UNIDADES TECNOLGICAS DE SANTANDER DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BSICAS

INFORME DE LABORATORIO DE BIOLOGA

Comprobar la presencia de algunas molculas de importancia biolgica en muestras frescas.

Identificar algunas biomolculas utilizando reactivos qumicos.

INTRODUCCIN

Todos los organismos vivos realizan actividades fsicas como trabajar, estudiar correr etc. las cuales estn

asociadas a funciones qumicas en su organismo. La suficiente energa y sustancias necesarias para

realizar dichas actividades es sintetizada en algunos casos por el cuerpo y en otros casos es adquirida por

medio de alimentos. Estos compuestos qumicos se denominan biomoleculas orgnicas e inorgnicas las

cuales estn presentes en los seres vivos para llevar a cabo procesos importantes como la conservacin y

produccin de energa, construccin y mantenimiento de tejidos, proteccin y sostenimiento de los rganos

y el metabolismo del organismo.

En este laboratorio se identific las protenas, lpidos, carbohidratos, cidos nucleicos y sales presentes en

muestras orgnicas e inorgnicas como agua, albmina, leche, extracto de papa, extracto de hgado,

extracto de semilla, almidn glucgeno, algodn, bebida hidratante y suero pedialyte, adems se identific

la solubilidad de la mantequilla, el aceite de cocina y el aceite oleico en muestras de agua, etanol, ter de

petrleo y diclorometano. Utilizando para esta identificacin y diferenciacin de biomoleculas los reactivos

de Benedict, Molisch, Lugol y Biuret las cuales arrojaron pruebas positivas o negativas para cada prctica

realizada.

MARCO TEORICO

Las biomolculas orgnicas se pueden identificar a partir de una serie de reacciones qumicas, las cuales

pueden llevarse a cabo en el laboratorio; para ello necesitamos adquirir conocimiento frente a los reactivos

que hacen posibles desarrollar estos experimentos a cabalidad y con xito.

La prueba con el reactivo de Benedict sirve para identificar azcares reductores tales como la lactosa,

IDENTIFICACIN

TITULO DEL EXPERIMENTO

RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS

GRUPO: E 135 DOCENTE: HUGO CARVAJAL

AUTOR (ES) DANNY MANUEL RODRIGUEZ FRANCY BALLESTEROS ERIKA SILVA MARTIN QUINTERO JHAIR OVIEDO

Comparar los principales grupos de compuestos orgnicos con relacin a su composicin qumica y funcin

OBJETIVOS DE LA PRCTICA

glucosa maltosa y celobiosa, presentes en los carbohidratos los cuales a su vez, son biomolculas orgnicas

presentes en los seres vivos, esta biomolcula es de gran importancia para el organismo ya que es la fuente

primaria de energa.

El reactivo de Benedict esta formado qumicamente por:

Sulfato cprico, citrato de sodio, carbonato anhidro de sodio y NaOH para alcalinizar el medio. Al mezclarse

este reactivo con el azcar se presenta una reaccin de oxidacin. El cobre II de disolucin acuosa y de

color azul se reduce a cobre I, el cual se precipita como xido de cobre I de color rojo.

El reactivo de Molisch reacciona con los carbohidratos efectuando una deshidratacin catalizada la cual se

produce por el cido sulfrico presente en este reactivo. Este reactivo es una disolucin de alcohol al 15%

de a-naftol en etanol, produce una reaccin de condensacin al reaccionar con el furfural (es un aldehdo

que se obtiene de desechos agrcolas) para producir un compuesto de color prpura.

El reactivo de Lugol es una disolucin de Yodo y Yoduro de Potasio es utilizado como indicador de prueba

de yodo, que permite identificar polisacridos como los almidones, glucgeno y algunas dextrinas, sin

embargo este no reacciona con molculas de azcar simple como la fructosa o lactosa. En el caso de la

identificacin de almidn con el Lugol, al mezclase esta nueva solucin toma un color azul intenso, el que

manifiesta la presencia de almidn.

El reactivo de Biuret est compuesto de hidrxido de potasio y sulfato cprico junto con tartrato de sodio y

de potasio, presenta un color azul y cambia a violeta cuando se encuentran protenas y tiende a rosa

cuando se combinan polipptidos de cadena corta.

