“Año de la Diversificación Productiva y del Fortalecimiento de la Educación”.

UNIVERSIDAD “ALAS PERUANAS” FILIAL HUANCAYO

TEMA:CURVA DE

CALIBRACION DE LA GLUCOSA

ALUMNO: GALLEGOS PALERMO, CHRISTIAN.

CARRERA: TECNOLOGIA MEDICA.

CICLO: III CICLO.

CURSO: BIOQUÍMICA CLÍNICA I.

DOCENTE: Lic. T M. César Manuel Sánchez Alpaca.

PERÚ - 2015

CURVA DE CALIBRACION DE LA GLUCOSA

Introducción:

Es un método de química analítica empleado para medir la concentración de una

sustancia en una muestra por comparación con una serie de elementos de concentración

conocida. Se basa en la existencia de una relación en principio lineal entre un carácter

medible (por ejemplo la absorbancia en los enfoques de espectrofotometría) y la

variable a determinar (concentración). Para ello, se efectúan diluciones de unas

muestras de contenido conocido y se produce su lectura y el consiguiente

establecimiento de una función matemática que relacione ambas; después, se lee el

mismo carácter en la muestra problema y, mediante la sustitución de la variable

independiente de esa función, se obtiene la concentración de esta. Se dice pues que la

respuesta de la muestra puede cuantificarse y, empleando la curva de calibración, se

puede interpolar el dato de la muestra problema hasta encontrar la concentración del

analito. Las curvas de calibración suelen poseer al menos una fase de respuesta lineal

sobre la que se realiza un test estadístico de regresión para evaluar su fiabilidad.

La medida de la concentración mediante un método instrumental se basa en la

existencia de una relación proporcional entre dicha concentración y la señal analítica o

respuesta que genera un instrumento.

Generalmente esta relación es lineal, de modo que puede expresarse como:

y =a+b·CA

Donde CA es la concentración del analito, y la señal medida, a la ordenada en el origen y

b la pendiente de la recta.

La ecuación de la recta se obtiene mediante calibración con disoluciones de

concentración perfectamente conocida (disoluciones patrón) a partir de la medida de la

señal analítica proporcionada por éstas. Los pares de valores concentración-señal se

ajustan a una recta, a partir de la cual pueden obtenerse la concentración del analito en

muestras desconocidas.

 Preparación de los patrones

Se preparan patrones del analito que cubran un intervalo adecuado de concentraciones,

y se mide la señal analítica proporcionada por los mismos.

Disoluciones del analito de concentración conocida y creciente.

Obtención de la relación señal y concentración

Se traza un gráfico con las señales frente a la concentración de analito y se calcula la

recta que "mejor" se ajusta a los datos mediante un ajuste por mínimos cuadrados. De

esta forma se obtiene la pendiente (b) y la ordenada (a) en el origen que definen la recta.

Gráfico señal-concentración y recta ajustada por mínimos cuadrados

Uso de la curva de calibrado

Se mide la señal analítica para las muestras desconocidas y se interpola en la recta de

calibrado para obtener valores de concentración de analito.

Obtención de la concentración de analito en las muestras a partir de la gráfica y la recta.

Finalmente, para obtener la concentración de analito en la muestra hay que tener en

cuenta en los cálculos las posibles diluciones a las que se ha sometido la muestra para

obtener las disoluciones M1, M2 y M3 de medida.

TUBOS ESTÁNDAR REACTIVO ABSORBANCIA1 20 mg/dl 1 ml 0.1002 40 mg/dl 1 ml 0.1503 60 mg/dl 1 ml 0.2004 80 mg/dl 1 ml 0.2505 100 mg/dl 1 ml 0.3006 120 mg/dl 1 ml 0.350

Llevar a baño maria por 37°C X 5 min.

Leer a espectrofotómetro a 505 nm.

TUBOS CONCENTRACION ABSORBANCIA PACIENTE1 40 0.100 0.3222 60 0.150 0.2253 80 0.200 0.2654 100 0.2505 120 0.3006 140 0.350

CC

0.100 0.150 0.200 0.250 0.300 0.350

0.225 0.265 0.322