armado hongos

7/26/2019 armado hongos

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Candida albicans


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Ttulo: Morfologa microscpica a partir de un cultivo de Candida spp. Gram, 100Descripcin: Blastoconidias de diferente tamao, redondeadas u ovaladas, de pared delgada, de 4-6 m

dimetro,


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_Ttulo: Morfologa microscpica a partir de un cultivo de Candida albicans. Azul de lactofenol, 40x__Descripcin: Blastoconidias de diferente tamao, redondeadas, de pared delgada, gemantes, con seudohifay/o__hifas.


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Ttulo: Morfologa microscpica a partir de un cultivo de Candida albicans. Gram, 40x__Descripcin: Blastoconidias de diferente tamao, redondeadas, de pared delgada, gemantes, con hifay/oseudohifas.


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Ttulo: Formacin de Clamidoconidias en bilis de buey. Azul de lactofenol, 40x__Descripcin:Clamidoconidias terminales e intercalares.


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Ttulo: Formacin de Clamidoconidias en Corn Meal Agar. Azul de lactofenol, 40x__Descripcin:Clamidoconidias terminales.


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_Ttulo: Formacin de Clamidoconidias Negativas. Azul de lactofenol, 40x.


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Blastoconidias de Cryptococcus spp.

Gram, 40x.


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Cryptococcus spp


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Descripcin: Blastoconidias de 5 a 10 m, congemas de la mitad del tamao, la cpsula no seobserva.


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Ttulo: Examen directo Criptococosis. Tinta china, 40x.Descripcin: Blastoconidias redondeadas u ovaladas, de 4-6 m de dimetro, congemacin nica, inclusiones citoplasmticas, pared gruesa y refringentes, con un halocapsular.


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Ttulo: Examen directo Criptococosis a partir de Hemocultivo. Gram. 100xDescripcin: Blastoconidias redondeadas u ovaladas, Gram variables.


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Candida spp


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Ttulo: Examen directo Candidiasis (orina). Fresco. 40x.Descripcin: Blastoconidias ovaladas o redondeadas de diferente tamao, sin seudohifas ehifas.


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Ttulo: Examen directo Candidiasis (orina). Fresco. 40x.Descripcin: Blastoconidias ovaladas o redondeadas de diferente tamao, con seudohifas y/ohifas.


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Ttulo: Examen directo Candidiasis (orina). Fresco. 40x.Descripcin: Blastoconidias ovaladas o redondeadas, + hifas.


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Ttulo: Examen directo Candidiasis (orina). Gram. 100x.Descripcin: Blastoconidias con seudohifas e hifas.


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Ttulo:Cultivo de Candida guillermondiia partir de Hemocultivo. Agar Chocolate.Descripcin:Colonias planas, hmedas de color crema a amarillo.


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Ttulo:Cultivo de Candida tropicalis a partir de Hemocultivo.Agar Chocolate.Descripcin:Colonias de color crema, cremosas, brillantes con un borde levemente irregular.


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Ttulo:Cultivo de Candida albicansa partir de orina (siembra cuantitativa). Agar SabouraudDextrosa.Descripcin:17000 UFC/mL de Candida albicans.Colonias lisas, brillantes de colorblancooligeramente beige.


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Levadura de cerveza


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AB

C

Presencia de levaduras (A), pseudohifas (B) y clamidoconidios (C)


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Clamidoconidios

Pseudomicelio

Candida albicans

Punto de gemacin


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Que es una Levadura Emergente?

Son aquellas levaduras antes consideradas

inocuas a las que ahora se les atribuye lacapacidad de daar al cuerpo humano.

Ej. Saccharomyces cerevisiae( usadaampliamente en la industria)

Malassezia spp Trichosporon spp

Rhodotorula spp.
http://es.wikipedia.org/wiki/Imagen:S_cerevisiae_under_DIC_microscopy.jpg


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Generalidades de Malassezia spp.

Levadura lipoflica

Colonizante habitual de la piel

84% de la poblacin en edad escolar , 3% delos neonatos sanos y 50-80% de neonatosinternados en UCI est colonizado.


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Significancia Clnica

El cuadro clnico ms comn causado por

Malassezia spp. es Pitiriasis versicolor.

ltimamente se ha encontrado en cuadros dedermatitis seborreica, foliculitis, y sepsis

neonatal.


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Generalidades. Trichosporonspp.

Es una levadura que ha sido aislada desde:Suelo, muestras de agua, vegetales,mamferos y aves.

Es un miembro de la flora normal de la boca,piel, y uas.

La especie ms conocida es T. asahii.


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Significancia Clnica

Trichosporon spp. es el agente causante depiedra blanca, infecciones superficiales ytrichosporonosis invasivas.

Los pacientes que se encuentran en mayorriesgo de infecciones sistmicas son losinmunocomprometidos.


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Trichosporonosis invasiva

Cuando Trichosporon spp. Causa infeccionesinvasivas, estas son de progresin rpida,involucrando varios rganos y sistemas,incluyendo pulmones, riones y bazo.

Lesiones cutneas como manifestaciones deinfecciones diseminadas tambin han sidodescritas.


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Trichosporonosis invasiva

Trichosporon spp. ha sido aislado de pacientescon fungemia.

Puede infectar vlvulas protsicas, SNC,cornea y peritoneo.

Tambin es el causante de funguria benigna

en transplantados renales La trichosporonosis diseminada es muy rara

en pacientes inmunocompetentes.


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S. cerevisiaeen pacientesInmunodeprimidos.

Produce; neumona, endocarditis, abscesoshepticos, fungemias y sepsis, pero no conmucha frecuencia.

Ha sido aislada desde lesiones periodontalesde pacientes con VIH.


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Diagnstico. Saccharomycesspp.

o Caractersticas Macroscpicas:

o Las colonias crecenrpidamente y maduran en 3das.

o Son planas, suaves, hmedas,brillantes u opacas, colorcrema.

o La imposibilidad de usarnitrato y la capacidad defermentar carbohidratos soncaractersticas tpicas.


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Agente causal de vaginitis y de balanitisen sus parejas.

Vaginitis por Saccharomyces cerevisiae

En un caso pudo demostrarse que la cepa causal de un episodio de vaginitis era lamismaque se obtenia de los dedos del esposode la paciente y de la levadura con queelaboraba pizza en un establecimiento de su propiedad.

Wilson et al.Bread making as a source of vaginal infection with Saccharomyces cerevisiae. Report of a case in a woman and apparent transmission topartner. Sex Transm Dis 1988.

Nyirjesy et al : Saccharomyces cerevisiaevaginitis : Transmission from yeast used in baking Obstet Gynecol 1995.

Garcia -Martos et al : Saccharomyces cerevisiaevaginitis Enfer Infecc Microbiol Clin 1996

Posteraro et al: Molecular and epidemiological characterization of vaginal Saccharomyces cerevisiaeJCM 1999.

S cerevisiae: levadura ascosporada .

Elaboracin de: vino ,cerveza y pan

Saccharomyces


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Rhodotorula spp.

Especies: R.minuta, R.glutinis y R. mucilagenosa. Rhodotorulaha sido aislada como agente causal d

micosis oportunistas.

Casos de meningitis, endocarditis, ventriculitis,peritonitis, endoftalmitis, infeccin de catter

venoso central, fungemia y sepsis, han sidoreportados.


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Rhodotorulaspp.

Caractersticas Macroscpicas:

Las colonias crecen rpido, son suaves, brillantes uopacas, mucosas.

Son de color rosado cremoso y/o rojo anaranjado.

No fermenta azcares y produce ureasa.


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Rhodotorula spp.

Caractersticas Microscpicas:

Blastoconidios globosos y elongados.

Pseudohifas e hifas aseptadas y rudimentarias.


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1.- Tubo germinativo

2- Tubo germinativo

Medios cromgenos

3.- Medios cromgenos : Chromagar, Candida ID

Sistemas manuales: Galerias API: 20C- 32 C

Sistemas automatizados: Vitek,Microscan

Qu tenemos actualmente?