Materiales

Aceite de cocina Solucin de agua de papa naftol Solucin de Lugol (Kl) Solucin de Sudan Solucin de Biuret Solucin de albumina 1% Solucin de almidn 1% Solucin de glucosa 10% Acido sulfrico (H2SO4) Acido ntrico 3M Hidrxido de sodio 3M Agua destilada Mechero Tubos de ensayo Pinzas Gradilla Pipetas Mortero

PROCEDIMIENTOS

1.- Reconocimiento de Carbohidratos

FIN

Se utilizaran 2 mtodos uno general para reconocer cualquier tipo de carbohidratos (test de molish), y otro

para reconocer exclusivamente almidn (test de lugol o yodo)

a) Test de Molish

Procedimiento

Tubo (1): Se le agrega 2ml de solucin de almidn

Tubo (2): Se le agrega 2ml de solucin de glucosa

Tubo (3): Se le agrega 2 ml de agua destilada

Luego se le agrega 3 gotas de solucin alcohlica de naftol al 1%, a los 3 tubos, se agitan y luego se

depositan los tubos en la gradilla.

Se le agrega 1ml de acido sulfrico (H2SO4) por las paredes de cada tubo.

Observaciones:

Tubo (1): En este tubo con solucin de almidn se observan 2 lquidos de densidades diferentes, el ms

espeso, transparente violceo en el fondo,

y el blanquecino arriba. Tambin al agregar el acido sulfrico se formo un anillo de color violeta en la interfaz

entre el lquido blanquecino y el liquido transparente violceo.

Tubo (2): En este tubo con solucin de glucosa se observa al agregar el acido sulfrico un anillo, pero ms

grueso que el tubo (1) y de un color morado en los dos tercios inferiores del tubo. El liquido que se encuentra

tanto abajo como arriba del anillo es transparente

a- Carbohidratos en general

Muestras

Adicionar

Agregar 2 ml

respectivamente a

cada tubo

3 gotas reactivo

de Molish

Marcados con

el nombre de

cada muestra 8 tubos de ensayo

Agua, Albmina, Leche,

Extracto de hgado papa

y semillas, pedacitos de

papel y Almidn

Inicio

Adicionar paredes

de los tubos

Mezclar

1 ml de H2SO4

Observar y tomar

resultados

Lentamente y

no mezclar

Tubo (3): Al agregar el acido sulfrico no se observa cambio alguno en la solucin, se sigue viendo un liquido

transparente.

b) Test de Lugol o Yodo. Reconocimiento de almidn

Procedimiento

Tubo (1): se le agregan 2ml de solucin de almidn

Tubo (2): se le agregan 2ml de agua de papas

Tubo (3): se le agregan 2ml de solucin de glucosa

Tubo (4): se le agregan 2 ml de agua destilada

Luego a cada tubo se le agrega 1 gota de Lugol

Se agitan suavemente.

Observaciones

Tubo (1): En este tubo con almidn al agregar la solucin de Lugol, el lquido se torna de un color azul oscuro.

Tubo (2): en este tubo con agua de papas al agregar la solucin de Lugol tambin se torna de un color azul

oscuro.

Tubo (3): En este tubo que contiene glucosa al agregar el Lugol se torna de color amarillo.

Tubo (4): este tubo que contena agua destilada al agregar el Lugol se torna de color amarillo.

CARBOHIDRATOS GENERALES

Reactivo de Molish 3 gotas + 1ml

H2SO4

+( Color azul-violeta intenso)

Muestra (2ml) Resultados

Agua + solucin coloidal

Leche + solucion colloidal/

estado gel

Albumina + solucion colloidal/

estado gel

Higado + solucion coloidal

Papa + solucion coloidal

Semilla + solucion coloidal

Papel + solucion colloidal

Almidon + solucion coloidal

2.- Reconocimientos de Lpidos.

Test de Sudn.

Procedimiento.

Tubo (1), (2), (3) se le agregan1,5 de agua

Luego a los 3 tubos se le agregan 20 a 30 gotas de Sudn y se agitan vigorosamente

Se dejan reposar

A continuacin se le agregan:

Tubo (1): 1 ml de aceite de comer

Tubo (2): 1 ml de macerado de almendras sin cascaras

Tubo (3): 1 ml de agua destilada

Se agitan suavemente y se les dejan reposar por 30 segundos.

Observaciones.

Primero al agregarle sudan los tres tubos que contenan agua destilada esta agua incolora se tie de un

color rojo oscuro luego

Tubo (1): se observa dos lquidos de densidades distintas, el lquido aceitoso se ubica superiormente, es de

color amarillo rojizo y sobre este hay un delgado anillo ms oscuro en la superficie. El otro liquido esta abajo

y es de color rojo oscuro.

Tubo (2): la mezcla con las almendras molidas resulta de un color rosado y se ve de una consistencia espesa

y en la superficie una pequea franja ms oscura de color rojizo.

