EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS

Laura QuinteroKarol Avila

Camila ArevaloMargira SuarezClaudfia Castro

Material por grupo de laboratorio, 10 tubos de ensayo, 2 erlenemeyer de 150ml, 1 de precipitado de 500ml, 1 mortero con mano, 4 pipetas de 5ml, 5 pipetas de 2ml, 2 tubos de centrífuga, 1 gradilla, 1 pipeteador.

Materiales y reactivos generales. (volúmenes calculados para 10 grupos de laboratorio): Arena lavada, buffer fosfato 0,1M y pH 7.4 (300ml), solución malonato de sodio 1% (100ml), Solución cianuro de potasio 0,05M (50ml) PELIGROSO, Solución de p-fenilendiamina al 1% (100ml), Solución de succinato de sodio al 1% (100ml), Solución de azul de metileno 0,01% (100ml), aceite mineral (200ml), Agua destilada, Baño de maría termostatado a 37ºC, Tejido hepático fresco, Tejido cardiaco fresco, Tejido muscular fresco (deben conseguir tejidos de animales recién sacrificados en un matadero, puede ser de porcino, vacuno o ave órgano entero) y mantenerlos refrigerados.

MATERIALES Y REACTIVOS

PROCEDIMIENTO1.Extracción y preparación de las enzimas ycoenzimas: Tomar una muestra de aproximadamente 5g de tejido libres de sangre y colocarlos en un mortero con arena lavada, macere cuidadosamente hasta formar una masa suave adicionando poco a poco tres porciones (cada una de 5ml) de buffer fosfatos hasta completar un volumen aproximado de 15ml.

Transfiera la mezcla a un erlenmeyer de 150ml y manténgalo en un baño con hielo durante 15 minutos, mezclando ocasionalmente. Pase la muestra a tubos de centrífuga y centrifugue a 1500 rpm por 10 minutos después de esto llevar a nevera el tubo o poner en hielo hasta su posterior uso.

2. Seguimiento de la reacción catalizada por la Citocromo Oxidasa: Prepare una serie de tubos debidamente marcados según las indicaciones de la Tabla 1.

3. Prepare una serie de tubos debidamente marcados según las indicaciones de la Tabla 2.