SISTEMA ABO

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Inmunología básica de los grupos sanguíneos

Antígenos

Un antígeno se define como cualquier sustancia que, cuando ingresa en el organismo y se reconoce como extraña, provoca una respuesta inmune. Ésta podría inducir la producción de anticuerpos específicos que determinan una reacción observable.

Anticuerpos

Un anticuerpo es el producto de la respuesta inmune que reacciona con el antígeno correspondiente en forma observable. Los anticuerpos o inmunoglobulinas (Ig) son proteínas plasmáticas que se ubican en la fracción de las gammaglobulinas. Existen cinco clases de inmunoglobulinas:IgG, IgM, IgA, IgD e IgE.

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¿Qué es un grupo sanguíneo?

Un grupo sanguíneo se define como “una característica heredada sobre la superficie del eritrocito, la cual se puede detectar por medio de un anticuerpo específico”.Definición de sistema de grupo sanguíneo

Un sistema de grupo sanguíneo está compuesto por antígenos heredados como grupo. Cada sistema está constituido por antígenos producidos por alelos en un locus genético único o en loci tan estrechamente ligados, que no se presenta entrecruzamiento

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Importancia biológica de los antígenos de los grupos sanguíneos

La importancia biológica de muchos antígenos de los grupos sanguíneos se debe principalmente a su estructura. Las siguientes funciones se han atribuido a los antígenos de los grupos sanguíneos:

•Transportadores de moléculas biológicamente importantes a través de la membrana del eritrocito.•Receptores de estímulos externos y células de adhesión.•Reguladores del complemento para prevenir la destrucción de los eritrocitos.•Enzimas.•Anclaje de la membrana del eritrocito al citoesqueleto•Proveedor de matriz extracelular de carbohidratos para proteger a la célula de daños mecánicos y ataques por agentes infecciosos.

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Importancia clínica de los anticuerpos de los grupos sanguíneos

La importancia clínica se determina de acuerdo a si el anticuerpo es capaz de destruir los eritrocitos in vivo, si el anticuerpo puede cruzar la placenta (y el antígeno está bien desarrolladoen el feto), y por la frecuencia relativa del antígeno. Usando estos criterios, los anticuerpos ABO, los cuales causan destrucción intravascular inmediata, son los más importantes en las transfusiones, seguidos por los anticuerpos Rh, los cuales ya se han formado por la estimulación inmune y pueden causar enfermedad hemolítica del recién nacido severa o destrucción inmune de las células transfundidas. Otros factores importantes son la clase y subclase de inmunoglobulina y el rango térmico del anticuerpo. En general, los anticuerpos clínicamente importantes son IgG quereaccionan a 37°C

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Los antígenos de grupo sanguíneo ABO son de gran importancia en medicina transfusional; son los más inmunogénicos de todos los antígenos de los grupos sanguíneos, convirtiendo la transfusión de sangre ABO incompatible en la causa más común de muerte por este procedimiento. A pesar de su importancia clínica, las funciones fisiológicas de los antígenos del grupo sanguíneo ABO siguen siendo un misterio

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Antígenos del sistema ABO

Los antígenos del sistema ABO se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta y sexta semana del embrión y no se desarrollan completamente hasta después del nacimiento. Esta podría ser una razón para que la enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido por incompatibilidad ABO, sea usualmente leve.

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•Los antígenos del sistema ABO están compuestos por azúcares que protruyen de la membrana de la superficie de los eritrocitos.

•Están unidos a un componente denominado ceramida

• Una serie de cuatro azúcares se une a la ceramida. A esta estructura de cuatro azúcares o sustancia precursora, se le unen otros azúcares que le dan la especificidad a cada antígeno ABO

Estructura de los Antígenos del Sistema ABO

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En el caso del sistema sanguíneo ABO, muy poco se conoce acerca de las funciones de estos azúcares en los eritrocitos, excepto que ellos hacen parte del glucocálix, una matriz de azúcar que rodea la célula y la protege de daños químicos e invasión de patógenos .

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Subgrupos de A y B

• Los subtipos del grupo sanguíneo ABO se denominan subgrupos y/o variantes.