Tubo (3): en este el colorante se disolvi homogneamente por toda la solucin quedando de un color rojo

oscuro.

3.- Reconocimiento de Protenas

Test de Biuret

Procedimiento:

Tubo (1): se le agregan 2ml de solucin de almidn

Tubo (2): se le agregan 2ml de solucin de albumina

Tubo (3) se le agregan 2ml de agua destilada.

Luego se le agregan a los 3 tubos 2ml de reactivo de Biuret

Observaciones.

Tubo (1): al agregar el reactivo no vemos ningn cambio de color el lquido sigue siendo blanquecino

Tubo (2): en este si se observa un cambio

de color en el fondo donde se ve que toma un color violeta claro

Tubo (3): con el agua destilada tampoco se observa un cambio de color sigue siendo el lquido transparente

4.- Desnaturalizacin de Protenas:

Efecto de la Temperatura

Procedimiento

Tubo (1): se le agregan 2ml de solucin de almidn

Tubo (2): se le agregan 2ml de solucin de albumina

Luego se calientan ambos tubos flamendolos por el mechero

Observaciones

Tubo (1): Antes de someterlo a calor el almidn se observaba de un tono blanquecino. Despus del calor se

sigui viendo blanquecino.

Tubo (2): Antes de aplicarle calor la albumina se observaba transparente y espesa. Luego de aplicarle calor

se volvi blanquecina quedando como un residuo en el fondo ms blanco

Efecto del pH

Procedimiento

Se colocan 2ml de albumina en los tubos (1) y (2)

Luego se deja escurrir por las paredes

Tubo (1): acido ntrico (HNO3)

Tubo (2): hidrxido de sodio (NaOH)

Observaciones

Tubo (1): Tras agregar cido Ntrico a la Albmina observamos que se forma una especie de anillo color

blanco en medio de la solucin y en el fondo adquiere un color blanquecino amarillento claro.

Tubo (2): Tras agregar Hidrxido de Sodio observamos que la Albmina adquiere un leve tono blanco, pero

sigue siendo transparente.

RESULTADOS

1) Reconocimientos de carbohidratos

Test de Molish

Tubo (1):

Este tubo con almidn dio positivo al test de molish, ya que se forma un anillo de un color violeta claro en la

zona donde se separan los dos lquidos.

Tubo (2): Este tubo con glucosa tambin dio positivo al test de molish, ya que tambin se forma una anillo

pero ms grueso y de color violeta oscuro en los dos tercios inferiores del tubo.

Tubo (3): en este tubo con agua destilada dio negativo ya que no se observa cambio alguno en el color.

Test de Lugo o Yodo:

Tubo (1): Este tubo con almidn da como resultado positivo debido a que al agregar la solucin de Lugol, el

lquido se torna de un color azul oscuro.

Tubo (2): en este tubo con agua de papas al agregar la reaccin con Lugol tambin resulta positiva ya que

la solucin se torna de un color azul oscuro.

Tubo (3): En este tubo que contiene glucosa al mezclarla con el Lugol se torna de color amarillo por lo cual

la reaccin es negativa

Tubo (4): este tubo que contena agua destilada al agregar el Lugol se torna de color amarillo por lo cual

tambin da negativo.

2) Reconocimientos de Lpidos.

Tubo (1): En este tubo se observan dos lquidos de densidades distintas, en donde el Lugol se queda arriba

observndose como una pequea franja junto al aceite por lo que da positivo.

Tubo (2): esta tambin da positivo ya que sobre la mezcla con almendras se visualiza una pequea franja

de Lugol ms oscura (rojiza) que la muestra en general (rosada).

Tubo (3): El agua destilada con el sudan se disuelve homogneamente no reacciona, por lo que la reaccin

es negativa.

3) Reconocimiento de Protenas

Test de Biuret

Tubo (1): la reaccin con almidn es negativa ya que no se aprecia cambio alguno.

Tubo (2): esta reaccin con albumina da positiva debido a que se observa un cambio de color (violeta).

Tubo (3): esta reaccin con agua destilada tambin es una reaccin negativa, ya que tampoco se observa

cambio alguno.

4) Desnaturalizacin de Protenas:

Efecto de la Temperatura

Tubo (1): la reaccin da negativa al aplicarle calor ya que no se observa cambio alguno.

Tubo (2): la reaccin da positiva ya que al aplicarle calor se observo que cambia de una solucin

transparente a una solucin blanquecina.

Efecto del pH

Tubo (1): La reaccin es positiva ya que tras agregar el acido ntrico en la albumina se forma un anillo de

color blanco en medio de la solucin.

