UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALAFACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Román Mayra, Machuca Geanina, Barros Katherine.Curso: Quinto Paralelo: B Grupo N° 5Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 08 de Julio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 15 de Julio del 2014

PRÁCTICA N° 7

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR PLOMO.

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Parenteral.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar las reacciones que presenta el cobayo ante una Intoxicación por plomo.

2. Distinguir la sintomatología de la intoxicación por plomo con relación a otras

sustancias toxicas.

3. Determinar el tiempo en que actúa el toxico en el organismo del cobayo desde su

administración hasta la muerte del mismo.

4. Conocer mediante diversas pruebas de identificación la presencia de plomo en el

cobayo

MATERIALES Bata de laboratorio Guantes de látex Gorro Mascarilla Zapatones Perlas de vidrio. Agitador de vidrio. Papel filtro Instrumentos de disección Campana Pipetas, Tubos de ensayo Erlenmeyer Vasos de precipitación Jeringuilla de 10cc

PROCEDIMIENTO

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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SUSTANCIAS Nitrato de plomo Clorato de Potasio Ácido Clorhídrico conc. Cromato de potasio Yoduro de potasio Ácido sulfúrico

EQUIPOS

Balanza analítica Cocineta

Para la realización de ésta práctica se efectúan los siguientes pasos:

1. Primeramente BIOSEGURIDAD: Es decir colocarse la mascarilla, bata de

laboratorio, gorro, zapatones y los guantes de látex.

2. Realizar la esterilización del meson de trabajo con alcohol potable 70°.

3. A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo

4. Con la jeringuilla tomamos 5 ml de nitrato de plomo e inyectamos al cobayo

(vía parenteral)

5. Colocamos el cobayo en la campana

6. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.

A causa del toxico en el animal de experimentación.

7. Esperamos el tiempo de defunción.

8. Una vez muerto el cobayo se procede a realizar la disección:

a) Tomamos el bisturí # 11 y lo colocamos en el soporte de bisturí y procedemos

a rasurar al cobayo.

b) Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y con

una jeringa aspirar la sangre.

9. Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de

precipitación.

10. Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras.

11. Agregamos las 50 perlas de vidrio, 2 gr de KClO3 y 25 ml de HCl concentrado.

12. Llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular; y 5 minutos antes

que se cumpla el tiempo establecido añadir 2 gr más de KClO3.

13. Una vez finalizado el baño maría, dejar enfriar, filtrar, y con el filtrado realizar

las reacciones de reconocimiento:

R1) Con el cromato de potasio R2) Con el yoduro de potasio R4) Con el ácido sulfúrico

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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GRÁFICOS

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Muestra inicial

ó filtrado

Reacción con el cromato de potasio

Reacción Positivo no característico Precipitado amarillo

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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2. Colocar al cobayo en la campana y observar todas

sus manifestaciones.

1. Administrado la sustancia toxica (PLOMO) por vía

peritoneal

3. Colocamos el cobayo en la tabla de disección

Disección del cobayo 5. Extracción y troceado de las viseras

6. Adición del ácido, KClO3 Y Perlas

7. Baño Maria 8. Resultado del filtrado

Antes Después

Reacción de yoduro de potasio

Reacción Positivo característico Precipitado amarillo cristalino

Antes después

3. Con el ácido sulfúrico

Reacción Negaticvo Coloración violeta (no hubo)

Antes Después

OBSERVACIONES

En la realización de ésta práctica al haber administrado nitrato de plomo (toxico) por vía

peritoneal al animal en experimentación, hemos observado la sintomatología que

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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presentó: perdida de actividad motora, somnolencia, hipoxia, presencia y expulsión de

fluidos necrosados, y laceración en la zona d punción.

CONCLUSIONES

Se determinó que el plomo a es un toxico muy potente, debido a las reacciones que

presento el cobayo, y el tiempo de muerte que fue de 3 minutos, a diferencia de la

cetona que fue de 7 minutos. Todas las reacciones de reconocimiento de plomo son

indispensables para la verificación de una intoxicación o muerte por este tóxico.

RECOMENDACIONES

Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma

logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación,

evitando así una intoxicación.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.

Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera

obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica.

GLOSARIO

PLOMO

Es un metal gris azulado, blando y pesado, se corta fácilmente con un cuchillo.

El plomo cuyo peso atómico 207,21 está en el grupo cuatro de la tabla periódica y el

subgrupo que contiene el germanio y estaño. El plomo forma aleaciones con muchos

metales, y, en general, se emplea en esta forma en la mayor parte de sus aplicaciones. Es

tóxico, y la intoxicación por plomo se denomina saturnismo o plumbosis.