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Identificacin Candida

Produccin de clamidoconidios

Agar papa zanahoria

Agar harina de maiz- Tween 80

Agar harina arroz- Tween 80

4.- Microcultivo( Dalmau, 1929 ) Estudio micromorfolgico de las levaduras


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LEVADURAS

EMERGENTES

TM Alejandra Soto Labra

Tecnologa Mdica

UNIVERSIDAD DE CONCEPCION

FACULTAD DE MEDICINA

CARRERA TECNOLOGIA MEDICA


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Seccin I Aspectos generales24

En los hongos mucedinceos, las hifas son incoloras ohialinas, y en los hongos negros dematiceos o feoides,son de color oscuro por la presencia de pigmentos de tipomelanina (figura 3-16; figuras 2-1 y 2-2). Estos pigmentos

p ejos que con eren to erancia contra estrs am-biental y contra oxidantes antimicrobianos que se producen

durante la defensa del husped.Las paredes fngicas estn formadas por diferentescapas: polisacridos, como glucanos (polmeros de glucosa),mananos (polmeros de manosa) y polmeros de glucosami-na; protenas (algunas de las cuales son permeasas); lpidos(el ergosterol es un esterol esencial); componentes brila-res, como la quitina y, casi nunca, celulosa.

En el pice de las hifas existen vesculas que forman uncomplejo interno de membrana y contienen enzimas quesintetizan a pare o que a esintegran; tam in ay part-culas denominadas quitosomas, cuya funcin no se conoceen de nitiva.

Necesidades fisiolgicas

Los ongos e en encontrar en os me ios e cu tivo onecesario para su crecimiento y desarrollo: ) materiasnitrogenadas como peptona; b) azcares como glucosa omaltosa, que son indispensables; c) un soporte slido, comola gelosa, que permite a los hongos lamentosos desarrollarmice io areo con rganos e ructi cacin, y ) un pH ci-do, ya que es ms conveniente (5 a 6.5). El medio glucosadoo maltosado de Sabouraud rene estas caractersticas.

A n de obtener la esporulacin sexuada o asexuada espreferible utilizar medios naturales gelosados como papa-

zana oria o extracto e ma ta.Muchos hongos necesitan vitaminas; stas se encuentran

en las impurezas de la peptona y del azcar; en ocasiones, con-

Figura 3-16. Aureo asi iumsp., hifas y clamidosporas oscuras40 ).

viene emp ear me ios enriqueci os con vitaminas espec .La fermentacin de azcares es una caracterstica de impor-ancia para diferenciar las levaduras; tambin es conveniente

el mtodo de utilizacin de azcares y materias nitrogenadasen anaerobiosis; esto tambin puede usarse en algunos hon-os amentosos. gunos e ementos, como e co re, manga-

neso, hierro y cinc se han identifi cado como estimulantes decrecimiento; sin embargo, stos mismos pueden inhibirlo si seencuentran en exceso en los medios de cultivo.

La forma de levadura de los hongos fi lamentosos seobtiene en medios con sangre o huevo. De acuerdo con losrangos e temperatura a a que se esarro an as i erentesespecies de hongos, pueden dividirse en term los, queresisten hasta 55 C; mesfi los, que crecen dentro de unmargen trmico que va de 0 a 50 C, y psicrfi los, quecrecen mejor de 0 a 20 C. Los anemfi los son hongosam ienta es.

La temperatura ambiente de 20 a 30 C permite eldesa-rrollo de casi todos los hongos, en especial los

parsitos super ciales; para los parsitos de mucosas yrganos pro-fundos conviene ms que sea de 30 a 37 C.

La mayor parte necesita oxgeno y humedad relativapara vivir. gunos mo i can su meta o ismo a cam iara temperatura, por ejemplo, Fusarium sporotrichoides y

espe-cies de Cladosporium, Alternaria, Mucor yPenicillium a bajas temperaturas producen tricotecenos,causantes de aleu-cia txica alimentaria.

Reproduccin

Para conservar su capaci a e a aptacin, os ongosdeben reproducirse con facilidad. Las hifas se desarrollan a

partir de una espora por emisin de un tubo germinativo;a forma ms simple ocurre por crecimiento apical de lasifas no hay crecimiento intercalar, pero las clulas no ter-

minales pueden emitir rami caciones (figura 3-17)La reproduccin se lleva a cabo por medio de esporas y Los

Figura 3-17. Esquema del crecimiento apical. (Modi cada de Courssuperieur de mycologie mdicale. Pars. Institut Pasteur, 1980.)


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33Captulo 3 Hongos

Figura 3-30. Reproduccin asexuada por blastosporas. (Modificada de Cours superieur e myco ogie m ica e. Pars. Institut Pasteur,1980.)

Figura 3-31. S. sc enc ii, simpodulosporas.

Figura 3-32. Reproduccin asexuada por fialosporas. (Modificada

de Cours superieur de mycologie mdicale. Pars. Institut Pasteur,1980.)

Figura 3-33. Filides deenicilliumsp. y Aspergillussp.


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Parte VI Apndice

Cuadro 37-8 Inhibidores de la sntesis de pared fngica.

Antimictico Grupo qumicoPresentacin, dosisyva de administracin

Mecanismo deaccin Espectro Efectos colaterales

Caspofungina Neumocandina-B Viales de vidrio con54.6 mg o 75.6 mg decaspofunginaDosis de carga de70 mg y posteriormentedosis de mantenimientode 50 mg/daVa intravenosa

Inhibe la sntesis de la1,3--glucana (paredfngica), resultando eninestabilidad osmtica ymuerte del hongo

Fungicida para Candidaspp. y fungisttica para

Aspergillus spp. Moderadaactividad contra H.capsulatum,C. immitis, B.dermatitidis, P. jirovecii ydiversos dematiceos

Cefalea, fiebre, nusea,flebitis en el sitio deinfusin y elevacinreversible de las enzimashepticas

Micafungina Equinocandina Viales de vidrio con50 mg y 100 mg demicafunginaDosis estndar150 mg/da


Fungicida para Candidaspp. y fungisttica para

Aspergillus spp. Moderadaactividad contra P. jiroveciiy diversos hongosdimrficos

Nusea, vmito, cefalea,diarrea, flebitis en el sitiode infusin y leucopenia.Otros: vasodilatacin,edema facial, urticaria ymuy raro, anafilaxia

Anidulafungina Equinocandina Viales de vidrio con50 y 100 mg deanidulafunginaAdultos: dosis promedio50 mg/da

En candidosis esofgica:dosis de carga: 100 mg/da mantenimiento:50 mg/daCandidemia: dosis decarga: 200 mg/da ymantenimiento:100 mg/daNios: dosis de carga:1.5-3 mg/kg/da,mantenimiento:0.75-1.5 mg/da


Fungicida para Candidaspp. (cepas resistentescomo C. krusei, y C.lusitaniae) y fungistticaparaAspergillusspp.

Acta contra biofilmsdeespecies de Candida

Hipotensin, vmito,estreimiento, nusea,fiebre, hipopotasemiay elevacin de enzimashepticas

H

H

O O

OH

Me

OMe

OH

OHC

CO2H

Sordarina

N

O

Amorolfina

la D-7-8 isomerasa, lo que genera membranas defectuosas

con alteracin importante de la permeabilidad. Espectro e indicaciones. Acta frente a los principales der-

matofitos y cepas de Candida. Est indicada en tia de lospies, ingle, cuerpo y candidosis cutnea. La presentacinen laca se utiliza para onicomicosis blanca superficial osubungueal distal (no mayor al 50% de la ua) o como tra-tamiento concomitante al sistmico.

Presentacin. Crema al 0.5% y laca al 5 por ciento. Dosificacin. Para la crema: 1 o 2 aplicaciones diarias por

15 a 30 das. Para la laca se recomiendan dos aplicacionessemanales durante 6 a 8 meses.

Contraindicaciones. Hipersensibilidad al frmaco. No serecomienda su uso en nios.

Efectos colaterales. Pueden presentarse algunas dermatitispor contacto.

Interacciones medicamentosas. No se han reportado.

Aspergillus y Scedosporium apiospermum. Son antifngicos

que an continan en desarrollo.

Grupo miscelneoEn este grupo se incluyen una serie de frmacos de diferentesorgenes, desde antibiticos naturales, productos sintticos ysales con actividad antifngica.

