PREVENCION DE RIESGO CARDIACO

MC Arturo Olvera MedelCentro de Diagnóstico e Industrial

Monterrey, N.L.

VI Congreso Regional de Químicos Farmacéuticos BiólogosBiblioteca Universitaria “Raúl Rangel

Frías”25 – 27 de Agosto de 2004

0100200

300

400500

600

700

800900

1,000

Muer

tes

en 19

96 (m

iles)

CVD Cancer Accidentes HIV/AIDS

959.2

544.7

93.832.7

Magnitud de Causas de Muerte en los Estados

Unidos

American Heart Association. 1999 Heart and Stroke Statistical Update.1998.

Costo Total Estimado a 5 años por Caso

CostoPromedio

Evento ECV (1986 $)Infarto agudo al miocardio 51.211Angina de pecho 24.980Angina pectoris inestable 40.581Muerte súbita 9.078

ProcedimientosAngioplastia 26.916Cirugia de Marcapaso 32.465

Wittels EH 1990;65:432– 440. et al. Am J Cardiol

Antecedentes

Relación de riesgo cardiovascular con el desarrollo de procesos arterioescleroticos.

Identificación de factores de riesgo que promueven la aterogenesis:

•Lipoproteinas aterogenicas•Hiperglucemia

•Fumar cigarrillos•Hipertension

PANEL DE LIPIDOSFactores de riesgo (arteroesclerosis)

COLESTEROL

TRIGLICERIDOS

HDL

LDL

Lp(a)

APOLIPOPROTEINA A & B

Colesterol Total no es la respuesta!Niveles de colesterol y triglicéridos

Marcadores diagnósticos

Transtornos de lípidos Riesgo cardiovascular

Aseguramiento clínico ?

Información detallada de Lipoproteínas

Diagnóstico exacto y tratamiento de transtornos lipídicos

LIPOPROTEINAS

HDL

LDL

Lp(a)

Estructura de una lipoproteina de baja densidad

Apo-B

Colesterol Libre

Fosfolípidos

α - Tocoferol

β - Caroteno

Trigliceridos

Ester de Colesterol

Clasificación de Lipoproteinas

Quilomicron VLDL IDL LDL HDL

DENSIDAD 0.95 0.95-1.006 1.006-1.019 1.019-1.063 1.063-1.21

DIAMETRO 80-1200 30-80 23-35 18-25 5-12 (nm)

VLDL=Lipoproteina de muy baja densidad IDL=Lipoproteina densidad intermedia

LDL=Lipoproteina de baja densidad HDL=Lipoproteina de alta densidad

Tall AR (1995) plasma cholesteryl ester tranfer protein and high-desnsity lipoproteins., new insights from molecular genetic studies Journal of Internal Medicine 237: 5-12

Medida de HDL y LDL Colesterol

LDLHDL

Clases de lipoproteinas

LDLLDLQuilomicronesQuilomicrones,,VLDL, y VLDL, y sus sus

productosproductos

HDLHDL

99––15 nm15 nm

Potencialmente Potencialmente antianti--infamatoriosinfamatorios

> 30 nm> 30 nm 2020––22 nm22 nm

Potencialmente inflamatoriosPotencialmente inflamatorios

Métodos Directos

•Totalmente automatizado para ensayos de rutina

•Primeros métodos comerciales-enmascara el no HDL en la etapa inicial

-mide HDL-C en la segunda etapa

•Métodos de aclaramiento-Aclaramiento del no HDL en la etpa inicial

-Mide HDL en la segunda etapa

Métodos Directos de Enmascaramiento

•Método WAKO SIGMA- Método de Inmunoseparación (IS)

•Método DAIICHI BECKMAN- Polímero Polianión/ detergente(PPD)

•Método KWOYA BM/Hitachi- 1-Ciclodextrinsulato/enzimas modificadas con

polietilenglicol (PEPME)

Métodos de Enmascaramiento

HDL

LDL

IS

CM PPD

VLDL

PEGME

CE CO

VLDLHDL

Muestra

Reactivo 1

LDLCM

Lipoproteinas en muestras de paciente

CM

LDL

CM

HDL

LDL

HDL

CM

LDL HDL

HDL

LDLCM

MUESTRA NORMAL MUESTRA ANORMAL Ej. Triglicéridos Altos

Métodos Directos de Enmascaramiento

•Buenos resultados en muestras “normales”

•Pobre desempeño en muestras “anormales”

- niveles altos de triglicéridos y bilirrubina

- baja especificidad

- incapacidad para distinguir lipoproteínas

Principio de Reacción

CM

VLDL

LDL

HDLVLDL

HDL

Colesterol Esterasa &Colesterol Oxidasa

Colestenona

+ H2O2

H2O + O2

CATALASA

Etapa de Aclarado

LDLCM

PEROXIDASA

Etapa de análisis

HDL HDLColesterol Esterasa &Colesterol Oxidasa

Colestenona

+ H2O2

* La azida de sodio inhibe la acción de la catalasa en la etapa de análisis Compuesto - color

Comparación de Ultracentrifugación con métodos directos en muestras discrepantes

Muestra 1

0

5

10

15

20

25

Randox Method 1 Method 2

mg/

dL

PEGME PPD

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Randox Method 1 Method 2

mg

/dL

Muestra 2

PEGME PPD

Resultado del estudio

Todos los métodos equivalentes con muestras “normales”, sin embargo,

solamente el nuevo método Randox dio resultados exactos en muestras

discrepantes (triglicéridos ó bilirrubina elevados)

LIPOPROTEINAS

HDL

LDL

Lp(a)

Lipoproteina (a) Lp(a)

Que es la Lipoproteina (a) ?

