UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGAFACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICASESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE BIOLOGA

PROYECTO DE TESISSENSIBILIDAD ANTIFNGICA DE ESPECIES DE Candida EN MUJERES GESTANTES QUE ACUDEN A AL HOSPITAL REGIONAL DE AYACUCHO MAMLL, 2014.

PRESENTADO POR:OSCCO CCORAHUA, LusberAsesor:Blgo. Mg. Serapio ROMERO GAVILN

AYACUCHO-PER2014

1. TITULOSensibilidad anti fngica de especies de Cndida en mujeres gestantes que acuden al Hospital Regional de Ayacucho MAMLL, 2014.1.1 DATOS DEL INVESTIGADOR Y COINVESTIGADORES:Bach. OSCCO CCORAHUA, Lusber estudiante de la Escuela de Formacin Profesional de Biologa, Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga.Telfono: 966888179, 066 - 490400 Fax 066-326918Email: lusberoscco@hotmail.com1.2 INSTITUCIONES QUE PARTICIPAN EN LA EJECUCION DE LA INVESTIGACION: DIRESA INS Hospital Regional Ayacucho. UNSCH

2. RESUMEN: Realizar trabajos para tener conocimiento acerca de la sensibilidad antifngica de especies de Candida en mujeres gestantes que acuden a los Laboratorios Urbanos de la Red huamanga nos dar informacin acerca de la situacin de la candidiasis en nuestra Regin. Puesto que la incidencia de infecciones fngicas nosocomiales aument significativamente en la ltima dcada y el control, prevencin de la candidiasis vaginal en nuestra Regin est enmarcada dentro las polticas regionales, nacionales y del objetivo de la Norma Tcnica de Salud N 077-MINSA/DGSP V.01. El objetivo del proyecto es determinar la sensibilidad antifngica de especies de Candida en mujeres embarazadas que acuden a los Laboratorios Urbanos de la Red Huamanga para lo cual se realizar la tipificacin de las especies de cndida por los mtodos de: tubo germinativo, produccin de clamidospora, produccin de velo, asimilacin de carbohidratos, Prueba de la Ureasa, Sensibilidad a la cicloheximida- Agar Mycosel, Identificacin Bioqumica enzimtica y la sensibilidad antifngica se realizar con el Mtodo de difusin en Agar con los antifngicos fluconazol, voriconazol y nystatin. Por otro lado la, es importante identificar criterios para nuevos directivas y lineamientos considerando que el 20% de la candidiasis vulvovaginal son ocasionadas por especies del gnero Candida, distintas a C. albicans y por otros gneros de levaduras que no producen filamentos al parasitar y la sensibilidad a los antifngicos es diferente por cada especies de Candida.

