UNIDAD II: CELULA Y METODOS HISTOLOGICOS

UNIVERSIDAD DE LOS ANDESFACULTAD DE FARMACIA Y BIOANALISIS

ESCUELA DE BIOANALISISCATEDRA DE CIENCIAS MORFOLOGICAS

DRA. CARLU ARIAS DE PEREZ

Diferencias entre las células procariotas y eucariotasCELULAS PROCARIOTASCELULAS PROCARIOTAS CELULAS EUCARIOTASCELULAS EUCARIOTAS

Organismos Organismos representadosrepresentados

Bacterias y Cianobacterias Hongos, Plantas

Tamaño celularTamaño celular Pequeño. Generalmente entre 1 y 10 micras

Grande, generalmente entre 1 y 100 micrómetros

Metabolismo y Metabolismo y fotosíntesisfotosíntesis

Anaeróbico y aeróbico Aeróbico con excepciones

MotilidadMotilidad Inmóviles o Flagelos formados por flagelina

Normalmente con movimiento, cilios o flagelos formados por microtúbulos

Paredes celulares Paredes celulares Presente, constituida por mureína, de azúcares y péptidos característicos.

Presente en vegetalesAusente en animales.

ReproducciónReproducción Por división o fisión binaria Mitosis o Meiosis

Organización Organización celularcelular

Principalmente unicelular Principalmente pluricelular con células diferenciadas.

Membrana NuclearMembrana Nuclear Ausente Presente

NucleolosNucleolos Ausente Presente

MitocondriasMitocondrias Ausentes. Los procesos bioquímicos equivalentes tienen lugar en la membrana citoplasmática.

Presentes.

CloroplastosCloroplastos Ausentes. Los procesos bioquímicos equivalentes tienen lugar en la membrana citoplasmática.

Presentes en células vegetales.

Organelas Organelas citoplasmáicascitoplasmáicas

Ausentes. Solo poseen ribosomas.

CELULA CELULA VEGETALVEGETAL

CELULA CELULA ANIMALANIMAL

ESTRUCTURA CELULAR BÁSICAESTRUCTURA CELULAR BÁSICA

Membrana Membrana plasmáticaplasmática

CitoplasmaCitoplasma

NúcleoNúcleo

CITOPLASMA CITOPLASMA Y ORGANELASY ORGANELAS

CITOESQUELETO

FORMAS DEL NÚCLEO Y LA CÉLULA

CUBICAGlándula Tiroides

Túbulos renales

PRISMÁTICAIntestino delgado y grueso

POLIEDRICAHígado

ESTRELLADAAsta anterior de Médula Espinal

CILINDRICAMúsculo estriado esquelético y cardíaco

FORMAS DEL NÚCLEO Y LA FORMAS DEL NÚCLEO Y LA CÉLULACÉLULA

PIRAMIDALAcinos glandulares Páncreas

PLANA DE FRENTE

ESFÉRICAÖvulos femeninos

FUSIFORMEMúsculo Liso

PLANA TRANVERSALEndotelios vasculares

MÉTODOS DE ESTUDIO MÉTODOS DE ESTUDIO HISTOLÓGICOHISTOLÓGICO

VivosVivos

Estudio de células y tej idosEstudio de células y tej idos

FijadosFijados

ESTUDIO DE CÉLULAS Y ESTUDIO DE CÉLULAS Y TEJIDOS VIVOSTEJIDOS VIVOS

Dentro del Organismo Fuera del Organismo

Método de observación directa

• Examen al estado fresco

•Cultivo de tejidos

•Coloraciones vitales:

- Supravitales

- Intravitales

PROCEDIMIENTO PARA LA PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN DEL PREPARACIÓN DEL

MATERIAL HISTOLÓGICOMATERIAL HISTOLÓGICO

Técnica: Inclusión en parafinaTécnica: Inclusión en parafina

ESTUDIO DE CÉLULAS Y TEJIDOS ESTUDIO DE CÉLULAS Y TEJIDOS FIJADOSFIJADOS

3.- ORGANOSLOS ORGANOS ESTAN FORMADOS POR DIFERENTES TIPOS DE TEJIDOS

TRAQUEATRAQUEA

TEJIDO EPITELIAL

CARTILAGO

TEJIDO GLANDULAR

TEJIDO MUSCULAR

1.- TOMA DE MUESTRA1.- TOMA DE MUESTRA• Sobredosis de Anestesia• Inhalación de éter• Perfusión del fijador• Traumatismo craneal

2.- FIJACIÓN2.- FIJACIÓN Fijadores:

*Físicos : Calor, frío, desecación.*Químicos: Simples: Formol 10%, Alcohol

Compuestos: mezclas

(Detener procesos vitales y conservar estructura.)

