MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de...

16
Micetoma 1 MICETOMA El micetoma es un pseudotumor inflamatorio crónico, localizado, no contagioso que afecta progresivamente tejido cutáneo, subcutáneo y óseo, produciendo deformación y destrucción de los tejidos invadidos, donde el agente causal forma micro colonias, que a simple vista tienen el aspecto de gránulos de color blanco-amarillento, negro o rojo y que son eliminados por trayectos fistulosos. El síndrome: tumefacción, presencia de fístulas y gránulos se considera patognomónico de un micetoma. Agentes etiológicos. Hay dos grupos fundamentales de microorganismos productores de micetomas: Eumycetes u hongos verdaderos. Bacterias del orden de los Actinomycetales. Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de la enfermedad. La clasificación taxonómica de los agentes más importantes de ambos grupos se describe a continuación: División: Ascomycota Clase: Euascomycetes Orden: Dothidiales Familia: Leptosphaeriaceae Leptosphaeria senegalensis Familia: Didymosphaeriaceae Neostudina rosatti Orden: Microascales Familia: Microacaceae Pseudoallescheria boydii (anam. Scedosporium apiospermium) Clase: Hyphomycetes Acremonium kiliensi Acremonium recifei Exophiala jeanselmei Madurella grisea Madurella mycetomatis

Transcript of MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de...

Page 1: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 1

MICETOMA

El micetoma es un pseudotumor inflamatorio crónico, localizado, no contagioso que afecta

progresivamente tejido cutáneo, subcutáneo y óseo, produciendo deformación y destrucción de

los tejidos invadidos, donde el agente causal forma micro colonias, que a simple vista tienen el

aspecto de gránulos de color blanco-amarillento, negro o rojo y que son eliminados por trayectos

fistulosos. El síndrome: tumefacción, presencia de fístulas y gránulos se considera

patognomónico de un micetoma.

Agentes etiológicos. Hay dos grupos fundamentales de microorganismos productores de

micetomas:

Eumycetes u hongos verdaderos.

Bacterias del orden de los Actinomycetales.

Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos

pueden ser agentes causales de la enfermedad. La clasificación taxonómica de los agentes más

importantes de ambos grupos se describe a continuación:

División: Ascomycota

Clase: Euascomycetes

Orden: Dothidiales

Familia: Leptosphaeriaceae

Leptosphaeria senegalensis

Familia: Didymosphaeriaceae

Neostudina rosatti

Orden: Microascales

Familia: Microacaceae

Pseudoallescheria boydii (anam. Scedosporium apiospermium)

Clase: Hyphomycetes

Acremonium kiliensi

Acremonium recifei

Exophiala jeanselmei

Madurella grisea

Madurella mycetomatis

Page 2: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 2

Clase: Coelomycetes

Pyrenochaeta romeroi

También Aspergillus nidulans, especies de Fusarium y de Curvularia (vistos anteriormente como

productores de Aspergilosis, Hialo y Feohifomicosis, respectivamente) han sido descriptos como

agentes productores de micetomas.

Dominio: Eubacteria

Reino: Monera

División: Schizomycota

Clase: Eubacter

Orden: Actinomycetales

Familia: Streptomycetaceae

Actinomadura madurae

Actinomadura pelletieri

Nocardia asteroides

Nocardia brasiliensis

Nocardia otitidiscaviarum

Familia: Streptomycetaceae

Streptomyces somaliensis

Los micetomas producidos por los eumycetes son llamados micetomas eumicóticos o también

micetomas maduromicóticos, al haber sido identificados por primera vez en la ciudad de

Madura (India). Los micetomas producidos por bacterias son llamados micetomas

actinomicóticos.