• Los subgrupos de ABO se diferencian por las cantidades de antígenos A, B, u O (H) sobre los eritrocitos.

• De los subgrupos de A y B, son más comunes los subgrupos de A.

• Los subgrupos son clasificados por la cantidad de antígeno A, y esta cantidad disminuye en el orden A1, A2, A3, Ax, Aend, Am, Ael

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Anticuerpos del sistema ABO

• los anticuerpos del sistema ABO se forman como resultado de la exposición a antígenos A, B o similares.

•Esta exposición previa puede darse in utero o inmediatamente postparto, en el caso de antígenos A y B, o como respuesta a una exposición a antígenos similares en partículas de polen, alimentos, bacterias y virus

• Es así como sólo se generan anticuerpos dirigidos contra los antígenos ausentes en los eritrocitos de cada persona

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• Los anticuerpos anti-A y anti-B pueden ser detectables en los niños entre los 3 y 6 meses de vida, luego del nacimiento.

• La mayoría de los anticuerpos anti-A y anti-B presentes en el cordón umbilical son de origen materno, adquiridos por la transferencia placentaria de IgG materna; por lo tanto, los anticuerpos anti-A y anti-B en el suero de recién nacidos o niños menores de 6 meses, no se consideran válidos.

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• La producción de anticuerpos se incrementa, alcanzando el nivel de los adultos entre los 5 y 10 años de edad, y disminuyen posteriormente en adultos de edad avanzada. Las personas ancianas tienen niveles menores de anti-A y anti-B que los adultos jóvenes

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Reactividad de los anticuerpos anti-A y anti-B

• Los anticuerpos ABO son una mezcla de IgM e IgG; sin embargo, los anticuerpos anti-A y anti-B de las personas con grupos sanguíneos A y B son predominantemente del tipo IgM, en tanto que las personas con grupo sanguíneo O son de tipo IgG predominantemente.

• Debido a que la IgG atraviesa la placenta y la IgM no, los niños de grupo sanguíneo A o B, de madres O, presentan un mayor riesgo de desarrollar enfermedad hemolítica del feto y del recién nacido, que los niños de madres A o B

Circulación

materna

pH 7.4

Circulación fetal

pH 7.4

Sincicio Trofoblasto

FcRn

LpH 6

LpH 6

Endocitosis

Cambio de pH unión de IgG

con FcRn

Degradación de proteínas

Exocitosis

Cambio de pH liberación de IgG

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• Tanto los anticuerpos anti-A y anti-B tipo IgM como los tipo IgG aglutinan los eritrocitos principalmente A temperatura ambiente (20°C a 24°C) o por debajo de ésta, y activan eficientemente el complemento a 37°C.

• La capacidad lítica mediada por complemento de estos anticuerpos se vuelve aparente si el suero problema se incuba a 37°C.

• Los anticuerpos anti-A1 se presentan en el suero como un aloanticuerpo entre el 1% y el 2% de las personas A2 y en el 25% de las personas A2B. Algunas veces también se pueden encontrar anticuerpos anti-A1 en el suero de personas con otros subgrupos débiles de A.

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Respuesta inmune a los antígenos ABO

La respuesta inmune a los antígenos del sistema ABO tiene como resultado la producción de altos títulos de anticuerpos tipo IgM, los cuales se conocen con el nombre de isohemaglutininas. Estos anticuerpos activan el complemento luego de unirse a los eritrocitos causando hemólisis intravascular. Por otra parte, la presencia de complejos inmunes antígeno-anticuerpo puede llevar a una falla renal, shock, coagulación intravascular diseminada y muerte

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SISTEMA RH

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Sistema de Grupo Sanguíneo Rh

•Descubierto en el año 1940 por K. Landsteiner y A. Wiener.•Es el segundo sistema en importancia clínica después del sistema de grupo sanguíneo ABO.•Se requiere de compatibilidad entre donante y receptor para este sistema.•Es responsable de la enfermedad hemolítica al recién nacido.•Los antígenos de grupo sanguíneo Rh, son proteínas integrales de la membrana plasmática de los eritrocitos.•Estas proteínas Rh, son indispensables para mantener la estructura de la membrana plasmática del eritrocito.