ESTUPOR

Confusión, disminución del nivel de conciencia, descoordinación. Es la inmovilidad

física que sufre la persona cuando está en crisis catatónica. La persona se mantiene en

estado vigil pero sin poder responder a los estímulos externos.

NITRATO DE PLOMO

Es un cristal incoloro o un polvo blanco, y un oxidante muy estable y fuerte. Al

contrario que otras sales de plomo (II), es soluble en agua

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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El nitrato de plomo (II) es tóxico y probablemente cancerígeno. Por tanto, debe ser

manipulado y almacenado con las condiciones apropiadas de seguridad.

CROMATO DE POTASIO

El cromato de potasio (K2CrO4) es una sal ternaria de potasio con cromo en estado de

oxidación +6, por lo que es un fuerte oxidante.

Es utilizado como indicador químico amarillo utilizado para identificar la concentración

de ion cloruro en una solución con nitrato de plata.

XENOBIÓTICO

Es todo compuesto químico que no forme parte de la composición de los organismos

vivos

CUESTIONARIO

¿Indique las fuentes de contaminación por plomo?

la contaminación con plomo está asociada con la presencia de pintura que contiene

plomo en construcciones viejas, con lugares de trabajo que usan plomo (fábrica de

baterías), con agua potable, comidas y bebidas contaminadas, con juguetes, medicinas

tradicionales, cosméticos y con la tierra, polvo, agua, aire de las cercanías de minas y

fundiciones.

¿Indique cómo afecta el plomo al organismo?

En niños, se ha asociado la exposición al plomo con ausencias más frecuentes a la

escuela, menor rendimiento escolar, intervalos de reacción prolongados y coordinación

mano-ocular disminuida. La inmadurez fisiológica de fetos e infantes (hasta la edad de

36 meses) aumenta el riesgo de que el plomo penetre al sistema nervioso central, lo que

puede resultar en alteraciones neurológicas o de conducta permanente. El plomo

también puede afectar los sistemas renal, endocrino y sanguíneo. Los efectos inmediatos

del plomo son neurológicos, pero el envenenamiento en la infancia puede conducir más

tarde a problemas renales, hipertensión arterial y problemas de la reproducción.

¿Qué examen o estudio se ha demostrado que indica presencia de plomo en

sangre?

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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Algunos estudios encuentran un aumento acelerado de la creatinina o disminución de la

depuración de la creatinina cuando los niveles de plomo en la sangre son <60 µg/dL

¿Indique los efectos neurológicos del plomo en niños?

En los niños, la exposición aguda a dosis altas de plomo puede causar encefalopatía, con la presencia de ataxia, convulsiones, hiperirritabilidad, estupor, coma y muerte.

¿En lugares de trabajo cual es la cantidad de plomo permitido?

En lugares de trabajo, el límite permisible promedio de plomo es 50 µg/m3 por la

jornada de 8 horas

BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA

Medline plus. Disponible en:

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002480.htm

OSHA, Occupational Safety Health Administration, Department of Labor,

Washington, DC

EcuRed. Plomo. Disponible en: http://www.ecured.cu/index.php/Plomo

Poma P. Intoxicación por plomo en Humanos. Anales de la Facultad de

Medicina. 2008;69(2):120-6

Wikipedia. Com. Nitrato de plomo. Disponible

http://es.wikipedia.org/wiki/Nitrato_de_plomo_(II)

Wikipedia.com. Cromato de potasio. Disponible en:

http://es.wikipedia.org/wiki/Cromato_de_potasio

LIBRO

Peterson, W.R. Formulación y Nomenclatura Química Orgánica (en

español) (6ta edición). Barcelona-España: Eunibar-editorial universitaria de

Barcelona. pp. 102–106.

Armendaris G, Gerardo (2007). Química orgánica 3 (en español) (Tercera

edición). Quito-Ecuador: Gruleer. pp. 140–141.

AUTORIA

BQF. Carlos García

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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Machala 15 de Julio del 2014

FIRMA

______________ ______________ _________________

Mayra Román Katherine Barros Geanina Machuca

ANEXOS:

ANEXO 1.

ANEXO 2.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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Eliminación de la materia orgánica o mineralización

El material de la investigación son generalmente estos órganos y para poder separar las sustancias toxicas, es necesario eliminar la materia orgánica, proceso comúnmente llamado como mineralización este proceso se lo puede realizar mediante dos métodos:

El del cloro naciente o método de fresenius y babo y el de la mezcla sulfo-nítrica; ambos métodos los estudiaremos a continuación.