En la tabla N° 1 se muestra la frecuencia y color de los gránulos de los agentes mencionados:

Page 3: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 3

Tabla N° 1: AGENTES PRODUCTORES DE MICETOMAS

Agentes Color de los gránulos Frecuencia

Micetoma actinomicótico

Nocardia asteroides Blanco Raro

Nocardia. brasiliensis Blanco Común

Nocardia otitidiscaviarum Blanco a amarillo Raro

Actinomadura madurae Blanco a amarillo Común

Actinomadura pelletieri Rojo Ocasional

Steptomyces somaliensis Amarillo a café Ocasional

Micetoma eumicótico

Madurella mycetomatis Negro Común

Madurella grisea Negro Ocasional

Pseudoallescheria boydii Blanco Común

Acremonium kiliensi Blanco Raro

Acremonium recifei Blanco Raro

Exophiala jeanselmei Negro Raro

Pyrenochaeta romeroi Negro Raro

Leptosphaeria senegalensis Negro Raro

Neostudina rosatii Negro Raro

Fusarium solani Blanco Raro

Epidemiología

Fuentes y vías de infección. Los microorganismos causales viven como saprófitos en la

naturaleza, en el suelo o en restos vegetales e ingresan al organismo humanos a través de algún

traumatismo, habitualmente una espina, aunque también pueden hacerlo mediante astillas de

madera, piedras, instrumentos metálicos, picaduras de insectos o mordeduras de animales.

Distribución. Es una enfermedad que existe en todo el mundo. Su distribución depende del

clima, el relieve del suelo, la precipitación fluvial y otros factores ecológicos. Es más frecuente

en países de clima tropical y subtropical. La mayor casuística corresponde a África ecuatorial.

Sudán registra 300-400 casos anuales. Los agentes más comunes son: M. mycetomatis, S.

somaliensis y A. pelletieri. México ocupa el segundo lugar de endemicidad, con condiciones

Page 4: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 4

climáticas similares a la de África, pero difiere en los agentes etiológicos predominantes que son,

N. brasiliensis (86%) y A. madurae (10%). La tercera región endémica es en Madura, India, en

donde el 65% de los micetomas son actinomicóticos (A. madurae, N. brasiliensis y A. pelletieri)

y el 35 % restante corresponde a M. mycetomatis.

En la Argentina se han descrito muchos casos de micetomas, sobre todo en la zona Noroeste y

Centro de nuestro país (Salta, Jujuy, Tucumán, Santiago del Estero); N. brasiliensis y M. grisea

han sido los agentes más aislados.

Predomina en el sexo masculino, con proporción 4:1; se presenta en más del 60 % de los casos en

campesinos que andan descalzos, quienes están más expuestos a los traumatismos. La edad

promedio de presentación es entre los 20 y 50 años. El tiempo de evolución puede ser muy

variable, desde pocos meses hasta 50 años, siendo, en la mayoría de los casos, de 2 a 3 años. Se

considera que, si bien el estado nutricional, la higiene y el estado de salud influyen, la incidencia

de esta enfermedad depende más de la exposición al suelo y de los hábitos de trabajo del

paciente, por lo que puede considerarse como una enfermedad ocupacional.

En el Centro de Referencia de Micología (CEREMIC) en Rosario, en un período de 40 años

(1959-1998) se diagnosticaron 17 casos de micetomas: 10 eumicóticos (59 %) y 7

actinomicóticos (41 %). Las especies más aisladas fueron M. grisea (29,5 %) y N. asteroides

(17,6 %). Otros agentes aislados fueron: P. boydii, M. mycetomatis, F. solani, N. brasiliensis y A.

madurae. En el 100 % de los casos, la enfermedad fue observada exclusivamente en el pie y en

pacientes del sexo masculino. Es de destacar que la mayoría de éstos provenían de otras zonas

del país, generalmente de la región del norte argentino, que corresponde a la zona endémica de

nuestro país.

Cuadro clínico. Las partes descubiertas del cuerpo son las localizaciones más frecuentemente

involucradas; predominan las infecciones en el pie aunque puede observarse esta enfermedad en

rodilla, muslo, mano, antebrazo, brazo, hombro, pared abdominal, región pre-esternal y más

raramente cara o cabeza. La localización del micetoma tiene relación directa con el sitio de

inoculación.

