JAISON LOZANO CARDONA

ANGÉLICA MARÍA OMAÑA NIÑO

WILLIAM FERNANDO CUADROS RIVERA

CROMATOGRAFÍA LIQUIDA (HPLC)

• Técnica que separa una mezcla de solutos basada en la

velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se

establece al ser arrastrados por una fase móvil (líquida o

gaseosa).

CROMATOGRAFÍA

• El botánico ruso Mikhail Semenovich Tsweet,(1872-1919) en 1906 empleó por primera vez eltérmino "cromatografía“.

• A comienzos del año 1903 usó columnas deadsorción de líquidos para separar pigmentosvegetales (por ejemplo, clorofilas).

• La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)comenzó a desarrollarse en los años 1960,aumentando su importancia en las décadassiguientes, hasta convertirse en la técnicacromatográfica más empleada.

HISTORIA DE LA CROMATOGRAFÍA

CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA EFICIENCIA (HPLC)

• Técnica utilizada para separar los componentesde una mezcla. Consiste en una faseestacionaria no polar (columna) y una fase móvillíquida que fluye a través de una columna quecontiene a la fase fija.

• La utilización de los diferentes detectores dependerá de la naturaleza de los

compuestos a determinar.

RENTABILIDAD DE LA TÉCNICA

VENTAJAS

• Se puede utilizar varias veces• Alta versatilidad• Tiempo reducido de análisis• Usado para análisis cualitativo

y cuantitativo• automático

DESVENTAJAS

• Alto costo de los equipos• Alto costo de mantenimiento

de los equipos• No existe un detector

universal • Falta de experiencia del

operador

A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidosde alto rendimiento no está limitada por la volatilidad o la estabilidadtérmica de la muestra.

ESQUEMA DEL HPLC

FASE MÓVIL

BOMBA DE PRESIÓN

BOBINA DE INYECCIÓN COLUMNA

DETECTOR

FASE ESTACIONARIA

INFLUENCIA DE LA FASE MÓVIL EN LA SEPARACIÓN

APLICACIONES DE LA TÉCNICA

APLICACIONES DE LA TÉCNICA EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA

Permite muy buenas separaciones e identificaciones desustancias en un tiempo corto, tanto cualitativa comocuantitativamente es la mas utilizada debido a sus cualidades desensibilidad.

• Purificación y caracterización de enzimas y proteínas

• Separación e identificación de azucares.

• Determinación rápida y precisa de la composición de asidosgrasos.

• Identificación y determinación de esteres metílicos

• Separación alfa y beta tocoferol

ARTÍCULOS DONDE SE APLICO LA CROMATOGRAFÍA LIQUIDA

• Determinación de la fluorescencia de la ACRILAMIDA (AA) enlos alimentos procesados con calor. (Universidad de Fuzhou, China).

• Determinación de VITAMINA A (RETINOL) en mielesenriquecidas, por Cromatografía líquida de Alto Rendimiento.(Universidad Nacional del Nordeste, Chaco, Argentina).

• Folatos y su disponibilidad en alimentos evaluados porcromatografía líquida. validación y aplicaciones en cálidadnutricional de alimentos. (Departamento de Tecnología de Alimentos,

Nutrición y Bromatología. Universidad de Murcia)