• Una variante de Lipoproteina– De densidad y tamaño intermedio entre LDL y

HDL

• Particula LDL con una Apo-(a) extra

• Sintetizada en el higado– Hereditaria– No afectada por la dieta o el estilo de vida

Por que medir Lp(a) ?• Individuos con carga genética para la formación de

Lp(a) tienen mayor predispocisión a la arteroesclerosis.

• Se han encontrado niveles elevados de Lp(a) en la sangre de muchas personas en las cuales la vulnerabilidad a enfermedades coronarias no puede atribuirse a otras causas.

• Lp(a) es un excelente indicador para seleccionar individuos de alto riesgo quienes están en la necesidad de prevencion primaria para enfermedades vasculares coronarias

Estructura de Lp(a)

Partícula de LDL

Apo(a) unida

Estructura de Plasminógeno

Mecanismo Propuesto• Lp(a) similar en estructura al

plasminogeno– La clave de su aterogenicidad

• Lp(a) favorece la coagulación– Compite con plasminogeno por fibrina– Promueve desarrollo plaquetario– Infarto al miocardio o cerebral

Lp(a)• Valores mayores de 30mg/dL

– Duplican el riesgo de enfermedades cardiacas

• Valores mayores de 50mg/dL con elevados niveles de LDL– Aumentan 6 veces el factor de riesgo

Ensayo Lp(a)

LATEX

LATEX

+A700nm

Métodos alternativos

Randox Lp(a)• Kit Inmunoturbidimetrico con látex

mejorado

Otros métodos• Inmunodifusion radial• Radioinmunoensayo• Nefelometria

Caracteristicas

• Reactivo liquido estable- Listo para usar~ Cat. LP3403 R1 1x10 ml / R2 1x6 ml

• Estable hasta caducidad- Un mes abordo a 10°C

• Calibrador – Cat. LP3404 5x1ml

CHOLESTEROL

TRIGLYCERIDOS

HDL

LDL

Lp(a)

APOLIPOPROTEINAS A & B + PCR

Proteina C reactiva (PCR)Métodos para PCR

• Prueba en placa

• Ensayo inunoturbidimetrico

• Ensayo de alta sensibilidad

• Ensayo de rango total

Promotores de Aterogenesis

Estimulos nocivos

Fumar cigarrillos HipertensionObecidadHiperglucemiaLipoproteinas aterogenicas

Iniciacion

Crecimiento

Complicaciones

Respuesta inflamatoria al

dañocitoquinas, moleculas bioactivas y

células caracteristicas de inflamación

Factores de RiesgoPro-inflamatorios

ICAM-1 Selectinas, HSPs,

etc

Circulación

Pro-inflamatorios primarios cytokinas (Ejm. IL-1 TNF-α )

“Mensajero” cytokinasIL-6

PCR SAA

Celulas endoteliales

Cascada inflamatoria. IL indica interleucina, ICAM-1, Molecula de adhesión intercelular.TNF-α, Factor de necrosis tumoral SSA, Amiloide A en suero

Investigaciones Cardiacas• 1/3 de ataques cardiacos presentan perfiles

“normales de lipidos”

• Mejor aseguramiento de condiciones patologicas por ejm. Arteroesclerosis.

• Arteroesclerosis o inflamacion están relacionadas

• PCR mide inflamacion.

• PCR es un factor de riesgo independiente

Proteina C Reactiva (PCR) Método de Alta sensibilidad

IMPORTANCIA CLINICA

• Valoracion de riesgo cardiaco

• Prevencion primaria de riesgo cardiaco

• Pronostico despues de un infarto al miocardio

• Monitoreo del tratamiento

PCR Rango normal

• Antecedentes:-

– En general para el monitoreo de inflamación, infecciones etc, son significativos valores >6mg/L.

– La mayoria de los kits de PCR “tradicionales” tienen una sensibilidad aproximadamente de 3mg/L y linearidad superior de entre 160 – 200 mg/L

Prediccion en riesgo coronario

Valores de PCR

Riesgo bajo < 1mg/lmoderado de 1 a 3 mg/lalto > 3.0 mg/l

PCR Rango total

0.1 – 160 mg/l• Nuevo reactivo IT de latex mejorado

• Adaptable en general a analizadores químico clínicos

• Mediciones de PCR en rango total tanto dentro y cercano al rango normal

PCR Rango total

0.1 – 160 mg/l• Implicaciones para el laboratorio:-

– Perfiles de PCR estan siendo solicitados mas frecuentemente

– Evidencias crecientes para llegar a ser parte del panel de pruebas cardiacas de rutina

– Mantener una prueba de rutina para inflamacion general e infeccion.

PCR Rango total

0.1 – 160 mg/l• Catalogos No.- CP 3847, R1 2x11ml / R2 2x11 ml- CP3849, R1 4x50ml / R2 4x50 ml- CP3850, R1 5x100ml / R2 5x100 ml

• Set de calibrador liquido- CP 2499 6x1ml

• Control PCR proteinas especificas