Presentacin de PowerPoint

Universidad Autnoma de San Luis Potos. Unidad Acadmica Multidisciplinaria Zona Huasteca

Lic. Bioqumico

Cuarto semestre

Liquido peritoneal

Integrantes.Alans campos Luzma GabrielaCortez Escobar Jairo Manuel Garca pacheco Ana Marlen. Yez Gravioto Natanael.

La capa serosa llamada peritoneo que recubre a la cavidad abdominal esta formada por dos capas, una de ellas una recubre la pared de la cavidad (parietal) y la otra, los rganos ubicados dentro de esta membrana (visceral), entre estas dos capas se encuentra un liquido seroso, llamado liquido peritoneal o asctico, encargado de proporcionar la lubricacin entre las membranas parietal y visceral. Y de evitar la friccin entre ambas membranas que sucede del movimiento de los rganos encerrados en su interior. Qu es el liquido peritoneal?

Cmo esta formado el liquido peritoneal? El lquido es de color amarillo plido, claro y transparente, su composicin consiste en agua, electrolitos, anticuerpos, clulas blancas de la sangre (300 por ml) Las protenas y cantidad de liquido son bajos. Se trata de un liquido estril, cualquier presencia de microorganismos es anormal en este liquido.

En ocasiones este liquido puede acumularse en grandes cantidades en cuadros de inflamacin produciendo ascitis, generada por diversas causas como: 1.- Aumento de la presin hidrosttica capilar: retencin de lquidos insuficiencia cardiaca2.- Disminucin de la presin onctica: desnutricin, cirrosis heptica sndrome nefrtico 3.- Aumento de la permeabilidad capilar: infecciones bacterianas (peritonitis),inflamaciones de las membranas procesos malignos 4.- Obstruccin linftica: Tumores malignosLinfomas Infeccin e inflamacin Lesiones o obstruccin del conducto torcico El examen se realiza para:Detectarinfeccin (peritonitis) causada por la presencia de bacterias en el liquido estril. Tumor (canceroso o no cancergeno Apendicitis Extraer grandes cantidades de lquido del espacio peritoneal en personas que tengan enfermedad heptica, enfermedad renal Ver si una lesin al abdomen ha causado sangrado interno.Enfermedad cardiaca Cirrosis heptica

Propsito del estudioLa obtencin de la muestra se obtiene por paracentesis abdominal, por ser el proceso mas factible. Se debe vaca la vejiga antes del procedimiento y se debe limpiar con un antisptico una pequea rea del abdomen Es un procesamiento invasivo que debe ser realizado en condiciones estriles, e implica la introduccin de un catter o una aguja en la cavidad peritoneal para extraer liquido con fines diagnsticos y teraputicos. El lugar de eleccin para practicar la puncin suele ser el cuadrante inferior izquierdo. La muestra no debe trasportarse en una jeringa tapada con tapn de goma estril por que es te mtodo no es seguro. Una parte de10 a 15 ml de la muestra se reparte entre dos frascos con medio de cultivo lquido(aerobio y anaerobio), de los destinados para hemocultivos