Tubo (2): Tras agregar Hidrxido de Sodio observamos que la Albmina sigue siendo transparente pero

adquiere un leve tono blanco por lo cual la reaccin tambin es positiva pero ms dbil.

DISCUSION Y CONCLUSION:

DISCUSION:

De acuerdo a los experimentos realizados en este laboratorio, pudimos identificar diferentes biomolculas.

Para identificar Carbohidratos en general ocupamos el test de molish en el que los polisacridos y disacridos

se hidrolizan con acido sulfrico concentrado hasta monosacridos y se convierten en derivados del furfural

o 5 hidroximetil furfural los cuales reaccionan con -naftol formando un color prpura violeta, como es el

caso de las

reacciones positivas a carbohidratos de la glucosa y el almidn, en cambio el agua destilada como no es un

carbohidrato reacciona negativamente a esta prueba. Luego para identificar un tipo de carbohidrato

especficamente el almidn ocupamos el test Lugol o Yodo, que contiene una mezcla de yodo y yoduro, lo

cual permite reconocer polisacridos, particularmente el almidn por la formacin de una coloracin azul

violeta intensa y el glicgeno y las dextrinas por formacin de coloracin roja. Este test dio positivo o sea se

tio de azul violeta intenso la reaccin con almidn y el agua de papas porque ambos contiene polisacridos

y no poseen enlaces glucosdicos, en cambio la glucosa que es un monosacridos y el agua destilada dieron

negativo.

Para el reconocimiento de lpidos ocupamos el test de Sudan

La caracterstica comn a todos los lpidos es que son insolubles en agua y solubles en disolventes

orgnicos como la gasolina, benceno, xilol, cloroformo, entre otros. Cuando se mezcla agua y aceite y se

agita la mezcla se forma una emulsin transitoria. Esto significa que si se deja la mezcla reposar unos

instantes, las gotas de aceite, de menor densidad, suben y se unen entre s, formndose dos capas, la

superior de aceite y la inferior de agua comprobndose su insolubilidad en agua, como lo que ocurre en la

reaccin con aceite de cocina en el cual se separa el aceite del agua destilada, y lo mismo ocurre en la

reaccin con almendras, ya que al molerlas se le extrae el aceite quedando este en la superficie. En cuanto

a su tincin, los lpidos se colorean selectivamente de rojo -anaranjado con el colorante Sudn, lo que

tambin ocurri con el aceite y las almendras, ya que el sudan es afn con los lpidos. En cambio el agua

destilada no tiene ninguna reaccin con el sudan porque esta no contiene lpidos por lo que el sudan se

disuelve homogneamente en este.

Para reconocer protena ocupamos el reactivo de Biuret que est formado por una disolucin de sulfato de

cobre en medio alcalino, este reconoce el enlace peptdico de las protenas mediante la formacin de un

complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que

forma parte de los enlaces peptdicos, lo que produce una coloracin rojo-violeta. Como lo que se observa

en la reaccin con albumina que es una protena simple la cual reacciona con el Biuret tindose de color

violeta, en cambio el almidn que es un polisacrido y el agua destilada no reaccionan con el Biuret.

En la desnaturalizacin de protenas ocupamos el efecto de la temperatura y del pH. Debido a que las

protena presentan una disposicin caracterstica en condiciones fisiolgicas, pero si se cambian estas

condiciones como temperatura, pH, etc. pierde la conformacin y su funcin, proceso denominado

desnaturalizacin. Como lo que se observa en la reaccin al someter la albumina a una temperatura elevada

se ve que esta se coagula, porque la temperatura aumentada al actuar sobre la protena la desordenan por

destruccin de sus estructuras secundaria y terciaria. Esta coagulacin tambien se observa por

desnaturalizacin qumica al someter la albumina a acido ntrico. En cambio al someter el almidn al calor

no se observan cambios porque este no es una protena, es un polisacrido. Con el hidrxido de sodio la

protena se coagula levemente, lo quiere decir que pierde sus propiedades pero no tan fuerte como es con

el acido ntrico.

CONCLUSION:

Luego de los diferentes test aplicados a las distintas soluciones, aprendimos a reconocer las caractersticas

qumicas y fsicas de cada biomolculas, identificando por ejemplo, molculas del tipo carbohidrato, lpidos,

molculas del tipo proteico, etc.

Aprendimos acerca de la desnaturalizacin de las protenas tras el efecto de la temperatura, tomando como

ejemplo los casos del almidn y la albmina y as tambin el efecto pH de sta ltima luego de agregarles

cido Ntrico e Hidrxido de Sodio a dos muestras de la misma para observar as los efectos de cada cual.