Amorolfina Molcula. Morfolina (derivado desmetilado), de origen

sinttico. Mecanismo de accin. Fungisttico y a altas concentracio-

nes, fungicida. Acta a nivel de la sntesis del ergosterol;interfiere especficamente en dos pasos: D-14 reductasa y


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Apndice

Parte

VI

A lo largo de este texto se ha revisado la enorme variedad deenfermedades tanto superficiales como sistmicas causadaspor diversos hongos patgenos primarios y oportunistas, suscaractersticas clnicas y algunas condiciones particulares delos agentes etiolgicos y del hospedero en cada caso. Para eltratamiento ptimo de estas enfermedades es indispensablecontar con opciones teraputicas lo ms adecuadas en cada

situacin; en esa bsqueda del antimictico ideal, hay unagran cantidad de frmacos; algunos han pasado la prueba deltiempo y, pese a ser viejos en el mercado, continan siendoeficaces, de fcil aplicacin e incluso de bajo costo, resultan-do tiles en determinadas enfermedades, por ejemplo, algu-nas frmulas magistrales como los simples toques con solu-cin yodada o la frmula de Whitfield para casos de micosissuperficiales, mientras que otros como la anfotericina B, pesea su elevada toxicidad, permanece como frmaco de primeraeleccin en determinadas micosis sistmicas que ponen enriesgo la vida, y como estndar de oro contra el que se com-paran los nuevos frmacos.

De esta forma, se contina en la bsqueda de nuevosmedicamentos que cumplan en la mayor medida las expec-tativas del antimictico ideal: un amplio espectro y eficaciaclnica, bajas tasas de resistencia, menos efectos adversos einteracciones medicamentosas; disponibilidad en el mercadoy un costo accesible.

En este captulo se hace una revisin de los aspectos gene-rales y prcticos de los antimicticos de uso comn y aquellosde reciente aparicin; finalmente se describen las caractersticasde los frmacos en desarrollo y las expectativas a futuro.

Los antimicticos, llamados tambin antifngicos, sonuna serie de medicamentos que tienen diversas acciones frente

a los hongos productores de micosis superficiales, subcutneasy profundas, tanto patgenos primarios como oportunistas. Aeste tipo de frmacos se les puede dividir de acuerdo con dife-rentes caractersticas: mecanismo de accin, composicin qu-mica, espectro de accin, tipo de micosis contra la que actanetc. La figura 37-1 presenta de manera general el nivel celularen que actan. En este captulo se dividirn de acuerdo con su

mecanismo de accin; en el cuadro 37-1 se presentan los tiposde antimicticos y grupo qumico al que pertenecen.

Inhibidores de la sntesisde ergosterol (membrana fngica)Se dividen en los siguientes grupos:

Derivados azlicos

Los derivados azlicos se dividen en dos tipos: imidazlicosy triazlicos. Son antimicticos sintticos de amplio espectro ytienen propiedades farmacolgicas muy variadas; algunos pre-sentan actividad antibacteriana contra grampositivos, algunosgramnegativos y anaerobios, as como accin antiparasitariacontra protozoarios y helmintos, por ejemplo, metronidazol ymebendazol, respectivamente; algunos otros son inmunopo-tenciadores como el levamisol; sin embargo, la atencin aquse centra en aquellos que actan contra hongos filamentososy levaduras.

En general, el grupo imidazol incluye medicamentos deuso tpico, con excepcin del miconazol, que se utiliz porva intravenosa, y el ketoconazol; ambos son los nicos que

Cap

tulo

37 AntimicticosDenisse Vzquez-Gonzlez


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Parte VI Apndice

Cuadro 37-1 Tipos de antimicticos y grupos de qumicos a los que pertenecen.

Tipo de antimictico Grupos y ejemplos

1. Inhibidores de la sntesis del ergosterol(membrana fngica)

Imidazlicos:bifonazol, ketoconazol, miconazol, isoconazol, etctera. Triazlicos: fluconazol, itraconazol, voriconazol, posaconazol, etctera. Alilaminas: naftifina, terbinafina Bencilaminas: butenafina

2. Desestabilizadores de membrana fngica(derivados polinicos)

Anfotericina B desoxicolato Anfotericina B lipdica Anfotericina B liposomal Anfotericina B de dispersin coloidal Nistatina Pimaricina (natamicina)

3. Inhibidores de la sntesis de cidos nucleicos 5-fluorocitosina

4. Inhibidores de la mitosis fngica Griseofulvina

5. Inhibidores de la sntesis de protenas Sordarinas

6. Inhibidores de la sntesis de pared celular fngica Equinocandinas y neumocandinas: micafungina, anidulafungina y caspofungina Nikkomicinas

7. Grupo miscelneo AmorolfinaCiclopiroxolamina Derivados tiocarbamatos: tolnaftato y tolciclato

Figura 37-1 Mecanismo de accin de los antimicticos (tomada y modificada de Bonifaz, Hernndez y Ponce, 2008).

Ergosterol

14--desmetilasa

Lanosterol ErgosterolSORDARINASSntesis deprotenasFactor deelongacin

ALILAMINASBloquean la formacin deergosterol en la membranacelular por inhibicin delescualeno

GRISEOFULVINABloquea los microtbulos

intracelulares

POLIENOSSe unen a lasmembranas celularesy las rompen

EQUINOCANDINASInhiben 1,3--glucanosde la pared celular

AZOLESBloquean la formacin de ergosterol en la

membrana celular por inhibicin de la 14--desmetilasa dependiente del citocromo p450

FLUOROCITOSINAIngresa activamente vapermeasa y bloquea lasntesis de DNA/RNA


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Captu

lo

Levaduras6Introduccin

Cuando se clasifican los hongos microscpicos de maneraemprica es cil distinguir dos grupos: los hongos filamen-tosos y las levaduras. Desde el punto de vista macroscpico,

los primeros tienen un crecimiento mohoso porque ormanmicelio, mientras que las levaduras tienen un crecimientocremoso o bacteriorme, es decir, muchas colonias no pue-den distinguirse a simple vista de las bacterias. Al grupo delevaduras se les puede denominar correctamente Blastomy-cetes; lo cual no implica una taxonoma sino una agrupacinmorolgica. Se trata de un grupo que parece homogneo,pero que est conormado por muchos microorganismos he-terogneos; por eso vale la pena reunirlos y estudiarlos comouna entidad, si bien es cierto que en uncin de los objeti-vos de esta obra son ms relevantes las levaduras patgenasy oportunistas de hecho, cada una de ellas ser tratada en

la seccin correspondiente a su padecimiento, por ejemplo,candidosis, criptococosis, etc.; tambin se mencionan aque-llas que tienen un inters general, por su aplicacin industrial,de contaminacin, alimentaria, entre otras.

Antecedentes histricos

El nombre de levadura (en ingls yeast), proviene de unvocablo muy antiguo de esta lengua que originalmente uegist ogysty significa espuma o burbuja, quiz como pro-ducto final de la ermentacin. Fue sin lugar a dudas Saccha-romyces cerevisiae la que dio origen a su nombre debido a

su ubicuidad y por participar en muchos procesos. Las le-vaduras han sido los primeros microorganismos domesti-cados por el humano para su provecho; existen registrospictricos de su utilidad desde hace 6 000 aos en la culturaegipcia en la produccin de pan y de cerveza; su descubri-miento quiz ue accidental al ocurrir contaminacin de lamasa del pan, lo que produjo un material esponjoso mscil de digerir y, en el caso de las bebidas alcohlicas, ueel propio proceso de ermentacin el que dio origen a unsinnmero de bebidas.Imagen 6-1 Colonias cremosas levaduriformes de Candida krusei.

Imagen 6-2 Colonias cremosas negras de Hortaea werneckii.