Si bien pueden existir variaciones en el síndrome relacionadas con las diferentes etiologías, el

sitio anatómico afectado, el estado general del paciente y la duración de la lesión, las

características clínicas son, en forma esencial, las mismas. La lesión primaria se manifiesta por la

inflamación local, poco dolorosa del tejido subcutáneo en el lugar de inoculación. El cuadro

evoluciona lentamente hacia el reblandecimiento de la zona afectada donde posteriormente se

abren una o más fístulas a través de las cuales drena una secreción serosa, serosanguinolenta o

seropurulenta, con los gránulos característicos. Esta fístula puede curar de manera definitiva

Page 5: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 5

(aparecen cicatrices fibrosas, hipo o hiperpigmentadas), puede dar una falsa cicatrización o puede

permanecer drenando. A medida que la enfermedad avanza se van abriendo nuevos trayectos

fistulosos.

Fig 1: Micetoma actinomicótico producido por Actinomadura madurae

Fig 2: Micetoma eumicótico producido por Madurella grisea

La evolución es lenta pero progresiva, sin regresión espontánea. La zona afectada aumenta de

volumen, se deforma, presenta un aspecto tumoral, con una consistencia dura de tipo leñoso. La

superficie está salpicada de muchas eminencias pequeñas, cada una de las cuales contiene el

Page 6: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 6

orificio de una fístula. Muchas veces se advierte un borde mamelonado y carnosos en la boca de

las mismas (Fig 1 y 2). El microorganismo invade los tejidos más profundos destruyendo el

tejido conectivo subcutáneo, huesos (en algunos casos) y ligamentos, aunque más raramente

afectan tendones, músculos, y nervios.

Generalmente los micetomas actinomicóticos evolucionan más rápidamente que los eumicóticos

y los agentes actinomycetales son más osteofílicos, produciendo osteomielitis, osteoporosis e

hipertrofia con fusión de los huesos más pequeños. Puede haber discapacidad funcional del

miembro afectado por fibrosis de tejidos blandos, aumento de volumen o dolor, pero depende

sobre todo de la localización y es mayor cuando afecta a una articulación.

En la enfermedad eumicótica difícilmente haya diseminación hacia otras áreas cutáneas, en

cambio los agentes actinomicóticos (principalmente Nocardia brasiliensis) tienen gran tendencia

a diseminarse y provocar lesiones secundarias en otros sitios de la piel u órganos internos. Otras

diferencias entre los dos cuadros son los siguientes:

-Los agentes actinomicóticos producen lesiones más extensas y obliterantes en hueso, con

cambios tanto líticos como hipertróficos; durante el curso de la infección eumicótica, se presenta

lesión tardía del hueso con efectos líticos, pero no hipertróficos.

- Los actinomicetos invaden el músculo más rápidamente que los eumicetos

- Los agentes actinomicóticos causan proliferación celular, que contribuye a que los bordes sean

elevados alrededor de las fístulas, abiertas en la superficie cutánea. (Fig 1)

Diagnóstico diferencial. El micetoma presenta un cuadro típico que debe diagnosticarse

rápidamente. Se debe descartar la actinomicosis, producida principalmente por Actinomyces

israelii que presenta un cuadro semejante de induración firme, hinchazón y formación de

trayectos fistulosos con gránulos, pero el inicio de la enfermedad, la naturaleza endógena y el

cuadro clínico completo son característicos y forman una entidad clínica bien definida. La

nocardiosis generalizada con su infección primaria en pulmones y un curso clínico muy

diferente, conforma un cuadro clínico separado. Si el agente es Nocardia asteroides, no hay

gránulos. N. brasiliensis puede considerarse como agente de nocardiosis si el sitio primario

afectado es el tórax o los pulmones y la diseminación a otras áreas puede dar lugar a

“micetomas” en una gran variedad de órganos.

