Practica de Laboratorio Transporte de Membrana Final

8/16/2019 Practica de Laboratorio Transporte de Membrana Final

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PRACTICA DE LABORATORIO TRANSPORTE DE MEMBRANA

HORARIO(16:00 – 18:00)

Realizado por:

Cesar Andrés Lesmes Sepúlveda 3135 1

Carlos Al!er"o #ravo Re$es 31%01&

S'pervisado por:

SEBASTIÁN PINEDA PINEDAspinedap 'nal ed' *o

+anizales Caldas016

1

mailto:[email protected]:[email protected]


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RESUMEN

,l "ema de "ranspor"e de s's"an*ias a "ravés de mem!ranas es de vi"al impor"an*ia $a-'e sin es"as en"rar.ano!/e"os des*ono*idos a la *él'la provo*ando da os -'e p'edanser irrepara!les o in*l'so ma" ndola es por es"o -'e es"as paredes *el'lares poseenme*anismos -'e 2a*ili"an el "ranspor"e de s's"an*ias de 'n medio a o"ro en es"a pr *"i*apara represen"ar *4mo 2'n*iona el "ranspor"e de s's"an*ias de 'n medio a o"ro se '"ilizara*omo manera de e/emplo 'na par"e de "ripa de *erdo(e "ra.da del in"es"ino del ado deél)la *'al la llamaremos a par"ir de a* membrana celular. ,s"e e/er*i*io se realiza *on el2in de demos"rar la osmosis en el *'al se podr des*ar"ar si se *onsidera 'n medio7ipo"4ni*o 7iper"4ni*o o iso"4ni*o por medio de de"ermina*i4n *'ali"a"iva am!ién se'sara *omo e perimen"o 'n "rozo pe-'e o de 'na 7o/a de al a para analizarlo en elmi*ros*opio *on 'nas *'an"as o"as de a 'a des"ilada es"o se realiza *on el 2in dedemos"rar 'n medio 7ipo"4ni*o de la pared *el'lar ve e"al

.

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INTRODUCCIÓN

9a!lamos de la impor"an*ia -'e "ienen las mem!ranas *el'lares al a*"'ar *omo!arrera -'e divide dos medios 'ni4 del o"ro *on 'na !i*apa 2os2olipidi*a $ *on*a!ezas 7idro2ili*as -'e se en*'en"ran in"era*"'ando dire*"amen"e *on el medio $

*on lolas 7idro2o!i*as -'e es" n in"ernamen"e se de!e 7a!lar de la impor"an*ia-'e "iene para el "ranspor"e de s's"an*ias de 'n medio a o"ro -'e la *él'la p'edere-'erir o -'e ne*esi"e dese*7ar s's"an*ias al e "erior 1;

Ca!e des"a*ar -'e la mem!rana *el'lar para -'e *'mpla s' *orre*"o2'n*ionamien"o $ p'eda servir *omo medio pro"e*"or $ "ranspor"ador de!e poseer *ier"as pro"e.nas -'e *on an2ipa"i*as es de*ir son "an"o 7idro2ili*as *omo7idro2o!i*as $ es" n in*r's"adas den"ro de la mem!rana *el'lar a es"as pro"e.nasde "ranspor"e se les da el nom!re de pro"e.nas in"e radas sin es"as la mem!ranasolo de/ar.a pasar a 'a o ases por la !i*apa 2os2olipidi*a*omo se m'es"ra en la

(2i 'ra 1) 1;ero an"es e pli-'emos -'e son es"as pro"e.nas "ranspor"adoras $ *' les son s's2'n*iones: las pro"e.nas "ranspor"adoras son a-'ellas -'e permi"en el "ranspor"ede pe-'e as molé*'las -'e no p'eden a"ravesar la *apa de l.pidos es"as

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pro"e.nas 2'eron dise adas para "ranspor"ar 'n "ipo de molé*'la en espe*i2i*o -'esea ne*esaria para -'e la *él'la p'eda realizar los pro*esos $ 2'n*iones -'e le*orrespondan , is"en 2ormas -'e permi"en el "ranspor"e de s's"an*ias 'na es eltransp rte act!" $ la o"ra se llama transp rte pas!" "am!ién *ono*ida *omo(di2'si4n 2a*ili"ada) se 7a!lara de manera m'$ e pl.*i"a es"os dos "ranspor"es: 1;(# $ o"ros 1???)

• ranspor"e pasivo (di2'si4n 2a*ili"ada): es"e "ranspor"e es 2 *il de en"ender para -'e las *ier"as s's"an*ias p'edan lle ar a l in"erior de la *él'la solore-'ieren de 'na pro"e.na de *anal -'e les permi"a en"rar sin nin únpro!lema en es"e "raspor"e las pro"e.nas no re-'ieren de nin ún "ipo deener .a para realizar es"a 2'n*i4n es de*ir no 7a$ as"o de ener .a -'e sene*esi"e para a!sor!er o e p'lsar s's"an*ias de la *él'la 1;

• ranspor"e a*"ivo: en es"e mé"odo de "ranspor"e de s's"an*ias al in"erior dela *él'la e is"en 'nas pro"e.nas espe*ializadas -'e re-'ieren 'n as"o deener .a para permi"ir el in reso de las s's"an*ias es"as pro"e.nas "ra!a/an*on el radien"e de *on*en"ra*i4n en donde e p'lsan @a para poder a!sor!er *omo 'na !om!a el B -'e es" en el medio e "erno de la *él'la

1; (# $ o"ros 1???)