Métodos fresenius y babo o del cloro naciente: El material que vamos a investigar que puede ser el residuo que ha dado la separación de los tóxicos volátiles o material original (vísceras en general, sangre, vómitos, etc.), se trituran finalmente en presencia de agua para formar una masa fluida se la coloca en un balón de 1000 ml de capacidad; se agrega de 15 – 20 ml de ácido clorhídrico concentrado y de 1-2 dg de clorato de potasio. Se coloca finalmente el balón en un baño maría hirviente en una campana; se agita frecuentemente parea que el cloro que se forme este en intimo contacto con la materia orgánica; se debe agregar el tiempo 1-2 g de clorato de potasio

ClO3K +6HCl KCl+ 3H2O+3Cl2

Cuando cesa el desarrollo de cloro, se añaden nuevamente 2g de clorato de potasio, remplazando también el agua que eventualmente se haya evaporado. Cuando al agregar clorato de potasio, no se desarrolla más cloro se agrega cautelosamente más ácido clorhídrico. Estas operaciones se realizan hasta cundo no se tenga ningún liquido lípido de color amarillo por la presencia de cloro. Se deja entonces enfriar, se desplaza el cloro y el dióxido de cloro eventualmente presentes en una corriente de anhídrido carbónico, se filtra en calienta para evitar la separación del cloruro de plomo.

El líquido filtrado contiene casi todos los metales tóxicos como el arsénico bajo la forma de ácido arsénico, antimonio, bismuto, mercurio, cobre, zinc, plomo, bario, etc., bajo la forma de cloruros.

El residuo del filtrado puede a su vez contener cloruros de plata y de plomo, así como sulfatos de plomo y bario.

Tanto en líquidos filtrados como en el residuo, se realizan las reacciones analíticas para identificar los distintos elementos tóxicos que eventualmente pudieran estar presentes.

Método de la mezcla sulfo-nítrica: a la muestra motivo de la investigación se le agrega un volumen determinado de ácido nítrico concentrado y un volumen ácido sulfúrico concentrado equivalente al 50% de ácido nítrico agregado y se lo pone a calentamiento en baño maría hirviente en una campana.

El ácido sulfúrico es empleado como deshidratante de la materia orgánica y también para destruirla y oxidar el carbón orgánico, y en esas condiciones, puede el ácido nítrico oxidar el toxico mineral transformándolo en nitrato soluble.

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El calentamiento de la mezcla, al inicio será lento para evitar la formación de espuma que se produce cuando la muestra lleva gran cantidad de sustancias amiláceas; la formación de espuma también se puede evitar utilizando sustancias solidas inertes como perlas de vidrio, pues de lo contrario la operación se hace difícil y además hay perdida de muestra y consecuentemente de toxico. En ocasiones es necesario tapar el recipiente adaptando un refrigerante vertical para condensar y recuperar parte del toxico

Si durante el calentamiento se ose observa la carbonización de la muestra, se interrumpe el proceso y se agrega nuevas cantidades de ácido nítrico. Esta operación se repite varias veces hasta observar la disolución completa de la materia orgánica incluyendo las grasas.

Cuando se obtiene un pequeño volumen traslucido, se da por terminado el proceso.

Si acaso se presenta un precipitado blanco, seguramente serán los sulfatos de calcio o de plomo, esta precipitación sucede cuando en la oxidación ha faltado ácido nítrico, lo cual hace que quede libre el ácido sulfúrico y reaccione y precipite con estos metales.

Para darse cuenta de la falta de ácido nítrico, basta observar el desprendimiento de vapores blancos que correspondan a los anhidros del azufre.

Una vez concluida esta fase, se procede a filtrar la mezcla y en el líquido filtrado se realizan las reacciones para investigar los tóxicos que posiblemente existen.

El residuo de ser necesario también se lo emplea si fuese necesario tal como se estableció en el método del cloro naciente.

El método de la mezcla sulfo-nítrica, tiene como modificación que es utilizada cuando se desea que la destrucción de la materia orgánica sea más rápida. para esto, inicialmente se realiza la destrucción con la mezcla sulfo-nítrica, y cuando hayan transcurrido de 15-630 minutos de calentamiento , se agregan partes iguales de ácido perclórico y ácido nítrico, esta mezcla debe ser agregada con sumo cuidado , ya que se produce desprendimiento enérgico de oxígeno , y además porque durante esta oxidación hay formación excesiva de gases, lo9s mismos que deben ser condensados una parte , y otros eliminados por la salida de agua , por lo que es necesario instalar un refrigerante y un tubo de desprendimiento.

