AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS.Son las que se aslan con mayor frecuencia-Desarrollan bien en: Agar sangre, chocolate, medios selectivos (Mac Conkey).Algunas son patgenas clsicas, otros si colonizan sitios sensibles provocan enfermedades.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.Consideraciones generales, anatoma de las ITU y FMN de la uretra anterior:

Estafilococos coagulasa negativosEstreptococos viridans y no hemolticosLactobacilosDifteroidesNeisseria sp.Bacilos Gram negativosAnaerobiosMycobacterium sp.Ocasionalmente levaduras.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.VIAS DE INFECCION:VIA ASCENDENTE: - Escherichia coli - Klebsiella - Proteus mirabilis - Otras enterobacterias: Citrobacter, Serratia marcensces, - Pseudomonas aeruginosa - Staphylococcus saprophyticus - Enterococcus.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.VIA DESCENDENTE: - Staphylococcus aureus - Candida albicans - Listeria - Mycobacterium tuberculosis - Salmonella

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.RECOLECCION Y TRANSPORTE DE MUESTRAS: La calidad del diagnstico laboratorial depende directamente de la muestra enviada.

METODOS DE OBTENCION DE LA ORINA:Aspiracin suprapbicaSegundo chorro o chorro medioCateterizacin vesicalBolsa recolectora

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.I. DIANOSTICO PRESUNTIVO: PRUEBAS DE SELECCIN RAPIDA PARA ITU:

Gram de gota fresca Washington: - colocar 1 gota de orina fresca en lmina porta objetos, no extender y dejar secar - Seguir los pasos de Gram. - Resultado: La presencia por lo menos de 01 bacteria/campo (20 campos), se correlaciona con bacteriuria significativa (>100,000 UFC/ml orina)

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.Sedimento: - Colocar 6 ml. Aprox. De orina en un tubo y centrifugar a 2500 rpm x 3` - Decantar y hacer un preparado hmedo del sedimento. - Resultado: - Leucocitos: > 5 10/c (piuria significativa) - Bacterias: Escasas, moderadas y abundantes - Celulas epiteliales, hematies, cilindros, cristales, etc.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.Prueba de Griess:

- Colocar tira reactiva en la orina - Resultados: Determina enzimas reductoras de Nitratos y esterasa leucocitaria, pH, proteinas, etc.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.II. DIAGNOSTICO DEFINITIVO: CULTIVO DE ORINA UROCULTIVO. A. Aislamiento usar asa calibrada de 1, 10, y 100 ul., cargar con la muestra e inocular al medio de cultivo

Incubar a 35 37 C x 18 24 hrs.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.Medios de cultivo: - Gram negativos: Agar Mac Conkey, Chromocult, EMB. - Gram positivos, Gram negativos: Agar tripticasa soya (TSA), Agar sangre - Otros medios de cultivo: A. sabouraud, ogawa

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.B. Lectura - Resultados:

1. Recuento de colonias = UFC/ml de orina = n de colonias totales x factor (10, 100, 1000)

Ejemplo: Recuento=103 col. X 1000 =103,000 UFC/ml orina.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.CRITERIOS DE INTERPRETACION DE UN RECUENTO EN UROCULTIVOS:CHORRO MEDIO:Urocultivo negativo:100,000 UFC/ml orina

PUNCION SUPRAPUBICA:Cualquier nmero es importante.

CATETERIZACION VESICAL:- Recuentos mayores de 100 UFC/ml de orina se consideran positivos

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.2. Identificacin del microorganismo aislado agente etiolgico. - Macromorfologa - Micromorfologa - Identificacin bioqumica

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.3. Pruebas de sensibilidad a los antibiticos: Determinar si agente etiolgico de la ITU es sensible, moderadamente sensible o resistente a las diferentes drogas.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.INTEGRACION DE LOS RESULTADOS:Dx. Presuntivo: Ex. Directo.Dx. Definitivo: Urocultivo: - Recuento de colonias - Agente etiolgico de la ITU - Sensibilidad o antibiograma

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. COPROCULTIVO.I. DX. PRESUNTIVO: No es relevante (Vibrio cholerae)II. DX. DEFINITIVO: Transporte (cary blair) A. Enriquecimiento de la muestra: - Caldo selenito - Agua peptonada alcalina - Caldo tetrationato inocular e incubar 35 37C x 6 12 hrs.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. COPROCULTIVO.B. Aislamiento: Sembrar por estria y agotamiento. - Mac Conkey - EMB - SS - TCBS, etc. incubar 35 -37C x 18 24 hrs.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ENTEROBACTERIAS. COPROCULTIVO.C. Identificacion: 1. Macromorfologa 2. Micromorfologa 3. Est. Bioqumico metablico 4. SerologaD. Antibiograma.