La botriomicosis (actinofitosis estafilocóccica) es una entidad que se parece fielmente al

micetoma, ya que produce hinchazón, granos y fístulas que drenan. Entre los agentes productores

se incluyen: Staphylococcus aureus, Pseudomona aeruginosa, Proteus spp., y posiblemente

Escherichia coli. El examen de los gránulos identifica rápidamente esta enfermedad.

Page 7: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 7

Diagnóstico microbiológico.

Se basa en la descripción macro y microscópica de los gránulos, cultivos del material e

identificación de la cepa aislada.

Materiales: Pueden ser: pus o exudado obtenido por drenaje espontáneo o por presión de las

fístulas, que se deben recoger en gasa o recipiente estéril; o material de biopsia del trayecto

fistuloso. Generalmente se observan en estos materiales la presencia de gránulos que varían de

tamaño, de 300 a 2 mm o más, según el agente productor.

Estudio macroscópico de los gránulos. Se debe realizar el estudio de su morfología, textura,

color y aspecto (los más pequeños pueden observarse al microscopio o lupa) que en algunos

casos pueden contribuir a esclarecer la identidad del microorganismo causante.

Las características macroscópicas de los gránulos actino y eumicóticos correspondientes a los

distintos agentes etiológicos se resumen en las Tablas N° 2 y 3.

Examen microscópico directo de los gránulos. Se realiza con KOH y colorante Azul Cotton

(Gueguén). En el caso de un micetoma actinomicótico se puede observar el gránulo formado por

filamentos flexuosos muy finos, de 0,5 a 1 de diámetro, no tabicados, así como también

elementos cocoides y bacilares (Fig 3). Si es un micetoma eumicótico, se observa el gránulo

formado por filamentos hialinos o pigmentados, de 2 a 5 y la presencia de células grandes, de

15 o más, en la periferia (Fig 4).

Las características macro y microscópicas de los gránulos actino y eumicóticos correspondientes

a los distintos agentes etiológicos se resumen en las Tablas N° 2 y 3.

Coloraciones. Gram-Nicolle: es de utilidad para describir la macromorfología de los elementos

actinomicóticos que pueden aparecer como formas filamentosas flexuosas, bifurcadas o

ramificadas y microsifonadas, Gram (+) y rodeados de un matriz Gram (-). La coloración de

Kinyoun se utiliza para poner en evidencia la ácido-resistencia de los elementos actinomicóticos.

En un corte del material de biopsia que contenga los gránulos, coloreado con hematoxilina-

eosina, se observa el centro de los granos actinomicóticos un color claro, poco organizado, luego

una zona de basofilia y eosinofilia en la periferia. (Fig 3) Algunas especies pueden presentar

mazas en la periferia que es un material fuertemente eosinófilo que da lobulaciones.

Page 8: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 8

En el corte de un grano eumicótico teñido con H-E se observa un entrelazado de hifas con

características propias de acuerdo a cada agente etiológico (Fig 4). En el caso de Madurella

grisea los filamentos están incluidos en una sustancia amorfa y pigmentada llamada cemento.

Fig 3: Grano actinomicótico – HE-100x

Fig 4: Grano eumicótico – HE - 400x

Page 9: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 9

Tabla N° 2: Micetoma Actinomicótico. Características macro y micromorfológicas de

gránulos y colonias.

Especie Gránulo Histología (H-E) Morfología de la

colonia

Morfología

microscópica Nocardia

asteroides

Blanco, blando

suave, amorfo, 1

mm

Grupos de filamentos

homogéneos, forman una

malla laxa., mazas raras

Crecimiento rápido

a 37 ºC, plegada, no

vellosa amarillo-

naranja

Microfilamentos no

ramificados, que se

fragmentan en

bastones cortos y cocos,

acidorresistentes

Nocardia brasiliensis

Blanco a amarillo,

lobulado, blando,

suave, 1 mm

Igual al anterior, mazas comunes.

