Practica de Bioquimica

UNIVERSIDAD JOSE CARLOS MARIATEGUI 2015 CURSO: BIOQUIMICA

1 Prof. Blgo. Jose Antonio Valeriano Zapana

PRACTICA DE LABORATORIO N° 1

I. OBJETIVOS

Determinar el PH de soluciones utilizando los métodos colorimétricos

(indicadores de PH) y poteciométricos.

Reconocer la capacidad amortiguadora de aminoácidos y aminas.

Relacionar los conocimientos adquiridos del funcionamiento de los

tampones de importancia biológica.

II. INSTRUMENTOS

Tubo de ensayo

Fiola

Pipeta

Gotero

Gradilla

Pera de goma

Envases de vidrio

Peachímetro

Destilador de agua

Balanza analítica

Vaso precipitado

III. REACTIVOS

Soluciones tampón de PH: 3,4,5,6,7,8,9,10 y 12

Indicador universal

Hidróxido de Sodio Neo

Ácidos Clorhídricos.

IV. MÉTODO DE TRABAJO



4.1. ESCALA PATRÓN

Preparar una batería de 4 tubos de ensayo y colocar en cada tubo 1 ml

de solución de PH: 3, 5,10 y 12, adicionar 5 gotas de indicador universal

y 9 ml de agua destilada.

4.2. EXPERIMENTO 1

Preparar una batería de 4 tubos de ensayo

TUBO 1: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de H2O

TUBO 2: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de tampón de PH

7

TUBO 3: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de H2O

TUBO 4: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de tampón PH 7

Determinar el PH de cada solución y anotar el resultado en una tabla

4.3. EXPERIMENTO II

TUBO 1: adicionar de NaOH 0.1 M

TUBO 2: adicionar una gota de NaOH 0.1 M

Observar, determinar el PH y anotar el resultado en la tabla.

Soplar el aire expirado, por 15 segundos en el tubo 1 y por un minuto en

el tubo 2.

Observar, el cambio de color y determinar el PH y anotar el resultado de

la tabla.

TUBO 3 : adicionar una gota de HCl 0.1 M

TUBO4 : adicionar de HCl de 0.1 M

Observar el cambio de color, determinar el PH y anotar el resultado en la

tabla.

Continuar la adición de HCl al tubo 4, gota a gota, hasta obtener e color

del tubo 3.

Determinar cuántas gotas de HCl deben ser adicionadas para obtener la

misma coloración del tubo 3.



TUBOS MUESTRA INICIAL NaOH 0,1M

PH AIRE

HCL 0,1 M

N° GOTAS

Tubo 1 Agua destilada + 1 gota de NaOH 0,1 M + aire expirado por 15 segundos

3

0,1M

20

5

Tubo 2 Tampón de pH 7,0 + 1 gota de NaOH 0,1M + aire expirado por 1 minuto

5

0,1M

15

3

Tubo 3 Agua destilada + 2 gotas de HCl 0,1 M

10 0,1M 10 2

Tubo 4 Tampón de pH 7,0 + 2 gotas de HCl 0,1 M N° de gotas de HCl para obtener el pH del tubo 3

12

0,1M

8

1

Tabla n°1: resultados de las muestras.

Fuente: elaboración propia.

4.4. CUESTIONARIO:

1) Colocar en orden decreciente la acidez de las siguientes

soluciones: ácido acético 1M,hidroxidode sodio 1M y ácido

clorhídrico 1M

HIDRÓXIDO DE SODIO Na(OH) (1M)

[OHˉ] = 1M PH + PoH = 14

PoH= - log (OHˉ) PH = 14 - 0

PoH= - log( 1M) PH = 14

PoH= O

ÁCIDO ACETICO (C2H4O2 ) (1M)

[H] =√𝐾𝑎(𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜)

[H] = √(1.8 ∗ 10 − 5)(1)

[H] =4.24*10-4

PH = -Log (4.24*10-3)

PH = 2.37



ÁCIDO CLORHIDRICO HCL (1M)

PH= -Log (1)

PH= 0

2) Colocar en orden decreciente de acidez las siguientes soluciones:

ácido acético 100 mmol, hidróxido de amonio 10 mmol, ácido

clorhídrico 10 M de agua.

HIDRÓXIDO DE AMONIO NH4OH

POH= -Ln (0.1) 100mmol=0.1 m

POH=1

Ph=1

Ph=14-1

Ph=13

ÁCIDO ACETICO C2H4O2

[H]=√𝐾𝑎(𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜) 10mmol=0.01 m

[H]= √(1.8 ∗ 10 − 5)(0.01)

[H]=4.24*10-4

Ph=-Log(4.24*10-4)

Ph=3.37

ÁCIDO CLORHIDRICO HCL

Ph= -Ln(10)

Ph= -1

3) Calcular cuántos iones H y iones OH están presentes en una

solución de HCL 0,001M.

HCL +H2O = CL- +H3O

[H+]= 0.001M

[H+]= 10-3M

[OH] [H+]= 1*10-14



[OH] = 10-14(10-3)-1

[OH] = 10-11M

4) Calcular la concentración de protones en moles por litro en una

solución 1 M de ácido acético sabiendo que la Ka del acido

acético a 25°C es de 1.86*10(-5).

[H] =√𝐾𝑎(𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜)

[H] = √(1.86 ∗ 10 − 5)(1)

[H] =4.31*10(-3)

5) Calcular el punto isoeléctrico de la glicina sabiendo que pKa1=2,4

y pKa2 =9,7

Pl = (pKa + pKa2)

Pl = (2,4+ 9,7)

Respuesta: El punto isoeléctrico de la glicina es de 6.05

6) Como calculo el pH de una solución de a) 0.001M de ácido

sulfúrico? y b) 0.001M de hidróxido de sodio, asumiendo que

ambos solutos están completamente ionizados, cual será el valor

de pH de la solución resultante de la mezcla de 25 ml de la solución

de ácido sulfúrico con 20 ml de la solución de hidróxido de sodio?

a) El ácido se disocia de la siguiente manera :

H2SO4 2H (+) + SO4 (-)

Luego 0,001 mol del ácido produce 0,002 moles de H (+) pH = -log (0,002) pH= 2,69

b) NaOH:0,001M

NaOH Na (+) + OH (-)

pOH = -log(0,001)

pOH= 3

2

2 6.05



pH = 14-3 pH = 11

c) Como ambas soluciones son fuertes y poseen la misma concentración 20 ml de NaOH neutralizan 20 ml de ácido, luego solo quedan 5 ml de ácido de concentración 0,001 M en un volumen de 45 ml así: [H+]= (0,001*5)/45 [H+]= 1,111*10^(-4) pH = -log( 1,111*10^-4) ph= 3,95

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