PRELBM_352001_36

7/30/2019 PRELBM_352001_36

1/11

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNADEscuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA

Programa: Ingeniera AgroforestalPREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM

Nombre y Apellido: Gloria Isabel Perdomo Cdigo: 1006517732; Fecha: 04-05-2013

BIOQUIMICA METABOLICA

PREINFORMES DE PRCTICAS

GLORIA ISABEL PERDOMOCODIGO 1.006.517.732

TUTOR

JAIRO GRANADOS MORENO

GRUPO: 352001_36

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE.

PROGRAMA DE INGENIERIA AGROFORESTAL

CERES SAN VICENTE DEL CAGUAN

2013

7/30/2019 PRELBM_352001_36

2/11




PRCTICA 2: Capacidad Amortiguadora

INTRODUCCIN

a capacidad amortiguadora se usa para compararoluciones amortiguadoras y es igual a las mili-equivalenciase cido o base fuerte que puede neutralizar la solucinmortiguadora sufriendo as un cambio de PH en su unidad.al capacidad depende de las concentraciones absolutas delstema y la proporcin relativa de las formas disociadas yn disociar y da como mxima cuando el cociente, es decir,sal o acido es prxima a la unidad.

entefacto o diagrama conceptual

MATERIALES Y MTODOS1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Caractersticas

Erlenmeyer De 125ml

Pipetas Graduadas De10ml

Esptula Metlica

Agitador De Vidrio

Probeta Graduada De 100ml

Bureta De 25mlSoporte Universal

Metlico, con pinza parabureta

Beaker Vaso precipitado De 250ml

Potencimetro

Equipo De Titulacin

Balanza Digital

1.3.3.Diagrama de Flujo

2. TABLA DE DATOS

MUESTRASValores Evaluados

Wm (g) Vm (mL) Ph1 Ph2Concentrad

oHarinaForrajeSangreOrina

3. RESULTADOS ESPERADOS:

Se espera que la capacidad amortiguadora sea mayor la sangre que con el buffer, y que este sea mayor encomparacin con la leche.

Se espera que al diluir sustancias como concentradopulverizado y agua destilada, igualmente con harina yforraje picado para comparar su PH (potencial bufferanse espera que el concentrado sea mayor en la sangre la orina.

GLOSARIO

Soluciones amortiguadoras: Son aquellas soluciones cuya concent

de hidrogeniones vara muy poco al aadirles cidos o bases fuertobjeto de su empleo, tanto en tcnicas de laboratorio como en la finfuncional del plasma, es precisamente impedir o amortiguar las variacde pH y, por eso, suele decirse que sirven para mantener constante e

Homestasis: Homeostasis es el conjunto de fenmenosautorregulacin que llevan al mantenimiento de la constancia epropiedades y la composicin del medio interno de un organismo; caracterstica de un organismo vivo, por la cual mediante la absorcalimentos y vitaminas (metabolismo) puede regular las funcione

Alistar

titulacion

Adicionar

concentrados

Registrar

PH

Evaluar

el PHfinal

Rotular
http://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivohttp://es.wikipedia.org/wiki/Metabolismohttp://es.wikipedia.org/wiki/Metabolismohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivo

7/30/2019 PRELBM_352001_36

3/11




Muestras Biolgicas Concentrado ,Orina, SangreY Forraje

2 Reactivos a utilizar

Reactivo Frmula Concentracin

Hidrxido de Sodio NaOH 0,1Ncido Clorhdrico HCl 0,1N

Fenolftalena C 0H14ORojo De Metilo C H N O

Agua Destilada H OSolucin Buffer

Fosfato HPO42

3 Procedimiento

1.3.1. En campo:

ecolectar en campo las muestras de Leche (20mL), harinagr), Forraje picado (5gr), sangre (20mL) de acuerdo a losotocolos establecidos para tal efecto; las muestras se

mpacarn en bolsas negras, las cuales se rotularn con losatos de origen.

3.2 En Laboratorio

todo de titulacin volumtrica: con agua destilada,olucin buffer y leche.

cnica potenciomtrica: con agua destilada, cidoorhdrico, harina y forraje picado.

existen dentro de l, para mantener una condicin estable y constanhomeostasis es posible gracias a los mltiples ajustes dinmicoequilibrio y los mecanismos de autorregulacin.