Procedimientos para la toma de muestra.Obtencin de la muestra por paracentesis Esquema general del procesamiento de la muestra por el laboratorioExamen fsico: aspecto macroscpico Examen citolgico microscpico Estudio bioqumico Tincin de Wright (citologa) Cultivo Hemocultivo Estudio bacteriolgico Para conocer cualquier alteracin en su color normal: amarillo plido, claro, escaso y darnos una idea de la posible causa Aspecto lechoso: derrames quilosos Hemorrgico: puncin traumtica o derrame Si fue una puncin traumtica se aclara el liquido al seguir aspirando Recuento celular en cmara de NeubauerGlucosa, pH, protenas totales Estudio microbiolgico: Tincin de Gram Cantidad de clulas presentes en el liquido.Presencia de leucocitos: posible peritonitis Para identificar la presencia de moo en el liquido siNo Peritonitis descartada Posible ascitis causada por contaminacin del liquido Pruebas bioqumicas Antibiograma Opaco/ turbio: pancreatitis, infarto intestinal, infeccin, o perforacin intestinal Estudio microscpico Recuento celular en la cmara de Neubauer: gruesa capa de cristal con forma de portaobjetos, de unos 30 x 70 mm y 4 mm de grosor. Sirve para determinar la presencia de clulas malignas Dilucin del liquido peritoneal Se cuentan las clulas contenidas en los cuatro cuadrados grandes de las esquinas y se calcula: clulas por mm3= N x 2,5 LeucocitosNeutrfilosLeucocitos No deben estar presentes en el liquido, su presencia puede indicar neoplasias, tuberculosis o hemorragia intraabdominalCitocentrifugacin de un volumen importante Utilizacin del sedimento Clulas mesoteliales Resultados Cantidades superiores a los 250 l sin sintomas: posible asictis neutrofilica debido a peritonitis bacteriana Cantidades elevadas en traumatismos, peritonitis tuberculosa, neoplasias.Alteraciones en su morfologa indican la presencia de posibles carcinomas o tumores Aumento en la concentracin posible infeccin del liquido, peritonitis Estudio bioqumico- Gradiente de albumina - Protenas - Enzimas - Densidad - pH- Lpidos - Lactato - Bilirrubina- Glucosa- Triglicridos - Creatinina y urea - Fosfatasa alcalina Para conocer si existe una alteracin en la concentracin de las sustancias que componen este liquido y en base a eso, determinar los estudios siguientes. - El lquido peritoneal normal es pobre en protenas (< 2 g/dl). es un criterio fundamental a la hora de clasificarlo como trasudado o exudado- Se observa en derrames asociados a cncer ovrico- ADA: Adenosn-desaminasa - til para el diagnstico de peritonitis tuberculosa, en la que aumenta por encima de 43 UI - Es paralela a la concentracin proteica-Derrames hemticos, cirrosis heptica, peritonitis espontneas, secundarias, carcinomatosis peritoneal y peritonitis tuberculosa = descenso de los valores de 7.35 por el metabolismo anaerobio- En infecciones bacterianas : valores disminuidos de la proporcin de glucosa en liquido/suero. - Gradiente alto: cirrosisGradiente bajo: carcinomatosis peritoneal- Colinesterasa: Desciende en trastornos hepticos, se incrementa en la tuberculosis o neoplasias Lactato-deshidrogenasa: en el derrame pleural, se halla elevada en los exudados ascticos - Su incremento ocasiona la ascitis quilosa u obstruccin linftica- Una concentracin superior a 6 mg/dl, o mayor a la presente en suero, sugiere la presencia de bilis o bien una perforacin de intestino proximal- Inferior a 25 mg/dl, se eleva en las mismas situaciones en las que desciende el pH, posible peritonitis Ayuda al diagnstico de ascitis quilosa causada por bloqueo linftico secundario a tumores (linfomas) o traumatismosRotura dela vejiga urinaria ydeextravasacindeorinaala cavidadperitonealDiagnostico dependiendo del examen bioqumico: Concentracin de protenas Superior a 3 g/dL : caracterstico de exudados Inferior a 3 g/dL : trasudado Presentan escasa celularidad. Se originan por un desequilibrio que afecta a las presiones hidrostticay/o coloidosmtica del plasma Es caracterstica de insuficiencia cardiaca, pericarditis constrictiva, cirrosis heptica, hepatocarcinoma, hgado metastsico, peritonitis bacteriana espontneaPresentan abundante celularidad. Suelen ser secundarios a una lesin en el revestimientomesotelial o endotelial de los vasos. Es caracterstica de ascitis biliar, ascitis pancretica, ascitis quilosa, tumores peritoneales, tuberculosis peritoneal, sndrome nefrtico , pericarditis constrictiva y cirrosis heptica.

