1 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Unidad Acadèmica Ciencias Químicas y de la Salud

Carrera de Bioquímica y Farmacia

Laboratorio de toxicología

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumna: Tania Carolina Barba Toro Curso: Quinto Paralelo: A Grupo N° 7 Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 15 de junio del 2015 Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 22 de junio del 2015

PRÁCTICA N° 3 Título de la Práctica: Intoxicación por Alcohol Metílico

Animal de Experimentación: Rata Wistar.

Vía de Administración: Vía Parenteral (Intraperitoneal)

Volumen administrado: 10 ml de Formaldehìdo

Tiempos:

Inicio de la práctica: 07: 50 am

Hora de administración del toxico al cobayo: 07:52 am

Deceso del animal: 08:05 am( 13 minuto)

Síntomas: Convulsiones, vomito, Nistagmos y causar ceguera.

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2 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la

Intoxicación por Metanol.

2. Establecer la sintomatología y controlar el tiempo en que actúa el Metanol.

3. Conocer mediante reacciones de identificación la presencia de

Metanol.

MATERIALES

Guantes

Mascarilla

Zapatones

Bata de laboratorio

Jeringa de 10 cc

Cronómetro

Equipo de disección

Bisturí

Portatubo

Probeta

Vaso de precipitación

Erlenmeyer

Equipo de destilación.

Tubos de ensayo

Pipetas

SUSTANCIAS

Metanol Puro

Hidróxido de Sodio 0.1 N

3 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Agua destilada

Ácido tartárico

Ácido Sulfúrico puro

Permanganato de potasio al 1%

Soluciòn Saturada de Ácido Oxálico

Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff)

Cloruro de Fenil Hidracina al 4%

Nitroprusiato de Sodio al 2.5%

Hidróxido de Sodio 0.1 N

Ácido clorhídrico (HCl)

Ferricianuro de potasio al 5-10%

Hidróxido de Potasio al 12%

Ácido cromotrópico

Leche

Cloruro Férrico (FeCl3)

PROCEDIMIENTO

1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.

2. Tener todos los materiales listos en la mesòn de trabajo

3. Administramos a la rata wistar, 8 ml de Metanol por vía

intraperitoneal, anotamos el tiempo.

4. Colocar la rata wistar en la panema.

5. Observamos las manifestaciones que la rata wistar hasta su muerte.

6. De ahí procedemos a la disección de la rata wistar.

7. Colocando las vísceras (picadas o trituradas lo más finas posibles) en

el recipiente adecuado (balón del equipo de destilación).

4 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

8. Preparar 2gr de ácido tartárico en 50ml de agua destilada, luego se

añade la solución de ácido tartárico a las vísceras en el balón.

9. Añadir cierta cantidad de Ácido tartárico, se deja en contacto por 30

minutos para acidular la muestra.

10. Luego de este tiempo se filtra, previamente se arma el equipo de

destilación, en un Erlenmeyer recogeremos el destilado.

11. El destilado se recoge con 20 ml NaOH 0.1 N,

12. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de

identificación de Metanol en medios biológicos.

13. Culminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.

REACCIONES

1. Reacción de Schiff.- A una pequeña porción de la muestra, se

añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar

se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por

tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de

ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere

un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle

nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se

le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo

cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.

2. Reacción de Rimini.- A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de

cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de

nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución

de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

3. Con la Fenilhidracina.- En un medio fuertemente acidificado con

ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un

pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de

ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de

potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.

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4. Reacción de Marquis.- Se toma 1ml de destilado y se agregan

5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una

solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en

10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o

después de algún tiempo un color violeta.

5. Con el Ácido Cromotrópico.- Con este ácido en un medio

fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido

produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

6. Reacción de Hehner.- Se mezcla una gota de destilado con

algunos mililitros deleche, se estratifica con ácido sulfúrico

concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5

gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso

positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul

violeta.

GRÁFICOS:

1.- Animal de

experimentación Rata

Wistar.

3.- Colocamos en la rata

wistar en la panema y

observamos sus

manifestaciones.

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2.- Administramos

el Metanol a la rata

wistar por vìa

intraperitonial

6 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

5.- Sacamos todas las

vísceras y las picamos

para colocarlas en un

beaker

7.- Añadir cierta

cantidad de Ácido

tartárico, se deja en

contacto por 30 minutos

para acidular la muestra.

8.- Se filtra, previamente se

arma el equipo de

destilación, y en un

Erlenmeyer recogeremos el

destilado.

4. Procedemos

a la disección de

la Rata Wistar.

6.- Colocamos todo

esto en el balón

colocando con 50 perlas

de vidrio

9.- Con el filtrado

procedemos a realizar las

reacciones de identificación

de formaldehido en medios

biológicos

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7 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS

BIOLÓGICOS:

1) Reacción de Schiff:

Reacción Positivo no característico Cambio de coloración

2) Reacción de Rimini: Positivo no característico

Reacción positivo no característico Cambio de coloración

ANTES DESPUES

ANTES DESPUES

8 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

3) Reacción con la fenil hidracina: positivo no característico

4) Reacción de Marquis: Positivo no caracteristico

5) Con el ácido cromotrópico: Positivo no característico

ANTES DESPUES

ANTES DESPUES

ANTES DESPUÉS

9 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

6) Reacción de Hehner: Positivo no característico

Reaccion Reacción positivo no caracteristico Coloración beis

OBSERVACIONES:

El uso de guantes y mascarilla es esencial al momento de

preparar la solución de cianuro ya que éste puede ser inhalado

causando efectos en nuestro organismo.

Encender la campana de ventilación para eliminar el olor del

cianuro y así mismo los malos olores que se producen al disectar

la rata wistar.