3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMACul ser la sensibilidad antifngica de especies de Candida en mujeres gestantes que acuden al Hospital Regional de Ayacucho MAMLL? , 2014.4. JUSTIFICACIN DE LA INVESTIGACINLa incidencia de infecciones fngicas nosocomiales aument significativamente en la ltima dcada (1) y el control, prevencin de la candidiasis vaginal en nuestra Regin est enmarcada dentro las polticas regionales, nacionales y del objetivo de la Norma Tcnica de Salud N 077-MINSA/DGSP V.01 (2).En el presente estudio estn comprometidos e involucrados la Direccin de Investigacin, el Laboratorio de Referencia Regional en Salud Pblica y la Estrategia Regional de Salud Sexual y Reproductiva de la DIRESA, se contar con apoyo del Instituto Nacional de Salud en realizar el control de calidad de las muestras enviadas. As mismo ser ejecutado por personal calificado del Laboratorio de Referencia y de las Redes de salud.Este trabajo contribuir en identificar la sensibilidad antifngica de las especies aisladas de Candida, que facilitara eleccin del tratamiento, adems nos dar a conocer los factores de riesgo asociados a la candidiasis en las mujeres embarazadas que acuden a los Laboratorios Urbanos de la Red Huamanga y de sta manera se puedan crear estrategias de control y prevencin de la candidiasis. Actualmente, es importante identificar criterios para nuevos directivas y lineamientos considerando que el 20% de la candidiasis vulvovaginal son ocasionadas por especies del gnero Candida, distintas a C. albicans y por otros gneros de levaduras que no producen filamentos al parasitar, cuyos sntomas pueden ser clnicamente casi indistinguibles de los causados por C. albicans (2).Los resultados de este estudio proveern de informacin para el anlisis y la toma de decisiones a la Direccin de Investigacin, Laboratorio de Referencia Regional en Salud Pblica y la Estrategia Regional de Salud Sexual y Reproductiva de la DIRESA, pues nos dar a conocer la sensibilidad antifngica de especies de Candida, prevalencia y factores de riesgo asociados a la candidiasis en las gestantes, esta informacin permitir, la implementacin de Directivas a nivel Regional para el Monitoreo, Supervisin y Asistencia Tcnica.5. ANTESCEDENTES GUEVARA y col. (1997). Lima, indicaron que de los 100 pacientes estudiadas con flujo vaginal anormal, en los consultorios externos de ginecologa del hospital Arzobispo Loayza en la ciudad de Lima, se observ que en 24 casos con diagnstico de candidiasis se identific las siguientes especies: 50% fueron Candida albicans, 25% Candida tropicalis, 16% Candida famata, 4% Candida glabrata y 4% Candida cruzei.RIVEROS y col. (2003). En un estudio en Venezuela encontraron que de 60 pacientes con vulvovaginitis estudiadas 40 resultaron positivas al cultivo micolgico. El 72,5% de los casos positivos correspondi a Candida albicans, seguido de C. tropicales en el 17,5%, C. kefyr con el 5%, C. parapsilosis con el 2,5% y C. guilliermondii en el 2,5%. Estos resultados revelan que la especie que obtuvo mayor frecuencia fue Candida albicans. Dentro de las manifestaciones clnicas fue altamente significativa la presencia de flujo vaginal blanquecino, leucorrea no homognea, prurito vulvar y ardor vaginal. Se encontr tambin asociacin estadstica significativa con leucorrea abundante, leucorrea moderada, erosin cervical, inflamacin vaginal e inflamacin del cuello del tero.LLOVERA SUREZ, Vilma y col. (2004). Cuba. Realizaron un estudio con 404 mujeres que asistieron al laboratorio de Microbiologa del hospital Gineco-Obstrtico Ramn Gonzlez Coro de Ciudad de La Habana, dentro de los resultados el 34,16 % (138) de las mujeres albergaban levaduras en la vagina, se identificaron 3 gneros: Candida (88,49 %), Trichosporon (10,79 %) y Rhodotorula (0,72 %). El prurito y el ardor mostraron significacin estadstica (p< 0,01); por otro lado el embarazo, el uso de dispositivo intrauterino (DIU) y la terapia con antibacterianos fueron los factores de riesgo frecuentes en relacin con la presencia de Candida en la vagina.BERGER Y RIVERA, (2006). En un estudio en Nicaragua sobre infecciones de transmisin sexual en embarazadas del puesto de salud Lea Brackett encontraron que como factores de riesgo: semana de gestacin 20, el bajo nivel acadmico, el tener nueva pareja, pobre conocimiento sobre salud sexual, inicio de vida sexual temprana y multiples parejas.DE LA PARTE, Mara (2006). De un estudio en Venezuela publicaron que de las 60 muestras estudiadas procedentes de pacientes con clnica de vulvovaginitis, C. albicans fue la especie ms aislada con el 84% y las especies no albicans representaron el 16%, de las cuales la siguiente en frecuencia fue C. tropicalis con el 8% C. guilliermondii con un 5% y C. glabrata con el 3%. Lo cual nos indica la candidiasis es causada por diferentes especies de cndida por ende necesitan tratamientos especficos para cada uno de ellas.DORANTE FRANCO, Maribel y Col. (2008) de un estudio realizado en Caracas Venezuela sobre la Distribucin y sensibilidad a los antifngicos de aislamientos clnicos de Candida en seis centros de salud del rea metropolitana de Caracas; publicaron que C. albicans fue la levadura aislada con ms frecuencia (46,7%) y el resto de las especies de Candida representaron ms de la mitad de los aislamientos (53,4%). En cuanto a la sensibilidad: C. tropicalis y C. glabrata muestran una menor sensibilidad a fluconazol (87,1% y 56,7% respectivamente) que otras especies.MANCILLA ROJAS, Grislida (2012). Realiz un estudio en acerca de Sensibilidad Antifngica de especies de Candida en el Hospital Regional de Ayacucho, donde encontr que: de las 101 cepas de Candida aisladas a partir de secrecin vaginal, C. albicans fue la ms frecuente representando el 81.2% (82/101), seguida de C. glabrata con el 15.8% (16/101) y C. dubliniensis, C. parapsilosis y C. lucitaniae con el 1% (1/101) respectivamente. La sensibilidad antifngica fue la siguiente: el Voriconazol fue el antifngico que present mayor sensibilidad con 84.1% de C. albicans, C. glabrata con 93.75%, C. dubliniensis y C. lucitaniae sensibles al 100% (1/1) respectivamente. Por otro lado el Fluconazol presenta sensibilidad de C. albicans con 75.6%, C. glabrata con 62.5%, C. dubliniensis 100% (1/101) y C. parapsilosis 100% (1/101). As mismo la nistatina presenta una resistencia de 3.7% y SDD 31.7% para C. albicans y 62.5% para C. glabrata. MURILLO, Sandra (2013). En un estudio realizado en Guayaquil sobre incidencia de candidiasis vaginal en mujeres gestantes entre las edades comprendidas de 20 a los 35 aos de edad atendidas en el hospital Verdi Cevallos Balda de la ciudad de Portoviejo encontraron que el grupo etario ms frecuente es entre las edades de 2 a 25 aos con un 38.1%, entre los signos y sntomas ms predominantes de 420 pacientes embarazadas fueron: el flujo blanquecino en un 38% (107 casos), seguido de prurito en un 26%. Las semanas de gestacin donde se diagnosticaron caso de candidiasis fue entre las 31 y 36 semanas en un 36.6% (49 casos).6. MARCO TERICO6.1CandidiasisEs una infeccin primaria o secundaria, causada por levaduras del gnero Candida, con manifestaciones clnicas extremadamente variables de evolucin aguda, subaguda, crnica o episdica, en las cuales el hongo puede causar lesiones cutneas, mucocutneas, profundas odiseminadas (3).6.2 Agentes etiolgicosEl principal agente es Candida albicans, pero pueden estar implicadas otras especies de Candida como, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Candida famata, Candida krusei; Candida lusitaniae, Candida parapsilosis, Candida tropicalis. Por otro lado las levaduras de otros gneros distintos de Candida como Saccharomyces, Pichia, Rhodotorula pueden dar cuadros clnicos similares a la Candidiasis (4). 6.3 Candida: Candidaspp., son levaduras mitospricas alargadas o ligeramente redondas de 2 - 6 x 3 - 9 m que se reproducen por gemacin (blastoconidios). A excepcin deC. glabrata,el resto de las especies asociadas a candidosis pueden formar pseudomicelios;C. albicansyC. dubliniensisadems son formadoras de hifas (2).6.4 TaxonomaTeniendo en cuenta la reproduccin sexuada de las levaduras se las incluye en las subdivisiones Ascomycotina, Basidiomycotina y Deuteromycotina (cuando no se conoce la reproduccin sexuada) (5). Dominio: Eucarya Reino: Fungi Divisin: Eumycota Subdivisin: Deuteromycotina Clase: Blastomycetes Familia: Cryptoccocaceae Gnero: Candida Especies: C. albicans; C. glabrata; C. krusei; C. parapsilosis; C. tropicalis, etc. 6.5 Signos y sntomasPuede haber casos asintomticos en 10% a 20% de mujeres en edad frtil, pausiasintomticos, casos agudos y severos. Sntomas: Se presenta prurito y ardor vulvar en 83.3%, vulvodinea, sensacin de quemadura (56,3%), dispareunia y sntomas urinarios: Disuria, polaquiuria y tenesmo. Signos: Flujo variable: Aspecto de leche cortada en 78.3% de los casos o blanco grisceo con o sin flculos, eritema vulvar (37.5%), eritema vaginal (54.2%), test de aminas negativo y pH vaginal 4.4 +- 0.7. Tambin se acompaan lesiones descamativas, exulceraciones y lceras (secundarias a rascado) y rara vez lesiones costrosas, despulimiento de la mucosa, edema, o congestin intensa (6,7).6.6Diagnstico:En el interrogatorio se tendr en cuenta antecedentes de flujo genital, detalle de medidas higinicas, sntomas y antecedentes patolgicos de importancia. Al examen fsico se determinar la presencia de signos, caractersticas del flujo, lesiones vulvovaginales agregadas (lceras, etc.).El diagnstico clnico suele sobre diagnosticar ms que subdiagnosticar. En la gran mayora la observacin de leucorrea y de la mucosa vaginal mediante la especuloscopa, es suficiente sin tener que requerir de exmenes complementarios. En general el PH es inferior a 4.5 y el test de aminas. En las nias la vaginoscopa, mtodo de excepcin, se efectuarn por el especialista en caso de vulvovaginitis crnica (4).

