Alumna: Javiera Inostroza Z.Fecha: 24 Agosto 2012

Universidad de ChileTecnología Médica

Introducción

• Estudio por microscopia directa: método rápido y rentable

• Orienta sobre la selección del medio de cultivo más adecuado u otros exámenes complementarios.

• Ayuda a interpretar la relevancia del cultivo.• Sensibilidad menor a cultivos

¿Hialohifomicosis o Aspergilosis?

Aspergillus sp

Introducción

• Estudio por microscopia directa: método rápido y rentable

• Orienta sobre la selección del medio de cultivo más adecuado u otros exámenes complementarios.

• Ayuda a interpretar la relevancia del cultivo.• Sensibilidad menor a cultivos

Muestra: Biopsia

• Etapas:• Observación macroscópica.• Fijación.• Selección de zonas de estudio.• Deshidratación.• Inclusión.• Realización de cortes.• Hidratación.• Tinción.• Examen microscopico.

Tinciones

• Hematoxilina-eosina• Gomori-Grocott• Ácido peryódico de Schiff(PAS)• Fontana-Masson• Mucicarmina• *Giemsa• * Gram

Giemsa

• Fundamento: afinidad que demuestran las células y sus componentes a los distintos colorantes incluidos en el colorante de Giemsa

Giemsa

• Muestras:• Frotis sanguíneos• Muestras

respiratorias

Gram

• Fundamento.• Cristal violeta.• Lugol

(complejo)• Alcohol-acetona• Colorante de

contraste (safranina)

Gram

• La mayoría de los hongos son gramnegativos

• * Cryptococcus neoformans

Hematoxilina-eosina

• Fundamento:• Eosina: ácido,

basófilo (rosado)• Hematoxilina:

catiónico unión a aniones (azul)

•Zigomicosis. H-E (hifas anchas no septadas, con membrana más basófila, polisacaridos son negativos)

• Tiñe mayoría de los hongos

Zona necrótica en cuyo seno se observa un crecimiento micótico formado por Aspergillus (H.E. Neg. X 100)

Formación de granulomas en infección micótica (H.E., Neg x20)

Hematoxilina-eosina

•Estudio de la respuesta tisular

Hematoxilina-eosina

• Se tiñen bien:• Aspergillus spp• Zigomicetos• Blastoconidios• Pseudohifas de

Candida.

Aspergilosis pulmonar invasiva

crecimiento invasor del hongo con infiltración del

parénquima pulmonar y de los vasos sanguíneos

Cryptococcus en hilio pulmonar

Hematoxilina-eosina

• Caracterización de hongos pigmentados

• Fundamento:• Ácido crómico: oxidación

grupos OH de polisacáridos de pared celular.

• Aldehidos reducen complejo nitrato-plata-metanamina color café-negro.

• Verde brillante

Zigomicosis, GMS

Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata) 

Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)

• Utilidad:• Aspergilosis• Zigomicosis• Candidiasis• Criptococosis

Mucorales (Rhizopus)

Biopsia pulmonar, disposición característica de las hifas de Aspergillus en el parénquima pulmonar.

Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)

Tinción de Gomori-Grocott (Metenamina de plata)

Abundantes conidios (esporas) de forma oval o periforme de base plana (Grocott).

Cryptococcus

Ácido peryódico de Schiff (PAS)Fundamento:

• Ácido peryódico rompe la unión entre carbonos con hidroxilos adyacentes,

• Formación de grupos aldehído.

• Reactivo de Schiff reacciona con los aldehídos para dar un color rojo púrpura intenso.

Zigomiceto

Ácido peryódico de Schiff(PAS)

Vaso colonizado por hifas y esporas de morfología típica de Scedosporium spp (PAS).

esporas

Cryptococcus en miocardio (SIDA)

Ácido peryódico de Schiff(PAS)

Histoplasmosis, intracelular

Fontana-Masson

• Fundamento:melanina reduce el nitrato de plata que se precipita sobre los gránulos del pigmento dando una coloración negra.

• Hongos dematiáceosBipolaris spicifera in lung tissue (Fontana-Masson stain; magnification ×100).

Fontana-Masson

Cladosporium

Mucicarmina

• Fundamento: tiñe glucoproteínas.

• Cryptococcus sp.

Las mucinas o mucoproteínas son

proteínas con H.C. en una proporción superior al 4 %.

La técnica del mucicarmín de Mayer sirve para identificar globalmente las mucinas,

pero no reconoce su naturaleza bioquímica.

Criptocococis miocárdica

Mucicarmina

Mucicarmina

Riñón. Nefritis criptococócica.Mucicarmín.