Universidad Nacional Autónoma de México

FES Iztacala

“evaluación de degradación celular en Raphanus sativus L. causada por riego de aguas residuales industriales de una planta tratadora de Tlalnepantla Edo.Mex.”

INTEGRANTES :Martínez Nolasco Hazete Moreno Patlán Mario IvanOrtega Salinas Jessica CitlalliReyes Medina Carlos Ulises

AGUA RESIDUAL

Color, Olor.

Lodos arenas y gravas

Composición químicas

Composición físicas

sales minerales, compuestos cormo sulfatos, carbonatos, que pueden sufrir algunas fenómenos de óxido-reducción.

Agua residual

Agua (99%) Sólidos (0.1%)

Orgánicos Inorgánicos

Residuos, Minerales Pesados

Sales

Metales

Proteínas (65%)

Carbohidratos (25%)

Lípidos (10%)

El 63% del agua proviene de ríos, arroyos y lagos, el resto de aguas subterráneas.

Estadísticas

al 2009 el 76.7% le correspondía al agrícola. 

La superficie sembrada varía entre 20 y 23 millones de hectáreas anualmente.

Aguas de riego representa 6.5 millones de hectáreas

85 Distritos de Riego

Muerte celular programada

Mecanismo por el cual se regula una serie de procesos fisiológicos

• lento proceso de senescencia,• pérdida de la clorofila,(color pardo en hojas)• marchitez• abscisión de la hoja.

A nivel celular • El rol de las vacuolas en la digestión progresiva de orgánelos. •Los cloroplastos desaparecen primero, luego las mitocondrias y finalmente el núcleo .por carencia de nutrientes• asociada a la autofagia en cultivos celulares

ANTECEDENTES

Ramírez Pisco 2006.BIOSÓLIDOS PROCEDENTES DELTRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES PARA USO AGRÍCOLA Y SUEFECTO SOBRE EL CULTIVO DE RABANO ROJO (Raphanus sativus L.).

Berrueta M.D2011

MUERTE CELULAR INDUCIDA POR CONDICIONES AMBIENTALES ADVERSAS EN Calibrachoa parviflora

ESTUDIO DE LA POLIMERIZACIÓN DE FENOLES UTILIZANDO PEROXIDASAS PRESENTES EN RÁBANO COMÚN (Raphanus sativus var sativus), CON APLICACIÓN EN LA BIORREMEDIACIÓN DE AGUAS RESIDUALES DE UNA EMPRESA TEXTILERA

Rafael Vargas 2011

En México es un país que abastece sus cultivos con aguas residuales de sus zonas urbanas. los compuestos presentes en aguas residuales y las consecuencias de sus usos en la agricultura es un tema de actualidad en varios países de la región hispanoamericana. Debido al uso de estas aguas dando siesgos no solamente a la planta si no también a la población que consume estos productos se pretende determinar si las afectaciones que ocasionan son o no admisibles el rábano es una especie idónea para este tipo de evaluación están, el de ser una planta de rápido crecimiento(cinco semanas) y presentar un contacto directo entre el sustrato y la parte comestible.

justificación

Objetivo GeneralEvaluar el efecto del riego con aguas residuales sobre plantas de en Raphanus sativus L condiciones de invernadero.

Objetivos Específicos+Obtener los valores de área foliar y necrosis utilizando el software imagej®.+Determinar el contenido de clorofila a , clorofila b y carotenoides.+medir la presencia de metales pesados por espectrofotomefria atómica+ evaluación de degradación de ADN por técnica cometa 

germinaciónParte de la variabilidad de resultados se relaciona con las

condiciones ambientales a las que se somete la semilla para promover la germinación, en especial con el nivel de sombra.

bajo condiciones óptimas, conforme aumenta el tiempo de almacenamiento, la viabilidad de la semilla desciende

paulatinamente (Hartmann y Kester, 1998).

102 semilla

Agua potable Agua residual

10 ml diarios

perlita Tierra y composta algodón perlita

Tierra y composta

algodón

Cultivo de la planta

10 plantas

Agua potable 50% AP50% AR

Agua residual

grupos

Tipo de riego

8 onzas a cada planta cada tercer día

Técnicas

metales pesados

Cuantificación de azucares y almidon.

