[Lab] Microbiología - DX Micológico

8/10/2019 [Lab] Microbiologa - DX Micolgico

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Setas

F ilamentosos= Mohos

Levaduras


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Ascomycota

(ascomicetes)

Zygomycota

(zigomicetes)

Basidiomycota(basidiomicetes)

Deuteromycota(hongosimperfectos), no se lesconoce ciclo de

reproduccin sexual

Chytridiomycota

(quitridiomicetes)


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Clulas eucariotas: Ncleo La mayora tienen pared

celular de quitina,mananos, glucanos.

Algunas sonencapsuladas, inmviles,poseen esterolesen sumembrana citoplasmtica

En la naturaleza suelenser saprofitos.

Existen unas cuarentaespecies patgenas parala especie humana.


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Modalidades de reproduccin

Asexual o imperfecto Anamorfo

Sexual o perfecto Teleomorfo

Sexual y Asexual (Anamorfo y Teleomorfo juntos =Holomorfo

La reproduccin asexual no genera variabilidad pero es mucho ms rpida


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Los hongos pueden reproducirse de diferentes formas:

Asexual. Se multiplican las clulas dando lugar a nuevas hifas.

Mediante esporas asexuales en el esporangio

Por Conidias en conidiforos

Por gemacin (levaduras)

Por fragmentacin

Tpicos ejemplos: Clamidosporas, Artrosporas, Blastosporas

Sexual. Mediante la produccin de clulas llamas esporas.

Mediante esporas sexuales

O cuando dos hifas de individuos genticamente diferentes se

unen. Tpicos ejemplos: Oosporas, Zigosporas, Ascosporas,Basidiosporas


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Esporas fngicas

Asexuales

Sexuales

ArtroconidiasBlastoconidiasClamidoconidiasMacroconidiasMicroconidias

Esporangiosporas

ZigosporasAscosporasBasidiosporasOosporas


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Macroconidias

Conidias

Esporangiosporas

Levadura multigemanteMacroconidias

Macroconidias


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Penici l l ium

sp., conidiforo, mtulas,filides, y conidios

Curvular ia lunata, conidios.

Aspergillus sp. vescula sobre la que sedisponen las filides, mtulas y conidios.

Mtula


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De acuerdo a su forma a los hongos se

clasifican en:Hongos filamentosos (MOHOS)

Las esporas del moho germinan para producirlos filamentos largos de ramificacin conocida

como hifas. Las hifas pueden ser:- hifas septadas

- hifas no septadas.

Las hifas crecen formando una masa deramificacin y su conjunto se llama Micelio.


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Hifas tabicadas o septadasHifas sifonadas o aseptadas

o cenocticas

Micelio


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CLASES DEMICELIO

MICELIO AEREOMICELIO

VEGETATIVO


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MICELIO

ALGODONOSO

MICELIO

VELLOSO

MICELIOPULVURULENTO


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MICELIO

CEREBRIFORME

MICELIOS

PIGMENTADOS


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Hongos que pueden presentar forma de moho o delevadura (dimorfismo).

Su forma suele depender de factores ambientales talescomo;

Temperatura, as son levaduriformesa 37 yfilamentososa temperatura ambiente.

Otros factores son por ejemplo la concentracin deCO2 , crecimiento en suero, etc.

Hongos dimrficos


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Hongos dimrficos

T ambiente T 37C

Blastomyces dermati tidis


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DIAGNSTICO

Levaduras y Mohos.


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Como en otras enfermedades infecciosas , las micosis sediagnostican en el laboratorio siguiendo el esquema

clsico

DIAGNOSTICODE LAS

MICOSIS

INMUNODIAGNOSTICO

CULTIVOS

EXAMEN DIRECTO


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Preparacin en lmina portaobjetos con una gota de KOH al 10%.

Para la cpsula de Cryptococcus neoformans (LCR), se adicionauna gota de tinta china para visualizar la cpsula.

En exudados purulentos se recomienda realizar una tincin conGram, Giemsa y tambin Wright. Si se trata de cortes histolgicoshacer una preparacin con hematoxilina y eosina.

EXAMEN DIRECTO

Examen microscpico de

la muestra patolgica:Escamas de piel, pelos,fragmentos de uas,Exudado purulento, LCRo biopsias

Caractersticashifas, esporas,levaduras, etc.

Para observar


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AZUL DE LACTOFENOL

Usado para la observacin de hongo: El fenol destruye la flora acompaante El acido lctico conserva las estructuras fngicas al

provocar un cambio de gradiente osmtico conrelacin al interior del fngico generando una

pelcula. Azul de algodn posee la capacidad de adherirseala quitinapresente en las hifas y conidios y de loshongos microscpicos


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CULTIVO DE HONGOS

El producto patolgico y la tcnica de toma de muestra se elegirde acuerdo con el tipo de micosis por investigar.