Pude observar que al administrar Metanol puro por vía

intraperitoneal al cobayo, éste presentó picazón, convulsiones, se

orinó, se observó además secreción ocular y por ultimo presentó

necropsia de la mayor parte de las vísceras al momento de abrirlo.

RECOMENDACIONES

Es de vital importancia asegurarse que el equipo esté

correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el

escape de los vapores en el proceso de la destilación, siendo estos

en pequeñas cantidades mortales.

Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

ANTES DESPUES

10 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

CONCLUSIONES

Al final de esta práctica la reacción que presenta la rata wistar

ante la intoxicación con metanol puro, aprendimos como el

metanol en una sustancia que puede provocar grandes daños en

los organismos vivos, observamos lo que provoca internamente el

metanol y los signos que presento el cobayo cuando a este se le

administro la sustancia, cabe mencionar que la dosis depende del

peso del ser vivo en este caso de la rata wistar.

CUESTONARIO

1. ¿Cuál es la Dosis Letal del Metanol?

Ingerir elevadas cantidades de metanol puede causar dolor de

cabeza, mareo, náusea, vómitos y muerte (de 20 a 25 g se tiene

una dosis mortal). Tomar más de medio litro o más puede causar

ceguera o pérdida de la visión, ya que puede dañar seriamente el

nervio óptico. Una exposición crónica puede ser causa de daños al

hígado o de cirrosis. La dosis letal de metanol para los humanos

varía entre 0,3 gramos y 1 gramo por kilogramo de masa

corpórea.

2. ¿Cuáles son los síntomas más comunes por intoxicación con

metanol?

Los síntomas pueden abarcar:

Pulmones y vías respiratorias

o dificultad respiratoria

o paro respiratorio

Corazón y vasos sanguíneos

o convulsiones

o presión arterial baja

Sistema nervioso:

o comportamiento

agitado

o coma

o mareo

o dolor de cabeza

o crisis epiléptica

11 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Piel y uñas

o dolor abdominal (fuerte)

o diarrea

o problemas con la función hepática

o náuseas

o pancreatitis

o vómito

Otros: fatiga, calambres en las piernas, debilidad

3. ¿Cuáles son las aplicaciones y usos del metanol?

El metanol tiene una gran variedad de aplicaciones industriales. Su

uso más frecuente como materia prima para la producción de metil-

butil-éter, que es un aditivo para la gasolina. Se emplea en la

fabricación de formaldehído, ácido acético, cloro metanos,

metacrilato de metilo, metilaminas, dimetil tereftalato, o como

solvente o anticongelante en pinturas en aerosol, pinturas de pared,

limpiadores para carburadores y compuestos para limpiar parabrisas

de automóviles.

El metanol también se emplea como anticongelante en vehículos,

solvente de tintas, tintes, resinas, adhesivos, biocombustibles

y aspartame. El metanol puede ser también añadido al etanol para

hacer que éste no sea apto para el consumo humano (el metanol es

altamente tóxico) y para vehículos de modelismo con motores de

combustión interna.

4. ¿Cuál es la dosis letal en humanos?

La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina) para

seres humanos (DL50) se encuentra entre 500 y 5000 mg/kg, que

representa una cantidad total de entre 35 y 350 g para una

persona de 70 kg de peso.

GLOSARIO:

Anión gap: El anión gap es la diferencia entre los aniones

plasmáticos que habitualmente no se miden (proteínas, sulfatos,

12 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

fosfatos y ácidos orgánicos como lactato y piruvato) y cationes

plasmáticos que habitualmente no se miden (K+, Ca2+, Mg2+). El

anion gap normal es entre 8 - 12 mEq/l.

Cetoacidosi Diabética: La cetoacidosis diabética (CAD) hace

referencia a una descompensación de la diabetes mellitus que,

junto con el estado hiperosmolar y la hipoglucemia - secundaria al

tratamiento, son las tres principales complicaciones agudas de la

diabetes mellitus. A diferencia de las complicaciones crónicas, esta

complicación se desarrolla en cuestión de horas y pone en peligro

la vida del paciente, por lo que se considera una urgencia médica.

Metanol: También conocido como alcohol de madera o alcohol

metílico (o raramente alcohol de quemar), es el alcohol más

sencillo. Su fórmula química es CH3OH (CH4O).

Nefrolitiasis: Es la presencia de litos (piedras) en el riñón, y

cuando éstos se encuentran en la vía urinaria, se denomina al

cuadro Urolitiasis, debe ser manejada por un equipo de médicos

(Nefrólogos, Urólogos, y eventualmente Endocrinólogos).

Nistagmus: Es un tipo de movimiento involuntario de los ojos.

Usualmente es de lado a lado, pero a veces es de arriba abajo o

en forma circular (movimiento rotatorio incontrolable). El

movimiento varía entre lento y rápido y usualmente involucra

ambos ojos. El nistagmus ocurre más frecuentemente en la

infancia, pero también puede adquirirse después en la vida.

Vértigo: Es una sensación ilusoria o alucinatoria de movimiento

de los objetos que nos rodean o de nuestro propio cuerpo, por lo

común, una sensación de giro. El vértigo suele deberse a un

trastorno en el sistema vestibular

WEBGRAFIA:

Toxicidad por metanol y su efecto sobre las vías visuales

Disponible en: vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3373.pdf

Metanol 4.19 Disponible

en:www.minambiente.gov.co/documentos/Guia19.pdf

BIBLIOGRAFIA:

13 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Manuel Repetto Giménez, toxicología fundamental. Cuarta

edición.2009.

AUTORIA:

Bioq. Farm. Carlos García MSc

FIRMA DE RESPONSABILIDAD

__________________ Carolina Barba Toro