“MMUESTREO DE AAGUA DE MMAR

PARA LA IIDENTIFICACIÓN DE

PPLANCTON”

Estandarizar la Toma de Muestras de Agua de Mar para la Identificación de Plancton en los Estados del Golfo de México, así como la toma de muestra de moluscos

Objetivo

Tamaulipas, Veracruz, Tabasco, Campeche, Yucatán y Quintana Roo

Fenómeno natural caracterizado por un aumento de la concentración de ciertos organismos componentes del Plancton

Condiciones ambientales

Aumento de organismos fitoplanctónicos

Coloración del agua "Marea Roja“, concentración y profundidad

No visibles

Aperiódicos e impredecibles

Que son los FAN’S

Los biotoxinas son producidas por los organismos originadores de FAN’S

Los moluscos bivalvos filtradores

de agua, obtienen y concentran

plancton, incluidos los tóxicos. Las

Toxinas se ligan a los tejidos o en

las glándulas digestivas.

Los moluscos no alteran sus

características, por lo que a "simple

vista" no es posible detectar

toxicidad.

Filtradores de FAN’S

Óptimos

Representativos

Georreferenciados

Nombre de la Ubicación

Localidad Municipio y Jurisdicción

Consideraciones

Zonas de Extracción de Moluscos Bivalvos

Antecedentes históricos con presencia de FAN’S

Coloraciones en el agua de mar

Mortandad de peces

Síntomas de irritación, molestias en vías respiratorias, garganta y lagrimeo

Puntos de Muestreo

Agua y Moluscos

Puntos de Muestreo Agua y Moluscos

EstadoEstado Puntos para Puntos para monitoreo de monitoreo de

AguaAgua

Puntos para Puntos para monitoreo de monitoreo de

MoluscosMoluscos

Tamaulipas 20 6

Tabasco 6 3

Campeche 15 3

Yucatán 20 ___

Quintana Roo 42 ___

Veracruz 83 17

Calendario de Monitoreo

De acuerdo a lo que establece la Guía Técnica para el monitoreo de biotoxinas marinas y fitoplancton como medida preventiva de intoxicaciones asociadas a florecimientos algares nocivas y la Instrucción de Trabajo para el control de los moluscos expuestos a biotoxinas marinas (Documentos en Revisión) COFEPRIS

Monitoreo Guía Instrucción de Trabajo

Agua 2 Veces por semana Diario o cada tercer dia

Moluscos 1 vez al mes Diario o cada tercer día

Calendario Pendiente

Toma Directa

Con Red

•Por arrastre

•A profundidad

Con botella muestradora

Métodos de Muestreo de Agua

Termómetro de mercurio de –10 a 110°C

Cinta Adhesiva masking tape

Libreta de campo

Hoja de registro

Etiquetas

Marcadores indelebles

Hielera con refriegerantes o hielo

Jeringas o pipetas de 5 ml

Acetato de lugol

Papel Kraft o estraza

Chaleco Salvavidas

Kit para la medición de pH

GPS

Material y Equipo para el Muestreo de Agua

Lancha y operador

Combustible

Toma Directa

Es utilizada cuando está presente el Florecimiento de

Algas Nocivas

Toma Directa Materiales y Equipo:

• Frascos de polietileno de boca ancha con tapa

y contratapa de 250 ml color ambar

Metodología

• Ubicarse en los puntos de monitoreo georreferenciados

• Enjuagar el frasco de 250 ml tres veces con el agua de lugar.

• Sumergir el frasco aproximadamente a 30 cm del espejo del agua

• Llenar el frasco aproximadamente al 90%.

• Agregar 2.5 ml de acetato de lugol

• Etiquetar las muestras

• Tomar y anotar los parámetros de TºC y pH

• Proteger las muestras de la luz, en caso de que los frascos no sean de color ámbar forrándolos con papel kraft o estraza

• Introducir los frascos a la hielera y mantener la temperatura de transporte a aproximadamente 4°C

• Anotar las observaciones o irregularidades que se observen alrededor del medio (mayor aportación de agua dulce hacia el mar, mortandad de especies acuáticas, lluvias, nortes, etc.)

Toma Directa

• Frasco 500 ml con tapa y contratapa plásticos

• Envío al LESP-Veracruz, en un tiempo no mayor a 24 hrs. A partir de la toma de muestra.

Toma Directa de muestras de agua para cuantificación de

Brevitoxina/Elisa

(Proyecto 2004 LESP-Ver.)

Con Red

Es utilizada para conocer el plancton existente en el agua de mar, no es recomendable aplicar esta técnica cuando

hay presencia de Florecimiento de Algas

Nocivas

Con Red por Arrastre

Materiales y Equipos:

Red de muestreo No. 25 abertura de malla 20µm, con colector.