,n la (


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Mater!ales

• +i*ros*opio• Laminillas por"ao!/e"os•

Laminillas *'!reo!/e"os• >la*a de *alen"amien"o• erm4me"ros• o"eros• >inzas• 3 #eaDer 150 mL• >ipe"a 10 $ 5 ml• radilla• ap4n de *or*7o *on "'!o *apilar • 6 '!os de ensa$o• Cron4me"ro• C'!os de 7ielo

React!" s

• CaCl al 10E ( o"ero)•

B+nF%• l'*osa al 0E• @aCl al 10E• Almid4n al 10E• Sol'*i4n de Godo

M#t $ s

La pr *"i*a *onsis"i4 en de"erminar los medios e is"en"es de la "'r en*ia $ el "raspaso dea 'a de 'n medio -'e "iene menos *on*en"ra*i4n a 'n medio de ma$or *on*en"ra*i4npara man"enerse en e-'ili!rio de"erminando *'ali"a"ivamen"e es"os pro*esos

Transp rte $e a%ua $es$e un me$! c n men r c ncentrac!&n a un c nma' r c ncentrac!&n(

1 ,s"e pro*edimien"o se realiza para *ompro!ar 'n medio 7ipo"4ni*o ladisol'*i4n se prepara 10 ml de 9 F des"ilada *on o"as de verdeme"ilo se pro*ede a a re ar 5ml de @aCl AL 5E $ por úl"imo se adi*iona5ml de


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% ,n 'n in"ervalo de 15 min desp'és de in"era*"'ar los dos medios seo!serva el "'!o de 2al*4n $ se ano"a el nivel in"erno -'e m'es"re es"epro*eso se realiza en 3 o*asiones al 2inal se o!serva *'al 2'e la *an"idadde a 'a -'e en"ro al "'!o de 2al*4n por medio de la mem!rana *el'lar seano"an "odos los *am!ios -'e se p'dieron o!servar

• E)per!ment *ue c mprueba la $e+!n!c!&n $e me$! ,!p t&n!c c n lasc#lulas "e%etales $e un al%a(

1 Se *or"a 'n "rozo pe-'e o de la 7o/a de al a -'e se en*'en"ra en ela*'ario del la!ora"orio de mi*ro!iolo .a se de!e re*ordar no me"er lasmanos sin "ener los 'an"es p'es"os $a -'e es"e a*'ario es" dise adopara la *rianza de mi*roor anismos para el es"'dio de ellos los *'alesp'eden provo*ar al ún da o en el or anismo 7'ésped al momen"o dees"ar en *on"a*"o

=esp'és de es"o se lleva el "rozo de m'es"ra al mi*ros*opio re*ordar -'ees"a m'es"ra de!e es"ar en*ima del por"a o!/e"os $ en*ima de ella de!ees"ar el *'!reo!/e"os para llevar a analizar lo si 'ien"e a realizar esa re ar 3 o"as de a 'a des"ilada en*ima de la m'es"ra $ volver ao!servar *'ali"a"ivamen"e -'e *am!io p'ede provo*ar al a adirle el a 'a ala m'es"ra se o!serva de n'evo en el mi*ros*opio $ se ano"an los*am!ios -'e 7an "enido las *él'las

• E)per!ment c n el n!trat $e plata ' m#t $ $e bene$!ct para $etecc!&n $esales(

3 Se "oma 'na m'es"ra de apro imadamen"e 1 5 mili"ros para % "'!os deensa$os m'es"ras ser n del a 'a -'e es" pasando por la mem!rana $las o"ras ser n para el *on"enido -'e es" n den"ro del "'!o os"eriormen"e a de es"os se les a re a ni"ra"o de pla"a -'e ser.a a 'nodel a 'a en el medio $ 'no del "'!o 2al*4n

5 G de es"os se les de"erminan por mé"odo de !enedi*" a re ando 5o"as del rea*"ivo !enedi*" $ poniéndolos en *alen"amien"o por 5 min'"os

los "'!os respe*"ivamen"e ser n 'no del a 'a en el medio $ 'no del "'!o2al*4n

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Resulta$ s ' $!scus! nes

E)per!ment -. RA@S>FR , ,@ LA +,+#RA@A .

