lleva 250ml.

Para obtener la recta de calibrado, después de seleccionar la longitud de onda de 400nm,

se introduce la disolución de blanco en la cubeta del espectrómetro, se ajusta la absorbancia a 0,

se determinan las absorbancias de las distintas disoluciones patrón y se representan frente a las

respectivas concentraciones. A continuación se obtienen las absorbancias de las 2 disoluciones

de la muestra, se interpolan en la recta de calibrado y se calcula la concentración de la

disolución problema.

DATOS OBTENIDOS

µg/ml absortividad

0 -0.017

0,25 0,056

0,5 0,071

0,75 0,143

1 0,174

[Muestra 1]: 382,579 µg/ml Absorbancia: 0,059

[Muestra 2]: 794,620 µg/ml Absorbancia: 0,093 (doble concentración)

GRÁFICA

CÁLCULOS

1.- Calcula la concentración exacta de la disolución patrón de amonio.

0,5477g/500ml. 1000mg/1g = 1,095mg/ml = 1095µg/ml

2.- Recalcula la concentración de las disoluciones intermedias.

1095µg/ml. 5ml/200mL = 27, 35µg/ml

1095µg/ml. 10ml/200ml = 54, 75µg/ml

3.- Recalcula la concentración de las disoluciones patrón del calibrado.

27,35µg/ml. 5ml/250ml = 0,54µg/ml

54,75µg/ml. 5ml/250ml = 1,095µg/ml

27,35µg/ml. 15ml/250ml = 1,6425µg/ml

54,75µg/ml. 10ml/250ml = 2,19µg/ml

4.- Completa una tabla con los valores de absorbancia para cada una de las disoluciones patrón.

Esta tabla ya ha sido realizada anteriormente en esta misma práctica.

5.- Representa en una gráfica la absorbancia frente a la concentración de NH4+.

También ha sido realizada dicha gráfica anteriormente en esta práctica.

6.- Calcula la ecuación de la recta por mínimos cuadrados y el coeficiente de correlación.

y = -0,00818 + 0,18736x

r = 0,984

7.- Calcula la concentración de NH4+ en la muestra problema.

0,059 = -0,00818 + 0,18736x; x = 0,358 µg/ml

0,093 = -0,00818 + 0,1873x; x = 0,54 µg/ml