SUBPROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD INSTRUMENTAL

ESPECTROFOTOMETRÍA ENCUESTA Nº 60 Diciembre 2014

CONTROL de EXACTITUD FOTOMÉTRICA:

El objetivo de esta encuesta es el estudio exactitud de la medida de absorbancia del espectrofotómetro a 340 nm. La exactitud fotométrica se calcula por comparación de la absorbancia promedio hallada con la absorbancia de referencia de la solución utilizada. Para la realización de la encuesta, se envía como material de control una solución de dicromato de potasio en medio ácido

Procedimiento:

Espectrofotómetros manuales: 1) Encender el espectrofotómetro el tiempo que indique el fabricante antes de realizar las

lecturas. 2) Seleccionar la temperatura de trabajo (25, 30 o 37ºC). 3) Llevar a 340 nm el selector de longitud de onda 4) Seleccionar una cubeta en buen estado (sin rayaduras, deformaciones y limpia), con la que se

realizarán todas las medidas de absorbancia. Introducir la cubeta en el compartimiento de medida respetando siempre la misma orientación al realizar las lecturas.

5) Llevar a cero de absorbancia con agua destilada, con la cubeta seleccionada. 6) Llenar la cubeta con la solución enviada y medir la absorbancia. 7) Medir por duplicado y calcular el promedio de ambas medidas

Espectrofotómetros con bomba de aspiración: 1) Encender el espectrofotómetro el tiempo que indique el fabricante antes de realizar las

lecturas. 2) Seleccionar la temperatura de trabajo (25, 30 o 37ºC). 3) Llevar a 340 nm el selector de longitud de onda. Llevar a cero de absorbancia con agua

destilada. Aspirar aire. 4) Aspirar la solución control y registrar la absorbancia. 5) Aspirar aire.

Repetir el procedimiento y calcular el promedio de ambas medidas

Autoanalizadores: 1) Seleccionar la longitud de onda de 340 nm o la mas cercana. 2) Seleccionar la temperatura de trabajo (25, 30 o 37ºC). 3) Cargar en una copa de reacción agua destilada para realizar el blanco. 4) Cargar la solución control en 2 copas de reacción y leer la absorbancia de cada una de ellas.

5) Restar el valor de la absorbancia del agua a cada lectura de las soluciones y calcular el promedio de las dos lecturas. 6) Si utiliza un autoanalizador con camino óptico de las cubetas de reacción distinto de 1cm, verifique si el programa del instrumento normaliza las absorbancias a 1cm de paso de luz. Si no lo hace, normalizar todas las lecturas de absorbancia a 1cm de paso de luz de la siguiente manera:

Absorbancia normalizada = absorbancia leída Camino óptico (en cm)

7) Registrar el promedio de las absorbancias normalizadas Si tiene alguna duda de cómo realizar estas mediciones con su equipo automático, le aconsejamos se comunique con el servicio técnico de su fabricante o con los profesionales del PEEC, subprograma instrumental.

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