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80 Parte I Introduccin y generalidades

El primer registro cientfico de las levaduras tuvo lugaren 1680 tras la invencin del microscopio por Leeuwenhoek,quien las observ y describi como cuerpos globulares; sinembargo, nunca las consider como organismos vivos. En1825, Mitscherlick y su equipo ueron los primeros en de-mostrar que las levaduras eran parte del proceso de abrica-

cin de la cerveza y el vino. Schwann, en 1839, identific lagemacin y ormacin de endosporas como parte undamen-tal en su reproduccin. El siguiente salto cronolgico llevahasta 1857 y 1863 cuando Pasteur considerado como elpadre de la enologa proporcion, gracias a sus primerosestudios, aportaciones significativas en los procesos de er-mentacin del vino; al descubrir cepas nicas como las me-jores procesadoras de una ermentacin limpia y del llamadoeecto Pasteur, este cientfico dio las bases para establecerque el proceso de abricacin del vino debe ser anaerbico,mientras que si se incorporan pequeas cantidades de oxge-no, ste se acidifica y permite el desarrollo de bacterias comoAcetobactersp. (con lo que se produce el vinagre).

El desarrollo de la panadera moderna tuvo un notableimpulso a partir de 1876 cuando Fleishmann, en Filadelfia,obtuvo gran cantidad de levaduras que posteriormente sec,sin que perdieran su viabilidad; as cre el mtodo de con-servacin que en la actualidad an se emplea; esto permiteel almacenamiento de los microorganismos y mantiene suscaractersticas por largos periodos.

En el rea mdica son las levaduras del gnero Candidalas que primero tuvieron una relacin con un padecimiento;es as como la candidosis es una de las enermedades mi-cticas que se conocen desde la antigedad; Hipcrates, ensu obra Epidemics, describi que en nios recin nacidos, y

en pacientes debilitados, se presentaban placas blanquecinasen la boca, a lo que denomin estomatitis afosa, lo quecorresponda a una candidosis oral. La segunda levaduradescubierta con importancia mdica ue Cryptococcus neo-formans, la cual ue aislada por primera vez en Italia a partirdel jugo de durazno en el ao de 1894 por Sanelice, quien ladescribi como una levadura capsulada que denomin Sac-charomyces neoformans; esta cepa ue utilizada para inducirde orma experimental dierentes lesiones en animales de la-boratorio. En ese mismo ao, en Alemania, Busee y Buschkereportaron el aislamiento del mismo hongo de una lesinsarcomatosa, lo cual se considera como el primer reporte

de criptococosis.Finalmente, las primeras obras sistemticas del estudio

de las levaduras se deben a dos investigadores: Guillier-mond a inicios del siglo y Lodder en el decenio de 1970-1979.

Caractersticas generales

Las levaduras son microorganismos que pueden vivir endiversos hbitat y con mltiples uentes de energa; sin em-

bargo, los carbohidratos son los ms importantes; incluso elnombre de la levadura ms conocida, Saccharomyces, provie-ne del trmino Saccharon, que significa azcar y es a partirde ste como en orma general se pueden presentar dos e-nmenos: la produccin de alcohol, para la elaboracin decerveza y vino; o bien la ormacin del anhdrido carbnico

(CO2), durante la abricacin del pan.

Morfologa y fisiologa

Desde el punto de vista estructural, las levaduras son enti-dades microbiolgicas independientes, por lo general uni-celulares, con membrana y pared celular, esta ltima casisiempre conormada por quitina; su citoplasma contienevacuolas y el ncleo; este ltimo suele ser pequeo y en oca-siones se conunde con las vacuolas. La pluricelularidad sepresenta cuando la levadura orma estructuras elaboradascomo seudomicelio (unin de varias clulas); por ejemplo,Candida albicanso casos excepcionales de multigemacin,

como sucede con hongos como Paracoccidioides brasiliensisy Trigonopsis sp. Tomando como base su orma, las levaduraspueden ser: globosas, ovoides, elongadas, rectangulares, ci-lndricas, triangulares, etc. Su tamao vara en general entre3-6 m, pero hay casos extremos; por ejemplo, Histoplasmacapsulatumpresenta levaduras intracelulares que miden de1-3 m, mientras que las de Blastomyces dermatitidis vande 8-10 m; existen algunos gneros que pueden medir hasta40 m. La mayora de levaduras son mesfilas, con tempe-ratura de crecimiento entre 20-48C, con un promedio de30-37C; sin embargo, slo 2% puede crecer con un rangoms amplio (entre 0-50C), pero sobre todo debajo de los

20C y cercanos a 0C. Algunos ejemplos de levaduras cri-filas son Yarrowia lipolytica y Pichia membranaefaciens, entanto que Kluyveromyces maximuses una termfila (48C).

En general las levaduras se desarrollan en medios neu-tros y ligeramente cidos; su rango ptimo de pH es entre4.5-6.5 debido a que por su metabolismo llegan a acidificarms su entorno; de orma excepcional crecen en medios b-sicos (aunque no mayor a 8), pero hay ejemplos de levadurascomo C. albicans, que tiene dos genes de activacin en am-bos tipos de pH. La mayora de los gneros son aerbicos,salvo aquellos que llevan a cabo procesos de ermentacin,los cuales son anaerbicos o anaerobios acultativos; es de-cir, las levaduras ermentadoras detienen su crecimientoy multiplicacin por la misma alta de oxgeno. Su uentebsica de alimentacin son los carbohidratos simples, comoglucosa y ructosa, o disacridos como sacarosa y maltosa; ladegradacin de disacridos los clasifica dentro del grupo decomplejo zimasa, es decir, que tienen la capacidad de rag-mentar azcares ms complejos. Sus principales aislamien-tos son en uentes naturales de rutas y bayas, pero se aslande diversas uentes como hojas, ores, piel, cuero, plumas ytracto digestivo de diversos animales, incluyendo el hombre.Algunas especies pueden crecer en altas concentraciones de


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Captulo 6 Levaduras 81

azcar y de sal, siendo ms adaptadas al primer sustrato queal segundo.

Existen diversos hongos que presentan una caracters-tica de particular inters tanto biolgico como clnico: edimorfismo ngico, en el cual un hongo puede pasar de laorma micelial a la levaduriorme, dependiendo de dos con-

diciones: temperatura y nutrientes. Este enmeno se obser-va en algunos hongos patgenos de importancia clnica, endonde su orma de levadura se presenta por lo regular al estarparasitando; los ejemplos ms caractersticos son: complejoSporothrix schenckii, Histoplasma capsulatum, Blastomycesdermatitidis, Paracoccidioides brasiliensisyPenicillium mar-neffei. Es importante resaltar que el estado levaduriorme seconsidera el ms simple o reducido desde el punto de vistamorolgico, por lo que ste es el que se presenta en los teji-dos del hospedero. Aunque de todos los hongos que se hanejemplificado se obtienen colonias levaduriormes en mediosricos a 37C, no se consideran estrictamente levaduras, sinoque se trata de hongos filamentosos que tienen esta capaci-dad de transormacin, la cual se considera un actor de vi-rulencia importante.

Otro grupo de hongos presentan un tipo de dimorfismoinverso, lo que significa que al inectar o parasitar presen-tan la orma de micelio y seudomicelo; el ejemplo caracte-rstico son las diversas especies de Candida, que son capacesde ormar ambas estructuras; las especies que ms lo hacenson: C. albicans, C. dubliniensis y C. tropicalis, entre otrasuna marcada excepcin a esta especie patgena oportunistaes Candida glabrata, la cual no lo produce en estado sapro-tico ni parasitario; por esta razn, por muchos aos quedclasificada dentro de otros gneros como Torula y Torulopsis

sin embargo, gracias a la biologa molecular, se le ubica filo-genticamente en el gnero Candida, muy cercano a Saccharomyces, que tampoco tiene esta capacidad.

Imagen 6-3 Blastoconidios simples de Rhodotorula mucilaginosa(PAS, 100X).

Imagen 6-4 A Colonia de Candida tropicalis. B Blastoconidios ymtiples seudohifas (PAS, 40X).

Imagen 6-5 Blastoconidios mltiples deParacoccidioides brasiliensis.(Cortesa: Robledo MA, Medelln, Colombia.) (Grocot, 100X.)

