Guia protocolos de investigacion

Edmundo Resenos DÍAZ

Guía para la elaboración de protocolos de investigación

I n s t i t u t o P o l i t é c n i c o N a c i o n a l m é x i c o

INTRODUCCIÓN

MI AÑO SABÁTICO 1993-1994 lo gocé como profesor visitante en el Departamento de Contaduría y Finanzas de la Universidad de las Américas-Puebla. Una de las preocu-paciones del Departamento es iniciar las actividades de investigación. Tal vez, es difícil explicar por qué no han iniciado esta actividad. Una de las explicaciones que encuentro es la tradición. La escuela se constituyó para satisfacer la demanda de estos profesionales en la zona de influencia de la Universidad, al menos así lo infiero de diversas conversaciones con los colegas. Desde luego, no era mi propósito averiguar estas razones, ni lo es ahora que inicio este tema. Considero que éstas no afectan la intención de elaborar esta guía, ni su posible uso. Pero sí explica el motivo de hacerla. Se pretende que esta guía sea útil para toda persona que desea hacer investigación formal. El protocolo consiste en un formulario que elabora una institución para sistematizar la presentación de los proyectos de investigación que recibe para su estudio, análisis y dictamen. En general, el formulario se elabora para aquellos proyectos que concursan por apoyos financieros. El proyecto debe convencer a comités, comisiones o jurados, de que el alcance o el resultado de la investigación puede llegar a constituir una apor-ración a la ciencia, a la tecnología, o a ambas. En su mayoría los proyectos de investigación proporcionan en su mismo

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informe datos, entre otros, acerca de qué tipo de proyecto es, qué problema se aborda, la teoría en la que se sustenta, la metodología que se seguirá, los recursos que se requieren para su realización, así como la mención de los casos donde se presente de los recursos con los que ya se cuenta. La experiencia ha mostrado que cada investigador proporciona esta información de manera diferente. Algunas de éstas se hacen evidentes en la secuencia del informe; otras por la omisión de información y algunas por el exceso de ésta. Esto dificulta tanto la evaluación de los proyectos como los criterios para seleccionarlos y apoyarlos. Tal problemática llevó tanto a las instituciones como a los organismos encargados del apoyo a las actividades de investigación a diseñar formularios que les permitan sistematizar la información que se requiere, a fin de facilitar el seguimiento. Estos formularios se conocen como "protocolos". La guía que se propone es de orientación general. Está enfocada a proyectos de investigación relativamente complejos y para personas que se inician en estas actividades. Lo que implica que se reconoce que los investigadores experimentados ya no requieren guías, pues ellos mismos son una guía para los iniciados; asimismo se reconoce que en la práctica actual no existen guías para proyectos complejos o extremadamente complejos, ya que éstos son elaborados por los propios investigadores experimentados. En virtud de que la fecha de culminación de mi estancia académica está próxima, se tomó la decisión de elaborar la guía con base en la experiencia personal, sin acudir a la

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bibliografía existente, que es muy amplia y numerosa. Por lo tanto, al usuario de ésta se le recomienda consultarla y estudiarla, para las adecuaciones pertinentes a su caso particular. Se pretende que sea una guía práctica y de fácil utilización.

JUSTIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN

La actividad de +}´´investigación pone de manifiesto el uso de la inteligencia humana como uno de los elementos diferenciadores de otros seres vivos, y concretamente dentro del reino animal. El hombre ha sido capaz de transformar el medio ambiente, la faz de la tierra para satisfacer sus necesidades.

Hoy día quien decida hacer investigación deberá incrementar sus estudios sobre ciencia, tecnología y desarrollo, método de investigación, lógica, filosofía de la ciencia y estadística, entre otros, y en particular la ciencia y la actividad sobre la cual va a investigar. Además, pasar un periodo de entrenamiento al lado de un investigador con algún grado de experiencia.

En términos sencillos, investigación es la actividad humana que se realiza para conocer la realidad (creación del conocimiento, lograr descubrimientos) y para usar ese conocimiento en el manejo de la realidad o en la creación de nuevas realidades (modificaciones a lo existente e invenciones) . No entraremos ahora en la cuestión de si es para bien o para mal. Simplemente lo hemos hecho, hemos sido capaces de. No estoy seguro de las fechas o épocas que estudiosos de la historia y evolución de la investigación dan como nacimiento de esta actividad humana, y lo que a continuación voy a decir puede ser muy cuestionable. Sin embargo,

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puede ser sencillo, útil e ilustrativo para las pretensiones de esta guía. Además, también puede ayudar a desmitificar y clarificar algunas concepciones de la investigación:

Tal vez, y guardando las debidas proporciones, la investigación nace cuando el hombre primitivo logra sus primeros conocimientos. Por ejemplo, cuando observa y concluye que golpea más fuerte con el puño cerrado que con la mano abierta (observación, prueba, comprobación, conclusión en un conocimiento). Más tarde descubre que con una piedra en su mano golpea aún más fuerte. Pero no se queda ahí, es probable que la observación de la unidad total: brazo, mano y piedra golpeando, lo haya conducido a amarrar una piedra a un palo y crear así la primera extensión del hombre. No es posible asegurar que haya sido exac-tamente de esta manera, en esa secuencia y tan rápido, pues posiblemente fue un leño primero, y entre cada paso pasaron muchas cosas y muchos años, pero lo útil es que el proceso de adquirir el conocimiento y aplicarlo para satisfacer mejor nuestras necesidades y tener mayor capacidad de influencia en el medio ambiente, es algo que se reproduce continuamente y ahora mucho más sofisticado, complejo y riguroso. Muchos conocimientos científicos ya son conocimiento común; muchos inventos son ya obras comunes. Todo ello, con los conocimientos científicos y los desarrollos tecnológicos actuales, constituyen el acervo, el "background", para la investigación que cada vez se inicia.

Hoy día, toda investigación está basada en los conocimientos y tecnologías existentes, tanto de dominio común como del científico y tecnológico. Por lo mismo, toda in-


vestigación expresará claramente y con la mayor precisión posible cuál es su contribución al conocimiento o a la tecnología, o a ambos a la vez.

Esto es lo que justifica la investigación, sea científica, tecnológica o bien una combinación de ambas: la contribución la aportación que se desea lograr. Esta contribución o aportación no necesariamente ha de ser grandiosa o espectacular. Como explica Thomas Khun en su libro en el que hace referencia a las revoluciones científicas; entre una ruptura del conocimiento y otra siempre ha existido una gran cantidad de investigación. Muchas de ellas con aportaciones significativas, otras con contribuciones modestas algunas de ellas casi imperceptibles y otras que fueron juzgadas como fracasos, pero todo este trabajo científico va conformando, desarrollando y cultivando el conocimiento hasta Ilegal al momento de la ruptura, de la revolución. Lo mismo ha sucedido con los desarrollos tecnológicos. Por ejemplo, imagínese cuánto trabajo de investigación científica se realizó antes de llegar a conocer la estructura del ADN; y cuánto desarrollo tecnológico gradual, muchas veces imperceptible, año tras año, se llevó a cabo sobre el carburador de los automóviles, antes de llegar al "full injection".

De manera paralela al desarrollo científico del conocimiento de la genética, también se realizarla el desarrollo tecnológico que permitiera y apoyara la investigación científica, por ejemplo los microscopios e instrumentos más potentes y precisos para su observación y manipulación. Asimismo, paralelo a los desarrollos tecnológicos de la in-

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yección de gasolinas a los motores de autos que incrementaban los conocimientos de la combustión interna de los motores y del comportamiento de ciertos elementos de los combustibles en diferentes condiciones de trabajo, se estaban desarrollando maquinarias, instrumentos y procesos nuevos para fabricar estos nuevos motores. Estos ejemplos nos pueden ayudar a visualizar, cómo se entreteje la complicadísima red de la investigación y de sus resultados, y además lo importante que ésta es para la vida actual y futura del hombre. Lo anterior también nos permite percatarnos de que casi es imposible pensar que sobre tal

o cual tema no hay nada escrito y que se parte de cero. Pero también resulta difícil imaginar que en la actualidad se agotan los temas de investigación. A cada momento, los resultados de cualquier investigación abren nuevas fuentes de investigación.

DEFINICIÓN DEL TEMA DE INVESTIGACIÓN

CONSISTE EN DEFINIR lo que se va a investigar. Su enunciado se hace de la manera más concreta que sea posible, sin apartarse del objetivo de transmitir con precisión la idea de lo que se pretende aportar.

De manera general, tratándose de investigación científica o básica se observan algunos lineamientos, sin que éstos constituyan una limitación a las posibilidades de la definición de temas, simplemente se anuncian como una orientación y pueden ser los siguientes:

1. La existencia de un elemento en el fenómeno que se estudia. 2. La relación o relaciones que tiene un elemento con otros elementos dentro de un

fenómeno. Cuando existen varias relaciones, en la mayoría de los casos conviene iniciar su estudio una por una y después todas a la vez. O bien, realizar un estudio genérico de todas a la vez y después una por una.

3. Determinar cuáles son los elementos que integran un fenómeno particular, las relaciones o funciones entre ellos, de qué tipo son cada una de ellas, criterios con los cuales se pueden jerarquizar o clasificar los elementos y las relaciones que establecen, las estructuras que conforman según su jerarquización y clasificación y, las relaciones que guardan. Una investigación de estas caractetís-

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ticas es conveniente planearla en varias investigaciones sucesivas o complementarias. 4. Descubrir criterios de clasificaciones, tipificaciones, caracterizaciones de fenómenos,

elementos, componentes, relaciones, funciones.

5. Descripción y explicación de estructuras.

6. Proposición de parámetros de medición.

Ejemplos:

a) (Del 1 y 2) Taylor descubre y demuestra que la división del trabajo* (elemento de la administración) incrementa (relación casual) la productividad'(elemento de la admi-nistración) .

b) (Del 3) Fayol encontró que la administración está inte- ■ grada por cinco principales funciones (determinación de elementos): planeación, organización, dirección, coordinación y control.

c) (Del 4 y 6) Las investigaciones de Likert aporran una clasificación del liderazgo y una escala para su evaluación y clasificación.

d) (Del 5) Uno de los hallazgos de los estudios de-Hawthorne que dirigió Elton Mayo, fue el de la estructura de los grupos informales dentro de las empresas.

Como se puede apreciar, no hay investigaciones totalmente puras de cada tipo; sin embargo, contar con un esque-

* Las cursivas son del autor para fines explicativos.


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ma, el que sea, al menos de los más usuales, permite iniciar la búsqueda del tema que se desea investigar y si ya se tiene experiencia en los más comunes se puede incursionar en esquemas más particulares.

No se investiga lo obvio, lo que va se sabe, lo que ya es conocimiento común, a menos que se tenga una teoría suficientemente sustentada en investigaciones que plantean una duda razonable acerca de lo considerado obvio, y que lo que todo mundo acepta como algo conocido, no es así; es decir, de que existe la duda fundamentada de que estamos equivocados. Tampoco se investiga la importancia, la "importancia" es un resultado natural de la investigación, no un propósito de la investigación. Lo que es o no importante, o el grado de importancia, generalmente se determina en las investigaciones sobre las estructuras.

ESTADO DEL ARTE

EL ESTADO DEL ARTE o marco teórico {background para los estadounidenses) es el acervo de conocimientos y experiencia que se tiene sobre el ámbito de estudio donde se ubica la investigación a realizar. Consiste en describir los antecedentes teóricos, el trabajo de investigación, los estudios o ensayos que se han realizado y que permiten fundamentar, justificar y buscar la investigación propuesta.