Crecimiento rápido a 30 ºC, plegadas,

no vellosa amarillo-

naranja

Microfilamentos no ramificados, que se

fragmentan en

bastones cortos y

cocos, acidorresistentes

Nocardia otitidiscaviarum

Ídem que el

anterior

Igual al anterior, mazas

comunes.

Crecimiento rápido

a 30 ºC, plegadas, no vellosa amarillo-

naranja

Microfilamentos, no

ramificados, que se fragmentan en

bastones cortos y

cocos,

acidorresistentes

Actinomadura

madurae

Blanco a

Rosado, oval a

lobulado suave, grande, 5mm

Centro vacío, amorfo,

cubierta periférica densa,

basófila, amplio borde rosado, margen laxo, con

flequillo de filamentos,

mazas, sin cemento

Crecimiento rápido

a 37 ºC, blanca a

crema, rugosa, no vellosa.

Microfilamentos

delicados, largos

sinuosos que no se fragmentan,

ramificados, no

acidorresistente

Actinomadura pelletieri

Rojo, duro, pequeño, oval a

lobulado, 1 mm

Redondo, homogéneo, coloración negra, banda

periférica clara, no hay

mazas, sin cemento

Crecimiento lento a 37 ºC, pequeña,

seca, no vellosa,

adherente, clara a rojo granate

Microfilamentos delicados,

ramificados, sin

fragmentar, ramificados, no

acidorresistentes

Streptomyces

somaliensis

Amarillo, duro,

redondo a oval, grande 2 mm

Tamaño variable, centro

amorfo, púrpura claro, con manchas rosadas,

filamentos negros en el

borde entero sin mazas,

tiene cemento

Crecimiento rápido

a 30 ºC, crema a pardo, rugoso, no

vellosa

Microfilamentos

delicados ramificados sin

fragmentar, produce

esporas, no

acidorresistentes

Page 10: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 10

Tabla N° 3: Micetoma eumicótico. Características macro y micromorfológicas de

gránulos y colonias.

Especie Gránulo Histología (H-E) Morfología de

la colonia

Morfología microscópica

Pseudoallescheria

boydii Blanco, suave,

oval a lobulado, < 2

mm

Hifas hialinas, 5 , cél. hinchadas

enormes, < 20 , sin cemento, bordes

rojos, periferia rosada

Crecimiento

rápido a vellosa blancuzco a gris

Hifas hialinas, finas,

aneloconidios unicelulares, grandes, en forma de limón,

sobre hifas o anelóforos simples

(Fig 1), cleistotecios oscuros. Anam.: Scedosporium

apiospermum y Graphium

Madurella

grisea

Negro, suave a

firme, oval a lobulado, < 1

mm

Poca sustancia

cementante oscura en bordes, células

poligonales en

periferia, filamentos hialinos en centro

Crecimiento muy

lento (Tº optima a 30ºC), canela a

gris, afelpada a

vellosa, pigmento oscuro difusible a

30ºC

Micelio estéril, presencia

aislada de clamidoconidios. (Fig 2)

Madurella

mycetomatis

Negro, firme a

quebradizo, oval a

lobulado, < 1

m, pueden estar

agregados

1-Tipo compacto con

cemento pardo 2-Tipo compacto con

cemento pardo en el

borde, células < 15

Crecimiento muy

lento (Tº optima 37ºC), vellosa,

aterciopelada,

crema a ocre

En cultivos viejos se ven

esclerotes negros < 2mm, en AHM muy aislados conidios, en

fialides pequeñas. (Fig 3)