A

B


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Otras levaduras que dan ases filamentosas al parasitarson Malassezia spp., en especial M. globosa, M. furfur, M.sympodialisy M. restricta. Es importante subrayar que estasespecies pueden ser causantes, entre otras cosas, de pitiriasisversicolor, en donde la orma parasitaria es una combinacinde cmulos de blastoconidios ms filamentos cortos y lar-gos y se considera que a mayor cantidad de stos, el hongoes ms virulento. La orma parasitaria de Cryptococcus neo-formans es de blastoconidios capsulados; sin embargo, en unporcentaje bajo, puede ormar seudomicelio, que tambin escapsulado. Algunas especies de Rhodotorula, como R. muci-laginosa, orman seudomicelio rudimentario.

Los gneros de Geotrichum yTrichosporonson microor-ganismos que se consideran de transicin entre levaduras ymohos; por ello ambos pueden presentar ormas anamrficas

Imagen 6-6 Dimorfismo de Blastomyces dermatitidis. Afase filamentosa a 25C (microconidios). Bfase levaduriforme a 37C (blastoconidiosy residuo de hifas) (azul de algodn, 40 y 100X).

de blastoconidios y artroconidios. Algunas especies de am-bos gneros dan hias al parasitar, a veces acompaadas desus ases anamrficas.

Formas de reproduccinLas levaduras presentan dos ormas de reproduccin: asexua-da o anamrfica y sexuada o teleomrfica. Las llamadas le-vaduras verdaderas pueden reproducirse mediante ambasormas, en su mayora a travs de la orma teleomrfica porascosporas y en algunos casos por basidiosporas; mientras queaquellas levaduras que slo presentan ase anamrfica son lla-madas clulas levaduriormes (del inglsyeast-like) y se re-producen principalmente por gemaciones o blastoconidios yexcepcionalmente mediante fisin transversal o binaria.

A A

B B


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Imagen 6-7 Blastoconidio monogemante de Blastomycesdermati-tidis(PAS, 100X).

Reproduccin asexuada o anamrfica

La ormacin de un blastoconidio se presenta cuando la clulamadre o base inicia con un alargamiento, el protoplasma em-puja la pared hasta el inicio de la gema, el ncleo se divide yla pared se hace transversal; de esta manera, si las condiciones

son las adecuadas, la clula hija se separa por estrangulamien-to de la madre, hasta adquirir su independencia, maduracin yrepeticin del enmeno reproductivo. La mayora de gnerosde inters mdico se reproducen de esta manera, por ejemplo,Candida, Cryptococcus, Malasseziay levaduras como Saccha-romycesy Hansenula. En general, al iniciarse la ormacin denuevas clulas, stas son ms pequeas que la madre; sin em-bargo, en algunas ocasiones, prcticamente antes del despren-dimiento celular, la hija tiene el mismo tamao de la madre,como lo presenta Blastomyces dermatitidis(ase levaduriormeo parasitaria), o bien en otras como Paracoccidioides brasilien-sis, pueden ormarse muchas clulas al mismo tiempo, dandocomo resultado bigemaciones, trigemaciones y multigemacio-nes; ambos enmenos hacen caractersticos a estos hongos.

En situaciones adversas para el hongo, algunos gruposde levaduras pueden mantener a las clulas hijas sin que sedesprendan, hasta ormar lo que se conoce como seudomice-lio. La mayora de especies del gnero Candida lo producenal parasitar o al encontrarse en medios pobres en nutrientes.

La segunda orma de reproduccin asexual es la fisintransversal (binaria), tambin llamada biparticin o esquizo-gnesis, se lleva a cabo mediante la duplicacin y desplaza-miento del material gentico, con posterior ragmentacin dela clula, dando como resultado dos clulas de igual tamao.El ejemplo caracterstico de este enmeno es el del gnero

Schizosaccharomyces; las especies ms conocidas son: S. pom-be, S. octosporusy S. mellacei.

Reproduccin sexuada o teleomrfica

La reproduccin sexuada o teleomrfica de las levaduras selleva a cabo de dos maneras.

1. Medianteascoporas (del griegoaskos, saco o bolsa)Es la orma de reproduccin ms recuente de las leva-

duras verdaderas; se lleva a cabo por meiosis, o divisincelular que da origen a clulas haploides; en algunos ca-sos el proceso es seguido de una o ms divisiones mit-ticas. Las esporas se orman a partir de una bolsa, sacoo asca que produce un nmero determinado y caracte-rstico de ascosporas (casi siempre en pares); las ascasson cuerpos cerrados, por lo que quedan comprendidodentro del tipo de los ascocarpos. Algunos ejemplos deesta reproduccin son Saccharomyces, BrettanomycesHansenula, Kluyveromyces, Pichia y Yarrowia. La or-ma y tamao de las ascosporas es variable y depende decada especie, de modo que hay ormas globosas, ovoides

elongadas, en sombrero, satrnicas, etctera.Las levaduras ascosporadas pueden ser homotlicasy heterotlicas, siendo el primer grupo el ms recuenteno se requieren dos cepas dierentes, sino que el inter-cambio de material gentico se hace con la misma cepaLas diversas especies de Saccharomycesson homotlicasy un ejemplo de especie heterotlica es Hansenula wingei

2. La segunda orma es a travs de basidiosporas(del grie-go basidion, pequea base). Se orman a partir de le-vaduras haploides, llevando a cabo una usin celular yla ormacin de hias que se ensanchan en su extremohasta ormar una base o basidio; despus se hace la u-sin nuclear, acoplamiento y meiosis, y se obtiene como

resultado final la esporulacin de basidiosporas que seeliminan y dispersan. Cada una de las basidiosporaspuede tener dos rutas: ormar de nuevo una ase teleo-mrfica similar a la descrita, o bien, pasar a su ormaanamrfica o de blastoconidio capsulado para continuarcon su reproduccin anamrfica o de gemacin. Algu-nos ejemplos de gneros de levaduras basidiosporadasson Cryptococcusy Rhodotorula(cuadro 6-1).

Cuadro 6-1 Ejemplos de levaduras ascosporadas, basidiosporadas ymitospricas.

Levaduras

Gnero

Ascosporadas BasidiosporadasMitosp-

ricasBrettanomycesDipoascusyGalactomyces(anamorfo: Geotrichum)HansenulaKluyveromycesPichia

SaccharomycesYarrowia

Zygosaccharomyces

CryptococcusMalassezia*RhodotorulaTrichosporon**

Candida**

*Sin que se haya obtenido la fase sexuada, clasificacin por biologa molecular**La mayora mitospricas o asporgenas, algunas con formas ascosporadas


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Tipos de levadurasDe orma didctica es actible clasificar a las levaduras en dosgrandes rubros: 1) aquellas que son benficas o tiles paradiversos procesos industriales y armacolgicos y 2) levadu-ras patgenas. Considere algunos ejemplos sobresalientes deambos.

Levaduras benficas

Bebidas alcohlicas y produccin industrial

de etanolLas levaduras son los microorganismos responsables por ex-celencia del proceso de ermentacin, el cual consiste en ladegradacin de una uente de carbono, por lo general car-bohidratos, para la produccin final de etanol. Los diversosproductos etlicos consumibles a partir de este proceso son lacerveza, vino y destilados alcohlicos. Los dierentes tipos decerveza dependen del sustrato gramneo (trigo, cebada, mijo,etc.) y de la orma de ermentacin (baja o alta) la cual, a suvez, depende de la temperatura y determina la concentracinfinal de alcohol; as, las levaduras que ms se utilizan son S.cerevisiaey Saccharomyces pastorianus. Para algunos tipos decerveza como la belga, de mayor peso y densidad se usanlevaduras salvajes, en especial Brettanomyces bruxellensis (es-tado teleomoro: Dekkera bruxellensis). Las cervezas de razo suaves se obtienen por el mismo proceso y gracias a losmismos microorganismos, pero la ermentacin se detieneantes de producir una cantidad elevada de alcohol.

La produccin del vino de mesa tambin es realizada porS. cerevisiae; sin embargo, es importante la utilizacin de unasola cepa para obtener mejor calidad del producto. El desa-rrollo descontrolado de otras levaduras produce lo que se de-nominan averas del vino, y se deben a contaminacin delmismo por diversas especies de Zygosaccharomycesy Bretta-

nomyces. Para los destilados alcohlicos como el whisky, ron,sake, entre otros, es tambin S. cerevisiaeel principal ermen-tador del mosto de las dierentes uentes de granos y diversosproductos como cebada, trigo, maz, arroz y aguamiel. Otrasespecies que pueden participar pertenecen al mismo gnero,comoS. ellypsoideus y S. apiculatus.