Plomada de 2 kilos

Lazos o cuerdas

Frascos de plastico de 100 ml de boca ancha con tapa y contra tapa

Con Red por Arrastre

Metodología:

• Ubicarse en el punto de monitoreo georreferenciados

• Se enjuaga la red con el agua del lugar

• Se amarra firmemente el extremo de la cuerda o lazo de la red con la plamada en el otro extremo, a alguna parte de la lancha.

• Tomar la cuerda o lazo con la mano y mantener la red a 1 metro por debajo de la superficie del agua y conservar una velocidad constante de 1 m/seg.

• Recorrer una distancia de 100 m

Con Red por arrastre

Metodología:

• Una vez terminado el recorrido, se saca la red del agua, y el colector de la red que se localiza al final de ésta se desprende.

• El contenido del colector se deposita en un frasco de 100 ml., se le agrega 1 ml de acetato de lugol.

• Se etiquetan las muestras.

• La muestra se introduce a la Hielera y se mantiene la temperatura a aproximadamente 4°C

• Tomar y anotar los parámetros de TºC y pH

Con Red a profundidad*

Metodología:

• Ubicarse en el punto de monitoreo georreferenciados

• Se enjuaga la red con agua del lugar.

• Se amarra firmemente el extremo de la cuerda o lazo de la red con la plamada en el otro extremo, a alguna parte de la lancha.

• Tomar la cuerda o lazo con la mano y sumergirla a una profundidad de aproximadamente 5 metros, asegurando que no quede ninguna burbuja de aire

• Se hacen movimientos giratorios horizontales, verticales o bien de derecha a izquierda durante aproximadamente 1 minuto o hasta que se observe la presencia de biomasa dentro de la red. Los movimientos deben ser suaves y lentos. La embarcación debe de estar estática.

Con Red a profundidad*Metodología:

• Se extrae la red.

• El sobrenadante se vierte en una bolsa plástica de cierre hermetico.

• Se introduce una pequeña cantidad del sobrenadante en el tubo capilar.

• Tomar y anotar los datos de tempertura y pH

• Se observa al microscopio el tubo capilar

*Fuente: Guía Tecnica para el monitoreo de biotoxinas marinas y fitoplancton como medida preventiva de intoxicaciones asociadas a florecimientos algares nocivas (Documento en Revisión) COFEPRIS

Con Botella Muestreadora

Es utilizada para conocer el plancton existe en el agua de

mar, a diferentes profundidades

*Fuente: FMRI

Materiales y Equipos:

• Disco de Secchi

• Botella Van Dor de 3 Lt con cuerda y mensajero

• Frascos de polietileno con tapa y contratapa de 1Lt (para la muestra)

• 1 Hielera

Con Botella Muestreadora

Metodología

1. Abra y fije los viajes en la botella de Van Dorn y cierre las válvulas

2. Sumergir la botella sobre el lado de la lancha a un 1 metro debajo de la superficie

3. Colocar el mensajero en la línea y el lanzamiento

4. Sacar la botella después de que las cápsulas hayan estado disparadas

5. Abrir la botella Van Dorn y verter el agua en el frasco de 1 Lt y agregar el acetato de lugol (1ml de acetato por cada 100 ml de agua).

6. Etiquetar el frasco con la muestra (especificar la profundidad a la que fue tomada la muestra)

Con Botella Muestreadora

7. Repetir los pasos 2-6 excepto, y sumergir la botella muestreadora a 2 metros del fondo debajo de la superficie

8. Tomar y anotar los parámetros de Temperatura y pH

9. Etiquetar los frascos (especificar la profundidad correspondiente de cada muestra)

10. Introducir los frascos con muestras en la Hielera y mantener la temperatura a 4°C

11. Anotar las observaciones en una hoja de campo

Con Botella Muestreadora

Etiquetado de muestras de Agua

Nombre del punto o estación de muestreo

Localidad, Municipio y Estado.

Temperatura del Agua

pH

Fecha y hora de muestreo

Nombre de la persona responsable en colectar la muestra

Observaciones

Profundidad a la que se tomó la muestra

Muestreo de Moluscos Bivalvos

• Muestras de Moluscos

Inmunoensayo ELISA

LESP-VER Proyecto 2004

• Muestras de Moluscos

Bioensayo en Ratón

LNSP

Muestreo de Moluscos Bivalvos

Materiales y Equipo:

• Hielera con refrigerantes o hielo

• Bolsas de plástico de polietileno de aproximadamente 30x60 cm (resistentes a cortes)

• Etiquetas

• Marcadores indelebles

• Oficios de solicitud de analisis al LESP ó LNSP

• Formato de solicitud AS-FAN-001/2003

Muestreo de Moluscos Bivalvos para Tamizaje de

Brevitoxina por Inmunoensayo (ELISA)

Proyecto 2004 LESP-VER.Metodología

Situarse en el banco de extracción de moluscos georreferenciado

Extracción de 30-35 moluscos por muestra

Colocar los moluscos en concha dentro de la bolsa plástica, colocar en otra bolsa y sellarla para evitar el contacto con el hielo.