Cuando se quiere orientar la investigación de toxico mineral, se realiza un examen previo, siguiendo la técnica de Reinsch, que consiste en tomar directamente una pequeña cantidad de la muestra, ya sean heces, vómitos, vísceras líquidos orgánicos, etc. Y agregarlas a un recipiente al que se le adiciona solución de ácido clorhídrico del 10-20% b. en la mezcla se introduce una lámina metálica libre de grasa y oxido , se calienta el recipiente y se observa el cambio de color de la lámina cada 5 minutos durante un tiempo máximo de treinta minutos .en ocasione, se puede formar depósitos sobre la lámina , en este caso , se extrae la lámina , se lava y se seca, y si la cantidad es suficiente se puede separar el depósito y disolver en un ácido y practicar en ella las

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reacciones analíticas, de acuerdo a las propiedades físicas que se observan en loa lamina ; por ejemplo, si la lámina es de cobre , los tóxicos presentes deben ser los elementos que debe estar por debajo de la escala electromotriz del cobre, como arsénico , bismuto , mercurio, plata , antimonio, etc.; si la prueba es negativa , se descartan estos elementos.

Si la lámina es de zinc o de hierro, y la prueba resulta positiva, debe pensarse en el Plomo.

Si en la lámina de cobre, aparece un color blanco, deberá pensarse en el mercurio o plata; en este caso se hará una diferenciación, calentando la lámina. Si es mercurio, y la lámina recobra el color purpura original; esto es debido a que el mercurio se volatiliza; y si es plata, el color original de la lámina no reaparece.

Si acaso se trata de arsénico o de antimonio, aparece una mancha gris oscura o negro brillante respectivamente

Intoxicaciones por plomo

Industrialmente, sus compuestos más importantes son los óxidos de plomo y el tetraetilo de plomo. El plomo forma aleaciones con muchos metales y, en general, se emplea en esta forma en la mayor parte de sus aplicaciones. Todas las aleaciones formadas con estaño, cobre, arsénico, antimonio, bismuto, cadmio y sodio tienen importancia industrial.

Los compuestos del plomo son tóxicos y han producido envenenamiento de trabajadores por su uso inadecuado y por una exposición excesiva a los mismos. Sin embargo, en la actualidad el envenenamiento por ploma es raro en virtud de la aplicación industrial de controles modernos, tanto de higiene como relacionados con la ingeniería.

El mayor peligro proviene de la inhalación de vapor o de polvo. En este caso de los compuestos órgano plúmbicos, la absorción a través de la piel puede llegar a ser significativa. Alguno de los sinto9mas de envenenamiento por plomo son dolores de cabeza, vértigo e insomnio. En los casos agudos por lo común se presenta estupor, el cual progresa hasta el coma y termina en la muerte.

El plomo rara vez se encuentra en su estado elemental, el mineral más común es el sulfuro. Los minerales comerciales pueden contener tan poco plomo como el 3%, pero lo más común es un contenido poco más o menos el 10%. Los minerales se concentran hasta alcanzar un contenido de plomo de 40% o más antes de difundirse.

Durante mucho tiempo se ha empleado el plomo como pantalla protectora para las máquinas de rayos x. En virtud de las aplicaciones cada vez más amplias de la energía atómica, se han vuelto cada vez más importantes las aplicaciones del plomo como blindaje contra la radiación.

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Su utilización como forro para cables de teléfono y de televisión sigue siendo una forma de empleo adecuada para el plomo.

El uso de plomo en pigmentos ha sido muy importante, pero está decreciendo en volumen. El pigmento que se utiliza más, en que intervienen este elemento, es el blanco de plomo 2PbCO3.Pb(OH)2; otros pigmentos importantes son el sulfato básico de plomo y los cromatos de plomo.

Efectos del plomo sobre la salud

El plomo es un metal blando que ha sido conocido a través de los años por muchas aplicaciones. Este ha sido usado ampliamente desde el 5000 antes de cristo para aplicaciones en productos metálicos, cables, tuberías, pero también en pinturas y pesticidas. El plomo es uno de los 4 metales que tienen un mayor efecto dañino sobre la salud humana. Este puede entrar en el cuerpo humano a través de la comida (65%), agua (20%), y aire (15%).