Entre las levaduras especiales se cuentan Kluyveromycesfragilis y K. lactis, que llevan a cabo ermentacin alcohli-ca a partir de lactosa, por lo que utilizan sustratos lcteos;tambin se han usado para la extraccin y comercializacinde su enzima lactasa, que sirve para abricacin de leche yderivados lcteos deslactosados.

Por ltimo, la produccin industrial de etanol se realizagracias a diversas especies de Saccharomycesy otras levaduras apartir de dierentes uentes como caa de azcar, maz y otroscereales; el inicio del proceso puede hacerse mediante la rup-tura de los azcares por medio de cido sulrico o el empleode amilasas; con esta ermentacin se puede alcanzar una pro-duccin de alcohol de hasta 96%, que posteriormente se utilizacomo biocombustible. Hay algunas cepas que pueden degradarxilosa y materiales de desecho, como residuos de papel y car-tn, desechos de agricultura y de la madera; al producto final sele llama alcohol celulsico y es uno de los combustibles ms ba-ratos, que compite avorablemente con la gasolina del petrleo.

Produccin de pan

La elaboracin del pan es a base de harina de cualquier ce-real, sal y agua. Sin embargo, para que este alimento se hagaesponjoso y suave, es necesario realizar el proceso de ermen-tacin, mismo que es similar al de las bebidas alcohlicas, esdecir, se produce alcohol etlico, el cual se evapora por las al-tas temperaturas del horneado, y bixido de carbono (CO

2),

que hace que la masa aumente su volumen, con lo que le dejauna consistencia esponjosa y tierna. La principal levadurautilizada es, una vez ms, S. cerevisiae, aunque tambin seemplean otras especies como Saccharomyces exiguus y Can-dida milleri.

Suplementos alimenticios y probiticos

El comportamiento poliactico de S. cerevisiaela convierteen la levadura que ms se utiliza como suplemento alimenti-cio; integrada a algunos alimentos constituye una uente im-portante de protenas y vitaminas, en especial del complejo B(con excepcin de B12); por esta razn se le ha llamado tam-bin levadura alimenticia. Su utilizacin es muy variable yse puede encontrar como sustituto de quesos (sabor parme-sano), en adicin a palomitas de maz, suplemento y extractode diversos tipos de alimentos, en especial los de tipo vegeta-riano, incluso en la elaboracin de medios de cultivo como labase del extracto de levadura agar.

Hay ermentados especiales como la kombuchau hongochino, japons o del t; se trata de una bebida cida debida ala ermentacin de algunas bacterias (Bacterium xylinum,Gluconobacter oxydans) en combinacin con un grupo de

Imagen 6-8 Ascosporas de Saccharomyces cerevisiae (Kufferatt,100X).


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levaduras, como: Saccharomycodes ludwigii, Saccharomycescerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Pichia fermentans yZygosaccharomyces bailii. Toda esta mezcla de microorganis-mos viven en simbiosis; el trmino de kombuchaviene deljapons que significa hongo o alga del t y se le consideracomo hongo inmortal debido a que si esta mezcla recibe

alimentacin azucarada, puede crecer de manera indefinida.Es una bebida que ha recibido un sinnmero de propiedadesy caractersticas. Otro producto de ermentacin combinadacon bacterias es el kfir, llamado tambin yogurt de pajari-tos o blgaros, que es un producto lcteo ermentado; seorigin en el Cucaso y ahora se ha diundido por el mundo;la combinacin de microorganismos es Lactobacillus acido-philus ms Kluyveromyces marxianus (estado teleomoro deCandida kefyr).

Saccharomyces boulardiiy S. cerevisiaeson las dos leva-duras que se utilizan en humanos como probiticos; su un-cin bsica es la restauracin de la ora intestinal, en especialdespus de largos procesos de tratamiento antibacteriano oen pacientes inmunosuprimidos (leucemia o ineccin porVIH). Se sabe que acta evitando la ineccin por Clostri-dium diffi cile.

Procesos de biorremediacinGracias a su alta capacidad enzimtica, muchas levadurasparticipan en la biorremediacin natural o intencionada dediversos sustratos, una especie que tiene gran importanciapara esto es Yarrowia lipolytica(estado teleomoro de Candi-da lipolytica), la cual se utiliza para la produccin in vitrode

cido ctrico, pero su principal papel es en la lisis de mltiplessustratos contaminantes; por ejemplo, degrada derivados hi-drocarburos (alcanos), que son residuos del petrleo; variostipos de cidos grasos, en especial el cido palmtico; diver-sos productos de aguas residuales (euentes) y se ha utilizadoen la degradacin del trinitotolueno (TNT).

Manejo en la cienciaS. cerevisiaeue el primer eucarionte del cual se complet susecuencia genmica con aproximadamente 12 millones depares de bases. La aportacin que esto ha dado a la cienciase ve directamente sobre procesos de replicacin, recombi-nacin y divisin celular, as como en la produccin de di-versas protenas. Es una noble levadura, de cil manejo, quetiene una diversidad de usos y aplicaciones para beneficio dehombre (cuadro 6-2).

Levaduras patgenas

El comportamiento patgeno que tienen estos microorganis-mos es en especial de tipo oportunista; provoca padecimien-tos recuentes como candidosis y criptococosis. Los hongosdimrficos que provienen de estados saproticos filamento-sos no los consideraremos estrictamente como levaduras; unejemplo caracterstico es Histoplasma capsulatum, que en suase parasitaria da levaduras intracelulares estrictas. La ma-yora de las enermedades que ocasionan se consideran en loscaptulos correspondientes; aqu se presentan slo las carac-tersticas micolgicas ms importantes.

Cuadro 6-2 Divisiones, familia y ejemplos de las principales levaduras de inters mdico e industrial.

Divisin Familia/orden Ejemplos

Ascomycota(Levadurasverdaderas)

SaccharomycotinaSaccharomycetes

BrettanomycesbruxellensesDipodascusalbidusGalactomyces candidumHansenula polymorpha, H. saturnus.Kluyveromyces marxianusPichia anomala yP. guilliermondi

Saccharomyces cerevisiae, S. bayanus, S. boulardiiYarrowia lipolytica

TaphrinomycotinaSchizosaccharomycetes

Schizosaccharomyces pombe,S. octosporus yS. mellacei

Basidiomycota(Club fungi)

BasidiomycotinaHimenomycetes

Sporidiales

Ustilaginomycotina

Cryptoccocus neoformans, C. gattiiRhodotorula mucilaginosa, R. rubra,R. glutinis yR. minutaMalassezia globosa, M. furfur, M. obtusa, M. pachydermatis, Malasseziaspp.


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Gnero CandidaComprende ms de 200 especies, pero slo cerca de 50 tie-nen un inters mdico y de stas alrededor de ocho son lasms recuentes; sobresale Candida albicans, la que puedeaislarse entre 40 hasta 85% de los casos. Candidaspp., sonlevaduras que no producen pigmentos melnicos, y su or-ma puede variar segn la especie: globosas, ovoides, elp-ticas y cilndricas; su reproduccin asexuada o anamrfi-ca es por blastoconidios (holoblstica) y la mayora de lasespecies patgenas pueden ormar seudohias e hias ver-daderas, con excepcin de Candida glabrata. Con base enestudios de biologa molecular se clasifican dentro de la

amilia Saccharomycetaceae, aunque a la mayora no se lehaya encontrado ase teleomrfica (ascosporas). C. glabrataes la especie ms cercana a Saccharomyces. En el cuadro 6-3se presenta la taxonoma del gnero y en el cuadro 6-4, serepresentan las principales especies y sus estados anamor-os y teleomoros.

Cuadro 6-3 Taxonoma del gnero Candida.