El medio de cultivo ms utilizado en micologa mdica es el AGAR

GLUCOSADO DE SABOURAUD (SGA), se le adiciona antibiticoscon el fin de evitar la contaminacin bacteriana y ciclo eximida(actidiona)para inhibir los hongos saprofitos

La incubacin en micologa mdica es siempre en aerobiosis, oscilando eltiempo desde 2-3 das para levaduras y especies saprofitas.

La temperatura de incubacin es 32 C; los dermatofitos y otros causantes demicosis cutneas a 25 a 30 grados centgrados (temperatura ambiental).


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Sporothr ix schenck i i

Microsporum canis


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Mycrosporum gypseum

Epidermop hy ton f loccosum


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Cryptococcus neoformans


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las infecciones causadas por hongos.

Se clasifican

Micosis

superficiales

Micosis

subcutneas

Micosis

cutneas

Micosis profundas

o

sistmicas

Micosis

oportunistas

son

en


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Piedra negraPiedra blancaTia negra

Pitiriasis versicolor

Son infecciones superficiales por hongos que afectan la capacrnea de la piel y la porcin suprafolicular del pelo.Se caracteriza porque: No se invade el tejido vivo y no hay respuesta celular del

husped.

No hay cambios patolgicos.

Estas infecciones son a menudo tan inocuas que los pacientes noson conscientes de ellas.


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DIAGNOSTICO

El diagnstico de micosis superficiales, serealiza en base a la visualizacin en la muestra

de hifas o esporos caractersticos en el examenmicroscpico directo y en el aislamiento delagente causal en los cultivos.


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causa la infeccinmictica superficial del cabello.Formando ndulos duros negros que sonmasas de hifas con ascosporas, en losejes del pelo (porcin extra folicular) encuero cabelludo, la barba, el bigote ypbico.Asociado a higiene deficiente.Es comn en Amrica Central y del Sur yAsia Sur-Oriental.


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Colonias pigmentado de

marrn a negro rojizo Hifas pigmentadas, ramificadas


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Es una infeccin superficial delcabello causada por Tr ichosporumbeigel i i o Tr ichospo rum cu taneumhongo levaduriformeLos pelos infectados desarrollanndulos suaves de color blanco

grisceo que son masas agrupadasde hifas se encuentran en la partedistal o central del pelo axilar,pubiano y crural.Piedra blanca se encuentra en todo elmundo, pero es ms comn en

regiones tropicales o subtropicales.


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Tia negra

Es una infeccin asintomtica que afectaexclusivamente el estrato crneo de la piel endonde da lugar, de manera caracterstica, amanchas negro-marronceas, no descamativas eindoloras; (manchas hiperpigmentadas),localizadas preferentemente en la regin palmar y

ocasionalmente en la plantar u otras reascutneas, debido a la colonizacin Hortaeawernecki i .

Las lesiones generalmente son nicas, dedimetro variable y pueden ser uni o bilaterales.

La tia negra es una micosis superficial depronstico benigno.

Hortaea werneckii


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Pitiriasis versicolor

Malassezia furf ur es una levadura lipfilaque viven en la piel como parte de la floranormal. La forma filamentosa Pit i rosporumovale

Es el agente causal de lapitiriasis versicolor,Pitiriasis foliculitisyrecientemente se haimplicado como un agentecausante de la dermatitis

seborreica y la caspa.


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Clnico y micolgico.

Micolgico directo con hidrxido de potasio al 10-40% y cultivo enSabouraud o lactrimel incubacin a 25 -28C.Luz de Wood

Diagnstico

Cultivo de M. furfu r, 10 das a30C. Colonias elevadas, desuperficie lisa.

M. furfu ren cultivo. Levaduras concuello de gemacin ancho.


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Luz de Wood


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Son infecciones superficiales causada por hongos a nivel de la piel,cabello o uas. (colonizan superficies queratinizadas).

No se invaden los tejidos vivos, producen una variedad de cambiospatolgicos en el hospedador por su presencia y sus productos

metablicos.

DERMATOMICOSIS: Es cualquier proceso mictico que se da a nivel dela piel Candidiasis de la piel, membranas mucosas y uas: Cand ida albicans

y especies afines

DERMATOFITOSIS: Es cualquier proceso mictico producido por hongosdermatofitos

Dermatofitosis(tia): Dermatofitos (Microsporum,Tr ichophyton,Epidermophyton)


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Micosis producida por Cand ida albicans, hongo oportunista.Agente causal de los intertrigos (submamario o inguinal), eczema depaales, onicomicosis con paroniquia y granuloma candidisico.