Esto implica que se conoce el campo del conocimiento relativo a la investigación. Asimismo que se cuenta con una bibliografía que ha sido estudiada, lo que demuestra un cierto dominio sobre ese campo del conocimiento, y se hace evidente cuando se redacta. Es decir, el estado del arte o marco teórico constituye una investigación bibliográfica.

Entre los requisitos que debe cumplir toda investigación está el de que sea verificable y replicable. Estos también son aplicables a la investigación bibliográfica. Verificable significa que pueda comprobarse lo que se afirma en forma oral o escrita. Por replicable se entiende que otro investigador esté en posibilidad de realizar la misma investigación con las mismas condiciones. Para cumplir lo anterior, durante el discurso científico se debe hacer evidente el uso de la bibliografía que se utilizó haciéndola figurar en las notas de pie de página. No son convenientes ni recomendables frases como: "muchos estudiosos dicen...", "se ha establecido que ...", "algunos 19

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ESTADO DEL ARTE

tratadistas han concluido ...", si nunca se indica quienes son los estudiosos, quién o quiénes han establecido o quiénes son los tratadistas, y se pretende llenar este hueco en los discursos relacionando la bibliografía al final del documento. Lo recomendable y la práctica más generalizada universal-mente es que se indique quién o quiénes dicen, establecen o concluyen, mencionando su primer apellido y el año de la publicación, cuando menos. Algunos más rigurosos indican la página o páginas. Por ejemplo: "Apoyados en el modelo del equilibrio (Miller y Friesen, 1980; Tushman y Romanelli, 1985) han argumentado que las organizaciones ...", "en una investigación que realizaron Rosen, Templetony Kichiine (1981) encontraron que las mujeres gerentes ...". Sin embargo, es imprescindible citar la página o las páginas cuando se hace una cita textual, p. e. "la relativa importancia de estos factores en una decisión de promoción particular o a través de las decisiones, ha recibido poca atención" (Stumpf and London, 1981b: 543).

Otro aspecto que es recomendable cuidar es el estilo de redacción. Las ideas deben ser expresadas de manera directa; con un uso conecto de las palabras que evite utilizarlas con los significados gráficos que tienen en el lenguaje popular; a menos que sea un hecho, dato o información que va a ser sujeto de análisis, entonces se cita entrecomillado y con el menor número de palabras posible sin perder la claridad, p. e.:

"es importante tener en cuenta que cuando se está en el estudio de la reputación de las actuaciones, el enfoque estructu*-

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ral nos permite examinarlas de la manera en que se analiza la estructura de relaciones en una organización completa." (39 palabras).

"el enfoque estructural sugiere examinar la reputación de las actuaciones en términos de la estructura de relaciones en una organización completa." (21 palabras).

Obsérvese que se eliminan algunos adjetivos no necesarios y consideraciones que están implícitas en la idea que se transmite y no se afecta la información ni la comunicación. En el discurso científico la transmisión de las ideas se estructura de la manera más directa y concisa que sea posible.

Al final de este capítulo deberá relacionarse cuando menos la bibliografía utilizada. Sin embargo, es recomendable indicar con que bibliografía complementaria se cuenta.

PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN no es el tema de la investigación. El tema es la denominación del problema. El problema es el objeto de la investigación y está constituido por el conjunto de implicaciones, efectos, significados que tienen o provocan los fenómenos, los elementos, las relaciones que se pretenden estudiar. Es la descripción analítica del tema. El problema se infiere del análisis que se realiza en el estado del arte. Es común que se constituya con una descripción de las hipótesis. El planteamiento del problema permite enunciar las hipótesis que se pretende probar. Las hipótesis son enunciados concretos de los cuestionamientos que se plantean en el problema o proposiciones que se pretende probar, tratándose de una investigación básica, por ejemplo: "entre mayor sea el tamaño de una organización, mayor es el nivel de responsabilidad de los empleados": o las aseveraciones a priori en que se sustenta la investigación aplicada o el desarrollo tecnológico, por ejemplo: "las firmas que secuencialmente entran a los mercados extranjeros, se moverán de su línea de negocios hacia nuevas líneas de negocios".

Puede observarse que en el primer caso se plantea una proposición que trata de probar una relación causal entre el tamaño de las organizaciones y el nivel de responsabilidad de los empleados, lo que tal vez permita plantear una teoría en torno del tamaño de las organizaciones y la con-

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PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

ducta de los miembros. En el segundo caso se trata de una aseveración, proveniente de otra u otras investigaciones en la que se podrían sustentar ciertos planes o restructuraciones organizacionales específicas u otros desarrollos tecnológicos administrativos. Se insiste nuevamente en que deben revisarse las investigaciones publicadas en revistas especializadas extranjeras y nacionales a fin de familiarizarse con la diversidad de planteamientos de problemas y de hipótesis que ha sido posible formular y que son sugestivas para expresar el problema y las hipótesis que se pretenden abordar en el protocolo que se está elaborando.

JUSTIFICACIÓN

LA JUSTIFICACIÓN ES LA EXPOSICIÓN de las implicaciones que puede llegar a tener el conocimiento que se espera lograr, explicando en qué consiste el avance y qué duda o sospecha pretende resolver. Desde luego, se debe referenciar con notas de pie de página hasta donde haya quedado el último avance, o de qué trabajos proviene la duda o qué trabajos científicos insinúan la existencia de escaso o nulo conocimiento. Tratándose de investigaciones aplicadas o de desarrollo tecnológico, la justificación consiste en explicar, de preferencia con referencias bibliográficas, el problema que se resuelve, su utilidad práctica y las ventajas que tiene. De ser posible, acompañarlo de comparaciones y evaluaciones (cuantitativas o cualitativas y de preferencia ambas), la posibilidad de aplicaciones y usos inmediatos y potenciales, ordenándolos, de preferencia, bajo algún criterio de jerarquización.

BIBLIOGRAFÍA

La presentación de la bibliografía debe hacerse observando los convencionalismos más generalizados, que son publicados en manuales o guías de redacción y en algunos libros de metodología, los cuales es recomendable consultar. Aquí se mencionarán las más usuales: las de libros y revistas.

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JUSTIFICACIÓN

Libros

Christensen, C.R., K.R. Andrews, J.L. Bower, R.G. Hamermesh y M.E. Porter, (1982), Busines Policy: Text and Cases (5th ed.) Homewood, II, Irwin.

Rousseau, D., (1983), "Technology in Organizations: A Constructive Review and Analitical Framework", en S.E. Seashore, E.E. Lawler, III, y C. Cammann (comps.), Assessing Organizational Change, Nueva York, John Wiley, 229-253.

Revistas

Woodman, R.W., J.E. Sawyer y R.W. Griffin, (1993), "Toward a Theory of Organizarional Creativity", Academy of Management Review, 18: 293-321.

Observaciones

En ambos casos obsérvese que el uso de las letras mayúsculas se limita a lo estrictamente necesario; se inicia con el apellido de los autores; en cuanto a los nombres, únicamente la letra inicial con mayúscula; a continuación el año de la publicación. Tratándose de libros, el título de éste se destaca usando letra cursiva. Si no se cuenta con computadora y un procesador de textos, subrayar o escribir entre comillas. A continuación la edición, sólo a partit de la segunda cuando es la primera no se acostumbra indicarlo, es decir si no se indica la edición, se sobreentiende que es la

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JUSTIFICACIÓN

primera. Después la ciudad donde se editó el libro y finalmente la casa editora, mencionándola por su nombre comercial, no por su denominación social, por ejemplo, no es usual "Prentice-Hall, Inc.", lo acostumbrado es: "Prentice-Hall". Cuando se trata de un trabajo publicado en un libro (véase el segundo ejemplo de libros), se inicia indicando el autor del trabajo y el título del trabajo, en seguida la indicación "en" y la cita del libro en la forma acostumbrada, destacándose el título de éste.

Por lo que hace a revistas, después de indicar los autores y el año, el título del trabajo: el nombre de la revista, destacándolo con letra cursiva y negrita o en la forma ya indicada en libros; el volumen de la revista, o en su defecto el número o la fecha; y finalmente las páginas donde se encuentra el artículo de referencia, incluyendo desde la página del título hasta la página de la bibliografía. La mayoría de las revistas tienen los siguientes datos: volumen, número y fecha.

OBJETIVOS

LOS OBJETIVOS EXPRESAN LOS LOGROS que se pretende alcanzar con la investigación. Tratándose de una investigación básica, pueden consistir en lo siguiente (de manera enunciativa, no limitativa):

• un hallazgo, • una comprobación, • una demostración, • la aportación de una clasificación, • la descripción de una estructura, • una refutación, • la aportación de una teoría o una hipótesis.

Tratándose de una investigación aplicada o de desarrollo tecnológico, de la misma manera enunciativa, pueden ser los siguientes:

• la invención de un producto nuevo, • la invención de un proceso nuevo, • la sustitución de materiales, • la invención de equipos e instrumentos de trabajo, • la mejora (innovación gradual) de productos, procesos, materiales, equipos o

instrumentos, • la experimentación de un producto, proceso, material, equipo o instrumento nuevo o

mejorado,

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OBJETIVOS

• el diseño de un producto, proceso, material, equipo o instrumento, • el diseño de modelos o sistemas operativos, • la construcción de plantas piloto.

También son frecuentes los proyectos de desarrollo tecnológico complejos o altamente complejos que involucran varios propósitos o todos los anteriores y algunos otros más, en ese caso estamos frente al desarrollo tecnológico de un sistema, aún cuando generalmente no se indica así, y simplemente se le da un nombre que únicamente tiene significado para los involucrados, por ejemplo: proyecto apolo, proyecto satélite solidaridad.

En cualquiera de los casos, en el protocolo de investigación se debe indicar el objetivo principal y los secundarios en orden jerárquico.

Para el enunciado de los objetivos en una investigación básica es de mucha ayuda el planteamiento hipotético. Tratándose de una investigación aplicada o de desarrollo tec-nológico, es útil apoyarse en la problemática que pretende resolver y en las utilidades que se vislumbran, también bajo un criterio de jerarquización.

METAS

LAS METAS SON LAS ETAPAS o pasos que se planea realizar para llevar a cabo los objetivos del proyecto de investigación. Generalmente son expresados en forma muy concreta y dentro de un criterio secuencial, de manera que den una idea clara de lo que se va a realizar en cada etapa de la investigación. Algunas de éstas ofrecen resultados parciales tangibles que deben mencionarse. De manera ilustrativa se ofrece un ejemplo sencillo (desde luego no constituye ningún patrón a seguir, pues cada investigación tiene sus propias metas):

1. Acopio de bibliografía. 2. Análisis, crítica y discusión de la bibliografía. 3. Elaboración de artículo o artículos. 4. Participación con ponencia en foros académicos.

Comentario: Es recomendable que el estudio de la bibliografía que se hizo no quede únicamente en la memoria del investigador. La forma en que la analiza, la interpreta, la cuestiona, la aplica, la utiliza para su problema, debe divulgarse para utilidad de la comunidad científica a la que pertenece. Si recibe críticas o comentarios ¡enhorabuena! pues ha interesado a su comunidad y constituyen una retroalimentación a su proyecto. Algunos investigadores utilizan esta etapa para construir el o los primeros manuscritos del estado del arte.

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META

5. Selección y elaboración de instrumentos de observación y medición. 6. Elaboración de artículo o artículos. 7. Participación con ponencia en foros académicos.

Comentario: Los artículos y las ponencias se elaboran generalmente para dar a conocer los instrumentos de observación o de medición que se han construido. En estos artículos se expone la justificación teórica y problemática que sustentan su construcción, sus usos inmediatos y los potenciales, sus limitaciones y condiciones restrictivas bajo las que opera.