Tincin de Wright Elaboracin del frotis con muestra sangunea Tincin hematolgica, que permite ver la morfologa de las clulas sanguneas, produciendo diversos colores Secar al aire con la sangre hacia arriba Cubrir completamente el portaobjetos con el colorante de Wright gota a gota, dejarlo aproximadamente de 5-8 minutos para la fijacin de los glbulos sanguneos. En caso de evaporacin, agregar un cantidad adicional Agregar un volumen de amortiguador de Wright igual al del colorante para evitar una coloracin dbil. Esperar la formacin de un brillo metlico. Puede usarse de igual manera agua desionizada. Dejar actuar de 10-15 minutos.Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensin presente un aspecto rosado al examinarlo a simple vista.Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodn humedecido en alcohol para eliminar cualquier resto de colorante.Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersin.Resultados Los eritrocitos: naranja o rosado. El citoplasma de los monocitos: tonalidad azul griscea con grnulo rojizos bastante finos y sus vacuolas caractersticas. El citoplasma de los linfocitos: azules. Los ncleos de los linfocitos y neutrfilos: prpura oscuro. Los ncleos de los monocitos: prpura algo ms claros (lila).Los grnulos de los eosinfilo :rojo-anaranjado intenso. Los grnulos de los basfilos prpura azulado muy oscuro. Los grnulos de los neutrfilos se :lila, bastante finos. Las plaquetas: violeta o prpura.La presencia de leucocitos indica una posible peritonitis Tincin de Gram Permite diferenciar a las bacterias dependiendo de su pared celular en Gram + o -, en base a ello se determina el tipo de tratamiento para el proceso infeccioso Preparacin del frotis Se toma una pequea porcin de la muestra, enseguida se esparce perfectamente lo ancho del portaobjetos Fijacin del frotis, pasndolo tres veces sobre la flama del mechero Cubrir el frotis con cristal violeta durante 1 minuto Escurrir el colorante y enseguida cubrir con Lugol. Dejar actuar durante 1 minuto. Lavar con agua Decolorara con alcohol-acetona durante 15 segundos Cubrir con el colorante de contraste: safranina. Dejar actuar durante 1 minuto y lavar con agua Secar la preparacin al aire Observar al microscopio al objetivo de inmersin, 100x Las bacterias Gram + se observan de color morado o azul Las bacterias Gram + se observan de color rosa

Cultivos Sirven para establecer las categoras del aumento del liquido peritoneal o ascitis: bacterascitis, peritonitis y ascitis neutrocitica . Si se trata de una peritonitis, se identifica al microorganismo causante Volmenes grandes de muestraCultivo en medios solidos Cultivos puros y mixtos Cultivos para Gram +Cultivos para Gram -Enterobacterias Staphylococos aureus E. ColiStreptococcus Clostridium sppPseudonoma aeruginosaHongos Cndida Estra en 4 Zonas Con asa de nicromel Colonias aisladas

McConkey EMBEndo Agar dextrosa Sabouraund Agar CetrimidaAgar McConkeyAgar sangre Proteus sppBacteroides fragilisKliebsella EMBCLDETCBS Chapman Agar Baird Parker Agar sps, TSN, anaerobio Hemocultivo Examen para determinar la presencia de moo en la sangreSe coloca en frascos especiales de hemocultivo -aerobios -anaerobios Ayuda a la identificacin del origen de la ascitis No debe existir proliferacin de moo en el medio Muestra de 10 a 20 ml del liquido asctico recin extrado Mezclar Incubar a 37 c por 7 das Tcnica con mayor sensibilidad , comparada con la de siembra en laboratorio Presencia de microorganismos: peritonitis Resultados Estudio bacteriolgico: Pruebas bioqumicas Identificacin del microorganismo causante de la peritonitis: pueden ser bacterias o un pequeo numero de hongos. Gram + : Provenientes de la piel o de la flora normal del organismo: Staphylococcus aureus, clostridium spp y elStaphylococcus epidermidisGram - : Provenientes del tracto gastrointestinal: Escherichia coli, kliebsella spp,y PseudomonaaeruginosaPrueba de Vogues Proskauer CatalasaCoagulasa CAMPADNasaPrueba de citratoUreasaRojo de metiloVogues ProskauerTriple azcarLicuacin de gelatinaMIOSIMLIA

Microorganismos implicados en infecciones por contaminacin del liquido peritoneal Morfologa colonial y celular de patgenos implicados.

MICROORGANISMO COLONIA CELULA Staphilococus aureus En agar sangre, nutritivo chocolate, soya tripticasa, etc, se ven colonias pequeas, blanquecinas, de forma circular, bordes redondeados, superficie lisa y convexa. Algunas cepas producen un pigmento carotenoide que les da un color doradococo inmvil, de 0.8 a 1 micrmetro de para formar grupos de clulas irregulares semejantes a racimos de uvadimetro, que se divide en tres planosCandida sppAgar Sabouraud Dextrosa: Colonias lisas, brillantes, de color blanco o ligeramente beigeclula oval levaduriforme de 2 a 4 micras, con paredes finas; en tejidos infectadosse han identificado formas filamentosas de longitud variable, con extremos redondos de 3 a 5 micras de dimetro y seudohifas, que son clulas alargadas de levadura que permanecen unidas entre sPseudomona aeruginosa son bacilos Gramnegativos Pequeos bastoncillos delgados de 1.5 mmy 3 mm. Estn unidos en pares y en cadenas cortas Tiene un flagelo polar.Staphilococcus epidermis