Clase: Ascomycetes

Subclase: Hemyascomycetes

Orden: Saccharomycetales

Familia: Saccharomycetes

Gnero: Pichia, Hansenula, Arxiozyma (estados teleomrficos)

Especies: A los estados anamrficos se les denomina Candidaylos ejemplos ms importantes son:C. albicans,C. glabrata,C. tropicalis,C. parapsilosis,C. dubliniensis

Imagen 6-9 Levaduras intracelulares de Histoplasma capsulatum(Hy E, 100X). (Cortesa: Zavalza-Sticker A, SLP, Mxico.)

Cuadro 6-4 Especies oportunistas y benficas de Candida spp. y susestados anamorfos y teleomorfos

Nombre anamorfo Nombre teleomorfo

De inters mdico o patgeno

Candida albicans No descrito

Candida dubliniensis No descrito

Candida famata Debaryomyces hansenii

Candida glabrata No descrito

Candida guilliermondii Pichia guilliermondii, Pichia ohmeri

Candida kefyr Kluyveromyces marxianus (K. fragilis)

Candida krusei Issatchenkia orientalis

Candida lusitaniae Clavispora lusitaneae

Candida parapsilosis No descrito

Candida tropicalis No descrito

De inters benfico o industrial

Candida famata Debaryomyces hansenii

Candida kefyr Kluyveromyces marxianus

Candida pelliculosa Pichia anomala

Candida lambica Pichia fermentans

Candida lipolytica Yarrowia lipolytica

Candida mogii Zygosaccharomyces rouxii

Los cultivos de Candidaspp., son similares; se desarro-llan en diversos medios, como Sabouraud dextrosa, papadextrosa y extracto de levadura agar, as como en dierentesmedios para aislamiento bacteriano; su promedio de creci-miento es entre dos y tres das a temperatura de 25-28C;algunas especies son termorresistentes. La mayora orma

colonias cremosas, limitadas, planas, opacas, y en ocasionesrugosas o surcadas, de color blanco o blanco-amarillento,con excepcin de C. guilliermondii, que es rosa-plido.

Los blastoconidios que orman miden entre 2 a 10 m dedimetro, con gemas de la mitad de su tamao; la ormacinde seudomicelio se puede ver en cultivos in vitro, ya sea cuan-do envejecen o cuando tienen sustratos bajos en carbohidra-tos ms tensoactivos; los ejemplos caractersticos son harinade maz o de arroz agar ms Tween 80al 1%, incubndose a25-28C durante 72 horas. Pueden ormar micelio verdade-ro, y la estimulacin o filamentacin inicial es de 5 a 15 mde largo; sta es una prueba que distingue a algunas especiescomo C. albicans yC. dubliniensis, las que desarrollan tubos

germinativos o filamentos cortos entre 2-3.5 horas a 37C(prueba presuntiva), la cual se realiza en suero humano o conglucosamina.

Todas las especies patgenas oportunistas de Candidapresentan seudohias largas, ramificadas, con pequeos ograndes cmulos de levaduras o blastoconidios (excepto C.glabrata). La ormacin de clamidoconidios se hace a partirdel seudomicelio y slo dos especies lo generan, C. albicanscon estructuras terminales o intercalares de 10 y 12 m dedimetro, y Candida dubliniensis,con estructuras mltiples oen racimos del mismo tamao.


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Imagen 6-10 Colonia de Candida albicansen medio cromognico.Blastoconidios y seudohifas (PAS, 100X).

Imagen 6-11 Colonias en medio cromognico (CHROM-candida)Colores: verde, C. albicans; rosa, C. krusei; azul, C. tropicalis; rosatenue, C.glabratay blanco sucio, C.parapsilosis.

Imagen 6-12 Colonias en medio Biggy-Nickerson; diversas coloniasde Candidaspp., coloridas por oxidacin.

Al igual que en la mayora de las levaduras, las pruebasbioqumicas se basan en el empleo de carbohidratos, ya queexiste un perfil para cada especie; se usan dos mtodos: zi-mograma o ermentacin y auxonograma o utilizacin. Elprimero se hace en cultivo lquido adicionando el carbohi-drato en estudio ms un indicador para pH cido y campana

de ermentacin (gas); el segundo se realiza en medio slidocon base peptonada, y los carbohidratos se agregan en ormade discos de papel impregnado con el sustrato, similares asensidiscos de antibiticos.

Algunas pruebas especiales son importantes para el estu-dio del gnero Candida, como la resistencia a cicloheximida,reduccin de sales de tetrazolio y utilizacin de nitratos e hi-drlisis de urea (ureasa). La identificacin molecular por son-das (primers) genticas especficas es el mtodo ms precisopara identificacin de todas las especies de Candida y diversaslevaduras (vase captulo 23).

Gnero CryptococcusGnero integrado por 37 especies conocidas, de las cualesdos son consideradas como las patgenas ms recuentes yotras tres se encuentran de orma excepcional, produciendocuadros patolgicos. Cryptococcus neoformans es el agenteetiolgico ms importante de la criptococosis; es un hongocosmopolita, patgeno y oportunista, el cual presenta dosvariedades: neoformansy grubii; el segundo esCryptococcugattii, considerado como patgeno primario con rea tropi-cal restringida. A estos dos agentes con sus variedades se leshan detectado cinco serotipos: A, B, C, D y AD (diploide h-brido) y ocho tipos moleculares. Otras especies que puedencausar enermedad en menos de 1% son: C. albidus, C. lau-rentii, C. uniguttulatus.


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Imagen 6-14 Colonia cremosa y mucoide de Cryptococcus neoformans.

Imagen 6-13 Seudohifas y clamidoconidios de Candida albicans(azul de algodn, 40X).

Imagen 6-15 Blastoconidios encapsulados de Cryptococcus neofor-mans. (Tinta china, 100X.)

El hbitat de Cryptococcus gattii es Australia, Canad,Colombia y algunas reas de EUA (San Francisco). En Mxi-co se asla de orma excepcional, mientras que C. neoformanstiene una distribucin cosmopolita; este ltimo tiene estadoteleomrfico ormado por basidiosporas y se denomina Filo-basidiella neoformans, mientras que el de Cryptococcus gattiicorresponde a Filobasidiella bacillispora; as quedan clasifi-cados en la divisin Basidiomycota; clase Himenomycetes yamilia Filobasidiaceae.

El desarrollo de Cryptococcus spp., se hace en mediosde cultivo habituales como Sabouraud dextrosa, extractode levadura y BHI agar, y es inhibido por la cicloheximida.Las especies C. neoformansy C. gattii orman colonias mu-coides, brillantes, limitadas, convexas, blanco-amarillentas(rara vez rosas). Cuando se siembran en medio con altocontenido de DOPA (del ingls: di-hidroxi-phenil-alanine),como los medios de Staib o de semilla de nger o alpistenegro (Guizotia abyssinica), generan pigmentos ca-ma-rrn, por la transormacin a cido caenico (pigmentomelanoide).

La reproduccin anamrica de ambas especies es igual,es decir, mediante blastoconidios rodeados por una cp-sula compuesta por polisacrido de -glucoroxilomanana

(GXM), unido a molculas de manosa, que puede medirhasta tres veces el cuerpo de la levadura; sta se puedereducir por las constantes resiembras. Forman levadu-ras haploides que llegan a medir entre 5 y 15 a 20 m dedimetro con gemas de la mitad de su tamao; de ormaexcepcional pueden desarrollar seudomicelio; microsc-picamente ambas especies son indistinguibles; por tanto,

se requiere de pruebas especiales: C. gattiicrece en mediode canavanina-glicina-azul de bromotimol agar y asimilala prolina como uente nica de carbono. (Ver captulo deCriptococosis.)

GneroMalasseziaLas levaduras de este gnero comprenden 14 especies, la ma-yora de ellas lipolicas; algunas producen pitiriasis versico-lor y estn asociadas a otros padecimientos como dermatitisseborreica, otitis externa (en algunos animales), dermatitisatpica, psoriasis y ungemias. Durante muchos aos se con-sider aMalassezia furfurcomo el agente etiolgico nico dela pitiriasis versicolor y se usaron como sinnimos Pityros-porum orbiculare yPityrospurum ovale(ambos actualmenteen desuso).Guillot y Guho reclasificaron el gnero con baseen sus caractersticas micromorolgicas y ultraestructurales,

secuencia de RNA y DNA nuclear y ribosmico, y pruebasbioqumicas y fisiolgicas de degradacin de cidos grasos ytensoactivos tipo tween.