Las comidas como frutas, vegetales, carnes, granos, mariscos, refrescos y vino pueden contener grandes cantidades significantes de plomo. El humo de los cigarros también contiene pequeñas cantidades de plomo.

El plomo puede entrar en el agua potable a través de la corrosión de las tuberías. Esto es más común cuando el agua es ligeramente acida. Este es el porqué de los sistemas de tratamientos de aguas públicas son requeridos llevar a cabo un ajuste de pH en agua que sirve para el uso de agua potable. Que nosotros sepamos, el plomo no cumple ninguna función esencial en el cuerpo humano, este puede principalmente hacer daño después de ser tomado en la comida, aire o agua.

El plomo puede causar varios efectos no deseados, como son:

Perturbación de la biosíntesis de hemoglobina y anemia Increment5o de la presión sanguínea Daño de los riñones Abortos y abortos sutiles Perturbación del sistema nervioso Daño al cerebro Disminución de la fertilidad del hombre a través del daño del esperma Disminución de la habilidad de aprendizaje de los niños Perturbación en el comportamiento de los niños, como es agresión,

comportamiento impulsivo e hipersensibilidad.El plomo puede entrar en el feto a través de la placenta de la madre. Debido a esto puede causar serios daños al sistema nervioso y al cerebro de los niños por nacer.

Efectos ambientales del plomo

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El plomo ocurre de forma natural en el ambiente, pero las mayores concentraciones que son encontradas en el ambiente son el resultado de las actividades humanas.

Debido a la aplicación del plomo en gasolinas un ciclo no natural del plomo tiene lugar .

En los motores de los coches el plomo es quemado, eso genera sales de plomo (cloruros, bromuros, óxidos) se originaran.

Estas sales de plomo entran en el ambiente a través de los tubos de escape de los coches. Las partículas grandes precipitaran en el suelo o en la superficie de las aguas, las pequeñas partículas Viajaran grandes distancias a través del aire y permanecerán en la atmosfera. Parte de este plomo caerá de nuevo sobre la tierra cuando llueva. Este ciclo del plomo causado por la actividad humana está mucho más extendido que el ciclo natural del plomo. Este ha causado contaminación por plomo haciéndolo en un tema mundial no solo la gasolina con plomo causa concentración de plomo en el ambiente.

Otras actividades humanas, como la combustión del petróleo, procesos industriales, combustión de residuos sólidos, también co0ntribuyen.

El plomo puede terminar en el agua y suelos a través de la corrosión de tuberías de tuberías en los sistemas de transporte y a través de la corrosión de la pintura s que contienen plomo. No puede ser roto, pero puede convertirse en otros compuestos.

El plomo se acumula en los cuerpos de los organismos acuáticos y organismos del suelo. Estos experimentaran efectos en su salud por envenenamiento por plomo. Los efectos sobre la salud de los crustáceos pueden tener lugar incluso cuando solo hay pequeñas concentraciones de plomo presente.

El plomo es un elemento químico particularmente peligroso, y se puede acumular en organismos individuales, pero también entrar en las cadenas alimenticias.

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:

El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizaran las reacciones de identificación que a continuación se detallan

1. Con el cromato de potasio: se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o en una capsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un precipitado amarillo0 de cromato de potasio.

Pb(NO3)2 + K2CrO CrO4Pb + 2KNO3

2. Con el yoduro de potasio: con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo

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cristalino de I2Pb soluble en caliente con agua y precipitable en frio como agujillas amarillas

Pb(NO3)2 + 2IK PbI2 + 2KNO3

3. Con la Difenil tío carbazona: esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono , al reaccionar con el plomo produce un color rojo

4. Con el ácido sulfúrico: en una solución diluida, produce un precipitado blanco de sulfato de plomo, este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se disuelva el precipitado produce un color anaranjado.

5. Con el tetrametildiaminodifenilmetano: es una solución acética. Para realizar esta reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de peróxido de hidrogeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gotas de la solución muestra; el papel filtro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta en baño, maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar el plomo como oxido de plomo. Así, se hace caer sobre el papel una gota de reactivo cerca de la zona donde se dejó caer las gotitas de la muestra. En caso positivo, en el punto de contacto aparece un color azul por la formación de hidrosol respectivo.

6. Con la bencidina: a 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta la que mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade ½ ml de peróxido de hidrogeno al 3% se hierve cuando momento, se separa y lava el precipitado (por centrifugación o filtración) con agua y finalmente se añaden gotas de bencidina sobre el precipitado. Un color azul nos indica la presencia de plomo.

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