Cinética Enzimática

Las funciones de las proteínas son específicas de cada tipo de proteína y permiten a las células defenderse de agentes externos, mantener su integridad, controlar y regular funciones, reparar daños… Todos los tipos de proteínas realizan su función de la misma forma: Por unión específica de otra molécula o ión (ligando o ligante)

Funciones de las Proteínas

De la unión se derivan:

Formación de estructuras celulares (Proteínas fibrosas)

Transporte y almacenamiento

Reactividad específica (catálisis)

Cambios conformacionales (alosterismo, motores moleculares, transmisión y transducción de señales)

• Las enzimas son catalizadores biológicos que disminuyen la energía de activación de las reacciones que catalizan, pero no modifican la constante de

equilibrio.

• Por tanto aceleran en igual proporción la velocidad de la reacción en las dos direcciones.

Enzimas

Reacciones catalizadas por enzimas

Reversible

Irreversible simplificada

Curva de Evolución de los componentes de la reacción

Maud Menten (izq) Leonor Michaelis (der)

Variables de la ecuación de velocidad

Variable dependiente: velocidad inicial

Variables independientes:

A) Concentración de enzima B) Concentración sustrato

Michaelis-Menten

!  Velocidad inicial

!  No añadir producto al medio de ensayo

!  Concentraciones de sustrato muy superior a la concentración de la enzima

La concentración de sustrato debe permanecer “casi” constante durante el periodo de tiempo en que se mide la

reacción

Representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten

Menten

Paramétros cinéticos

!  Son las constantes que aparecen en la ecuaciones de velocidad

!  Están compuestos por las constantes de velocidad de los pasos que constituyen la reacción catalizada

Unidades

Velocidad máxima

Constante catlítica (kcat)

Constante de Michaelis-Menten (Km)

Constante de especificidad

!   Concentración de sustrato o sustratos (cofactores)

!   Concentración de enzima

!   Inhibidores

!   Activadores

!   pH

!   Temperatura

Factores que afectan la velocidad

Determinación de los parámetros cinéticos

union a la enzima de ligandos que no son sustratos