E. coliLas colonias varan segn el medio de cultivo donde crezcan, en este caso el medio de cultivo EMB las colonias tienen en una coloracin verde-metalico, colonias medianas, circulares, convexas, moradas, contorno verde-metalico, bordes redondeadosBacilo Gram negativo. Miden 0.5 de ancho por 3 de largo.No forma esporas Mviles (flagelos pertricos).Citrobacter Haemophilus influenzae, (en n ios) peritonotis primaria Enterococcus sppClostridium sppStreptococuus pyogenes

Streptococcus pneumoniae

Kliebsella spp En agar McCONKEY: Colonias grandes planoconvexa, mucoides, brillantes, forma irregular, tambin se observan redondeadas, bordes ondulados, lactosa positivoMorfologa colonial y celular de patgenos implicados.

Staphylococcus aureusCandida spp

Pseudomonas aeruginosa

Pruebas bioqumicas

Antibiograma Pruebas de confirmacin: pruebas bioqumicas Prueba Staphylococuus aureus Streptococus pyogenes Clostridium sppStaphylococcus epidermis Prueba de cAMPPositivo /sufren hemolisisNegativoPositivo negativoVogues proskauer PositivoNegativoNegativopositivoDNAasaPositivoNegativo PositivoNegativo CoagulasaPositivonegativoPositivoNegativoCatalasa PositivoNegativoNegativo positivoPrueba E. coliKliebsella.sppPseudomona aeruginosa

Bacteroides fragilis

Prueba de citrato negativoPositivoPositivoNegativoRojo de metilo Vogues proskauer RM positivo / VP negativoRM negativo /VP positivoRM negativo/VP negativo RM positivo /VP negativo MIO Movilidad +/-Indol positivoOrnitina negativoMovilidad negativoIndol +/-Ornitina negativoMovilidad positivaIndol negativoOrnitina +/- movilidad negativoIndol negativo SIM H2S NegativoIndol positivo Movilidad +/-H2S negativoIndol +/-Movilidad negativoH2S negativoIndol negativo Movilidad positivo

H2S negativoIndol positivoMovilidasd negativoUreasa Negativo PositivoNegativoNegativo Antibiograma.

Descripcin de los hallazgos microbiolgicos

Mecanismos de patogenicidad Staphylococcus aureusToxicidad: Producida por Exotoxinas

Toxinas citotoxinas: producen poros en la pared de las clulas, lo que altera su permeabilidad y provocan dao o muerte celular. Daan a eritrocitos y leucocitos y activan las plaquetas.

Estructuras de pared: Peptidoglicano: Efecto pirgeno, necrohemorrgico, inmunognico

cidos teicoicos: Participan en adherencia, antifagocitarios, inmunognico.Unas pocas cepas producen una cpsula o capa de baba que incrementa la virulencia del microorganismoP. aeruginosa tiene un flagelo nico que permite su motilidad y puede mediar las interacciones iniciales de superficie.la exotoxina A que inhibe el factor 2 de elongacin eucarionte, con la interrupcin en la sntesis proteica y la contribucin a la muerte de las clulas del huspedtiene mltiples cilias en la superficie celular que son responsables de la adherencia a las membranas celulares y otras superficies.Mecanismos de patogenicidad de Pseudomonas aeruginosaBibliografia Roman Vargas Rosana , Ascitis articulo de revision, scielo.org, 30 de aaabril de 2015, disponibble en http://www.scielo.org.pe/pdf/amp/v24n1/a09v24n1.pdfhttp://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-enfermedades Del Rosario-QuintanaCristbal, Monzn-MorenoCarmelo , Ojeda-Vargas Mar, 2006, vol. 24 nm. 06Infecciosas y microbiologia clinica peritonitis-bacteriana-espontanea-un-paciente-13089697Strasinger, Di Lorenzo, 2008, Analisis de orina y de los liquidos corporales, 5ta edicion, EDITORIAL MEDICA panamericana, Espaa