IntroducciónMediante la electroforesis es posible separar moléculas biológicas en dependencia fundamentalmente de su carga bajo la influencia de un campo eléctrico.

FundamentoLa electroforesis es la migración de solutos iónicos bajo la influencia de un campo eléctrico.

Estas partículas migran hacia el cátodo o ánodo (electrodos - y +), en dependencia de una combinación de su carga, peso molecular y estructura tridimensional.

La velocidad de migración (v) de la partícula es directamente proporcional al producto de su carga efectiva (q) y el gradiente de potencial eléctrico (E) e inversamente proporcional al coeficiente de fricción (f) relativo a la talla y forma de la molécula, o sea, a la resistencia que le ofrece el medio.

V = q E / f

Componentes Del Equipo.

1. Tanque externo2. Conectores tipo banana3. Soporte para geles4. Cuña5. Tapa6. Cables fijos

PARTE FUNCION

Tanque externo Evita las fugas de líquido y las roturas. Es un dispositivo duradero y transparente resistente a la acción de agentes químicos y presión y temperaturas elevadas

Tapa Presenta dos cables fijos de alimentación con conector tipo banana para conectar aLa fuente de alimentación.

Soporte para geles El soporte incluye 2 cuñas de plástico para asegurar una buena fijación de los geles y electrodos de platino puro resistentes a la corrosión y a elevadas temperaturas.

Dispositivo para preparación de geles Presenta una junta de silicona en la base, proporcionando un perfecto sellado para evitar fugas de poliacrilamida que constituyen un riesgo tóxico para el usuario.

Placas de vidrio El equipo incluye 2 placas deVidrio planas con espaciadores fijos de 1.0 y 1.5 mm grosor para la preparación y electroforesis de los geles.

Peines El equipo se suministra con un con-junto de 8 peines de 1.0 y 1.5 mm de grosor yCon 10 ó 15 dientes

Ventajas Desventajas

Estables en un amplio rango de pH, temperatura y fuerza iónica

Fácil de almacenarResistente a agentes

desnaturalizantesQuímicamente inerte de propiedades

uniformesPuede ser preparado de forma rápida

y reproducible. Geles transparentes con estabilidad

mecánica, insolubles en agua,relativamente no iónicos y que

permiten buena visualización de las bandas durante tiempo prolongado.

Variando la concentración de polímeros, se puede

modificar de manera controlada el tamaño del Poro

Toxicidad de los monómerosDificultades en manipulación

PAGE en condiciones no desnaturalizantesNo se altera la conformación nativa de las proteínas separadas, por lo que finalizada la electroforesis, pueden realizarse estudios de funcionalidad de dichas proteínas separadas (actividad enzimática, capacidad de unión de anticuerpos, unión a receptores, etc.).Separa por carga y tamaño.

PAGE en condiciones desnaturalizantesUtiliza agentes desnaturalizantes de proteínas, son la urea y determinados detergentes. Estos afectan a la estructura nativa de las proteínas y a las interacciones con otras moléculas (proteínas, lípidos, etc.), ya que las interacciones hidrofóbicas de las proteínas son sustituidas por interacciones detergentes-proteína.

PAGE-SDSLas proteínas se unen a moléculas de SDS ( dodecilsulfato sódico) por cada dos aminoácidos, enmascarando o anulando las carga propio de la proteína con cargas negativas.

Los complejos SDS-proteína están cargados negativamente de forma uniforme.

A mayor A mayor tamaño de tamaño de

partícula mayor partícula mayor la carga.la carga.

Bibliografía Bionova. (s.f.). Obtenido de

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