Etiquetar la muestra

Colocarla en la Hielera Hielo-muestra-hielo, mantener temperatura entre 2 y 7°C

Las muestras deben de ser enviadas antes de 24 hrs a partir de la recolección al LESP

Muestreo de Moluscos Bivalvos para Tamizaje de Brevitoxina

por Inmunoensayo (ELISA)

Proyecto 2004 LESP-VER.Datos a considerar en Etiqueta Descripción del producto (nombre comun y de ser posible

científico) Cantidad de producto colectado. Nombre del producto (si se dispone del dato incluir la marca

o nombre comercial) Identificación del punto de muestreo (lugar de procedencia) No. de muestras que envia Entidad Federativa de procedencia Temperatura de conservación de la muestra Fecha y hora de muestreo Especificar el tipo de biotoxima marina a determinarse Nombre y firma de la persona que realizó el muestreo Requisitar formato AS-FAN-001/2003

Muestreo de Moluscos Bivalvos para Tamizaje de Brevitoxina

por Inmunoensayo (ELISA)

Proyecto 2004 LESP-VER.Datos adicionales

Especificar si es monitoreo regular o por contingencia.

Dependencia, Institución, organismo de sector público o privado que la remite.

LESP

Solicitud dirigida a:

M. En C. Aurora Parissi Crivelli

Directora del Laboratorio Estatal de Salud Publica

At’n. A la I. Q. Alicia Sanchez Chavez

Jefa del Depto. De Analisis Sanitarios.

Eucalipto s/n Lote 7 Manzana IZC, Col. Framboyanes, Cd. Industrial

Bruno Pagliai, Veraccruzm, Ver.

Telefonos: 012299812143 ext. 103 Dirección General y ext. 118 y 119 Depto. De Análisis Sanitarios

Muestreo de Moluscos Bivalvos para Cuantificación de Brevitoxina por el

Metodo de Bioensayo en Ratón

LNSP Metodología

Situarse en el banco de extracción de moluscos georreferenciado

Extracción de 60-65 moluscos por muestra

Colocar los moluscos en concha dentro de la bolsa plástica, colocar en otra bolsa y sellarla para evitar el contacto con el hielo

Etiquetar la muestra

Colocarla en la Hielera Hielo-muestra-hielo, mantener temperatura entre 0 y 7°C

Las muestras deben de ser enviadas antes de 24 hrs a partir de la recolección al LNSP

Muestreo de Moluscos Bivalvos para Cuantificación de Brevitoxina por el Metodo de Bioensayo en Ratón

LNSPEtiquetado Descripción del producto (nombre comun y de ser posible

científico) Cantidad de producto colectado. Nombre del producto (si se dispone del dato incluir la marca

o nombre comercial) Identificación del punto de muestreo (lugar de procedencia) No. de muestras que envia Entidad Federativa de procedencia Temperatura de conservación de la muestra Fecha y hora de muestreo Especificar el tipo de biotoximan marian a determinarse Nombre y firma de la persona que realizó el muestreo

Muestreo de Moluscos Bivalvos para Cuantificación de Brevitoxina por el

Metodo de Bioensayo en Ratón

LNSPDatos adicionales

Especificar si es monitoreo regular o por contingencia.

Dependencia, Institución, organismo de sector público o privado que la remite.

LNSPSolicitud dirigida a:M. En B. Elvira Espinosa Gutiérrez Directora General del Laboratorio de Salud PúblicaAt’n. A la M. en C. Sandra Sanchez del AngelJefa del Depto. De Microbiología.Calzada de Tlalpan No. 4492 Col. Toriello Guerra México, D.F.

Recomendaciones Generales

Muestreo en los puntos georreferenciados

Uso del Chaleco Salvavidas

En caso de:

• Nortes

• Fuertes lluvias

• Existencia de banderas amarillas y rojas instaladas por SCT en puertos de Salida.

No se tomaran muestras

Proteger las muestras del sol

Realizar observaciones: Mortadad de peces, coloración de agua de mar, etc.

Durante el muestreo llevar agua simple para consumo

Conclusión

Aun cuando existen diversos

metodos de muestreo, y en virtud

de que no contamos actualmente

en los Estados con todo el equipo

necesario. La metodología a

emplear para el muestreo será

TOMA DIRECTA.