Concentraciones crecientes de Alcohol: 70- 90 - 100%

3.- DESHIDRATACIÓN3.- DESHIDRATACIÓN

4.- ACLARAMIENTO4.- ACLARAMIENTOCon un solvente de la parafina. Ej: Xilol, Benzol.

Parafina derretida a 60º.

5.- INCLUSIÓN5.- INCLUSIÓN

Formación Formación del bloquedel bloque

Proceso de Inclusión

BARRAS DE LEUCKART

7.- CORTE7.- CORTEMICROTOMO

Micrótomo (cortes de 6 a 10 μ) → Agua a 45º

ALBUMINA DE MAYER: Clara de huevo y glicerina a partes iguales

Colocar en estufa a 37º por 12 horas

(Deshidratación-Aclaramiento)8.- COLORACIÓN8.- COLORACIÓN

Coloración de células

•Físico → Óptica

•Químico:

Ácido + Base = SAL (Color)

PROCESO

COLORACION HEMATOXILINA - EOSINA

Coloración de células.

Hematoxilina + Núcleo . (Base) (Acido)

Eosina + Proteínas(Acido) (Base)

= SAL (Azul)

= SAL (Rosada)

Basofilia: Afinidad por estructuras básicas.

Acidofilia: Afinidad de las estructuras ácidas.

TÉCNICA DE COLORACIÓN HEMATOXILINA-EOSINA (H-E)

• Xilol para desparafinar (2 minutos)

• Alcohol para sacar el Xilol (2 minutos)

• Agua destilada para hidratar (2 minutos)

• Hematoxilina de Mayer para colorear núcleos (5, 10 o 20 min.)

• Agua corriente para sacar el exceso de Hematoxilina

• Lavado rápido en agua destilada para eliminar el agua corriente

• Eosina para colorear citoplasmas (de 30 segundos a 1 minuto)

• Agua destilada para sacar el exceso de Eosina

• Alcohol para deshidratar (2 minutos)

• Xilol para aclarar (2 minutos)

• Montaje

• Observación al Microscopio Óptico.

Otros Términos:

• ORTOCROMASIA: La estructura se colorea igual al colorante (Coloración Hematoxilina Eosina)

• METACROMASIA: La estructura se colorea diferente al colorante. (Azul de Metileno: es azul y tiñe Rojo)

9.- MONTAJE. Bálsamo de Cánada9.- MONTAJE. Bálsamo de Cánada

TOMA DE MUESTRA FIJACIÓN DESHIDRATACIÓN

90% 100%

Lavar con agua destilada

Alcohol

70%

ACLARAMIENTO o IMPREGNACIÓN INCLUSIÓN

(Parafina Líquida 60ºC)

Xilol

Barras de Leuckart

Bloque

ESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOSESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOS

Micrótomo

CORTE

Agua tibia

Pincel

Portaobjeto

(Albúmina de Mayer)

12 h a 37ºC

COLORACIÓN OBSERVACIÓN

ESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOSESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOS

• Xilol• Alcohol• Agua destilada• Hematoxilina• Agua corriente• Eosina• Agua destilada• Alcohol• Xilol• Montaje

MMIICCRROOSSCCOOPPIIOO

ÓÓPPTTIICCOO

PARTE OPTICAPARTE OPTICA

• CONDENSADOR• Lentes convergentes.

• OBJETIVO• Lentes plano convexas.

• Imagen: Aumentada-Real-Invertida

• OCULAR• Lentes convergentes.

• Imagen: Aumentada-Virtual-Derecha al objetivo

Microscopio electrónico de Transmisión

Microscopio electrónico de Barrido

Riñón

Piel

Imágenes vistas al microscopio ópticoImágenes vistas al microscopio óptico

Micrografías electrónicasMicrografías electrónicas

Fotografía de la superficie de un macrófago, obtenida por microscopía electrónica de barrido.