Acido dbil: es aquel cido que no est totalmente disociado e

disolucin acuosa. Aporta iones al medio, pero tambin es capaceptarlos. Si representramos el cido con la frmula general HA, edisolucin acuosa una cantidad significativa de HA permanece sin dis

mientras que el resto del cido se disociar en iones positivos

negativos , formando un equilibrio cido-base.

BIBLIOGRAFIA

Granados M. J. EMdulo de Bioqumica metablica. EscDe Ciencias Agrcolas Pecuarias Y Del Medio Ambiente.ECAPMA.

http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recurs5275.PDF

Definicin de homeostasis - Qu es, Significado y Concehttp://definicion.de/homeostasis/#ixzz2RuVsvh9Q
http://es.wikipedia.org/wiki/Estado_estacionariohttp://es.wikipedia.org/wiki/Equilibrio_din%C3%A1micohttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cidohttp://es.wikipedia.org/wiki/Disoluci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Ionhttp://es.wikipedia.org/wiki/Equilibrio_%C3%A1cido-basehttp://definicion.de/homeostasis/#ixzz2RuVsvh9Qhttp://definicion.de/homeostasis/#ixzz2RuVsvh9Qhttp://definicion.de/homeostasis/#ixzz2RuVsvh9Qhttp://definicion.de/homeostasis/#ixzz2RuVsvh9Qhttp://es.wikipedia.org/wiki/Equilibrio_%C3%A1cido-basehttp://es.wikipedia.org/wiki/Ionhttp://es.wikipedia.org/wiki/Disoluci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cidohttp://es.wikipedia.org/wiki/Equilibrio_din%C3%A1micohttp://es.wikipedia.org/wiki/Estado_estacionario

7/30/2019 PRELBM_352001_36

4/11




R CTICA 3: CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES

INTRODUCCIN

os carbohidratos no estructurales se dan debido a lacumulacin de carbohidratos solubles en los tejidos de lasantas, se produce cuando la tasa de formacin de glucosaurante el proceso de fotosntesis supera la cantidadecesaria para el crecimiento y la respiracin.

n esta prctica se determinaran los carbohidratos notructurales, se les llama as al no hacer parte de la pared celular,tn muy activos y representan azucares libres que se almacenan

n los rganos de reserva.

entefacto o diagrama conceptualCARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES

SonFormados Compuestos No Forman

por ActivosCarbono En el Parte

Hidrogeno Metabolismo de la ParedOxigeno De la Celular

PlantaPosee Almacenados

EnFermentacin Races Tallos CoronasRpida y total



Balanza Analtica

Bao Termosttico

Beaker De 100 - 200 - 400 ml

Varilla de vidrio

Papel de filtro

Tubos de Ensayo Con gradilla


Compuestos

Carbohidratos Activos PlantaNo

Estructurales Raiz-Tallo-CoronaMetabolismo

1. TABLA DE DATOS

Tabla. Datos para la cuantificacin de CNE


Se espera aprender mediante el mtodo de Fenol Sulfrico determinar la cantidad de carbohidratos toNo estructurales, extraerlosbasndose en su contenidalmidones hidrolizables y azcares solubles y medmedio de la lectura espectrofotomtrica.

Se espera adquirir conocimientos suficientes sobre

carbohidratos no estructurales, como son compuestos activos en el metabolismo de las plantas.

GLOSARIO

Carbohidrato: es un compuesto orgnico con la frmula geCM (H 2 O), n, es decir, que consta slo de carbono, hidr

y oxgeno, los dos ltimos en la relacin atmica 2:1.

7/30/2019 PRELBM_352001_36

5/11






Glucosa C6H12O6

Agua destilada H2O

Fenol C6H5OH

3 Procedimientoxtraccin

epositar en el vaso de precipitados y agregar 50ml deolucin de HCl, agitar por 3 minutos y llevar al Beaker consolucin al bao termosttico a 90C por 20 min.

ejar enfriar por 5 min y filtrar, medir el volumen filtrado yevar 5ml de este a un tubo de ensayo en el cual sedicionara 5 ml de NaOH y agitar por 15 seg. Tapar y rotulars FCNE (filtrado para carbohidratos NE).

uantificacin:

otular 3 tubos de ensayo as B (blanco), St (estndar), mmuestra y adicionar los reactivos en el orden que se indican la tabla 1, agitar por 20 seg. Y llevar al bao mara por 3in. Sacar y agitar 10 seg. Dejar enfriar completamente.

uantificacin Agronmica:

Mezcla reactiva: Rotular 7 tubos de ensayo as 1, 2, 3, 4,6, B, colocar en bao de hielo y adicionar los reactivosdicados en la tabla 1.

carbohidratos pueden ser vistos como los hidratos de carbonah su nombre. Es esencialmente un sinnimo de sacridogran familia de los hidratos de carbono naturales que lnumerosos papeles en los seres vivos.