8. Universo de estudio y selección de la muestra. 9. Observaciones, experimentos, mediciones [...]

10.Análisis y discusión de los resulrados obtenidos. 11.Elaboración de artículo. 12.Participación con ponencia en foros académicos.

Comentario: La difusión de los resultados y conclusiones de una investigación en revistas especializadas es ineludible. Este trabajo se simplifica cuando se han realizado pu-blicaciones y ponencias previas sobre diversas etapas o aspectos de la investigación.

PLAN DE TRABAJO

EL PLAN DE TRABAJO es la descripción con cierto grado de detalle del proceso que se pretende seguir para realizar la investigación. Consiste en el enunciado concreto de cada uno de los procesos (conjunto de actividades que tienen un fin predeterminado) necesarios en que se ha subdividido el trabajo de investigación. Su enunciado se hace atendiendo a la secuencia lógica de eslabonamiento y a la continuidad propia de cada uno de ellos. El uso de técnicas de programación como la ruta crítica y las barras de Gantt son un buen apoyo para este proceso y ios siguientes.

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CALENDARIO DE ACTIVIDADES

EL CALENDARIO DE ACTIVIDADES es la programación cronológica de las actividades que se van a realizar para llevar a cabo el proyecto de investigación.

Comentario: Para elaborar el plan de trabajo y el calendario de actividades es conveniente tener en cuenta la metodología que se definió seguir (que deberá estar explícita en algún documento publicado o inédito) y las metas. La elaboración de la metodología, las metas, el plan y el calendario están impregnadas del grado de creatividad e innovación que es capaz de desarrollar el investigador, en función de la infraestructura y recursos con que cuenta y por lo mismo tienen un alto grado de originalidad. Fernando Ibarra, amigo y colega, dijo en alguna ocasión que existen tantas metodologías como investigaciones hay. No lo he verificado, pero como consecuencia de las investigaciones que he conocido, encuentro mucho de verdad en su aseveración.

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INFRAESTRUCTURA DISPONIBLE

EN ESTE CAPÍTULO se relacionan las instalaciones, equipos, instrumentos y sistemas de apoyo, tanto físicos como humanos, con que se cuenta para tealizar la investigación. Incluye expertos, técnicos, edificaciones, laboratorios, equipamientos, instrumentos de trabajo, sistemas de cómputo y comunicación incluyendo tedes, bibliotecas.

Es importante tener en cuenta este aspecto desde el momento en que se genera la idea; ya que si se desea genuina-mente realizar la investigación, ésta deberá planearse de manera que sea realizable con los recursos con que se cuenta o porque sea muy alta la certeza de adquirir lo que falta. El grado de viabilidad de un proyecto de investigación, en buena parte está en función del grado de dependencia de la adquisición de infraestructura.

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FORMACIÓN DE INVESTIGADORES

LA FORMACIÓN DE INVESTIGADORES o formación de recursos humanos (sin entrar en la polémica sobre si el hombre es o no un recurso, prefiero la primera descripción) se refiere a las acciones concretas que se llevan a cabo durante ia realización de las investigaciones para satisfacer la necesidad social de incrementar el número de investigadores en activo.

Además de realizar los estudios formales convenientes para que las personas se capaciten y habiliten en la actividad de investigación, es indispensable que realicen trabajos con investigadores experimentados.

La investigación se aprende trabajando en ella. Ahí se forja el investigador. Estudios y trabajo son complementarios, no obstante ante la falta de uno de ellos, lograr la formación de los investigadores es mayor cuando se trabaja desarrollando la propia investigación. En la actualidad existen grupos donde se puede aprender a investigar. La opción "echando a perder se aprende" debe tomarse en casos muy extremos. Las instituciones educativas que imparten estudios de postgrado sin programas de investigación, tienen la posibilidad de acudir a las que sí cuentan con ellos, y, de manera creativa, negociar estrategias y acciones que satisfacen sus necesidades de formación de investigadores, ya que todas las investigaciones permiten y requieren la incorporación de personas en formación a diferentes niveles.

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FORMACIÓN DE INVESTIGADORES

El supuesto más generalizado es que una investigación es realizada por un equipo de investigadores, constituido por: directores, asociados, asistentes, técnicos, tesistas, estudian-tes.

El tamaño del equipo, su experiencia y madurez, incrementan la viabilidad del proyecto de investigación.

En general, en el proyecto se integra un resumen de la curricula de cada uno de los participantes, misma que destaca la formación académica a partir de licenciatura: la(s) tesis que ha dirigido, membresías de asociaciones académicas y profesionales a las que pertenece, reconocimientos académicos que le han otorgado, actividades como consultor o experto y relación de publicaciones a la fecha.

RECURSOS NECESARIOS PARA EL PROYECTO

ESTE CAPÍTULO TRATA acerca del informe relativo a la cantidad, tipo de personas y recursos físicos que son necesarios para la realización de la investigación que se propone.

Por lo que respecta a personas, de manera general se refiere a asesores, investigadores, especialistas, técnicos, tesistas, alumnos. El director del proyecto determinará el perfil de capacidades y habilidades que debe cubrir cada persona.

En cuanto a recursos físicos, generalmente son los relativos a construcciones, equipos, aparatos, instrumentos, herramientas, hardware, software, materiales, sustancias, etcétera. El director debe conocer ampliamente lo relativo a las especificaciones y características de cada uno de estos recursos, así como el precio aproximado y posibles proveedores.

Es conveniente que dutante la gestación de la idea el director inicie las negociaciones con autoridades y organismos de financiamiento que lo lleven a obtener cuando menos un compromiso moral que le dé un alto grado de seguridad de que apoyaron el proyecto y las adquisiciones necesarias.

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PRESUPUESTO

EL PRESUPUESTO CONSISTE en la evaluación monetaria, lo más aproximada posible, del costo de las inversiones necesarias para la realización de la investigación. Los conceptos más comunes son:

• director(es) del proyecto, • investigadores, • personal, • expertos, • bibliografía (libros, revistas, compra de artículos y otros documentos), • consultas a bancos de información, • pasajes y viáticos (trabajos de campo, visitas a investigadores con los que se trabaja

conjuntamente, asistencia a foros académicos, etc.), • terrenos y construcciones, • equipo de laboratorio, • sustancias y materiales, • maquinaria y equipo para talleres, • herramientas y accesorios, • equipo de computación y paquetes para procesamiento de datos.

Es necesario indicar cuáles son las instituciones que participarán en el financiamiento del proyecto, determinando

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PRESUPUESTO

montos y porcentajes que aportarán cada una de ellas y las partidas que cubre cada aportación.

Éstos son los puntos más generales que requieren los protocolos de investigación. Las diferencias entre los protocolos de una institución a otra pueden consistir en informaciones específicas adicionales, entre ellas curriculum del director y/o responsable del proyecto y de los participantes; o bien, información sobre el centro de investigación donde trabajan tanto el director y/o el responsable del proyecto. Si se trata de un proyecto de investigación conjunta donde participan dos o más instituciones, generalmente se informa sobre las aportaciones y responsabilidades de cada institución y el papel que asumen sus representantes. En fin, cada institución particular tiene elaborado su protocolo con sus propias especificaciones respecto de los tipos de apoyos que ofrece a la investigación. Cada proyecto de investigación tiene sus propias características, por ejemplo, no es lo mismo un proyecto de investigación básica que un proyecto de investigación aplicada. Por lo tanto, el investigador que llena el protocolo deberá tener una concepción clara y completa del proyecto de investigación que se va a realizar, ya que el protocolo es únicamente un formulario o formato que se ha elaborado, con especificaciones propias de cada proyecto de investigación.

Recuérdese al llenar el protocolo, éste puede ser un formulario en papel o estar incorporado en un disket, que es el único medio y tal vez la única vía que se tiene para de-mostrar y convencer a quien está dirigido, de la capacidad del investigador, de lo importante del proyecto y el porqué debe ser apoyado. De manera que el protocolo debe y merece ser llenado con todo cuidado y rigor. ¡Buena suerte!

EJEMPLO I*

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN

DEL GEN DE COLAGENASA EN

CÉLULAS

HEPÁTICAS EN CULTIVO

* En este ejemplo se eliminan hojas de información detallada. Se conserva una página de cada tipo de información como muestra ilustrativa para el lector.

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN DEL GEN

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

DATOS GENERALES

NO ESTÁ ASOCIADO A NINGÚN PROGRAMA

Título;

Expresión y regulación del gen de colagenasa en células hepáticas en cultivo

Comité a evaluarlo: Ciencias de la salud Disciplina: Ciencias de la salud Especialidad: Biología molecular en medicina Duración del proyecto: 6 cuatrimestres Monto solicitado a Conacyt: 291,000 (nuevos pesos)

Datos de la institución solicitante: Universidad de Guadalajara Dependencia: Centro Universitario de Ciencias de la Salud (C.U.C.S.) R.F.C.: UGU250907-MH5 Domicilio: Juárez núm. 975 Sector Juárez C.P.:.

Rector o responsable ante Conacyt: Dr. en C. Víctor Manuel González Romero Nombramiento: Rector General de la Universidad de Guadalajara

Director de la dependencia

Dr. Raúl Vargas López

Datos del responsable del proyecto R.F.C.: AEBJ-570309 Dr. Juan Socorro Armendáriz Borunda Nombramiento: Profesor e Investigador titular, C, tiempo completo Domicilio laboral: Sierra Mojada s/n Independencia C.P. 44340 Teléfono laboral: 913 617-4159 Extensión: 0 Fax: 915 617-4159 Domicilio particular: López Cotilla 1542 Int. 7 Moderna, Sector Hidalgo C.P.: Teléfono particular: 915 616-9441

Datos del administrador del proyecto Med. Esp. Víctor Manuel Lara Vélez Nombramiento: Secretario Administrativo del C.U.C.S.

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48 EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA SOLICITUD DE APOYO

DESGLOSE FINANCIERO

Gasto corriente

Honorarios por servicios profesionales20,000 Viáticos 0 Pasajes 0 Gastos de trabajo de campo 0 Ediciones e impresiones 6,000 Servicios externos y comerciales 0 Cuotas de inscripción 0 Profesores visitantes 0 Becas para proyectos de investigación 0 Artículos, materiales y útiles diversos163,000 Documentos y servicios de información5,000 Libros 5,900 Animales para rancho y granja 0

Total gasto corriente 199,900

Gasto de inversión

Equipo de laboratorio Equipo de cómputo Herramientas y accesorios Total gasto de inversión

Total solicitado

236,5

00 54,60

0 0

291,10

0

491,00

0

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN DEL GEN 49

PROTOCOLO DEL PROYECTO ANTECEDENTES

PATOFISIOLOGÍA DE LA CIRROSIS HEPÁTICA

LA CIRROSIS DEL HÍGADO es un padecimiento que lleva necesariamente a la muerte si el

paciente no recibe oportunamente un adecuado tratamiento de soporte. Datos de 1993 indi-

can que la cirrosis hepática y otras enfermedades crónicas del hígado se situaron como

tercera causa de mortalidad hospitalaria en México (SS, 1993).

La cirrosis del hígado es "un proceso difuso caracterizado por fibrosis y una conversión

de la arquitectura en nódulos estructuralmente anormales" (Boyer, 1994). Con este proceso

se asocian cambios vasculares importantes que conllevan a una alteración en el suministro

sanguíneo y por ende en la nutrición de la célula hepática.