Pyrenochaeta

romeroi

Negros,

blandos y de forma tubular,

de 0,5 a 1,5

Centro vacío,

amorfo, cubierta periférica de células

poligonales

Crecimiento

rápido a 30ºC, colonia vellosa,

lanosa, negro

grisácea, periferia clara

Hifas hialinas y pardas,

picnidios ostiolados parduscos, conidios elípticos hialinas a

amarillo oscuro, nacen en

fialides dentro de picnidios

Exophiala

jeanselmei

Negro, suave,

irregular a

vermicular, de tamaño

variable

Centro del gránulo

hueco sin sustancia

cementante, células

vesiculares < 10

Crecimiento lento,

negra, 1º húmeda

luego aterciopelada,

reverso negro

1º células levaduriformes,

anelides largas tubulares,

conidias variables en tamaño, alargadas.

Leptosphaeria

senegalensis

Negro, suave,

irregular, 1 a 2

mm

Hifas negras y

sustancia de cemento

en la periferia, centro hialino.

Crecimiento

rápido, gris,

velloso, reverso negro, pigmento

difusible

En AHM se forma ascostroma

negro, < 300 , ascosporas alargadas a ovales tabicadas.

Neotestudina

rosatti

Blanco a

pardusco, suave, < 1 mm

Poliédricos con

filamentos encajados en la sustancia

cementante en la

periferia. Algunas vesículas en el centro

basófilo

Crecimiento lento,

plegada, compacta, color

canela a pardo,

reverso dematiáceo, Tº

optima a 30ºC

No hay conidios. Se producen

ascos en ascostromas no ostiolados esféricos a ovales

(350 ), ascosporas negras, curvilíneas, de dos células

Page 11: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 11

Cultivos. Para los cultivos el mejor material es una biopsia profunda, dado que está libre de

bacterias y de hongos contaminantes. El criterio a seguir con los cultivos de la muestra, depende

de lo observado en el examen directo.

Micetomas eumicóticos

Las muestras o gránulos que contienen eumicetos se pueden lavar en solución salina que

contenga antibiótico (excepto cicloheximida) y sembrar en medio Agar Sabouraud y Agar

Sabouraud-cloranfenicol, e incubar a 28 ºC. El crecimiento de los agentes eumicóticos puede ser

lento por lo que los cultivos no deben descartarse hasta las seis semanas. La identificación se

realiza a través de la macromorfología y la micromorfología de las colonias, principalmente por

las características del micelio vegetativo y la producción de conidios (que se puede estimular con

la utilización de medios naturales, como agar papa zanahoria y agar harina de maíz). En la Tabla

N° 3 figuran las principales características macro y micromorfológicas de los hongos productores

de micetomas.

Fig 1: Pseudoallescheria boydii

Fig 2: Madurella grisea

Page 12: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 12

Fig 3: Madurella mycetomatis

Micetomas actinomicóticos

Los gránulos actinomicóticos se deben lavar varias veces con solución fisiológica estéril y se

siembran en los medios apropiados como agar sangre o infusión cerebro–corazón, Lowestein-

Jensen, medio Czapek sin sacarosa con rifocina y anzuelo de parafina; las cepas de Nocardia

crecen bien en Agar Sabouraud-extracto de levadura (AS-EL) El medio no debe contener

antibióticos. Se deben sembrar varias placas o tubos e incubarse a 37ºC. Las cepas de Nocardia

son de crecimiento rápido, no así las de Actinomadura que a menudo desarrollan después de

cuatro semanas de incubación.

Pruebas de identificación de actinomycetales aeróbicos: Las consideraciones para la

identificación de los actinomicetos aeróbicos son en primer lugar, la composición de la pared

celular, en segundo lugar la morfología de la colonia y de sus filamentos, y por último, las

reacciones fisiológicas. La micromorfología de la colonia se usa para determinar la presencia de

micelio aéreo, su color, ramificación, fragmentación y si la hay, formación de esporos.