Diagnstico diferencialVulvovaginitis micticaVaginosis bacterianaTrichomonas vaginalis

Sntoma predominantePruritoFetidez olor a pescadoFlujo mal oliente ardor prurito

OlorNingunoA pescadomaloliente

AspectoGrumoso, viscosaLechoso, homogneoespumoso

ColorBlanco o amarillaGris amarronadoVerdoso amarillo blanco

pruritoIntensoNoLeve, intenso

Mucosa vaginalEritema, grumos blancos adherentesnormalPetequias

pH4.5>4.5

Eritema vulvarFrecuenteAusenteAusente

6.6.1 Exmenes complementarios.Examen directo: (Examen en fresco) La muestra debe ser tomada de la pared vaginal lateral puede ser sometida a observacin microscpica con KOH al 10 a 20% o preparaciones teidas (Gram) que permiten reconocer blastoconidias, filamentos, pseudohifas de Candida spp. (8).El examen microscpico directo es especfico pero menos sensible. Cultivo: No es usado rutinariamente, pero puede ser til en mujeres con sntomas recurrentes y con sntomas tpicos que presenten una preparacin de KOH negativo. Se logra aislar diferentes especies de Cndida adems de sensibilidad a diferentes anti fngicos (antifungigrama con lecturas a las 24 a 48 horas. de incubacin), no requiere medios exigentes (8), entre estos se tiene al Agar dextrosa de Sabouraud (Bioxn), durante 7 das a 37 oC o Agar Base Columbia por 48 horas en atmsfera de 5% de CO2, tambin se realiza cultivos con CHROMagar Cndida (CHROMagarCompany, Paris, France) para identificacin de especies segn el color de las colonias, (5) C. albicans produce colonias verdes y tiene la capacidad de producir tubos germinativos (prueba fisiolgica) y clamidoconidias en agar leche con Tween 80. (8), El cultivo en medio Intray Colorex Yeast: C. albicans da colonias de color verde o verde azulado; C. glabrata rosado oscuro y C. krusei rosado oscuro con bordes blancos; C. tropicalis azul oscuro con halo prpura (4).6.7Tipificacin La importancia de la identificacin de las especies de cndida radica en que algunas especies no albicans presentan resistencia a cierto medicamento as podemos mencionar:Est bien establecido queC. kruseipresenta resistencia natural a fluconazol y para otras especies comoC. glabratayC. tropicalisha sido reportada resistencia importante a la mayora de los imidazoles (9,10).Llover en un trabajo realizado en Venezuela indica que de las cepas de C. albicans identificadas, 76,19% fueron sensibles a fluconazol, las cepas de C. glabrata fueron 100% resistentes. La recurrencia de esta patologa, es debido a tratamientos antifngicos inadecuados, generalmente auto medicado, lo que puede llevar a variaciones antignicas y mutaciones de las especies de Candida y generar resistencia.6.8Factores predisponentesEs una patologa estrgeno dependiente, se identifican factores predisponentes como: Embarazo, anticonceptivos orales, diabetes no controlada (aumentan el glucgeno celular) (11),uso de antimicrobianos de amplio espectro como Tetraciclina, Cloramfenicol, Ampicilina,Cefalosporinas que eliminan flora protectora sobre todo lactobacillus, bacilos de Dderlein, inmunodepresin, terapia de reemplazo hormonal, estrs, coticoterapia, citostticos, obesidad, VIH positivo; otros factores son: uso de pantalones ajustados, duchas vaginales y ropa interior de nylon (fibra sinttica).Se menciona tambin clima tropical, subtropical, dietas ricas en carbohidratos y frutas que condicionan a la candidiasis asintomtica,edades extremas de la vida, hiper o hipoparatiroidismo, uso de espermicidas, edad joven (15 a 19 aos), nuliparidad y fase luteal del ciclo menstrual (11).Las causas predisponentes se pueden agrupar en: Locales: maceracin, contacto con agua, mala higiene genital, mala tcnica de limpieza, frotamiento, uso de irritantes como jabones, shampoo, baos de espuma. Fisiolgicas: recin nacidos, vejez (edades extremas), embarazo, obesidad Endocrinas: diabetes, hipotiroidismo. Alteracin de la flora normal: por uso de antibiticos (ATB). Enfermedades hematolgicas: linfomas, leucemias, anemia aplsica, agranulocitosis, neutropenia, hipo y agamaglobulinemia. Factores iatrognicos: uso prolongado de corticoides, quimioterpicos, inmunosupresores, agentes citotxicos, alimentacin parenteral, transplantes, ciruga abdominal, utilizacin de sondas y catteres, radioterapia, prtesis, hemodilisis, cateterismo. Enfermedades debilitantes: neoplasias, infeccin por virus de inmunodeficiencia humana (VIH), inanicin, quemaduras graves y extensas, drogadiccin, tuberculosis y otras enfermedades infecciosas.En general, la candidiasis cutneo mucosa es frecuente en pacientes con deficiencias en las clulas T, tal como ocurre en los pacientes con SIDA, en pacientes diabticos y con otras endocrinopatas. La infeccin ms seria, la candidiasis candidiasis invasiva (CI), que compromete la vida del paciente, se desarrolla en individuos severamente inmunocomprometidos, y, en la mayora de los casos de CI confluyen dos o ms de estos factores predisponentes. La neutropenia es una de las principales causas de CI; aunque los pacientes sometidos a trasplantes de rganos, con tumores slidos o con enfermedades malignas de la sangre, tambin tienen alto riesgo de sufrir CI. As mismo las carencias nutricionales. Insuficiencia de hierro, cido flico, Vitamina B12, azufre o zinc. El empleo de antihistamnicos puede tener cierta incidencia; otros factores son: Uso de pantalones ajustados, duchas vaginales y ropa interior de nylon (fibra sinttica). Se menciona tambin el clima tropical, subtropical, dietas ricas en carbohidratos y frutas que condicionan a la candidiasis asintomtica, hper o hipoparatiroidismo, uso de espermicidas y fase ltea del ciclo menstrual. Por otro lado los periodos de lactancia y embarazo. Durante el embarazo incrementan significativamente los niveles de estrgenos y progesterona (4). Por otro lado en las levaduras se encuentran receptores para estrgenos y progesterona, por tal motivo pueden ser estimuladas durante el embarazo. Por otro lado, estas hormonas intervienen en la supresin parcial de la respuesta de los linfocitos T. El coito, pero principalmente si existe eyaculacin en la vagina, ya que el semen alcaliniza la vagina por un periodo de horas, condiciones que pueden ser aprovechadas por los patgenos (11). As mismo el uso de espermicidas y sistemas de anticoncepcin intrauterinos. Los anticonceptivos hormonales, pero principalmente por su contenido en progestgenos, y no tanto los estrgenos, ya que producen un espesamiento del moco entre el tero y la vagina, disminuyendo la velocidad del flujo y por tanto la rapidez en la eliminacin. Por otro lado se menciona tambin el clima tropical, subtropical. Frmacos inmunodepresores y quimioterapia (4). 6.9sensibilidad anti fngicaDebido a que la candidiasis representa cerca del 80% de las infecciones fngicas nosocomiales, la identificacin de la especie implicada en la etiologa de la candidiasis constituye la base de la epidemiologa de estas infecciones, y el conocimiento de la sensibilidad a los antifngicos permite establecer estrategias teraputicas empricas y profilcticas adecuadas (12)6.10TratamientoEl Fluconazol es el tratamiento general para las candidiasis, pero tiene escasa actividad frente a C. glabrata (13). Asi mismo los imidazoles como el clotrimazol y miconazol son muy buenos agentes tpicos, pero estos resultan ser poco activos contra la C. glabatra.Segn la extensin de la infeccin y el estado general del paciente se decide un tratamiento tpico o sistmico. As tpicamente se puede emplear cotrimazol al 1 por ciento, miconazol, ketoconazol, sertoconazol, terbinafina o naftilina. Los tratamientos sistmicos ms frecuentemente empleados son itraconazol o fluconazol. Esta enfermedad tiene buen pronstico pero si los factores predisponentes de estas micosis no se corrigen es posible otra nueva infeccin (14).6.10.1 Tratamiento en mujeres embarazadasSe tratar solo a las mujeres sintomticas con tratamiento tpico imidazlico 7 das: Clotrimazol crema 2% aplicacin intravaginal 5 gr/noche por 7 das (15). Otra alternativa es emplear los preparados azlicos, ya que estos no presentan ninguna absorcin por va vaginal. La infeccin por C. glabrata o C. tropicales puede ser refractoria a los imidazoles, por lo que de vez en cuando habra que emplear el uso de violeta de genciana al 1% o cido brico (600mg en capsula vaginal) (13).6.11Epidemiologa de la candidiasisLa distribucin geogrfica de esta micosis es universal y ms de 70 % de ellas son producidas porC. albicansobservndose un porcentaje mayor por el serotipo B. Los casos de candidiasis sistmica estn relacionados a pacientes con severas deficiencias en su sistema inmune.C. kruseiyC. glabratason habitualmente resistentes a los compuestos azlicos y su hallazgo como agentes infecciosos involucrados en enfermedades sistmicas intrahospitalarias ha aumentado en los ltimos aos (5).Los casos registrados de candidosis muestran que el sexo no influye en la frecuencia, a excepcin de la candidosis urogenital que tiene mayor incidencia en el sexo femenino. La edad y raza de las personas son factores que, segn la clnica, no influyen en la presentacin de la micosis, la cual realmente depender del factor de inmunocompromiso asociado; sin embargo, por lo que respecta a la ocupacin aunque no es un factor de importancia, se considera que algunas actividades de las personas pueden favorecer la infeccin (6).6.13PrevencinSe debe incidir en la higiene individual, uso de ropa no ajustada, ropa interior de preferencia de algodn. Tambin disminuir los factores predisponentes del paciente con un buen control de la glucemia en los pacientes diabticos, tratamiento oportuno de la candidiasis en la mujer embarazada, disminuir el uso de dosis altas de anticonceptivos orales o frecuencia del uso de espermicidas, buscar una adecuada dosificacin inmunosupresora con corticoides y citostticos, evitar dosis altas y uso por tiempo prolongado de antibiticos de amplio espectro (4).

7. OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN7.1OBJETIVO GENERALDeterminar la sensibilidad antifngica de especies de Candida en mujeres embarazadas que acuden al Hospital Regional de Ayacucho MAMLL, durante los meses de junio a diciembre del 2014.7.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS: Identificar especies de Candida de exudados vaginales de mujeres gestantes. Determinar la frecuencia de candidiasis en mujeres gestantes. Describir los factores asociados a la candidiasis. Relacionar los factores asociados a la infeccin de candidiasis en mujeres gestantes que acuden a los Laboratorios Urbanos de la Red Huamanga.8. METODOLOGA DE INVESTIGACIN8.1 Diseo de estudioObservacional: descriptivo, prospectivo.8.2 Poblacin de estudio:Est constituido por 1382 Mujeres Gestantes que acuden al Hospital Regional de Ayacucho, datos que se tomaron en cuenta del censo de gestantes en el 2013.8.3Tamao de muestraEstar conforma por 301 mujeres gestantes que acuden al Servicio de Gineco-obstetricia del Hospital Regional de Ayacucho.FORMULA N Z2p.qn =E2(N-1)+ p.q Z2

Dnde: n= tamao de la muestra. N= Universo o nmero de unidades en la poblacin total Z= Valor de nivel de confianza o significancia de las estimaciones, valor constante que equivale a 1,96. N-1= Factor de correccin para muestras mayores de 30E= Precisin o el errorN= 1382Z= 1,96E= 0.05P =0.5Q=0.5 (1382) (1.96)2(0.5) (0.5)n =(0.05)2(1382-1)+ (1.96)2(0.5) (0.5) n =1327.27283.4525+0.9604

n =1327.27284.4129

HospitalPoblacin muestra

Htal Regional de Ayacucho1382301

8.4 Diseo muestralMuestreo probabilstico.Unidad de muestreo: Hospital Regional de HuamangaUnidad de anlisis: Estar conformada por la secrecin vaginal. 8.5Criterios de seleccin de la poblacin a estudiar8.5.1Criterios de inclusin Mujeres gestantes con problemas de secrecin vaginal. Mujeres gestantes con consentimiento informado para participar en la investigacin.8.5Criterios de exclusin Mujeres gestantes con tratamiento antimictico. Mujeres gestantes con diagnstico de VIH/SIDA.8.6Definicin de variables8.6.1Variable independiente Especie de Candida8.6.2Variable dependiente Sensibilidad a antifngico