Glucosa: La glucosa es un monosacrido con frmula moleC6H12O6, la misma que la fructosa pero con diferente posrelativa de los grupos -OH y O=. Es una hexosa, es decircontiene 6 tomos de carbono, y es una aldosa, esto es, el gcarbonilo est en el extremo de la molcula.

Transmitancia: se define como la cantidad de energaatraviesa un cuerpo en determinada cantidad de tiempo.Se define tambin como la fraccin de luz incidente, a una londe onda especificada, que pasa a travs de una muestra.

Espectrofotmetro: instrumento de anlisis qumico utilizadomedir en funcin de la longitud de onda la relacin entrevalores de la misma magnitud fotomtrica.Es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haRadiacin Electromagntica.

BIBLIOGRAFIA


http://www.es.wikipedia.org/wiki/Carbohidratos

http://www.fao.org/docrep/field/008/AB489S/AB488S00.chidratos no estructurales.htm

http://www.slideshare.net/LINEYANDREA/carbohidratos4402131

7/30/2019 PRELBM_352001_36

6/11




PRCTICA 4: Actividad de Catalasa

INTRODUCCIN

a catalasa es una enzima que se encuentra en organismos

vos y cataliza la descomposicin del perxido dedrgeno (H202) en oxgeno y agua.

2 H2O2 2 H2O + O2

a catalasa como biocatalizador de origen proteco, es unanzima xido - reductasa que participa en la degradacin delerxido de hidrgeno (H2O2), hasta Oxgeno molecularO2) y agua (H2O).

cha biomolcula, est presente en peroxisomas yitocondrias de clulas animales y vegetales,otegindolas de la toxicidad de los radicales libres

erxido, impidiendo su acumulacin y beneficiando el

etabolismo celular.


Organismosque

Vivos actanAnimales Vegetales como

Pueden catalizadoresdescomponer son

perxido de hidrogeno sustancias quepor aceleran las

enzimas reacciones qumicas

responsables sin serde la destruidas o alteradas

Actividad qumica tienenEn intervalo de temperatura

El H2O2 es toxico para la mayora de los



Soporte UniversalMetlico, con pinza para

buretaPipetas Graduadas De10ml

Beaker De 400 ml

Erlenmeyer De 125ml


Bureta De 25ml

Tubos de Ensayo Con gradilla


Catalizar

EnzimaPresente en

Celulas vivasAnimal vegetal

descomposicion rapidade

perxido de hidrogenoen

agua oxigeno

2. TABLA DE DATOS

Tabla 1 Datos para Actividad Cataltica de Catalasa (AC

TUBOS mL de KMnO40,01N Vs (mL)

B

1

2

3

4

5

6


Se espera determinar la actividad de catalasa por mdel mtodo permanganomtrico.

Se espera cuantificar la actividad enzimtica de la caten muestras de origen vegetal y animal; enzima qupuede encontrar en todos los seres vivos catanecesaria para descomponer el perxido de hidrgencompuesto txico, que se produce durante el metabo
http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3geno

7/30/2019 PRELBM_352001_36

7/11




Muestras Biolgicas Concentrado, frutas overduras, Orina y Sangre.


Reactivo Frmula ConcentracinPerxido deHidrogeno

H2O2 0.05 M

cido Sulfrico H2SO4 2 NPermanganato dePotasio

KMnO4 0.01 M

Extractos deCatalasa (ECAT)

3 Procedimiento

3.1Extraccin

rutas , verduras concentradosesar 2g de muestra picada pulverizada y colocarla en unbo de centrifuga ,luego adicionar 10mL de solucin fra de

uffer fosfato 0,05M, pH=6,8-7,0, agitar, con agitador dedrio (3min) y centrifugar a 2500rpm ,durante 5min Sacar elobrenadante, pasarlo a una probeta, medir su volumen,gistrarlo como : Vs y tomar 5 mL de ste para depositarlo

n un tubo de ensayo ,taparlo, rotularlo como

VCAT(extracto de verdura para catalasa ) FCAT(extracto de fruta para catalasa), ECCAT (extractoe concentrado para catalasa), colocarlos inmediatamenten bao de hielo.

angre y orinan un tubo de ensayo, colocar 0,2 mL de sangre y 10 mL deuffer fosfato fro, agitar vigorosamente hasta obtenerezcla completa, tapar, rotular: SSCAT (Solucin sangunea

ara catalasa) y guardar en refrigeracin bao de hielo. Encaso de la orina, mezclar 4 mL de muestra con 6 mL de

uffer fro, agitar, tapar, rotular: SOCAT (solucin de orinaara catalasa), colocar en bao de hielo.