Una de las características principales de la fibrosis y cirrosis hepática es la deposición en

exceso de varias proteínas de matriz extracelular (MEC) (particularmente colágena tipo I)

(Aycock y Seyer, 1989) en diversos sitios del lóbulo hepático (periportal, perisinusoidal y

pericentral), lo que ha su vez es un determinante principal de los efectos patológicos en la

función hepática. La fibrosis periportal distorsiona la triada portal (ducto biliar, vena

portal, y arteria hepática) restringiendo así el flujo biliar y sanguíneo. La fibrosis

perisinusoidal, en la cual las proteínas de matriz se acumulan entre los hepatocitos y el

endotelio sinusoidal, altera la función celular y puede alterar el flujo de los nutrientes a

50 EJEMPLO I

los hepatocitos. La fibrosis pericentral puede impedir el flujo sanguíneo sinusoidal e

incrementar la presión portal en la cirrosis (Friedman y Bisell, 1990).

Las nuevas perspectivas terapéuticas en el tratamiento de la cirrosis se basan en el

conocimiento de la biología de la modulación de la MEC en la fibrosis hepática, compren-

diendo las bases moleculares de la síntesis y degradación de las proteínas de matriz y de las

citocinas envueltas en la fibrogénesis hepática.

MECANISMOS PATOMOLECULARES EN LA CIRROSIS

HEPÁTICA

En el proceso fibrogénico están involucrados diversos tipos celulares presentes en el

microambiente hepático. Se ha descrito ampliamente la participación de las células de Ito

como la principal fuente celular de síntesis de MEC durante la fibrogénesis hepática

(Melani etal., 1989; Armendáriz-Borunda etai, 1994). La participación de las células de Ito

en este proceso depende de su previa activación por diversos factores bioquímicos, entre

los que se cuentan: la propia MEC, mediadores solubles como los factores de crecimiento

transformante beta (TGF-B, por sus siglas en inglés), de crecimiento derivado de plaquetas

(PDGF), de necrosis tumor al alfa (TNF-a), derivado de las células de Kupffer, de

crecimiento epidemial, corticosteroides y el acetaldehido (Friedman y Bisell, 1990;

Armendáriz-Borunda et ai, 1992). Asimismo, las células de Kupffer


presentes en el sinusoide desarrollan un papel fundamental en la activación de las células

de Ito al secretar algunas de las atocinas descritas e incluso al contactar directamente con

ellas con la emisión de prolongaciones a través de las fenestraciones de las células

endoteliales del sinusoide (Armendáriz-Borunda et al., 1989).

Diversos cambios se presentan en el microambiente hepático ante el exceso de proteínas

colagénicas en el espacio subendotelial; entre estos cambios se cuentan la pérdida de

vellosidades del hepatocito, la aparición de una membrana basal y, finalmente, la pérdida

de fenestraciones de las células endoteliales, un proceso conocido también como

capilarización de sinusoides. Con el cierre de este espacio, se impide el libre intercambio

de nutrientes entre la sangre sinusoidal y el hepatocito; de igual manera se ven impedidas

la destoxificación de diversas sustancias por el hepatocito, así como también la

incorporación de metabolitos producidos por el hígado al torrente sanguíneo. Estos

fenómenos explican algunas de las características clínicas de la cirrosis hepática como

analbuminemia, disminución en la sangre de algunos factores de coagulación y la

encefalopatía hepática, entre otros.

En el hígado, en condiciones normales existe un equilibrio entre las proteínas de

colágena y la coiagenasa, enzima intersticial que degrada de manera específica las

colágenas tipo I, II o III y que es secretada por los hepatocitos, las células de Ito y los

fibroblastos y neutrófilos circundantes (Hasty et ai, 1990); esta homeostasis se ve alterada

por el incremento de las primeras durante la cirrosis; es por ello

52

EJEMPLO I

que una de las estrategias terapéuticas para la eliminación del exceso de colágena se haya

enfocado en la inducción de la síntesis y de la actividad de la enzima colagenasa por las célu-

las hepáticas. Diversos tratamientos se han efectuado en este sentido con relativo éxito, sin

embargo, no se ha logrado la reversión total del padecimiento, probablemente debido a que

no se ha alcanzado la cantidad suficiente de la enzima en el espacio subendotelial, o bien su

actividad es reducida.

TRANSFECCION DE CÉLULAS EUCARIÓTICAS

Una de las formas para lograr cantidades suficientes de la enzima colagenasa en el

microambiente hepático es a través del incremento en la transcripción del gen que la codi-

fica en las células hepáticas, mediante la incorporación de un mayor número de copias de

dicho gen en el ADN cromosómico de la célula.

Para ello, y gracias al desarrollo de diversas herramientas de biología molecular, ahora es

posible la modificación transitoria o estable del genotipo de casi cualquier tipo de célula

mediante la introducción de ADN exógeno, de una manera tal que se pueden incrementar o

disminuir funciones específicas e incluso desarrollar nuevas funciones en una célula que

contenga la maquinaria transcripcional requerida para la síntesis de la nueva pro teína

(Martínez-Fong etal, 1994).

Al proceso de introducción de ADN exógeno a una célula eucariótica se le conoce como

transfección y consiste en la incorporación de un gen deseado a una célula a través


de un vector de expresión dado. Entre los vectores más utilizados para este fin se

encuentran los plásmidos; los cuales son segmentos circulares extracromosomales de ADN

que contienen regiones donde se inserta el gen de interés (sitios de clonación múltiple),

regiones que promueven la expresión general o específica del gen insertado (promotores),

regiones donde se localiza la capacidad de resistencia a antibióticos y regiones que

codifican a alguna enzima utilizada para la identificación de las células transfretadas.

Figura 1. Regiones componentes de un plásmico tipo (pUC19). Amp: gen de resistencia a ampicilina; O: origen de replicación del plásmido pBR322 P: secuencia codificante de poli-Adenosina; lac Z: gen estructural de E. coli de la enzima metabolizante del azúcar galactosa (B-galactosidasa). Dentro de la región de lac Z hay una secuencia que contiene varios sitios de reconocimiento único para enzimas de restricción, en la cual se inserta el gen de interés. El gen se presenta en forma de ADN complementario (cADN), producto de la transcripción inversa del ARN mensajero (mARN) que codifica para la proteína de interés. Cuando los fragmentos de ADN se clonan en esta región, el gen de lac es inactivado, lo cual se utiliza para la identificación de las células transformadas con este plásmido (ensayo colorido de actividad de B-galactosidasa sobre el sustrato X-gal). Una vez incorporado el plásmido al ADN de la célula eucariótica, ésta transcribe al gen exógeno, lo que finalmente se traduce en la síntesis de la proteína deseada completamente funcional.

54 EJEMPLO I

Se han utilizado diversos promotores con características particulares dentro de los vectores de

expresión, según sea la necesidad de controlar el grado de expresión de un gen determinado

o la de expresarlo en un tejido específico. Así por ejemplo, el promotor de albúmina (p alb)

dirige la expresión del gen que le acompaña únicamente en las células que cuentan con los

factores transcripciones que interactúan específicamente con esta región (í.e., hepato-cítos).

Además, diversos plásmidos tienen insertada la región promotora del gen de

fosfoenolpiruvato carboxicinasa (PEPCK, por sus siglas en inglés), enzima citosólica que par-

ticipa en la gluconeogénesis hepática. Esta secuencia, además de interactuar específicamente

con los factores transcripciones del hepatocito, puede ser regulada positiva o negativamente

por ciertos elementos presentes en el entorno celular (e.g., insulina, glucocorticoides, AMPc),

característica que la hace atractiva para el manejo experimental del nivel de expresión de un

gen deseado controlado bajo el mencionado promotor (Tilghman et al. 1974; McGrane et

al., 1988). Por ejemplo, en roedores en los que se les ha transfectado un gen dado con el

promotor de PEPCK, se puede lograr a voluntad la expresión de dicho gen, variando el

contenido de azúcares o proteínas en la dieta, ya que se conoce plenamente que ante

decrementos en el nivel de azúcar (glucosa) en el organismo o incrementos en el nivel de

proteínas, el gen de PEPCK del hepatocito se activa y por ende se induce la expresión del gen

asociado a dicho promotor (Martínez-Fong etal, 1994; Perales etai, 1994).

56

EJEMPLO I

lizar pruebas en modelos in vitro en condiciones experimentales controladas.

Se han utilizado para este fin líneas celulares en cultivo, las cuales retienen aún algunas

características propias del tipo celular de la que derivan y facilitan el control de variables

con respecto al origen de las células que provienen. La línea celular HepG2, proveniente de

células hepáticas humanas, contiene la maquinaria transcripcional específica del hepatocito

requerida para la síntesis de nuevas moléculas proteicas. Con ello, y utilizando plásmidos

con regiones promotoras específicas para hepatocitos, (e.g., promotor de albúmina) se

puede dirigir la transcripción del gen de interés insertado en el mismo vector de expresión.

Además, con la finalidad de regular experimentalmente la expresión del mismo, en nuestro

caso la expresión de la colagenasa, el gen de la enzima puede estar bajo el control de la

región promotora de PEPCK, de tal forma que mediante la adición de diversos compuestos

como insulina, AMPc y glucocorticoides, seamos capaces de modular el grado de expresión

de la enzima.

BIBLIOGRAFÍA

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1308. Secretaría de Salud (SS) (1993).

58

EJEMPLO I

OBJETIVOS

LOS OBJETIVOS A ALCANZAR en este proyecto de investigación son los siguientes:

1. Dirigir específicamente la expresión del gen reportero

cloranfenicol acetil transferasa (Cat) a células hepáticas en

cultivo mediante el empleo de un promotor exclusivo de cé

lulas hepáticas (promotor de albúmina) en el vector de ex

presión p9.12 alb CAT

Además de conocer la eficiencia de la transfección transitoria de ADN a diversas líneas

celulares en nuestras condiciones experimentales, es necesario corroborar que la línea

celular HepG2, tipo celular en donde se enfocará principalmente nuestro estudio, aún

retiene algunas de las características propias de las células de las que derivaron (Le.,

células del parénquima hepático); puesto que deben contener aún los factores

transcripcionales específicos requeridos para la expresión de albúmina, proteína que es

producida fundamentalmente por las células hepáticas.

2. Evaluar la eficiencia de transfección del gen exógeno de

colagenasa y del gen reportero CAT a células en cultivo.

Por la transfección con el plásmico pUCl 9/colagenasa se determinará el grado de

expresión de la enzima colagenasa

EXPRESIÓN Y

REGULACIÓN DEL GEN

59

y se relacionará con ia actividad de CKT producto de CAT. cotransfección con el

plásmido pSV2CAT en la misma célula. Con este ensayo se evaluará la eficiencia de

la trans-fección de ADN exógeno así como la capacidad de producción de la enzima

colagenasa por la célula hepática a partir de la integración del gen exógeno en su

genoma.

3. Regular la expresión in vitro del gen exógeno de colagenasa en células hepáticas en

cultivo mediante el control de sustratos que interactúan con la región promotora del

gen transfectado.

Es importante poder controlar a voluntad la expresión, o no, del gen de colagenasa,

dependiendo de la respuesta presentada por la célula transfectada; debido a ello es que

se plantea la necesidad de regular este gen exógeno bajo el promotor de PEPCK. El

promotor de PEPCK controlaría al gen de la colagenasa, expresándola cuando

estuviese en presencia de factores tales como AMPc y glucocorticoides, y no

haciéndolo cuando hubiere insulina.

De esta forma, si se requiriese un aumento o disminución de la enzima en el

microambiente celular, bastaría con adicionar al medio de cultivo algunos de los

compuestos mencionados.