8.7Operacionalizacin de variablesASPECTOS DEMOGRAFICOS

VARIABLEVALORES FINALESTIPO DE VARIABLEPROCESO DE MEDICINDEFINICIN OPERACIONALESCALA DE MEDICIN

EdadAoscuantitativoENCUESTAAos de vida cumplidosDE RAZN

Lusgar de residenciaRural

Urbano cuantitativoENCUESTALugar donde vive la gestante en los tres ltimos mesesNOMINAL

ASPECTOS social

VARIABLEVALORES FINALESTIPO DE VARIABLEPROCESO DE MEDICINDEFINICIN OPERACIONALESCALA DE MEDICN

Grado de Instruccin:Ninguna:

cualitativo

ENCUESTAMximo nivel acadmico alcanzado por la gestante al momento de su inclusin en el estudio

NOMINAL

Primaria:

Secundaria:

Superior:

Estado civilSolteraCasadaConvivienteDivorciadaviuda

cualitativo

ENCUESTACondicin civil de la madre al momento de su ingreso al estudio

NOMINAL

Religin

CatlicoEvanglicoMormnotros

cualitativo

ENCUESTAConjunto de principios, creencias y prcticas de las doctrinas religiosas, que unen a sus seguidores en la misma comunidad moral.

NOMINAL

OcupacinAgriculturaAma de casaComercianteEnfermeraEstudiantePolicaProfesoraSecretariaotros

cualitativo

ENCUESTALabor que desempea la paciente durante el periodo en estudio

NOMINAL

ASPECTO GINECO-OBSTETRICO

VARIABLEVALORES FINALESTIPO DE VARIABLEPROCESO DE MEDICINDEFINICIN OPERAC IONALESCALA DE MEDICIN

Semana de gestacin

semana

cualitativo

Recojo de informacin del carnet de Control Materno InfantilNumero de semanas desde el primer da del ltimo ciclo menstrual de la mujer hasta la fecha en que se efecta la medicin.

NOMINAL

Numero de control prenatalVeces que se realiza el control prenatalcualitativoencuestaVeces que se realiza el control prenatalDE RAZN

Prctica de Higiene Genital Si nocualitativoencuestaLavado genital

NOMINAL

Frecuencia de la Practica Higiene Genital 1 Vez/ Da2 Veces/Da 2 Veces/Semana InterdiariocualitativoencuestaFrecuencia de lavado genitalNOMINAL

Estado nutricional bajo peso < -1 D.E.

cuantitativoEvaluacin del ndice de Masa Corporal funcin de la edad gestacionalEvaluado en base al IMC en funcin de la edad gestacional

DE RAZN

Normal Entre -1 y +1 D.E.

obeso> +1D.E.

sobre peso> +2D.E.

Antecedentes de secrecin vaginal anormal antes del embarazo no

si

cualitativo

encuestaAntecedentes de secrecin vaginal anormal antes del embarazo

NOMINAL

Antecedentes de secrecin vaginal anormal durante el embarazo no

si

cualitativo

encuestaAntecedentes de secrecin vaginal anormal antes del embarazo

NOMINAL

Veces que consulta por el mismo casoNumero de Veces que consultacualitativoencuestaVeces consulta por el mismo casoDE RAZN

Solucion su malestar si nocualitativoencuestaSolucin del malestar candidiasicoNOMINAL

FACTORES DE RIESGO

VARIABLEVALORES FINALESTIPO DE VARIABLEPROCESO DE MEDICINDEFINICIN OPERAC IONALESCALA DE MEDICN

AnemiaSevera: Hb < 7.00 g/dL

CualitativoRecojo de informacin del carnet de Control Materno InfantilPorcentaje de Glbulos RojosEn la sangre en g/dl

NOMINAL

Moderada: Hb= 7.0-9.9 g/dL

Leve: Hb =9.9 g/dL-11.0

Normal: Hb> 12.0 g/dL

Prenda ntima (condicin)Ajustada No muy ajustada SueltaCualitativoencuestaCondicin de la prendaNOMINAL

Prenda ntima (material) algodn sinttico no sabe otroCualitativoencuestaMaterial de la prenda intimaNOMINAL

Antecedentes patolgicos personales deMellitus Si No sabe CualitativoencuestaAntecedentes patolgicos personales de Diabetes Mellitus

NOMINAL

EXAMEN FSICO-SIGNOS Y SINTOMAS

VARIABLEVALORES FINALESTIPO DE VARIABLEPROCESO DE MEDICINDEFINICIN OPERAC IONALESCALA DE MEDICIN

Color de la secrecin vaginalGris y/o AmorronadoCualitativoencuestaColor que presenta la secrecin vaginal

Nominal

Blanco Verdoso

amarillo blanco

otros

Olor de la secrecin vaginal A pescadoCualitativoencuestaOlor que presenta la secrecin vaginal

Nominal

Maloliente

habitual

Otros

Aspecto de la Secrecin vaginalGrumoso viscosoCualitativoencuestaaspecto que presenta la secrecin vaginal

Nominal

Lechoso

Homogneo

Espumoso

8.8 PROCEDIMIENTO A REALIZAR8.8.1Reunin de socializacin del Proyecto: Se realizar contacto con la Directora del servicio de Gineco Obstetricia del Hospital Regional de Ayacucho para la realizacin del estudio y consensuar los objetivos del mismo. Una vez aceptado los trminos del estudio y contando con la autorizacin de los responsables se proceder a organizar la recoleccin de los datos.8.8.2 Recoleccin de los datos: Para la recoleccin de los datos se elabor un instrumento la FICHA DE ENCUESTA que responde a los intereses de los objetivos. Est organizada por bloques de preguntas que incluyeron datos generales, antecedentes Gineco-obsttricos, comportamientos de riesgo para candidiasis, caractersticas sociodemogrficas y otras variables.8.9RECOLECCIN DE MUESTRA BIOLGICA8.9.1 Toma de muestra en los el Servicio de Gineco Obstetriticia de los Laboratorios Urbanos de la Red Huamanga:Se tomar la muestra de secrecin vaginal con la ayuda de un especulo introduciendo el hisopo en el saco vaginal realizando movimientos rotatorios.Se depositar el hisopo con la muestra vaginal en el tubos de tapa rosca conteniendo 2 mL de solucin salina fisiolgica estril al 0.85%, previo rotulado (16).Se realizar este procedimiento dos veces.8.9.2 Transporte de la muestra al Laboratorio de Referencia RegionalLos tubos sern transportados al Laboratorio Regional de Salud Pblica de Ayacucho para el procesamiento, tipificacin, sensibilizacin antifngica y finalmente sern enviados al Instituto Nacional de salud para el control de calidad. 8.9.3 PROCESAMIENTO EN EL LABORATORIO DE REFERENCIA REGIONAL