,s posi!le ver -'e las mem!ranas"ienen 'na ran impor"an*ia en el"ranspor"e de s's"an*ias de 'n medio ao"ro ,s"o lo eviden*iamos desp'és depreparar la sol'*i4n

,l "iempo en -'e era veri2i*ado la*an"idad de a 'a -'e 7a!.a pasado por la mem!rana era de 15 min'"os

>os"eriormen"e eneraremos 'nar 2i*a -'e represen"a el "iempo Hs

Hol'men -'e 7a pasado por lamem!rana

7

"iempo(min'"os) A'men"o delvol'men (ml)

0 015 0 530 0 6%5 1 5


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19 19.5 20 20.5 21 21.5 220

5

10

15

20

25

3035

40

45

f(x) = 23.73x - 471.19

Volumen Vs Tiempo

Volumen(ml)

Tiempo(minutos)

Con es"a ra2i*a podemos en"ender -'e el a'men"o de a 'a den"ro del "'!o de


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E)per!ment /. +,=KF KSF @KCF

,n es"a las *on*en"ra*iones lo!ales de sol'"os son i 'ales "an"o en el in"erior de la*él'la *omo del medio ,n es"e *aso la velo*idad de paso del a 'a por la mem!rana esla misma $ por lo "an"o el *on"enido de la *él'la es" en e-'ili!rio *on la sol'*i4n 2'era dela mem!rana *el'lar ,s"a se da a re ar "res o"as de 9 0 del mismo medio so!re la7o/a ( or"ora


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Ot o tem! "ue es #e mu$%! impo t!n$i! e$!l$! en l! #ifusi&n #e sust!n$i!s !t !' s #e l!s mem !n!s p! ! "ue este su$eso o$u ! l! mem !n! sene$esit! "ue se! pe me! le !l soluto p! ! "ue pe mit! el p!so #el me#ioexte no "ue posee m!*o $on$ent !$i&n !l me#io inte no "ue tiene !+!s$on$ent !$iones, existen #os fo m!s p! ! #ete min! "ue un! mem !n! se!pe me! le, l! p ime ! fo m! #e #ete min! esto es si el soluto t !sp!s! sin#i $ult!# l! i$!p! #e los l pi#os * l! se/un#! fo m! es "ue el soluto pue#!

inte !$tu! $on un me#io po oso #e l! mem !n! e'it!n#o !s el $ont!$to#i e$to #el soluto $on l! i$!p! #e los l pi#os ( ! p, 1996) 4

Como podemos ver al a'men"o de vol'men red'*e el "iempo de di2'si4n en 'na *an"idadde a 'a a 'na "empera"'ra *ons"an"e miramos -'e es" *asi en 'na 2orma lineal

'!o Con*en"ra*i4n de B+nF% empera"'ra iempo(+in'"os)1 o"as Am!ien"e( NC) min3 o"as Am!ien"e( NC) min 5 se

3 5 o"as Am!ien"e( NC) 3min

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11/12

0 10 20 30 40 50 60 70 80 900

0.2

0.4

0.6

0.81

1.2

1.4

Tiempo Vs. Tempe !tu !

Tempe !tu !( $)

Tiempo(se/un#os)

'!o Con*en"ra*i4n de B+nF% empera"'ra iempo(+in'"os)1 o"as 9elada(3NC) 1 min 20 se/

o"as Am!ien"e( NC) 1min 6 se/3 o"as Calien"e(80NC) 25.3 se/

Considerando el 2a*"or *omo es la "empera"'ra miramos -'e es 'n impor"an"e 2a*"or $ -'e-'e es"e 7a*e variar de 2orma *onsidera!le los "iempos de di2'si4n es"o se de!e a -'e ala'men"o de "empera"'ra las molé*'las de 9 0 "ienen ma$or in"era**i4n in*remen"ando ladi2'si4n

E)per!ment 1. pr'e!a de ni"ra"o de pla"a $ #enedi" para la presen*ia de sales

>ara es"e e perimen"o se a re aron los rea*"ivos para veri2i*ar -'e la mem!rana es"lle ando al e-'ili!rio -'e es el "raspaso de sales por la misma G 7a*e -'e "an"o den"rodel "'!o 2al*4n *omo del medio se es" n moviendo las par".*'las ,l A @F3 da lapre*ipi"a*i4n de las sales $ el mé"odo de #enedi*" de i 'al 2orma a'n-'e es"e no loal*anzamos 7a*er por-'e nos 2al"4 el "iempo para el *alen"amien"o >ero podemosas'mir -'e se presen"ara de 2orma posi"iva

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C nclus! nes.

El medio y la membrana siempre llegan al equilibro por el traspaso de solutos por medio de lamembrana esta se da por diferentes medios de transporte dentro de las células ya que este se encargade supervisar el paso de los nutrientes y proteínas desde el medio externo al interno o inverso.

,s impor"an"e sa!er el *ompor"amien"o de mem!ranas por-'e es" n "iene ranimpor"an*ia en la vida del in eniero -'.mi*o en diversos pro*esos -'.mi*os G de!emosresal"ar -'e "ienden a llevar al e-'ili!rio el medio $ la *él'la

Bibliografía

1 , ., , ., , ., , ., , :., , :., * ot os. (1999). Introducción a la BiologíaCelular 1ª edición. O ;< .

2 To to !, e, . :., ? @!se, @. . (2007). Introduccion a lamicrobiologia. uenos i es, /entin!A me#i$! B!n!me i$!n!.

3 ! p,

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