60 EJEMPLO I

METAS

DENTRO DE LAS METAS a alcanzar por este proyecto se contemplan:

1. Establecer y optimizar la metodología de introducción de ADN exógeno a células

eucarióticas en cultivo (proceso de transfección).

2. Conocer los mecanismos de expresión del gen de cola-genasa controlado bajo una

región promotora regulable y específica para las células hepáticas en cultivo, para

posteriormente intentar in vivo la incorporación y regulación de dicho gen en un modelo

experimental de cirrosis hepática.

3. Apoyar la formación de recursos humanos con los conocimientos y la capacidad de

análisis en diversos tópicos del área de biología molecular, capacitados en el manejo de

las técnicas de frontera de la biología molecular. Cómo parte de ello se involucrará a

diversos estudiantes del doctorado en Biología Molecular en Medicina, recayendo

particularmente en el M. en C. Fernando Siller una participación fundamental en el

desarrollo de este proyecto, del cual se pretenderá la producción de su tesis doctoral.

4. Crear un polo de desarrollo regional en el país, dedicado a la investigación básica y

clínica de la biología molecular en los problemas de salud que son de importancia rele-

vante para México.

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN DEL GEN 6l

5. Divulgar los resultados obtenidos por este trabajo en publicaciones de circulación

nacional e internacional, así como en los principales foros de comunicación del área.

6. Establecer relaciones de apoyo e intercambio a niveles nacional e internacional, con los

expertos en el área del trabajo que se pretende desarrollar.

OBJETIVO PRINCIPAL

Transfectar el gen exógeno de colagenasay regular su expresión en células hepáticas en cultivo.

62 EJEMPLO I

METODOLOGÍA

CULTIVO DE LÍNEAS CELULARES

SE PROPAGARÁN LAS DIVERSAS LÍNEAS celulares en las condiciones óptimas de cultivo,

con el objetivo de proveer de una población adecuada de ellas a cada uno de los diferentes

ensayos de transfección.

Para este fin, se incubarán células HepG2, provenientes de una línea celular de

hepatoma humano (células parenquimatosas), a 37°C en aire 95% y C025%, mantenidas a

80% de confluencia en medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) con 10% de

suero bovino fetal.

Bajo condiciones similares se mantendrán células de Ito, provenientes del mesénquima

hepático y células COS-7, línea celular descendiente de riñón de mono, utilizadas como

control en los ensayos de transfección.

TRANSFECCIÓN DE CÉLULAS

Uno de los métodos que más se utilizan para la introducción de genes a células

eucariónticas es la transfección de ADN con fosfato de calcio, en la cual el ADN exógeno

se deposita como un precipitado fino sobre la superficie de la célula en suspensión, para

posteriormente ser incorporado por la célula e integrado transitoriamente en el ADN

cromosomal.

Para ello, se crecerán las células HepG2, de Ito y COS-& en monocapa a

aproximadamente un 70% de confluen-


cia y serán transfectadas, según corresponda, individual o conjuntamente, con los

plásmidos p9.12albCAT, (promotor de albúmina y gen reportero CAT —específico para la

expresión en células hepáticas—), pSVoCAT (plásmido sin promotor—control

negativo—), pSV2CAT (plásmido con el promotor fuerte del virus de SV40 —control

positivo—), pSV2CAT (plásmido con el promotor fuerte del virus de SV40 —control

positivo—) pUC19/colagenasa (plásmido con el promotor de SV4 y el gen de colagenasa)

y PEPck/ colágena (plásmido con el promotor d PEPck y el gen de colagenasa). La

transfección se hará, por el método de precipitación de fosfato de calcio (Chen y Okayama,

1988; Armendariz-Borunda et ai, 1994). En breve: A las células en cultivo se adiciona el

precipitado recién formado de la solución de CaC12 con el ADN a ser transfectado y una

solución salina de HEPES. Se incuban de 4 a 16 h bajo condiciones estándar de

crecimiento para permitir que el precipitado se adhiera a la superficie de las células y el

ADN se integre a los cromosomas de las células huésped, posteriormente se lavan y

siembran con medio completo. Se recolectan las células a las 2-48 h posteriores a la

transfección, para determinar la expresión del gen incorporado.

ENSAYOS DE EXPRESIÓN TRANSITORIA USANDO EL SISTEMA REPORTERO

DE CLORANFENICOL ACETILTRANSFERASA (CAT)

Este sistema determina la actividad de la enzima CAT como una medida del nivel de

expresión del gen de interés

64 EJEMPLO I

transfectado conjuntamente con el gen que codifica para dicha enzima. La CAT es una

enzima bacteriana que cataliza la transferencia del grupo acetil proveniente de la acetil CoA

al cloranfenicol.

Las células transfectadas son recolectadas y Usadas en varios pasos de

congelación/descongelación. Se adicionan a los Usados celulares acetil CoA y

cloranfenicol marcado radiactivamente y los productos modificados del antibiótico son

separados del material original por cromatografía de capa fina. Finalmente se expone la

placa cromatográfica a una película autorradiográfica y los productos acetilados son

analizados cualitativamente y cuantitativamente por análisis de las bandas de la placa

cromatográfica correspondiente a las de la impresión autorradiográfica mediante

espectroscopia de líquidos de centelleo (Gorman et al., 1982).

REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN DEL GEN DE

COLAGENASA

La región promotora del gen de fosfoenolpiruvato carboxicinasa (PEPCK) controla la

expresión del cADN un gen dado cuando ambos se encuentran en el mismo vector de

expresión. La secuencia de PEPCK tiene la característica de incrementar o disminuir la

expresión del gen cuando están presentes ciertos compuestos que interactúan

directamente con ella; la ventaja de ello radica en la posibilidad de regular

experimentalmente el grado de expresión


mediante la adición de insulina, AMPc o glucocorticoldes a las células transfectadas.

La regulación de la expresión del gen de colagenasa se realizará en las células HepG2

transfectadas con el plásmido PEPCK/colagenasa (Valera y Bosch, 1994). Se adicionarán

de manera individual los compuestos insulina, glucocorticoldes y AMPc a las células

hepáticas y después de un tiempo de incubación se recolectarán las células para determinar

en ellas el nivel de expresión de la colagenasa por análisis de Northern blot así como por

análisis de su actividad enzimática.

PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE ARN DE

COLAGENASA

Se extraerá el contenido total de ARN de las células en cultivo utilizando el sistema de

aislamiento de ARNzol (Biotecx, 1992) para realizar el análisis del ARN específico de

colagenasa con la técnica de Northern blot (Thomas, 1980). En un gen desnaturalizante de

agarosa se coloca una alícuota de ARN total, se somete el gen a electroforesis y

posteriormente se transfiere el ARN a filtros de nitrocelu-losa. Se hibridiza el filtro con una

sonda radiactiva de ADN de colagenasa, de manera que complemente específicamente con

el ARN de mismo gen. Los filtros se lavan y secan y posteriormente son expuestos a una

película autorradiográ-fica para observar la banda de ARN específica de colagenasa.

Finalmente, se efectúa el análisis densitométrico de las ban-

66 EJEMPLO I

das en las placas autorradiográficas para cuantificar el contenido de ARN de cada

muestra (Armendáriz-Borunda et aL, 1993; Shapiro et al, 1993)

ENSAYO DE ACTIVIDAD DE COLAGENASA

El análisis de la actividad enzimática de la colagenasa es necesario para determinar

la funcionalidad de la enzima producida, ya que esta proteína pudiera encontrarse

enzimáticamente inactiva, lo que no se podría conocer a través de la determinación

única del ARN que la codifica.

Después de 24 h de mantener a las células en cultivo en un medio libre de

suero, el medio de cultivo se recolecta y se determina en éste la actividad de

colagenasa secretada por las células, siguiendo el método descrito por Hasty y

cois. (1986). En breve: se incuba el medio con fibrillas solubles de colágena

radiactiva (marcada con 14C), se adiciona acetato 4-aminofenilmercúrico para

activar la colagenasa latente y se somete a centrifugación para precipitar la

colágena no degradada. Del sobrenadante se toma una alícuota para determinar

por espectrometría de líquido de centelleo la radiactividad residual.

BIBLIOGRAFÍA

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Seyer (1994), "Activation of Ito

Cfí'G

EXPRESIÓN Y

REGULACIÓN DEL GEN

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68 EJEMPLO I

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Nitrocellu-lose". Proc. Nati. Acad. Sel, EUA, 77:5201-5205.

EXPRESIÓN Y .REGULACIÓN DEL GEN 69

INFRAESTRUCTURA Y APOYO TÉCNICO DISPONIBLE

EL INSTITUTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR (IBM) del C.U.C.S., cuenta con las áreas de

trabajo y el equipo de laboratorio que a continuación se describen:

Área de cultivo de células

— Campana de flujo laminar. Labconco mod. Purifier Class II.

— Microscopio óptico. Zeiss.

— Microscopio invertido. Zeiss mod. Axiovert 135.

— Incubadora de C02. Labline.

Área de análisis

— Espectrofotómetro UV-VIS. Beckman mod. DU650.

— Contador de líquido de centelleo Beckman mod. LS6500.

Área de extracción y análisis de ARNy ADN

— Transiluminador ultravioleta. UVP.

— 1 Cámara de electrofóresis.

Área común

— Congelador REVCO. VWR Scientific.

— Refrigerador. Roper.

— Centrífuga Beckman mod. J2-MI.

— Ultracentrííuga Beckman mod. XL-90.

— Centrífuga Hermle mod. ZK 364.

70 EJEMPLO I

El grupo de investigación del Instituto de Biología Molecular está conformado por

especialistas de varias disciplinas, gracias a lo cual se puede abordar un mismo problema

desde diversas perspectivas. Dentro de este grupo se cuentan médicos, farmacólogos,

toxicólocos, bioquímicos, inmunólogos, biólogos celulares y biólogos moleculares.

EXPRESIÓN Y

REGULACIÓN DEL GEN

7\

CALENDARIO DE ACTIVIDADES CUATRIMESTRE 1

Durante el primer cuatrimestre se emprenderán las actividades que a continuación se

describen:

• Adquisición del equipo y material de laboratorio faltante.

En tanto se consiguen, se efectuará el resto de las actividades programadas, en las

cuales no se involucra la necesidad de los mismos.

• Estandarización de las técnicas bioquímicas y moleculares

a utilizar.

Para identificar las variables que pudieran estar involucradas en cada tipo de ensayo y

así lograr una total confiabilidad de los resultados a obtener, se requiere la

estandarización de los mismos bajo las condiciones experimentales de nuestro la-

boratorio.

• Cultivo de líneas celulares.

La base principal de los ensayos a realizar son los cultivos celulares y de aquí la

importancia de estandarizar las condiciones óptimas para el crecimiento de las líneas

celulares a utilizarse. Una vez obtenida la confluencia de las células en las cajas de

cultivo, una alícuota de las mismas se guardará en congelación (-70°C) para mantener

un stock constante de células destinadas a los ensayos subsecuentes.

72 EJEMPLO I


• Efectuar la amplificación de los plásmidos pSV2CAT,

pSVoCAT, p9.12albCAT y pUC19/colagenasa en bacterias en cultivo.

Es necesario contar con la suficiente cantidad de plásmidos para realizar cada uno de los

ensayos de transfección. Para ello se requiere efectuar su amplificación en bacterias en

cultivo (e.g.j E. coli), en las cuales, después de un tratamiento de choque para lograr la

entrada del plásmido a las células, se multiplican por la adición de un antibiótico dado y

posteriormente se recuperen en el centrifugado del lisado de la célula bacteriana.

• Desarrollo de los ensayos preliminares de transfección

de plásmidos a las líneas celulares.