Con base en los estudios de biologa molecular, actual-mente el gnero Malassezia est localizado dentro de losUstilagomycetes, subclase de la subdivisin Basidiomycotina,aunque no se han reportado estados teleomrficos.

Las 14 especies reconocidas son:M. furfur;M. pachyder-matis;M. sympodialis; M. globosa;M. slooffi ae;M. restricta;M. obtusa;M. dermatis;M. japonica;M. nana;M. yamatoen-sis;M. equina;M. caprae yM. cuniculi.


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Imagen 6-16 A Blastoconidios en dermatitis seborreica (solucinde Albert, 100X).

Imagen 6-16 CBlastoconidios de Malassezia furfur(PAS, 100X).

A

Imagen 6-16 B Colonia de Malassezia slooffiae en medio Dixon-modificado. (Cortesa: Mndez-Tovar LJ, Mxico, DF.)

B

C

La mayora de las especies son lipodependientes, con ex-cepcin deM. pachydermatis, que aecta a diversos animales,en especial el conducto auditivo de los perros; otras que aec-tan equinos, cabras y conejos sonM. equina,M. caprae yM.cuniculirespectivamente.

Las especies de Malassezia se reproducen de orma

asexuada por blastoconidios de diversas ormas: globosos oesricos, ovales y cilndricos. Producen gemaciones entero-blsticas y monopolares. Algunas producen seudomicelio ymicelio verdadero, lo que caracteriza a la pitiriasis versicolor(vase captulo 8).

Otros gnerosTrichosporon.Est conormado por varias especies que pro-ducen algunos cuadros clnicos, por ejemplo: T. cutaneumyT. inkin; se les reconoce como agentes etiolgicos de la pierdablanca, micosis superficial que aecta los pelos de la cabeza y T.asahii,T. asteroides yT. mucoides, productores de trichosporo-

nosis cutnea superficial y prounda; pueden dar neumona einfiltrados pulmonares, endocarditis (biopelculas), enceali-tis, aeccin renal y ungemias.

El gnero Trichosporonha sido recientemente clasifica-do mediante biologa molecular dentro de los Basidiomyce-tes, aunque la mayora de las especies no presentan estadosteleomrficos.

Las diversas especies deTrichosporon son hongos leva-duriormes que orman parte de la ora habitual de la piely mucosas. Se desarrollan con acilidad a 25-28C en Sabouraud dextrosa agar, y son inhibidos por la cicloheximidaLas colonias son de aspecto levaduriorme, cremosas, limita-das, acuminadas, cerebriormes, de color blanco-amarillentoAl microscopio estn compuestas por hias tabicadas de 4 a8 m de dimetro; presentan dos tipos anamrficos a la vezartroconidios ovales o rectangulares (2 a 3 m por 4-8 m dedimetro), y blastoconidios de 2-4 m solos, o bien agrupados en cadenas. La identificacin de cada especie se hace conbase en dierentes pruebas fisiolgicas y bioqumicas.

Geotrichum.Est conormado por varias especies patge-nas oportunistas, pero destacan dos: Geotrichum candidumyGeotrichum capitatum; aectan pulmones, intestino, boca y piel

Geotrichum candidum es considerado como un hongolevaduriorme, aunque no se reproduce por blastoconidiosse desarrolla rpidamente entre 25-37C, presenta coloniasblancas y blanco-amarillentas, planas, vellosas y hmedasAl microscopio se observan hias macrosionadas, septadascon artroconidios rectangulares de aproximadamente 4 a10 m. Su poca actividad bioqumica y micromorologa lodistingue de otros hongos levaduriormes como Trichosporon, Candiday Saccharomyces. Presenta estado teleomrficoque corresponde a un ascomiceto heterotlico denominadoGalactomyces geotrichum; ste orma ascas hialinas esricasde aproximadamente 7-10 m. Geotrichum capitatum es unhongo levaduriorme filamentoso, blanquecino y cremoso; sereproduce por artroconidios elipsoidales, de bordes curva-dos y dispuestos en orma simpodial. Presenta estado teleo-mrfico, que corresponde a un ascomiceto heterotlico de-nominado Dipodascus capitatus. La posicin taxonmica deambas especies es: divisinAscomycota, claseHemiascomyce-tes y amiliaDispoascaceae.

Rhodotorula.Es producida por algunas especies de le-vaduras pigmentadas carotenoides, basidisoporadas y micro


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Imagen 6-17 Colonia de Trichosporon cutaneum. Blastoconidios yartroconidios (azul de algodn, 40X).

capsuladas; las ms comunes con Rhodotorula mucilaginosa

(anteriormente R. rubra) y R. glutinis; son contaminantesnormales y en ocasiones parte de la ora normal de piel ymucosas. De orma excepcional generan cuadros patolgi-cos en pacientes inmunosuprimidos; la mayora de ellos son:pulmonares, de vas urinarias, meningitis y ungemias.

Saccharomyces. S. cerevisiaey otras especies son leva-duras ascosporadas (levadura del pan y la cerveza), y puedenencontrarse como ora transitoria de mucosas. Producen ex-

Cuadro 6-5 Propiedades de las diversas levaduras de inters mdico.

Propiedades Cryptococcus

neoformansCryptococcus

gattiiCandidaalbicans

Candidaglabrata

Saccharomycescerevisiae

Rhodotorulaspp.

Geotrichumcandidum

Trichosporonspp.

Formacin de cpsula + + +*

Produccin de seudohifas E E + +/ + +

Pigmento en alpiste negro + +

Medio prolina +

Produccin de ureasa + +

Artroconidios + +

Ascosporas + + +

Basidiosporas + + +

Imagen 6-18 Colonia cremosa y con pigmento carotenoide deRhodotorula mucilaginosa.

Imagen 6-19 Colonia cremosa blanca deSaccharomyces cerevisiae.

cepcionalmente una serie de patologas en pacientes inmu-nosuprimidos; pueden aectar catteres, dilisis peritoneal, obien generar cuadros clnicos superficiales de boca y vaginao proundos como ungemias y endocarditis. En el cuadro6-5 se resumen las principales propiedades que identifican alas levaduras de inters mdico.

*, pequeas; E, excepcional (aprox. 5-8%).


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F i g u r a 6 - 1 I d e n t i f i c a c i n d e l a s p r i n c

i p a l e s l e v a d u r a s d e i m p o r t a n c i a m d i c a

Blastoconidios

concpsula

Seudohifasy

blastoconidios

Blastoconidios

Blastoconidios

yartroconidios

Hifasyartroconidios

Cultivo

ADS,

AEL,

AB,

MC

Cryptococcusspp.

Rhodotorulaspp.

Blastoconidios

Colordelacolonia

Rojo-Naranja

Blanca

Rhodotorula

Produccin

deas

cosporas

Hifas+Artroconidiosyblastoconidios

Tintachina

Cryptococcusspp.

Agaralpiste

negro

Agarh

arinade

maz+Tw

een801%

Clamidoconidios

Seudohifasy

blasto

conidios

Candidaspp.

Candidaspp.

Candidaspp.

Cand

idaspp.

Sacharo

mycesspp.

Trichosporonspp.

Trichosporonspp.

Hifasyartroconidios

Geotrichums

pp.

Zimogramas

Auxonogramas

Medioscromognicos

Sistemasautomatizados

ADS=AgarDextrosaSabourand.

AEL=AgarExtractodeLevadura.

AB=AgarBiggy.

MC=MedioCromognico.

Medioscromognicos:CHROMagarCandida

,

Candiselect

;

CandidaID.

Auxogenogramascomerciale

s:Auxacolor;SistemasApi.

Sistemas

Automatizados:RapidYeastPamelMicroScan

;Vitek

Geotrichums

pp.

MUESTRA

E

xamendirecto:KOH10-20%+

tintaazulchi-

n

a,

Blancodecalcoflor.

T

inciones:Gram,

Wright,Giemsa,

PAS.

+

+

C.glabrata

Saccharomycesspp.

C.neoformans

C.gattii

C.albicans

C.dubliniensis


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