3.2 Cuantificacin

gronmicaezcla Reactiva

istar 7 tubos de ensayo y rotularlos as: B, 1, 2,3, 4,5, 6,olocarlos en bao de hielo y adicionar los reactivos en elden dado.

celular.

Se espera aprender y familiarizarse con las propiedadelos enzimas y observar la actividad de la catalasa

GLOSARIO

Enzima Catalasa: La catalasa es en una enzima que la podencontrar en muchos organismos vivos, y cataliza la reaccidescomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgLa catalasa cumple una funcin protectora contra determinmicroorganismos patgenos, sobre todo anaerobios. Las bactanaerobias, mueren al estar en contacto con oxgeno, es porrazn que el oxgeno producido por esta enzima tiene ebactericida sobre estos microorganismos.

Perxido de hidrgeno:H2O2, es uno de los productos del

metabolismo celular en diversos organismos, pero dada su

potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima

catalasa.Se produce durante la oxidacin de las coenzimas FAD y FMN,biomolculas importantes en la oxidacin de sustratos a partir deloxgeno molecular .Tambin se genera por la oxidacin de cidosgrasos (AG) en los peroxisomas.Perxido de hidrxido, conformada espacialmente en su estrucuaternaria como una protena homotetramrica de peso moleque oscila entre 210 a 280 Kilodaltons(kD) con 4 subunididnticas, constitudas por un grupo prosttico de protoporfirina

grupo hemo (Fe-III), representando estos, un 1,1 % y 0,0respectivamente del peso molecular total de laEnzima.

Mtodo permanganomtrico: el cual se titula el perxido reses decir, el que no particip en la RBE, con una solucipermanganato de potasio (KMnO4) de concentracin conocidaPara deteccin de Perxido residual en rehso de filtros procedimiento permite una rpida determinacin de la ausencPerxido en el agua de enjuague del filtro de dilisis.

BIBLIOGRAFIA


http://www.enzima catalasa | La Gua Qumica http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa#ixzz2S4klkgGo

7/30/2019 PRELBM_352001_36

8/11




tulacin permanganomtrica

ontaje de titulacin, colocar el Erlenmeyer debajo de laureta y titular adicionando lentamente el KMnO4, agitando,asta que aparezca y permanezca un color rosado violetalido, por 30 segundos, en la solucin reactiva, registrar losL de permanganato gastados en este proceso.

ootecniaezcla reactivanco tubos de ensayo para los reactivos que se indican

ara la realizacin de esta prctica.

http://www.es.wikipedia.org/wiki/Catalasa

http://www.www.acienciasgalilei.com/qui/formulacion/peros.htm

7/30/2019 PRELBM_352001_36

9/11




R CTICA 5: CUANTIFICACI N DE NITR GENO NOROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest)

INTRODUCCIN

os compuestos que forman el NNP son los que contienenmonaco, nitritos y nitratos y otros como la urea, el Biuret ocido rico.

n el laboratorio, el nitrgeno no proteico (NNP), que estcluido en: rea, amonaco y pptidos, es tradicionalmentequel que pasa en el filtrado despus de la precipitacin conn reactivo especfico para protena.

ara separar el nitrgeno insoluble del soluble (NNP), estoe realiza mediante la lisis deolipptidos, hasta pptidos der menor peso molecular , del forma que son

etablicamente ms cercanos a la protena soluble(PS)


NITROGENONO PROTEICO

Son UtilizadoNitrgeno Compuestos que por

Amoniacal Pueden ser BacteriasUrea Convertidos en Para Fabricar

Protenas Aminocidos

ExcretadoEn forma de orina



Papel Filtro

Capsula de Porcelana Porcelana

Vaso de Precipitado Vidrio


Tubos de EnsayoCon gradilla


Nitrogeno No ProteicoUtilizado por

Son BacteCompuestos

Excretado

Nitrgeno En forma de OrinaAmoniacal

Urea

4. TABLA DE DATOS

Tabla: Datos para Nitrgeno no proteco (NNP)Tubos Wm (g) Vf(mL) A

Estndar (st)

m

Tipo y origen dela muestra


Se espera determinar con el resultado del anlisisbuena aproximacin al contenido de protena e

alimento, ya que el nitrgeno tambin provienecomponentes no proteicos.