Periodo donde se evaluará la integridad y funcionalidad de cada uno de los elementos

participantes en las reacciones de transfección. Esta etapa es crítica, ya que permite corro-

borar tempranamente la factibilidad y viabilidad de la hipótesis del trabajo postulado.

• Análisis estadístico de resultados.



Una vez establecidas las condiciones experimentales óptimas, se iniciarán los ensayos

bioquímicos y moleculares propuestos para la resolución del problema al que nos hemos

enfocado, los que a continuación se mencionan:

• Transfección del gen reportero cloranfenicol acetiltrans-ferasa (CAT a las líneas

celulares en cultivo).

• Ensayos de actividad de CAT.



• Transfección del gen de colagenasa a células en cultivo.

• Determinación del contenido de ARNm y la actividad de la enzima colagenasa.

• Ensayo de actividades de CAT



• Transfección del plásmido PEPCK/colagenasa a células

HepG2.

74

EJEMPLO I

• Regulación de la expresión del gen de colagenasa.

• Análisis del contenido de ARNm y la actividad de la enzima colagenasa.



• Conclusión de experimentos y en su caso comprobación de resultados con amplias

desviaciones estándar.


• Publicación y divulgación de resultados en foros y revistas nacionales e internacionales.

76 EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA RESPONSABLE

CONCENTRADO DE DATOS CURRICULARES

R.F.C.: AEBJ-570309- Nobilis: Dr. en C. Nombre: Juan Socorro A. Paterno: Armendáriz A. Materno: Borunda Nombramiento: Profesor e investigador titular C. Tiempo completo

Nivel del SNI: 1

Relación de grados obtenidos

GRADO INSTITUCIÓN AÑO

L Universidad Autónoma de Chihuahua 79

M CINVESTAV-IPN 84 D CINVESTAV-IPN 87 D POST-DOC, University of Tennessee 91 D Research Associate, U. of Tennessee 93

Total de tesis dirigidas

Licenciatura: 0 Maestría: 0 Doctorado: 0

Otros datos académicos relevantes: Becario Conacyt para maestría y doctorado, becario NIH (National Institutes of Health, USA) para postdoctorado, receptor de donativos del NIH; SNI nivel I, revisor de las revistas internacionales: Hepatology, Gastroenterology y Life Sciences.

EXPRESIÓN Y

REGULACIÓN DEL GEN

77

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA DR. EN C. JUAN SOCORRO ARMENDÁRIZ BORUNDA

RESPONSABLE RELACIÓN DE PUBLICACIONES

5 últimas publicaciones

Artículo Autores: J. Armendáriz-Borunda, C.P. Simkevich, N. Roy, A.H. Kang y J.M.

Seyer Título del artículo: "Activation of Ito Cells Involves Regulation of AP-1 Binding

Proteins and Induction of Type I Co..." Nombre de revista: Biochemistry Journal Páginas: 817-824 Año: 1994 Volumen: 304 Número:

Artículo; Autores: D. Martínez, J.E, Mullersman, A.F. Purchio, J. Armendáriz y A.

Martínez Título del artículo: "Nonenzymatic Glycosylation of Poly-L-Lysine: A New Tool

for Targeted Gene Gelivery" Nombre de revista: Hepatology Páginas: 1602-1608 " Año: 1994 Volumen: 20 Número: 6

Artículo Autores: J. Armendáriz-Borunda, H. Katay, C. Michael, J.M. Seyer, A.H. Kang

y R. Raghow Título del artículo: "Transforming Growth Factor B Gene Expression is Transiently

Enhanced at a Critical Stage During..." Nombre de tevista: Laboratory Investigation Páginas: 283-294 Año: 1993 Volumen: 69 Número 3

Artículo Autores: K. Katayama, J. Armendáriz-Borunda, R. Raghow y J.M. Seyer Título del artículo: "A Pentapeptide From Type I Procollagen Promotes Extracelluíar

Matrix Production" Nombre de revista: Journal ofBiologkal Chemistry Páginas: 9941-9944 Año: 1993 Volumen:-268 Número:

Artículo Autores: J. Armendáriz-Borunda, K. Katayama y J.M. Seyer Título del artículo: "Transcriptional Mechanism of Type I Collagen Expression are

Diferentially Regulated by Interle..." Nombre de revista: Journal ofBiologkal Chemistry Páginas: 14316-14321 Año: 1992 Volumen: 267 Número: 20

78

EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA SOLICITUD DE APOYO

DESGLOSE

FINANCIERO

AÑO:

1

Cuatrimestre Cuatrimestre Cuatrimestre Total 1 2 3

Gasto corriente Honorarios por servicios profesionales Viáticos Pasajes Gastos de trabajo de campo Ediciones e impresiones Servicios externos y comerciales Cuotas de inscripción Profesores visitantes Becas para proyectos de investigación Artículos, materiales y útiles diversos Documentos y servicios de información Libros Animales para rancho y granja Total gasto corriente

10,00

0

C 0 10,0

00 0 0 0 0 0 0 0 0 c 0 0 0 0 0 6,00

0

6,00

0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

40,75

0

40,750 0 81,5

00 5,000 0 0 5,00

0 5,900 0 0 5,90

0 0 0 0 0 61,65

0

40,750 6,00

0

108,

400

Gasto de inversión Equipo de laboratorio Equipo de cómputo Herramientas y accesorios

Total gasto de inversión: Total solicitado año: 1

59,12

5

59,125 0

118,250 54,60

0

3 0

54,600 0 0 0

0

113,725

0 172,850

281,250

(Nuevos

Pesos)

59,125

EXPRESIÓN Y

REGULACIÓN DEL GEN

79

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA

Y TECNOLOGÍA

SOLICITUD DE APOYO

JUSTIFICACIÓN DE REQUERIMIENTOS

FINANCIEROS

Honorarios por servicios profesionales Importe solicitado:

20,000

El apoyo a este rubro con el monto de N$ 20,000.00 se dedicará al pago de servicios

profesionales de dibujante y fotógrafo, así como para el pago de personal de apoyo

especializado de limpieza y mantenimiento de equipo de laboratorio y de oficina.

Ediciones e impresiones Importe solicitado: 6,000

El apoyo solicitado en este rubro es para solventar los gastos de publicación de

artículos de investigación y divulgación en revistas internacionales.

Artículos, materiales y útiles diversos Importe solicitado:

163,000

El monto solicitado se requiere principalmente para la compra de los reactivos de

laboratorio de calidad en biología molecular o de la mayor pureza disponible, así

como de los compuestos radiactivos, entre los que se cuentan:

80 EJEMPLO I

— vectores (plásmidos) comerciales: pUCl9, PEPCK/ bHG, p9.12albCAT, etcétera,

— enzimas de restricción (EcoRI, Sma I, Hind III, etcétera),

— medios de cultivo para crecer bacterias,

— medios de cultivo para crecer células eucariónticas,

— suero fetal de ternera para cultivo de células,

— antibióticos para medios de cultivo,

— tanques de C02 y aire ultrapuro,

— cloranfenicol marcado con 14C,

— colágena tipo I marcada con 14C,

— acetil CoA,

— reactivos para la extracción de ARN (ARNzol),

— membranas de nitrocelulosa para análisis de Northern blots,

— solventes y reactivos para la cromatografía de capa fina,

— película y emulsión fotográfica para la revelación de radiactividad,

— coctel para líquidos de centelleo,

— reactivos para la preparación de soluciones amortiguadoras, etcétera.

Documentos y servicios de información Importe solicitado: 5,000

Se requiere el monto de N$ 5,000 para el pago de consultas a bases de datos

especializadas como SECOBI, así como para la compra de software de discos compactos

con información específica en el área de biología molecular.

EXPRESIÓN Y

REGULACIÓN DEL GEN

81

Libros

Importe solicitado: 5,900

En este rubro se solicitan 5,900 nuevos pesos para la compra de material

bibliográfico de consulta básica de ediciones actualizadas en el área de biología

molecular y terapia génica, para apoyo didáctico del programa de doctorado de

biología molecular en medicina.

Algunos de los libros que se pretende adquirir son:

— The Liver. Biology and Pathobiology, 3a. ed, T.W. Arias, H. Popper, W.B.

Jakoby, D. Schachter, D. Shafrit, (comps.), Raven Press, Nueva York.

— Gene Expression, Cell and Tissue Specificity M. Karin Ed.,

— Molecular cell biology, 2nd Ed. J. Darnell Jr., H.

Lodish,

Molecular Cloning: A laboratory Manual, 2nd Ed. Vols l,2y3

J. Sambrook, E.E Fritsch y T. Maniatis; Cold Spring Harbor Laboratory,

Nueva York, 1989.

— Genes V

B. Lewin, Ed Oxford University Press, Oxford, Inglaterra, 1994.

— Human Pharmacoiogy: Molecular to Clinical. T. Brody,

M. Llarner, M. Kenneth. 2nd Ed.

—Methods in pharmacoiogy: Molecular and cellular biology of

pharmacological targets. Glossmann H, StriessningJ (Eds).

82 EJEMPLO I

Equipo de laboratorio Importe solicitado: 236,500

Se solicitan $ 236,500.00 en este rubro para adquirir diversos equipos de laboratorio que se

requieren directa o indirectamente para la realización de gran parte de los ensayos

experimentales.

El tanque de almacenamiento de nitrógeno líquido ($ 9,164) se requiere para la

congelación instantánea y la conservación de diversas muestras biológicas por nitrógeno

líquido. En este recipiente se puede almacenar por periodos prolongados el nitrógeno

líquido, en el cual se sumergerán las muestras.

Desionizador de agua ($ 22,750), equipo indispensable para la obtención de agua de alta

calidad, utilizada para la preparación de soluciones.

La máquina de hielo frappé también es un equipo de amplio uso dentro de un

laboratorio; necesaria para la producción continua de hielo, la cual se emplea durante el

desarrollo de experimentos en los que se requiere mantener a temperaturas bajas las

muestras biplógicas.

El pH metro ($ 14,761) es un equipo de medición básico necesario en la preparación de

soluciones amortiguadoras y de medios de cultivo entre otros, en los cuales recae

importantemente la buena funcionalidad de las líneas celulares con las que se pretende

trabajar.

Las cámaras de electroforesis ($ 3,887 c/u) junto con sus fuentes de poder respectivas ($

3,700 c/u) son indispensables para la separación y resolución de las muestras de ARN

sometidas a análisis de Northern lot.

84 EJEMPLO I

Una de las formas de comunicación que cada día va siendo más utilizada por las ventajas que

presenta, es la comunicación electrónica a través de redes computacionales de ámbito local e

internacional, donde la obtención de datos diversos y el establecimiento de comunicaciones

personales interactivas, por decir algunas de las funciones posibles, se ha vuelto una de las

tareas enormemente facilitadas por el uso de este medio.

El Centro de Documentación y de Sistemas de Información (CEDOSI) del Centro

Universitario de Ciencias de la Salud de la U. de G., forma parte de la red de cómputo de la

Universidad de Guadalajara y cuenta con el acceso a la red de cómputo internacional y con

la capacidad para brindar conección a gran número de redes locales dentro de la misma

Universidad.

La formación de una red electrónica local dentro del Instituto de Biología Molecular

conectada al CEDOSI y configurada para satisfacer los requerimientos específicos de

nuestra área de Investigación permitirá el acceso directo a las fuentes de generación de

conocimientos del área, obteniendo, finalmente, un auxilio rápido y efectivo en la in-

vestigación desarrollada por nuestro grupo.