1-Composición de la pared celular

El análisis de la pared celular es un requerimiento único en este misterioso grupo de

microorganismos. Muchas especies de Nocardia, Streptomyces, Actinomadura, etc., son muy

variables en su morfología y aún en su fisiología. Así que lo primero que se considera para su

clasificación es la composición química de su pared (Tabla N° 4). Son pruebas laboriosas que

requieren equipamiento especial y experiencia. En un principio los estudios se basaron en las

diferencias en la composición de aminoácidos de la pared celular, pero luego se encontró que la

composición de lípidos polares de la pared, podían distinguir los diferentes grupos de

actinomicetos. Las paredes celulares de todos los actinomicetos contienen glucosamina, ácido

murámico, alanina y ácido glutámico. Además, se encuentran como componentes importantes en

Page 13: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 13

los grupos respectivos: (I) ácidos LL-diaminopimélico (DAP) y glicina; (III) meso-DAP; (IV)

meso-DAP, arabinosa y galactosa.

Tabla Nº 4: Constituyentes de la pared celular en relación con la Taxonomía

Tipo de pared Componentes

principales en la pared

Tipo celular

completo Género

I LL-DAP, glicina Glicina Streptomyces

Nocardioides

II meso-DAP, glicina Xilosa

Arabinosa Micromonospora

III meso-DAP

Madurosa

Galactosa Ninguno

Actinomadura

Dermatophilus Microbispora

Nocardiopsis

Thermoactinomyces Geodermatophilus

IV meso-DAP Arabinosa

Galactosa

Nocardia

Rhodococcus

Corynebacterium Mycobacterium

V Lisina, Ornitina Ácido aspártico Actinomyces

VI Lisina, ac aspártico,

galactosa Oerskovia

2-Morfología

El estudio de la morfología se realiza preparando cultivos en portaobjetos (lámina gelosada) en

medios proteínicos o pobres. La incubación se extiende entre de 10 a 14 días a temperatura a 30-

37ºC. En un medio proteínico se ha observado: color del micelio aéreo, morfología del micelio

vegetativo (la ramificación y la fragmentación de los microfilamentos y las esporas), producción

de pigmento difusible y no difusible.

3-Pruebas fisiológicas

La descomposición de los aminoácidos y de las proteínas, así como la utilización de los azúcares,

es un elemento importante en la identificación de actinomicetos aeróbicos. Después de haber

seleccionado una colonia aislada de la primera siembra, se hace un subcultivo en agar cerebro

corazón (sin añadir azúcares). Después que ha habido crecimiento suficiente, se hacen estrías en

un cuadrante de placa de Petri conteniendo medio con: tirosina, xantina, hipoxantina y caseína,

en estas placas se deben incorporar controles positivos y negativos. Dichas pruebas se incuban a

temperatura ambiente durante dos semanas (en caso de caseina), tres semanas (en caso de

xantina) y cuatro semanas (en caso de tirosina). Se pueden acelerar los resultados en algunos

casos incubando las pruebas a 35 ºC. Una combinación de estas y otras pruebas, permite separar

las diferentes especies de Nocardia, Actinomadura y Streptomyces. (Tabla N° 5).

Page 14: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 14

En los últimos tiempos se han propuesto una serie de métodos de identificación de

actinomicetales aeróbicos fundamentados en la identificación de enzimas preformadas o en el

uso de equipos comerciales generados para otros fines, como lo son los equipos API para

bacterias o levaduras; pero que han demostrado tener aplicación a estos efectos, aunque hasta el

momento estas pruebas solo son de aplicación a un número reducido de especies, pero

afortunadamente son las más frecuentemente aisladas en muestras clínicas.

Serología.