Se espera cuantificar el nitrgeno no proteico (denominado tambin fraccin A de Van Soest, mediareactivo: cido Tricloroactico.

Se espera aprender y familiarizar con las propiedades del NAplicar tcnicas instrumentales analticas de Lectura

7/30/2019 PRELBM_352001_36

10/11






cido Tricloroactico Cl3-COOH

10%

Urea CO(NH2)2 0.25Agua Destilada H2O

Cloruro de mercurio HgCl2 1%

Fosfato pH 7 H3PO4

Indicador de tashiro C15H14N3O2NaCloruro de hidrogeno HCL

3 Procedimiento

3.1. Extraccin con cido Tricloroactico (ATA).

orraje: se toman 15 submuestras de 250 gr cada una, se cortan aaltura del pastoreo evitando lugares donde se pueda alterar lauestra como orillas de camino zonas prximas alambrados, etc.e guarda preferiblemente en una bolsa de papel o plstico en ungar con baja temperatura y etiquetar con todos los datosncernientes al lugar de la toma de la muestra.

uelo: se toman mnimo 10 submuestras de suelo a profundidade 20 cm, retirando la capa vegetal de la superficie y retirando de lauestra los residuos guardando en una bolsa plstica, dejar secara sombra si est muy hmeda.

esar +/-1.0 gr. De muestra pulverizada y registrar comoWm),adicionar en vaso de precipitado y agregar 30 mL degua destilada fra, agitar por 1 min., luego deje reposar 15in y adicione 20 mL de solucin de ATA y agite por 1 min.,

eje reposar a temperatura ambiente por 15 min.

ltre sobre probeta y mida el volumen del filtrado, coloque 5L del filtrado en un tubo de ensayo y rotule as FNNPltrado para nitrgeno no proteico, el papel filtro con elsiduo ponerlo en una capsula de porcelana y secar a

05c por 30 min.3.2. Cuantificacin:

uantificacin de N por mtodo espectrofotomtrico deuret Lowry

otular 3 tubos de ensayo as, B (blanco), St (estndar), mmuestra). Adicionar reactivos segn orden indicado en eluadro nmero 2.

vigorosamente por 15 seg. Y deje reposar 5 min. A temperambiente. Espectrofotomtrica: alistar el espectrofotmetro alongitud de onda (I) de 540 nm, y calibrarlo con el tubo de enblanco, leer absorbancia de las dems soluciones, St y m

registrar valores en la tabla de datos. Kjeldhal y espectrofotomtricas para determina

contenido de NNP y Protena verdadera (PV) en forraconcentrados.

Se espera adquirir conocimientos suficientes sobre El Nque es el principal nutriente nitrogenado para las bactedel rumen; lograr claridad sobre como tener suficientesfuentes de energa para que stas lo puedan utilizar y puedan biosintetizar aminocidos.

GLOSARIO

Nitrgeno no proteico: se denominan as a los compuestonitrgeno que pueden ser convertidos en protenas por algorganismos vivos.

Protena: son macromolculas formadas por cadenas linealeaminocidos. El trmino protena proviene de la palabra franprotine. Cada clula en el cuerpo humano contiene proLa protena es una parte muy importante de la piel, los mscrganos y glndulas.

Amoniaco: es un compuesto qumico cuya molcula consisun tomo de nitrgeno (N) y tres tomos de hidrgeno (H

acuerdo con la frmula NH3.

Pptidos: Son un tipo de molculas formadas por la univarios aminocidos mediante enlaces peptdicos.

BIBLIOGRAFIA


http://www.Nitrogeno no proteico/ Gua de Qumica 2000com/conceptos-bsicos/Nitrogeno#ixzz2S4klkgGo

http://www.es.wikipedia.org/wiki/Nitrogeno

7/30/2019 PRELBM_352001_36

11/11




PRELBM_352001_36

Documents

Transcript of PRELBM_352001_36