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• Existen 35 a 40 o más antígenos en el sistema Rh, pero solo 5 son los que se utilizan con más frecuencia y el uso rutinario es el antígeno Rho (D).

• Al igual que el sistema ABO, el sistema Rh-Hr tiene un puesto prominente en la práctica de la transfusión sanguínea y en relación con la enfermedad hemolítica del Recién Nacido es el más importante.

• A diferencia del sistema ABO, en el sistema Rh-Hr no existen aglutininas (o anticuerpos) naturales y cuando se presentan son el resultado de una inmunización previa.

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• El antígeno Rho (D) es determinado genéticamente a través de un gen autosómico dominante. Dicho gen aparentemente reside en el cromosoma1.

• En la rutina de transfusión (con excepción de embarazos y algunos pacientes Rh negativo) solo se tipa por el antígeno D en el sistema Rh y los demás únicamente si el anticuerpo se presenta, en problemas de paternidad, etc.

• Con el tiempo se descubrió que el sistema Rh-Hr es un sistema complejo y casi simultáneamente se crearon dos sistemas de nomenclatura.

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Nomenclatura Rh-Hr (Weiner)

Cada fenotipo se designa usando las letras Rh oHr con superscriptos, y comillas. La Mayúscula Rse reserva para cuando se refiere a la presencia deRho. Cada gene da lugar a un aglutinógeno (antígeno de grupo) con varias especificidades (determinantes antigénicas o factores), por lo tanto cada antígeno puede reaccionar con varios anticuerpos.

Cada individuo hereda de cada padre un gene quecontrola un antígeno Rh que tiene varias determinantesantigénicas, la combinación es equivalentea su fenotipo.

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NOMENCLATURA CDE (Fisher y Race)

La relación recíproca entre varios de los factores Rh hizo que Fisher y Race desarrollaran el concepto de que los antígenos Rh se derivaban de 3 loci de genes íntimamente relacionados. Cada uno con dos alelos. (después se descubrieron más). Estos antígenos se designan con las letras CDE y cde.

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Anticuerpos del Sistema

Los anticuerpos del sistema son generalmente producto de una respuesta inmune de la clase IgG que puede ser detectado empleando ciertos potenciadores, como los medios de baja fuerza iónica y medios proteicos (albúmina bovina), a una temperatura de 37°C, por ser esta una aglutinina caliente. 

Algunos sueros contienen mezclas de IgG e IgM, también se detectó IgA, pero siempre como un componente de menor cuantía y asociado con la hiperinmunización.

En sueros de pacientes que forman un anticuerpo anti-Rh distinto al “D”, los más comúnmente encontrados son el anti-c y el anti-E.Con respecto al anti-c se debe destacar que siempre es de origen inmune y es el más importante desde el punto de vista clínico luego del anti-D, ya que es productor de EHFN y RHT; en cambio el origen inmune del anti-E es raro, aunque más común que el anti-C, casi siempre es de origen natural y no inmune.

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ENFERMEDAD HEMOLITICA PERINATAL

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PRUEBAS PRE-TRANSFUSIONALES

Pruebas para determinar el grupo sanguíneo ABO/Rh

• Se basa en una técnica de hemaglutinación. • Se utilizan reactivos comerciales que contienen

anticuerpos específicos para cada antígeno, que se mezclan con la sangre a clasificar.

• Se hace en dos partes:• primero buscando en los eritrocitos la presencia de

antígenos (prueba directa),• y segundo, buscando en el suero o plasma los

anticuerpos (prueba inversa)

Aglutinación

Resulta de la fijación de los Ac´s a los Ag´s que están en la membrana de los eritrocitos, formando una red que mantiene unidas las células.

Este proceso se divide en dos etapas.