La infección por actinomicetos y eumicetos induce una respuesta inmune humoral. Los

anticuerpos no tienen una función protectora pero pueden ser utilizados para los procedimientos

de diagnóstico (inmunodifusión en eumicetos) y prueba de ELISA en el caso de

actinomicetomas. No se han establecido aún, procedimientos serológicos normatizados para el

diagnóstico o pronóstico de micetomas. Entre los numerosos estudios realizados al respecto, se

han logrado separar fracciones de polisacáridos en algunos actinomicetales, como Nocardia

brasiliensis, con las que se demuestran anticuerpos precipitantes y una específica reacción

cutánea, pero sólo con fines de investigación. Utilizando la prueba de ELISA se detectaron

anticuerpos contra antigenos inmunodominantes intra citoplasmáticos de 24 y 26 kDa de

Nocardia brasiliensis; este estudio serológico se empleó para confirmar el diagnóstico en

pacientes y dar seguimiento a la terapéutica ya que los niveles de anticuerpos disminuyen cuando

la infección responde satisfactoriamente a la terapéutica.

Tabla N° 5

Page 15: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 15

Tratamiento:

Es dificultoso por la baja penetración de ATB en tejido fibrosado.

- Micetoma Eumicótico:

- Itraconazol: 400mg/dia- 6 a 18 meses

- Posaconazol: 800mg/día 18 a 32 meses (no disponible)

- Cirugía conservadora (si no tiene lesión ósea): se extrae todo el micetoma con margen de

seguridad que es reemplazado por tejido de granulación+transplante de piel.

- Bajo índice de curación: solo el 30% de los pacientes se curan y el 33% presentan mejoría.

- Micetoma Actinomicótico:

- Trimetroprima-sulfametoxazol : 80-40 mg/ kg/día, meses a años

- Clotrimazol-ciprofloxacina (tiene + penetración ósea): 750mg/día por más de 1 año.

Bibliografía

- Mujica M.T., Biasoli M. y Bracalenti B.J.C. de: "Aislamiento y estudio de Pseudoallescheria

boydii de un micetoma podal". Rev. Argent. Micol. 1984, 7: 21-23.

- Biasoli M.S., Alvarez D.P. y Bracalenti B.J.C. de: "Study of a Madurella grisea isolated from a

foot mycetoma". Mycopathologia 1986, 94:117-121.

- Ramos, L; Luque, A. & Alvarez , D. 1986. Aislamiento e identificación de Madurella

mycetomatis de un micetoma podal. Bol Micológico; 3 (1):5-8.

- Rippon J.W. 1990. Micología Médica. Hongos y Actinomicetos patógenos. Tercera edición.

Interamericana Mc Graw-Hill., México, 574-628.

- Luque, A.; Mujica, M. T. & D´Anna, L. 1991. Micetoma podal por Fusarium solani. Bol

Micológico;6(1-2):55-57.

- Kwong-Chung K.J., Bennet M.D. 1992. Medical Micology. Lea & Febiger. Philadelphia -

London, 280-336.

- Gómez, C. et al. 1995. Micetoma podal a Madurella grisea. Acta de resúmenes VII Congreso

Argentino de Micología, XVII Jornadas Argentinas de Micología, Rosario, Argentina. 101-102.

- Gómez, C.R. y Biasoli, M.S. 1999. Diecisiete casos de Micetomas Actino y Eumicóticos en

Rosario, Argentina (1959-1998). Boletín Micológico 14 (1-2): 13-17.

- Salinas MC, Vera L, Welsh O, Rodríguez M. Antibody response to Nocardia brasiliensis

antigens in man. Zbl Bakt 1992, 276: 390-397.

- Vera LC, Salinas MC, Welsh O, Rodríguez M. Isolation and purification of two

immunodominat antigens from Nocardia brasiliensis. J Clin Microbiol 1992, 30: 1183-1188.

Page 16: MICETOMA - micofbioyf.wikispaces.com2010+teoria.pdf · Actualmente se considera que 23 especies de hongos verdaderos y 10 especies de actinomicetos pueden ser agentes causales de

Micetoma 16

- Salinas MC, Casillas S, Welsh O, An ELISA for serological diagnosis of Nocardia brasiliensis

in clinical correlation of mycetoma infection J Clin Micribiol 1993, 31: 2901-2906.