Tambin pueden producir onicomicosis Candid a stellatoid ea, C.trop icalis,

C.gui l lermondi i yC.parapsilosis.

DIAGNOSTICOLas preparaciones teidas con Gram, muestran levaduras Gram positivasredondas u ovales, con brotes de blastosporas de 3 a 4 m acompaadasde pseudohifas de 3 a 10 micras de longitud.


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CULTIVO

La mayora de los medios de cultivo bacterianos son satisfactorios para elaislamiento de Candida

Se recomienda efectuar la siembra en medio de Sabouraud con antibiticos(cloranfenicol). Los medios que contienen actidiona (cicloheximida) inhiben elcrecimiento de algunas especies.

INCUBACION: Temperatura ambiente (2530 C) cuando se trata de medios con

inhibidores

Temperatura de 37 C. en el caso de medios enriquecidos exentos desustancias inhibidoras.

OBSERVAR: Al cabo de 24 a 48 horas observar colonias caractersticas de

color blanco o crema, opacas, elevadas, lisas, brillantes o mates de 1 a 3 mmde dimetro.

La prueba de filamentacin y produccin de clamidosporassoncaractersticas muy sencillas y tiles para la identificacin de C.albicans.


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Filamentizacin en plasma: se toma una pequeaporcin de la colonia con un asa de platino esterilizada

y se siembra en 0,5 ml de plasma humano, se incuba a37C por 2 horas, al cabo de las cuales, se observaramicroscpicamente la formacin de un tubo germ inalsin constriccin en su punto de origen y con forma

caracterstica de "espejo de mano

tubo germinal


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Formacin de Clamidosporas:se siembra una parte de la coloniaen el medio Bilis-Agar o Agar Harina de Maz con aguja deinoculacin esterilizada, incubando en medio a 28 C por 48 a 72

horas en condiciones de aerobiosis.

Observar microscpicamente la formacin de esporas asexuales, deparedes gruesas y refringentes, llamadas clamidosporas, que puedenestar intercaladas o en posicin terminal de las hifas tabicadas o

septadas


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Es una infeccin fngica de los tejidos (piel, pelo y uas)que ocurre en seres humanos y animales producida por ungrupo de hongos DERMATOFITOS

3 gneros: Microsporum , Tr ichophyton,Epidermophyton. Son hongos queratinoflicos y queratinolticos Segn su afinidad por lo que parasiten se clasifican en:

Antropoflicos, Zooflicos y Geoflicos. Factores predisponentes: calor, humedad, edad, sexo,

hiperhidrosis, microtraumatismos, disminucin deinmunidad celular, predisposicin gentica.


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Tinea capitis o tia de la cabeza es la infeccin del cuero cabelludo. Tinea corporis o tia del cuerpo es la infeccin del tronco y

extremidades.

Tinea cruris, tia crural o tia de la ingle es la afeccin en la ingle.

Tinea manuum o tia de la mano es la infeccin de las palmas y

regin interdigital. Tinea pedis, tia del pie o "pie de atleta" afecta principalmente a los

pies en las plantas de los mismos y las zonas interdigitales.

Tinea barbae o tia de la barbilla es la infeccin de la barba y delrea del cuello.

Tinea faciale o tia de la cara es la infeccin de la cara.

Tinea unguim, tia ungueal o tia de la ua (una forma deonicomicosis

Las diversas dermatofitosis reciben el nombre de tias que se denominan por elsitio afectado


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DIAGNSTICO

Tinta china en LCR de unpaciente con meningitis

criptoccica

Gram de esputo de unpaciente con Sporotricosis

Calcofluor en un paciente concolangitis (Inflamacin de lava biliar) por Asperg i l lus

fumigatus.

til en muestras clnicas de pacientes con micosis que afectan piel ymucosas. Resultados en menos de 10 minutos.

Desventajas:

-Baja sensibilidad.- Incapacidad para identificar el hongo a nivel de especie.- Imposibilidad de realizar estudios de sensibilidad a los antifngicos.


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Microsporum canis

Epidermop hy ton f loccosum

macroconidias

Macroconidias en tros

Cabello ectotrix


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Microconidias

Tr ichophy ton mentagrophytes

Cabello endotrix

Macroconidias


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Mycrosporum gypseum

Epidermophyton floccosum


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Cultivo de Tr ichoph yton tonsuransmostrandovariacin en textura y color.


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Las hifas son relativamente anchas y con numerosos septos

Las microconidias tienen numerosas caractersticas que varan entamao y forma las cuales estn sujetas en ngulo recto a las hifas


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GRACIAS POR SUATENCION

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