EXPRESIÓN Y REGULACIÓN DEL GEN

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y

TECNOLOGÍA

Equipos de laboratorio Importe solicitado:

236.50

Valor Valor Descripción Cantidad Unidad unitario total

Tanque de nitrógeno theo

20,21 Lt. dimensiones 62.7% 36 1.00 1 9,164

9,164

País de origen: Estados Unidos Valor Unitario en moneda extranjera: Valor total en moneda extranjera: Proveedor: Bioselec, S. R

1,409.90 US Dolar 1,409.90 US Dolar

Dehionizador Barnstead con 4 cartuchos 1.00 1

22,750 22,750

País de origen: Estados Unidos Valor unitario en moneda extranjera: Valor total en moneda extranjera: Proveedor: Casa Rocas

Máquina para hielo Frappe. Marca Cole-Parker

País de origen: Estados Unidos Valor unitario en moneda extranjera: Valor total en moneda extranjera: Proveedor:

País de origen: Estados Unidos Valor unitario en moneda extranjera: Valor total en moneda extranjera: Proveedor: Bio S.A. de R.L.


1.00 1 49,208

49,208


1.00 1 17,222 17,222


86 EJEMPLO I

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y

TECNOLOGÍA

Equipo de cómputo Importe solicitado:

54.6ÍK

Descripción Cantidad Unidad

Valor Valor

unitario total

Drive 1.2 KB 5 1/4 1.00 1 472

472

Proveedor: Capacitación y soluciones en computación y redes (Comlex)

Impresora HP LaserJet II 1.00 1 4,000

4.00C

Proveedor: MHS, S.A. de C.V

Modem Fax 14,400 BPS, Hayes Int 1.00 1 780

780

Proveedor: Hersymac Sistemas

Scanner Genius GS-CI05+color 1.00 1 2,050

2,050

Ptoveedon Hersymac Sistemas

CD Rom Interno Mitsumi doble velocidad 1.00 1

1,590

1,590

Proveedor: Comlex

Servidor Hewlett-Packard 486 DX2/66

Mhz, 20 MB ram, 720 MB 1.00 1 17,680

17,680

Proveedor: Hersymac Sistemas

EJEMPLO II

MODELO DE CONTROL PARA ORGANISMOS DE INVESTIGACIÓN

APLICADA Y DE DESARROLLO TECNOLÓGICO

1 Antecedentes y Justificación Especificar las razones por las que se desea llevar a cabo este proyecto y los beneficios científicos que se espera se deriven del mismo. Señalar los antecedentes que existen en la literatura al respecto relacionando en el texto la bibliografía pertinente. (Anexar hojas).

2 Objetivos y Metas Señalar los objetivos, tanto generales como particulares, así como las metas que se deriven de ellos. (Anexar hojas).

3 Propuesta del plan de trabajo, incluyendo metodología y procedimientos.

(Anexar hojas).

4 Calendario de actividades

Llenar la forma I adjunta. UNA POR AÑO.

5 Resumen del proyecto Llenar la forma II adjunta.

6 En caso de proyectos de riesgo compartido, suministrar la información sobre el oferente y el usuario, así como de la industrialización y comercialización. (Anexar hojas).

7 Cooperación internacional Únicamente para proyectos de este tipo, especifique las acciones en las que se prevé la participación internacional, indicando en su caso las gestiones realizadas y su grado de avance. (Anexar hojas). Incluir cartas de intención de las instituciones con las que se desee colaborar.

8. Incluya en anexos toda la información que considere relevante para la evaluación de su proyecto, además de la aquí solicitada.

IV. VINCULACIÓN CON EL SECTOR PRODUCTIVO DE BIENES O SERVICIOS (En caso de proyectos de desarrollo tecnológicos)

1 INSTITUCIONES, EMPRESAS O PERSONAS QUE ESTÁN INTERESADAS EN EL APROVECHAMIENTO DE LOS RESULTADOS DEL PROYECTO (anexar documentos oficiales

MODELO DE CONTROL PARA ORGANISMOS DE INVESTIGACIÓN 93

2 ENTIDADES QUE ESTÁN DESARROLLANDO ACTIVIDADES SIMILARES O RELACIONADAS CON EL PROYECTO PROPUESTO:

3 EN CASO DE QUE ESTE PROYECTO ORIGINE DESARROLLO(S) O

INNOVACIÓN(ES) INDUSTRIAL(ES), SEÑALE SI EXISTEN (anexar documentación comprobatoria):

V. FORMACIÓN DE RECURSOS HUMANOS

1 Indicar las áreas de especialización, niveles académicos y el número de los recursos humanos que se forman a través del proyecto. (Anexar hojas).

VI. RECURSOS Y PRESUPUESTOS

1 Infraestructura con que cuenta la institución para desarrollar el presente proyecto, tal

Como instalaciones, equipo, materiales, información bibliográfica, etc. (Anexar

hojas).

2 Personal académico y de apoyo con el que cuenta la institución para la realización de

este proyecto. (Anexar hojas),

3 Llenar con cifras expresadas en MILES DE PESOS, las formas III y IV anexas de

PRESUPUESTO TOTAL DEL PROYECTO Y DEGLOSE DEL PRESUPUESTO

REQUERIDO. Tomar en cuenta que del presupuesto total otorgado por CONACyT se

retendrá el 10%, que se entregará después de la recepción de los informes finales

técnicos y financiero.

4 justifica! la necesidad, para la realización del proyecto, de los conceptos incluidos

como participación del CONACyT en las formas de PRESUPUESTO TOTAL DEL

PROYECTO Y DESGLOSE DEL PRESUPUESTO REQUERIDO. (Anexar hojas).

PERFIL DE FACTIBILIDAD SI

ESTUDIO DE MERCADO SI

DISPONIBILIDAD DE MATERIA PRIMA SI

ESTUDIOS DE PREINVERSIÓN SI

EJEMPLO II

III. PROTOCOLO

ANTECEDENTES

Una de las características de nuestra sociedad moderna es el predominio que han tomado

las organizaciones en su estructura; y tan es así, que se reconoce que nuestra sociedad es

una sociedad de organizaciones (Etzioni, 1972; Resenos, 1976). Esto se debe, en buena

medida, a que, a través de las organizaciones, el hombre ha encontrado la forma de realizar

las grandes empresas que demandan las necesidades modernas; casi para atender cualquiera

de ellas se requiere de una organización, incluso para realizar investigación científica y

tecnológica requerimos de organizaciones.

Una característica común a las organizaciones es que todas ellas son administrables

(Resenos, 1976). Por ello la actividad de administración ha cobrado tanta importancia en

nuestros días. Dentro de este proceso administrativo está el proceso del control de gestión.

Si bien todas las organizaciones son administrables, lo cierto es que no todas se

administran en la misma forma. No es lo mismo administrar fábricas de calzado, de autos,

de televisores, que administrar empresas cinematográficas, de publicidad, firmas de

ingeniería u organismos de investigación científica y tecnológica (Mintzberg, 1982;

Perrow, 1967). La característica común de las primeras es que son


organizaciones de producción masiva, en serie, donde el proceso de control pone énfasis

en el cumplimiento de las rutinas preestablecidas, en el logro de las cuotas de producción y

ventas convenidas, en general, está todo calculado y predeterminado para realizarse con

una tecnología que estandariza las actividades y que el control cuida de que así suceda.

En cambio, la característica común de las segundas es que producen artículos únicos

donde se ha puesto en juego la creatividad, la innovación, la originalidad, y no hay una

tecnología conocida, ésta se va adaptando o creando, a la vez que se produce el artículo,

por lo tanto, el control descansa en la adaptación mutua de los expertos que trabajan en

forma independiente para perfeccionar sus habilidades, de tal manera que propicie el

empleo de los medios de enlace. La autoridad no se ejerce en la forma tradicional de las

empresas de producción masiva, sino más bien, se trata de que los expertos ocupen el lugar

que les corresponde dentro de otros equipos y la potestad, o el control están basados en la

experiencia, no en la autoridad lineal administrativa. En esencia, las operaciones se

autodirigen y se autocontrolan, la administración apoya el cambio, la innovación, la

creatividad, la cooperación, por lo cual generalmente se controla el dilema de la eficacia a

través de la ineficiencia y en atención a las necesidades de los expertos y los costosos

medios de enlace. Parece que nada puede realizarse si antes no se ponen todos de acuerdo,

es decir, se controla, lo que ocurre sólo una vez. Estas organizaciones, que llamaremos

creativas, son a las que los investigadores

96 EJEMP

LO II

han tenido menos oportunidad de estudiar. (Mintzberg, 1982:13).

En la teoría de control se han desarrollado estructuras teóricas útiles, como son los lazos

de retroalimentación hipotétizados en la cibernética (Wiener, 1948), que en su forma

consta de cuatro elementos: normas o metas de referencia, sensor o función de entrada,

comparador, y ejecutor o función de salida (Powers, 1973). Para ilustrar este modelo,

frecuentemente se toma como referencia el ejemplo del termostato que controla la

temperatura de una habitación. Este es un modelo mecánico simplista. En los sistemas de

control humano, la retroalimentación involucra algo más que un sensor mecánico del

ambiente, ya que las metas y normas humanas no son tan inflexibles y tan predeterminadas

y casi siempre hay alternativas para reducir las discrepancias (Lord y Hanges, 1987).

En la teoría del comportamiento, la teoría de control tiene dos elementos primarios: el

cognoscitivo y el afectivo. El componente cognoscitivo consiste en metas internalizadas, el

procesamiento de la información relativa al propio estado en curso y a la comparación de

ese estado con las metas. El componente afectivo emerge de las discrepancias percibidas

entre los propios deseos y los estados en curso, y la conducta es iniciada desde el propio

deseo de resolver aquellas discrepancias (Carver y Scheier, 1982. En Klein, 1989). Las

conductas complejas se intenta explicarlas a partir de la jerarquía de los lazos de

retroalimentación, donde dada una cadena de metas, submetas y normas, las discrepancias

de la retroalimentación de orden elevado pa-


san a ser las normas de orden bajo. Por ejemplo un plan jerárquico para aumentar las

ventas a través de incrementar los contactos (Klein, 1989).

Varios autores han reconocido el poder explicativo de la teoría del control y la han

usado para examinar la conducta en las organizaciones (por ejemplo, Campion y Lord,

1982; HollenbeckyWilliam, 1987; Tayloro, Fisher eligen, 1984). No obstante que alguno

de estos autores ha trabajado para elaborar un modelo de la teoría de control de la motiva-

ción del trabajo, un examen de estos modelos revelará algunas inconsistencias. El

problema no es que los modelos sean incongruentes con los principios de la teoría de con-

trol o con los hallazgos empíricos, sino que las diferentes perspectivas los limitan para

proporcionar un modelo comprensivo. Además, la inconsistencia de las suposiciones y

tratamientos, no permiten aterrizar en un modelo coherente a través de la simple mención

de la literatura disponible (Klein, 1989).

La teoría del conjunto de metas que ha adoptado la teoría del control, proporciona

explicaciones importantes de aspectos, tales como: el origen de las metas personales, la

importancia de las metas comprometidas, las formas de caracterizarlas, incluyendo la

existencia de la interdependencia y las acciones recíprocas de submetas, la competencia de

metas múltiples, la jerarquización de las metas, las tareas estratégicas y la modificación de

metas sobre la marcha (Campion y Lord, 1982).

La teoría del aprendizaje social aborda, más que una teoría del control,

fundamentalmente la autorregulación. Sin

98 EJEMP

LO II

embargo, existen paralelismos entre las dos perspectivas, incluyendo las similitudes entre

expectativas de eficacia y expectativas de resultados. De acuerdo con la teoría del

aprendizaje social, la motivación involucra un proceso cognoscitivo en el cual las metas

son comparadas con conocimiento de la propia actuación (Bandura, 1977; Bandura y

Cervone, 1983). Además, las discrepancias negativas son percibidas como lo que crea

disatisfacción y motiva cambios correctivos (Klein, 1989).