Reacciones antígeno-anticuerpo eritrocitarias

1. Los anticuerpos se fijan a los antígenos eritrocitarios en cuanto se ponen en contacto con ellos.

2. „Se forma una red que determina la aglutinación

Hemólisis

Hemólisis es la ruptura de los eritrocitos con la correspondiente liberación de la hemoglobina intracelular. La hemólisis in vitro mediada por anticuerpos depende del ataque del complemento a la membrana del eritrocito

Factores que afectanlas reacciones antígeno-anticuerpo eritrocitarias

Fuerza iónica

En condiciones fisiológicas normales (in vivo) o en un tubo de ensayo (in vitro), los glóbulos rojos nunca hacen contacto, debido a su carga eléctrica negativa en la membrana que hace que se rechacen entre sí. La distancia que separa los eritrocitos es mínima, pero suficiente para evitar que las moléculas pequeñas de IgG que se adhieran a las células causen aglutinación,. Sin embargo, las moléculas de IgM más grandes, pueden unirlas, como y en consecuencia, los anticuerpos IgM pueden provocar aglutinación

Fuerza iónica

Fuerza iónica

La fuerza que mantiene la separación entre las células se denomina potencial zeta

TemperaturaLos anticuerpos de los grupos sanguíneos difieren con respecto a su actividad térmica óptima y son reactivos en un rango de temperatura restringido.

•Los anticuerpos fríos (IgM), entre 4°C y 25°C. •Los anticuerpos calientes, generalmente IgG, reaccionan mejor a 37°C.

pHEl pH óptimo de la mayoría de los anticuerpos de los grupos sanguíneos es de 6,5 a 7,5.

Cuando el pH es demasiado ácido o demasiado alcalino, las reacciones se inhiben. Para pruebas de rutina se debe usar un pH de 7,0.

Antigüedad del suero y los eritrocitos

Las reacciones más satisfactorias se obtienen cuando se utilizan suero y eritrocitos frescos.

Proporción entre anticuerpos y antígenos

La proporción entre anticuerpos y antígenos es importante.

•Cuanto mayor es la concentración de Ac´s en relación con la de los Ag´s, más intensa es la reacción. •Por lo tanto, la potencia de la suspensión de eritrocitos es esencial, •porque si es excesiva, podría enmascarar la presencia de anticuerpos débiles. •Para las pruebas de aglutinación, la preparación de los eritrocitos debe estar entre el 2% y el 5%.

una proporción de glóbulos rojos comúnmente usada es dos gotas de suero por una gota de una suspensión de glóbulos rojos entre el 2% y el 5%. Si el anticuerpo reacciona muy débil, aumentar la cantidad de anticuerpo puede incrementar la sensibilidad de la prueba.

Tiempo de incubación

Las reacciones antígeno-anticuerpo tienen un tiempo óptimo de incubación que favorece la máxima unión del anticuerpo al antígeno.

Periodos de incubación cortos no permiten que cantidades significativas de anticuerpo se unan,.

Periodos prolongados de incubación pueden resultar en disociación del anticuerpo del antígeno.

Tiempo Optimo

• Solución Salina entre 30 a 60 minutos solución.

• Solución de baja fuerza iónica entre 10 a 15 minutos.

• Albumina entre 30 a 45 minutos.

Lectura e interpretación de las reacciones de aglutinación

4+3+2++ / -−

4+3+2++ / -−

3+2+1+−

Otros Metodos

Tecnología de aglutinación en columna

métodos en los cuales los eritrocitos son filtrados a través de una columna que contiene un medio que separa los eritrocitos.

Se emplean una tarjeta o tira de microtubos,

Un espacio o cámara en la parte superior de cada columna usada para para incubar las células y el suero o plasma.

Con la centrifugación los eritrocitos pasan a través de la columna. el medio de la columna separa los eritrocitos aglutinados de los no aglutinados,

DISCREPANCIAS EN PRUEBAS PRETR-ANSFUSIONALES

Discrepancias mediadas por células.

•Aglutinación de campo mixta•Sustancias en el suero o plasma•Reactivos

Discrepancias mediadas por suero

•Aloanticuerpos•Autoanticuerpos•Transfusión de componentes plasmáticos ABO no idénticos•Edad•Enfermedad