Expo Embrion de Pollo 2-2

7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2

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MICROBIOLOGÍA GENERAL IILABORATORIO

VIROLOGÍA

PRÁCTICA 2“Estructuras del embrión de pollo y sus vías de inoculación”

EQUIPO: 10Pérez Peña García Mariem

Pérez Velázquez EliaReyes Nava Ana Margarita

GRUPO 2752SEMESTRE 2013-2



Adquirir el conocimiento para el correcto

manejo de la técnica de inoculación deembrión de pollo por las vías másutilizadas.

El alumno conocerá las diversas partes delembrión de pollo de 9 días de incubación.



INOCULACIÓN EN ANIMALES DEEXPERIMENTACIÓN

Monos, conejos, ratas, cobayos y ratones.

INOCULACIÓN EN EMBRIÓN DE POLLO O DERATÓN

INOCULACIÓN EN CULTIVOS CELULARES



Es el conjunto de técnicas que permiten elmantenimiento de las células in vitro,manteniendo al máximo sus propiedadesfisiológicas, bioquímicas y genéticas.



Cul t ivo pr imar io células, tejidos u órganos tomadosdirectamente de un animal.

Cult ivo de órganos mantenimiento de órganos o partede órganos in vitro.

Cult ivo de tej idos mantenimiento de tejidos in vitro.Cu lt iv o de célu las mantenimiento de células

dispersas.

Líneas celu lares células mantenidas por subcultivossucesivos comenzando por uncultivo primario.

Cul t ivos cont inuo s células que han logrado sobrevivir a muchos subcultivos.



Inoculación de virus en animales

Aislamiento e identificación de los virus

Comprobación de la inocuidad

Poder protector de vacunas (poliomielitis)

Elaboración de vacunas

Efecto neutralizante de sueros inmunes



Vía deinoculación

Imagen Vía deinoculación

Imagen

Víaintravenosa

VíaIntratraqueal

Víaintracerebral

Vía Intranasal

Víaintraperitoneal

VíaIntradérmica



Embrión de 7días

Embrión de 12-13 díasEmbrión de 16 días

Embrión de 8 días



Embrión de 18 días Embrión de 19 días

Embrión de 20 días

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CONSIDERACIONES:

• Reconocer la viabilidad del embrión.

• Conocer la edad aproximada para determinar lavía de inoculación.

• Reconocer los tejidos sanos que permitiránapreciar cambios macroscópicos que ocurrancomo consecuencia de la infección viral.

•

Humedad:57-60%

• Temperatura: 36-38 °C



UTILIDAD: Es unafuente de tejidovivo convenientey fácil de

manipular que seutiliza en lapropagación,titulación eidentificación devirus, así como enla preparación dealgunas vacunasvirales.

MEMBRANA VIRUS

Saco vitelino Herpes simple

Coriolantoídes Herpes simplePoxvirusSarcoma de Rous

VaricelaVirus de Laringotraqueitis aviar

Enfermedad de Beyer

Alantoides InfluenzaNew Castle

Virus de la bronquitis infecciosa

Amniótica ParotiditisVirus de la Gripe



El efecto citopático, es un deterioro de las células delcultivo de tejidos causado por el virus. Cambiosbioquímicos y moleculares, morfológicos y de viabilidadcelular, causados durante el ciclo de replicación viral.



EFECTO CITOPÁTICO DESCRIPCIÓN

Lítico El virus rompe la célula por lagran masa de virus que se

produce.Hiperplasia La célula se transforma y

multiplica aceleradamente.

Mixto (lítico e hiperplasia) Induce una transformación yluego se rompe.

Formación de sincitios Células multinucleadas porquelas membranas celulares sefunden.

Oncogénicos Transformación en célulasmalignas.

Cuerpos de inclusión Estructuras membranosas enforma de vacuolas.



L is is de una célu la

Hiperplasia



Cuerpos de inclusión

Corpúsculo s de

Negri



Virus Respuesta en célula animal

VIHHerpes simple

Paramixovirus

Células gigantes y multinucleadas,inclusiones intracitoplasmáticas.

Poliovirus

Togavirus

Lisis celular

Varicela

Rabia

Reovirus

Inclusiones o masas en citoplasma

Adenovirus Inclusiones nucleares

Morbillivirus Sincitios

Viruela Lítico e hiperplasia

PoliomavirusVirus del sarcoma de Rous Transformación



Evaluación del poder neutralizante desueros antivirales.

Atenuación y producción de vacunas , por lo general de aplicación veterinaria.(parotiditis, influenza, encefalitis equina,

rabiaFlury).



Aislamiento y mantenimiento de cepas

Clasificación de un virus



2. Corte el cascarón a la altura de lacámara de aire, procurando que noqueden bordes filosos.

1. Ilumine con el ovoscopio el embriónde pollo, identificando y marcando lacámara de aire y la mancha ocular.

3. Deposite el contenido del embrión

en una caja de Petri.

4. Proceda a identificar las estructurasdel embrión de pollo de 9 días.



1

Transiluminar al embrióne identificar la cámara de

aire



2

4

Perforar sobre lacámara de aire y

punto de inoculación

Succionar con unaboquilla por elorificio de la cámarade aire para formar una segundacámaraCon una aguja corta del 27

depositar 0.1mL del colorante.

3



1

Transiluminar

al embrión eidentificar lacámara de

aire



2

En posición horizontal,identificar el sacovitelino (mancha

obscura y densa).

3Introducir una aguja larga del 22,

verticalmente, a través de lacámara de aire y depositar 0.1mL

de colorante.



1

Transiluminar al embrión,

identificar la cámara deaire y marcar un punto enla cima



2

Perforar los puntosmarcados einocular 0.1mL del

colorante conaguja corta del 27.

Aproximadamente 5 mm por abajo de lacámara de aire localizar una zona libre de

vasos y del lado opuesto al embriónmarcar el punto de inoculación.

3

3

La inoculación se puede realizar también através de la cámara de aire con una aguja

del 22 larga.



1

Transiluminar alembrión, marcar la

cámara de aire y elpunto de inoculación



2

3

Marcar el punto de inoculación exactamentedonde se ve el embrión (localice las manchas

oculares).

Iluminar el embrión e inocular con la aguja larga del 22, 0.1mL

del colorante.



Brooks G. Microbiología médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. 17ª edición. El manual moderno. México,2002.

Kenneth, L. Microbiología. 9ª edición. PublicacionesCulturales. México, 1986.

Herrero, L [et al]. Procedimientos en virología médica.San José, C.R. : Editorial de la Universidad de CostaRica, 2004.

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