La teoría de la satisfacción aborda las reacciones afectivas que predice la teoría de control,

y que dependen primeramente de la dirección y magnitud de la discrepancia actua-

ción-meta y la importancia de la meta (Taylor etai, 1984). La retroalimentación indica que

si uno va más allá de la norma, esto producirá reacciones positivas; pero si se está abajo de

la norma, resultarán efectos negativos. Lo más valioso de la meta es la fuerza de la

reacción. Observando las atribuciones, las reacciones emocionales pueden ser amplificadas

cuando el éxito o fracaso es atribuido a causas internas, y, en cambio, atenuadas cuando se

atribuye a causas externas.

La teoría de control de gestión o administrativo está más allá de verse como un simple

mecanismo de regulación, aunque es probable que muchos de los administradores que

desconocen la teoría tengan este concepto limitado. El desarrollo de un modelo de control

incluye una nueva estructura conceptual que abarque los conceptos de regulación;

autorregulación por aprendizaje, metas, implicaciones, categorías, combinaciones,

complejidad, y sus interacciones


de retroalimentación en sus diversas manifestaciones e implicaciones (Resenos, 1974,

1976); de efectos afectivos; de motivaciones; de otros constructos teóricos sobre proce-

samiento de información, aprendizaje social, criterios de jerarquía y discriminación. Todo

esto para un modelo general de control de gestión.

Sin embargo, lo anterior aún no es suficiente para un modelo de control de gestión de

organismos de investigación científica y tecnológica, porque el concepto de control va más

allá de la verificación con lo planeado; se trata de controlar la creatividad, la capacidad

innovadora, y muchas veces la genialidad; y en este sentido, cuando menos, el matiz

restrictivo, y a veces coercitivo que tiene el control en las organizaciones de producción

masiva, da la impresión de que desaparece para transformarse y adquirir énfasis sólo en el

apoyo para facilitar y promover la innovación y la creatividad. Cómo se miden, cómo se

evalúan, o al menos cómo se pueden apreciar, son parámetros o criterios que aún no han

sido suficientemente elaborados, y menos aún se tienen medios, procedimientos, o

criterios para apoyar y fomentar la creatividad y la innovación.

JUSTIFICACIÓN

Este proyecto tiene dos propósitos fundamentales:

1) Proporcionar a los directores y gerentes de organismos de investigación aplicada y de

desarrollo tecnológico un

100 EJEMPLO II

modelo de gestión que contenga los elementos clave y de aplicación más general

para la administración de estas instituciones, de manera que permita a esos directivos

conducir y retroalimentar el funcionamiento, crecimiento y desarrollo de estos

organismos de investigación, en forma más específica y con mejores resultados. Con

ello se pretende que el modelo de control se constituya en un elemento adhoc que

apoye el incremento de la racionalidad administrativa. Procede lo anterior a partir de

su enlace con la planeación estratégica, disminuyendo a la vez las extrapolaciones

indiscriminadas de modelos y métodos de control de organizaciones que operan

dia-metralmente opuestas, y que, por lo mismo, son inadecuados, y cuya aplicación,

en lugar de controlar para el logro de los objetivos de la investigación, entorpecen su

funcionamiento y sus operaciones. 2) Aportar al acervo de la práctica y del

conocimiento científico de la administración, los criterios, indicadores y parámetros

que permitan controlar, orientar y fomentar la productividad, la creatividad y la

innovación de los organismos dedicados a la investigación aplicada y del crecimiento

tecnológico, en forma tal, que estos elementos propicien el desarrollo de lo que

miden y evalúan.

BIBLIOGRAFÍA

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MODELO DE CONTROL PARA ORGANISMOS

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OBJETIVOS

1. Identificar las características distintivas que presentan los organismos mexicanos de

investigación aplicada y de desarrollo tecnológico que inciden de manera preponderante

en la estructura de los sistemas de control que actualmente están operando.

2. Determinar el estado actual del control de gestión en la praxis de los organismos de

investigación.

3. Identificar los elementos (normas, estándares y parámetros) más generalizados del

control de gestión de los organismos de investigación.

4. Integrar un modelo generalista de control de gestión que considere las características y

el funcionamiento distintivo de este tipo de organismos.

5. Adaptar, integrar y desarrollar algunos métodos y procedimientos fundamentales que

apoyen la realización.

METAS

1.1 Reunir una muestra significativa de organismos de investigación aplicada y de

desarrollo tecnológico del sector público en el área metropolitana.

1.2 Identificar la estructura de organización y de funcionamiento.

i

1.3 Identificar las actividades distintivas.

1.4 Identificar los problemas operativos principales de control de gestión.

1.5 Conocer cómo se da el control de gestión o, en su caso, cómo se dan las funciones de

control, qué aspectos cubren, qué elementos utilizan, qué actividades realizan y a la

vez detectar cómo deberían ser para las instituciones que no lo tienen establecido.

1.6 Determinar si los elementos identificados en el punto 2.1 integran un modelo, un

sistema o un procedimiento de control.

1.7 Derivar, a partir de los resultados del punto 2.2, los modelos de control de gestión que

funcionan en los organismos de investigación, e integrar el modelo de control de

gestión de la praxis detectada.

1.8 Determinar sus alcances y limitaciones.

1.9 Integrar un modelo de control de gestión teórico derivado de la revisión bibliográfica.

1.10 Contrastar el modelo de control teórico contra el de la praxis.

1.11 Determinar los factores o fenómenos limitantes o po-tencialmente limitantes del

funcionamiento de los modelos de control.

PLAN DE TRABAJO

Este plan de trabajo se apoya en las siguientes consideraciones sobre el control de gestión:

110 EJEMPLO II

1.2 Desarrollos teóricos y empíricos de modelos de control generales.

1.3 Desarrollos teóricos y empíricos de modelos de control específicos para los

organismos de investigación y para otras organizaciones creativas (ejemplo, firmas de

ingeniería, empresas de consultoría, compañías publicitarias, empresas

cinematográficas, etc.).

1.4 Primera aproximación a un modelo de control teórico para organismos de

investigación.

1.5 Publicación de avances, participación en congresos o simposium.*

2. Selección de una muestra de organismos de investigación públicos del área

metropolitana

2.1 Se obtendrá un censo de organismos de investigación.

2.2 Se clasificará bajo diversos criterios.

2.3 Se integrará la muestra con el procedimiento de entrevista directa dirigida por alguna

de las clasificaciones del punto 2.2.

2.4 Publicación de avances, participación en congresos o simposium.*

3. Diseño del cuestionario

3.1 Se estructuran preguntas concretas sobre aspectos operativos, sistemas, métodos,

procedimientos, indicadores, estándares, etc., a partir de la primera aproximación a un

modelo de control de gestión (punto 1.4).

CALENDARIO DE ACTIVIDADES AÑO DE 1991-1992

MODELO DE CONTROL PARA

ORGANISiMOS DE INVESTIGACIÓN

115

RESUMEN DEL PROYECTO (Ceñirse a los espacios en cada

rubro)

Antecedentes:

Las organizaciones de investigación aplicada y de desarrollo tecnológico son diferentes a

las organizaciones de producción masiva o en serie. En las organizaciones de producción

masiva las cuotas de producción y ventas están predeterminadas, se sabe que se va a

hacer con la materia prima, qué, y cuánto podemos producir con ella. En las

organizaciones de investigación existe incertidumbre y riesgos de difícil previsión y eva-

luación sobre lo que se quiere lograr y cómo se va a lograr, producen artículos únicos

provenientes de la creatividad y de la innovación. Por lo anterior sus modelos, sus sistemas

administrativos y de control son o deberían ser diferentes.

Justificación:

Proporcionar a los directivos de organismos de investigación un modelo de control de

gestión específico para este tipo de instituciones que contenga criterios, indicadores y

parámetros que dirijan, retroalimenten y fomenten la creatividad y la innovación.

Objetivos:

• Tipificar a los organismos de investigación aplicada y de desarrollo tecnológico en

atención a las características

116 EJEMPLO II

distintivas que inciden en la estructura de los sistemas de control de gestión o las

funciones que practiquen como control de gestión.

• Determinar el estado actual del control de gestión de los organismos de investigación del

área metropolitana.

• Identificar los elementos de control de gestión de aplicación general.

• Integrar un modelo general de control de gestión para organismos de investigación.

• Desarrollar métodos y procedimientos generales para el control de gestión.

Metas:

• Conocer el control de gestión de diversos organismos de investigación.

• Analizar los elementos que caracterizan a cada modelo de control, teóricos y prácticos.

• Identificar normas y parámetros de trabajo, teóricos y prácticos.

• Identificar métodos y procedimientos de trabajo, teóricos y prácticos.

Metodología:

Investigación bibliográfica e investigación empírica a través de cuestionarios. Validación

del modelo de control administrativo en su caso real.


CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA YTECNOLOGÍA

Circuito Cultural Universitario 04515 México, D.F.

Por medio de la presente, me permito manifestar a ustedes que el Instituto de

Investigaciones Eléctricas tiene interés en aprovechar los resultados del proyecto de

investigación propuesto por el Dr. Edmundo Resenos Díaz, de la Sección de Graduados de

la Escuela Superior de Comercio y Administración del IPN, bajo el título: "MODELO DE

CONTROL DE GESTIÓN PARA ORGANISMOS DE INVESTIGACIÓN APLICADA Y

DESARROLLO TECNOLÓGICO".

Consideramos que la información y la metodología que se produzcan a través de dicho

proyecto nos serán de utilidad para probar, enmarcar y complementar la infraestructura

que el HE ha venido desarrollando, internamente, para integrar sus sistemas de seguimiento

y análisis institucional.

Asimismo, estimamos que el desarrollo de estudios y modelos de control de gestión,

como los que se propone abordar el proyecto de referencia, presentan la posibilidad de

generar criterios y herramientas de alcance global, susceptibles de coadyuvar en el

reforzamiento de la administración de las instituciones de investigación en el medio mexi-

cano.

I 1 : EJEMPLO II

V. FORMACIÓN DE RECURSOS HUMANOS

Ma. Anahí Gallardo Velázquez Tesis doctoral

Tema propositivo: Las políticas gubernamentales y su incidencia en el control de gestión.

Carlos Manuel García Velasco Investigador asociado y tesista

doctoral

Tema propositivo: El control de gestión de los desarrollos tecnológicos.

Alejandro Ramírez Iglesias Tesis doctoral

Tema propositivo: Indicativos de evaluación de gestión de la innovación en el diseño de

prototipos.

José Romualdo Rosas Vázquez

Tesis doctoral

Tema propositivo: Metodología para tipificar productos y servicios tecnológicos en centros

de investigación y desarrollo.


119

VI. RECURSOS Y PRESUPUESTOS

Infraestructura Instalaciones

Cubículos con mobiliario adecuado Equipo

Equipo audiovisual

1 Proyector de películas de 8 mm. 4 Proyectores de

transparencias 4 Proyectores de cuerpos opacos

Información bibliográfica

8300 Libros del área de la administración o relacionados con esta

área.

148 Títulos de publicaciones periódicas del área de la administración

o relacionadas con la misma.

DESGLOSE DEL PRESUPUESTO REQUERIDO

(En miles de pesos)

SI EL PROYECTO CONTEMPLA MÁS DE TRES AÑOS, USAR UNA HOJA

ADICIONAL

Guia protocolos de investigacion

Education

Transcript of Guia protocolos de investigacion