Cuantificación de clorofila

Técnica cometa

Determinación de necrosis

METALES PESADOS

- son tóxicos

-alteran el metabolismo y pueden provocar hasta su muerte.

- Metales como el cromo y el zinc sonutilizados por los organismos en cantidades pequeñas,se les conoce como oligoelementos

-pueden ingresar a los organismos a través de la cadena alimenticia , en la cual se pueden concentrar a medida que ésta avanza.

Metales pesados

- tienen capacidad paraintercambiar cationes del suelo por el contenido de losresiduos que son aplicados.

-Junto con la materiaorgánica controlan la toxicidad de los materialespesados en las plantas.

-Estos elementos son estables yse constituyen como nutrientes para las plantas (Na+, K+, Mg++ y Ca++)

Técnica de absorción atómica

La extracción de metales consiste en separarlos metales mediante un solvente patron

La cantidad extraída representa la concentraciónen el equilibrio obtenido en el contacto de lasfases involucradas

VARIACIÓN DE AZÚCARES SOLUBLES Y ALMIDÓN EN HOJAS La síntesis neta de azúcar y la capacidad de exportación aumentan durante el desarrollo de la hoja,

las hojas presentan diferencias en el metabolismo de estos dos azúcares de transporte durante el desarrollo de las hojas

La cuantificación del almidón puede proveer una medida exacta de la fluctuación en las reservas almacenadas

Debido a la función preponderante de los carbohidratos no estructurales en el crecimiento

almidon

se cuantificaran por el método colorimétrico de Nelson-Somogyi

se obtendra por diferencia de los valores de los azúcares solubles totales menos los reductores direc-tos.

Las muestras se filtraran y el extracto alcohólico se utiliza para su cuantificación el residuo se emplea para medir almidón por el método de la diastasa

Técnicas para semillas en germinación

Azucares y almidon

Los azúcares reductores directos

azúcares no reductores

La muerte celular programada pueden afectar las reacciones fotoquímicas de la fotosíntesis, alterando la síntesis de los pigmentos fotosintéticos como clorofila a.

CUANTIFICAIÓN DE CLOROFILA

MUERTE CELULAR

NECROSIS:Proceso

“caótico” de destrucción

celular traumática,

seguida por la liberación de componentes intracelulares

APOPTOSIS:

proceso de destrucción

celular regulado

MUERTE CELULAR PROGRAMADA (APOPTOSIS)

forma de muerte celular

caracterizada por distintos cambios morfológicos en la

célula

condensación de la cromatina

fragmentación nuclear

pliegues en la membrana

plasmática

contracción celular

ENSAYO COMETA

Detectar el daño in vitro o in vivo causado al ADN en

células individuales

migración del ADN por rupturas

simples en la hebra del ADN

Células sometidas a una electroforesis.

Los fragmentos de ADN migran fuera del núcleo celular y forman

una cola

ENSAYO COMETA

Consiste en los siguientes pasos

obtener las células

fijarlas con agarosa en un portaobjetos

Someterlas a una

solución de lisis (Triton X-100,

2.5 M NaCl) con la finalidad de

romper su membrana

celulardesenrollar el ADN en una

solución amortiguadora (NaOH 0.3M)

realizar la electroforesis

la determinación

del daño

Longitud del halo

clasificación del grado de daño en el

ADN.

Muerte accidental, pasiva e indiscriminada causada por agentes externos, debido a la acumulación de moléculas fitotóxicas ; de moléculas especificas después de un evento traumático y es irreversible. (H2O2) .

la necrosis

afecta

 se traduce como un aumento en la

senescencia de las plantas ya que las

EROS son las principales oxidantes de proteínas, ácidos nucleicos, lípidos y otras biomoléculas como la clorofila .

el uso de aguas negras puede provocar estrés oxidativo mediante las especies reactivas de

oxígeno (EROS),

Se caracteriza por la perdida progresiva de la integridad de la membrana que resulta en la liberación de los componentes celulares .

Técnica

La proporción entre el áera total de las hojas y de tejido

necrosado se determinara con el procesamiento y análisis de

imágenes con el programa Imagej.

(10mL de glicerol, 10mL de fenol, 10mL de acido láctico y 10mg de azul tripano al 5% disueltos en 10 mL de agua

destilada) según el método de Keogh

El grado de necrosis sera evaluado en las hojas enteras,

las cuales se teñiran con solución de azul tripano .