8.9.4Examen directo Se colocar con la ayuda del hisopo una gota del homogenizado de la muestra en una lmina portaobjeto luego se le echar encima una gota de KOH al 10% y luego cubrir con una lmina cubre objetos y observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x. En la observacin microscpica con objetivos de 10x y 40x se observar clulas redondeadas u ovaladas de tres a siete micras de dimetro que se reproducen por blastoconidias y forman pseudomicelio en la mayora de las especies (16).8.9.5Aislamiento de levaduras A partir del tubo que contiene la secrecin vaginal se sembrar en Agar Sabouraud Glucosa con Cloranfenicol mediante el mtodo de agotamiento en superficie. Se incubar a una temperatura de 37 C por 24 a 48h. Se realizar el examen macroscpico de los cultivos, luego se sembrar en Agar papa dextrosa para realizar estudios morfolgicos, fisiolgico, bioqumicos y tipificacin (16).Morfologa de las coloniasSe caracteriza por presentar colonias cremosas color blanco amarillento, lustrosas, poco elevadas y de bordes bien definidos. (16)8.9.6 Identificacin de especies del gnero Candida. 8.9.6.1 Prueba del tubo germinativo Se realizar una suspensin inoculando una asada de la cepa pura de, con 24 horas de desarrollo en Agar papa dextrosa en 0.5 ml de suero humano. Se incubar a 35 - Candida spp 37 C por 2h y 30 min. Se colocar 2 a 3 gotas de la suspensin en una lmina porta objetos y se cubrir con lmina cubre objetos. Se realizar la lectura al microscopio con objetivos de 10x y 40x. Se considerar como positivo una estructura elongada o alargada (tubo germinativo) que se origina de la levadura (16).8.9.6.2 Produccin de Clamidospora Se realizar la siembra de la cepa en forma de estras en paralelo sobre el Agar arroz. Se colocar una lmina cubre objeto estril sobre cada inculo sembrado. Se incubar a temperatura ambiente por un lapso de 3 a 5 das. Se colocar la placa petri al microscpico y sin retirar la lamina cubre objetos, observar con objetivos a 10x y 40 (16). Se considerar como positivo la visualizacin de estructuras redondas u ovales de pared gruesa, con aspecto de esporas laterales o terminales (clamidoconidios con pseudomicelios y blastoconidias). 8.9.6.3 Desarrollo a 42C Se sembrar las cepas de candida albicans en tubos que contengan Agar papa dextrosa. Se incubar a una temperatura de 42C por 48 horas. Se considerar positivo para C. albicans cuando se observa desarrollo ptimo y negativo para C. dublinensis sin desarrollo (16).8.9.6.4Asimilacin de carbohidratos Se inocular una asada de la cepa de candida spp en forma de estras sobre la superficie del medio base carbohidrato (glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, galactosa y rafinosa). Se incubar a temperatura ambiente por 2 a 3 das. Se considerar positivo al observar en la reaccin un viraje del color lila a amarillo (16).8.9.6.5Formacin de pelcula Se inocular una asada de colonia de levadura en un tubo de vidrio que contenga Caldo Sabouraud. Se incubar a temperatura ambiente (25 C) por 3 das. Se considerar positivo la formacin de pelcula en la superficie del Caldo Sabouraud (16). 8.9.6.6Prueba de la Ureasa Se inocular una asada la cepa de Candida spp en formas de estra en la superficie del medio base urea. Se incubar a temperatura ambiente por 2 a 3 das o a 37 C por 6h. La reaccin se considera positiva cuando se alcaliniza el medio lo que produce un cambio del color original (amarillo) a rosa o rojo (16).8.9.6.7Sensibilidad a la cicloheximida- Agar Mycosel Se inocular una asada de la cepa de candida spp en forma de estras en la superficie del Agar Micosel. Se incubar a temperatura ambiente por 2 a 3 das. La reaccin se considera sensible al no observar crecimientos de colonias de Candida en el medio (16).8.9.6.8Identificacin Bioqumica enzimtica. Se sembrar la cepa en forma de estras en la superficie de CHROM agar candida. Se incubar a 30 - 37 C por 24 a 48 h. Se considerar positivas para C. albicans, cuando las colonias son lisas y de color verde esmeralda, C. dubliniensis, colonias de color verde oscuro, C. tropicalis colonia de color azul oscuro con un halo prpura marrn en el medio de cultivo, C. krusei. colonias rugosa con el centro rosado y el borde blanco, C. glabrata, colonia de color violeta morado (16).8.9.6.9Mtodo de difusin en Agar A partir de un cultivo de 24 h a 35 C en Agar Sabouraud, se preparar un inoculo de turbidez 0.5 Mc Farland en solucin 0.15 M de cloruro de sodio estril (solucin salina 0.85%). El inoculo se usar dentro de los 30 min de su preparacin. Se inocular las cepas identificada con un hisopo en la superficie de cada placa con Agar Muller-Hinton suplementado con 2% de glucosa y azul de metileno, con una concentracin final de 0.5 mg/ml. Se dejar secar en una estufa a 37C de 10 a 15 minutos, para que se absorba la humedad, evitando tiempos ms prolongados de secado. Se colocar los discos antifngicos de modo que queden a 20 mm del borde de la placa, y separados entre s por 40 mm. Se incubar por 24h a 37C. (Si transcurridas las 24 horas de incubacin, los halos no son claramente distinguibles, prolongar la incubacin 24 horas ms para dar lugar al crecimiento de especies de desarrollo ms lento) Se medir el dimetro de la zona de inhibicin del crecimiento en mm.La zona a medir es la definida por las colonias con desarrollo confluyente. Dentro de la zona de inhibicin pueden desarrollar colonias con crecimiento inhibido que muestran un dimetro menor al de las colonias externas. Estas colonias no deben ser consideradas mutantes resistentes.

9. Anlisis y procesamiento de los datosLos resultados se elaborarn utilizando una base de datos y SPSSV. 20, se realizar frecuencias estadsticas, chi2.Los cuadros estadsticos, se realizaran A x B para poder determinar y comparar los datos obtenidos durante el procesamiento de las muestras.10Organizacin y responsabilidades DIRESA: finacnicamiento del proyecto con materiales, equipos, reactivos y espacio donde se realizar la tipificacin y sensibilidad de las especies de Candida. INS: realizar el control de calidad de las muestras procesadas en el Laboratorio de Referencia Regional de Salud Publica Ayacucho. Hospital Regional Ayacucho: Realizar el llenado de la FICHA DE ENCUESTRA y la toma de la muestra de las mujeres gestantes que acuden al hospital Regional de Ayacucho. UNSCH: finaciamiento del proyecto con personal para la realizacin de tipificacin, sensibilidad y el anlisis de los factores de riesgo asociados a la candidiasis.11. De las autoras y publicacionesAutor de la investigacin: OSCCO CCORAHUA, Lusber; los resultados no sern publicados. 12.Aspectos ticosTodas las pacientes incluidas en el estudio sern debidamente informadas de los objetivos de la investigacin. El primer paso durante la recoleccin de la informacin ser solicitarle su colaboracin. A cada paciente se le pidi firmar su consentimiento informado para participar en el estudio en el cual se le dar a conocer los beneficios ventajas, desventajas y en qu consiste el examen de toma de muestra (ver anexo). Una vez realizadas estas gestiones se proceder a entrevistar a cada una de las mujeres y realizar la toma de muestra. Se referir los resultados a las usuarias para su tratamiento respectivo.13. Cronograma de actividadesTiempo de duracin7 mesesFecha de inicioJunio del 2014Fecha de trmino probableDiciembre del 2014ACTIVIDADESJunJul.AgoSet.Oct.NovDic.Ene

Revisin bibliogrficaXXXXXXXX

Reunin de socializacinX

Capacitacin sobre toma de muestraX

Implementacin del proyectoXXXXXXX

Recoleccin de muestras de secrecin vaginalXXXXXXX

Aislamiento de las especies de CandidaXXXXXXX

Identificacin de especies de Candida por dif. mtodosXXXXXXX

Enviar muestras positivas al INS para el control de calidad de las especies de cndida.XXXXXX

Anlisis e interpretacin de datosXXXXXXX

Redaccin del informe finalXX

Exposicin del informeX

9. PRESUPUESTOEspecifica de gastoACTIVIDADESCosto S/.

2.3.15.1Materiales de escritorio e impresin:

millares de papel bon A4 de 80 g.66.00

marcadores de vidrio12.00

Resaltadores7.00

Lapiceros5.00

Corrector4.00

unidades de folder manila A48.00

cuaderno espiralado de 100 Hojas7.00

cmara fotogrfica400.00

2.3.15.1.1Accesorios

Tner impresin Hp laser jet 1006 180.00

SUBTOTALS/ 507.00

30.01Materiales para el uso en el laboratorioCosto S/.

Materiales de vidrio1328.00

Reactivos500.00

Mdios de cultivo8000.00

Otros420.00

SUBTOTALS/ 10248.00

39.00 Servicios Costo S/.

Movilidad 500.00

Papel bond A4 de 80 g. 50.00

Transcripcin50.00

Impresiones100.00

Encuadernado150.00

Memoria USB 25.00

SUBTOTALS/ 775.00

TOTAL DE PRESUPUESTO S/ 11530

10. FINANCIAMIENTOLRRS/ 10755

AutofinanciamientoS/ 775.00

TOTAL S/ 11530

11. BIBLIOGRAFA

1. Cornistein W., MoraA., Orellana N., CapparelliF., del CastilloM. Candida:epidemiologa y factores de riesgo para especies noalbicans. ELSEVIER [Internet]. 2013 [citado en 01 abr. 2014]. Vol.31: Nm.06. Disponible en: URL: http://zl.elsevier.es/es/revista/enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28/candida-epidemiologia-factores-riesgo-especies-no-albicans-90207098-originales-20132. Norma Tcnica de Salud Para el Manejo de Infecciones de Transmisin Sexual en el Per N 077-MINSA/DGSP V.01. Lima Per. 20093. Benesson A. Manual para el control de las enfermedades transmisibles. 16 ed. Washington DC: Organizacin Panamericana de Salud; 1999. p.28-30 (Publicacin Cientfica N 564).4. Prez SA. Ginecologa. 2da ed. Santiago (Chile): Publicaciones tcnicas Mediterrneo; 1995. 5. Biasoli Marisa. Candidiais. [Internet]. Argentina. Centro de Referencia de Micologia. Disponible en:URL:http://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/file.php/118/MATERIALES_2013/TEORICOS_2013/CANDIDIASIS_2013-1.pdf6. 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[Citado en 25 abr. 2014]. 25: 17-21 Disponible en: URL: http://www.reviberoammicol.com/2008-25/017021.pdf

ANEXOS ICONSENTIMIENTO INFORMADOProyecto del investigador: Sensibilidad antifngica de especies de Candida en mujeres gestantes que acuden Hospital Regional de Ayacucho MAMLL, 2014.Investigador principal: .Esta investigacin es realizada por la Direccin Regional de Salud y ser ejecutado en julio del 2014 por lo que lo invitamos a participar en este estudio, cuyo objetivo principal es Evaluar la sensibilidad Antifngica de especies de Candida en Gestantes que puedan predisponer al desarrollo de la candidiasis que se caracteriza por aumento del flujo vaginal (leucorrea) asociado a quemazn y prurito, que puede favorecer la aparicin de parto prematuro y rotura prematura de membranas que repercute en una disminucin de la calidad de vida de las personas afectadas. Este trabajo permitir conocer la sensibilidad antifngica de las especies de Candida lo cual facilita la eleccin del mejor tratamiento adems permitir conocer los factores de riesgo de la candidiasis en las mujeres embarazadas y de esta manera se puedan crear estrategias de prevencin contra la candidiasis.Si usted acepta participar en esta estrategia, nosotros le haremos algunas preguntas y anotaremos sus respuestas en esta ficha de encuesta. A dems se le realizar una tomar de muestra de secrecin vaginal con la ayuda de un especulo introduciendo el hisopo en el saco vaginal realizando movimientos rotatorios. Se le realizar este procedimiento dos veces para saber si usted est infectada o no.La toma de muestra est libre de riesgos.No realizaremos otro anlisis que no te hayamos informado ni guardemos las muestras, una vez terminadas el estudio se eliminarn todas.Todos los exmenes de laboratorio sern gratuitos no te ocasionarn gastos. Es posible que de su participacin en este estudio no obtenga un beneficio directo. Sin embargo la determinacin de la sensibilidad de especies de Candida podra beneficiar en un futuro a otros pacientes que la padecen y contribuir a un mejor conocimiento y tratamiento de esta enfermedad.Su participacin en el estudio es totalmente voluntaria, y usted decide no participar puede retirarse sin que tenga que dar explicaciones, no habr ninguna represara ni afectar en su beneficios para su atencin en el establecimiento de salud.La informacin que usted nos brinda y sus resultados en esta investigacin solamente lo conocern el investigador y le entregar sus resultados en un sobre cerrado personalmente.Si su resultado fuera positivo, Uds. Recibir una consejera por los profesionales de la salud. En el caso de que fuese positivo se mandaran las muestras al INS para su control de calidad es decir que ellos van a supervisar nuestro trabajo para cuidar que no se cometan errores.Si requiere mayor informacin o tenga otras dudas puede comunicarse con el investigador OSCCO CCORAHUA, Lusber. Telfono 966888179 email: lusberoscco@hotmail.com .Si Usted est de acuerdo con que le hagan el estudio debe otorgar su consentimiento informado por escrito firmado abajo.

-----------------------------------------Firma y huella del paciente Fecha:

-----------------------------------------Firma y huela del investigadorFecha

ANEXO IIFICHA DE ENCUESTAFACTORES QUE DETERMINAN LA CANDIDIASIS EN MUJERES GESTANTES QUE ACUDEN A LOS LABORATORIOS LOCALES DE LA RED HUAMANGA.

FECHA: ___/___/___N de ficha: ______HC:_______I. DATOS GENERALESNombre:Edad: aos

Lugar de origen: 1)Urbano 2) ruralLugar de residencia:

Grado de Instruccin: 1) ninguna 2) primaria 3) secundaria 4) superior

Estado civil: 1)soltera 2) casada 3) conviviente 4) divorciada 5) viuda

Religin: 1) Catlico 2) evanglico3) mormn 4) ninguno 5) otro....................

Ocupacin:

II. ASPECTO GINECO-OBSTETRICOSemana de gestacin: .Nmero CPN.

Pract. Hig. Genital: 1)si 2)no Vida sexual activa 1)si 2) no

Frecuencia de la Pract. Hig. Genital: 1) 1 vez/ da 2) 2 veces/da 3) 2 veces/semana 4) Interdiario

Estado nutricional: 1) bajo peso 2)Normal 3) obeso 4) sobre peso

Antecedentes de sec. vag. Anormal antes del embarazo 1) no 2) si hace cunto tiempo:

Antecedentes de sec. vag. Anormal durante el embarazo 1) no 2) si hace cunto tiempo:.

Veces que consulta por el mismo caso:Solucion su malestar 1)si 2) no

III. FACTORES DE RIESGOAnemia 1) severa 2) moderada 3)leve 4) normal

Ropa que usa con frecuencia 1) ajustada 2) no muy ajustada 3) Suelta

Prenda ntima (material) 1) algodn 2) sinttico 3) no sabe 4) otro

Antecedentes patolgicos personales deDiabetesMellitus: 1) Si 2) No3) no sabe

9. EXAMEN FSICO-SIGNOS Y SINTOMASColor Sec. Vag: 1) Gris y/o amorronado 2) BlancoVerdoso 3)amarillo blanco 4) otros..............

Olor Sec. Vag: 1) A pescado 2) maloliente 3) habitual 4) otros.............

Aspecto Sec. Vag: 1) Grumoso viscoso 2) lechoso homogneo 3) espumoso 4) otros

Eritema vulvar: 1) si 2)noPrurito vulvar: 1) intenso 2) leve e intenso 3) no

Disuria 1) si 2)noDisparreumia: 1)si 2)no

V. ASPECTO CLNICOUso de antibiticos de amplio espectro: 1) No 2) no sabe 3) si (especifique)

VI. EXAMEN DE LABORATORIODiagnstico

FORMULARIOFOR- 001PRT-CNSP-007

CONTROL DE CALIDADHONGOS LEVADURIFORMESESPECIES DE CANDIDAEdicin N 01

Pgina 01 de

Laboratorio: Micologa

Material de referencia Resultados esperados:

CEPAS ATCCTG(2hrs y 30 min a 37C)CL(24hrsT amb)CHROM(24-48 hrs a 37C)UREA(24 hrs a 37C)MYC(3 das aT amb)VELO(3 das aT amb)CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS(48 hr a 37C)

GLULACSACMALGALRAF

Cndida albicans 90028(+)(+)VERDES(-)(++)(-)(+)(-)(+)(+)(+)(-)

Cndida glabrata 90030(-)(-)BORDE BLANCO Y CENTRO ROSADO(-)(-)(-)(+)(-)(-)(-)(-)(-)

Cndida parapsilosis 22019(-)(-)CREMAS(-)(-)(-)(+)(-)(+)(+)(+)(-)

Cndida tropicalis00175(-)(+)AZULES(-)(-)(++)(+)(-)(+)(+)(+)(-)

Cndida krusei 6258(-)(-)ROSADAS(+/-)*(-)(+)(+)(-)(-)(-)(-)(-)

Cndida guilliermondii021342513(-)(-)VIOLETA(-)(+)(-)(+)(-)(+)(+)(+)(+)

Cndida Lusitaniae 0300448913(-)(-)BLANCA(-)(+/-)*( - )(+)(-)(+)(+)(-)(-)

TG: tubo germinativo; CL: clamidospora; CHROM: medio cromgeno; MYC: agar mycosel ; GLU: glucosa; LAC: lactosa ; SAC: sacarosa; MAL: maltosa; GAL: galactosa; RAF: rafinosa; *: reaccionas variables

Cdigo TGCLCHROMUREAMYCVELOGLULACSACMALGALRAFResultado

Fecha de cierre del registroFirma y V B del supervisor (a)