Para la identificacin de lignina, se mont el corte de hiedra previamente incubado en floroglucinol/HCl , con esta tincin es posible visualizar las estructuras lignificadas, dando as una coloracin roja-rosa en las membranas lignificadas. Un color rojo brillante desarrolla, debido a la presencia de grupos coniferaldehido en la ligninaLa lignina, junto con la celulosa forma parte de la pared secundaria, determina que haya menos agua y menos capacidad de hidratacin, al impregnar los poros sus molculas.se forma por la polimerizacin de tres alcoholes (p-cumaril, coniferil y sinapil) que difieren en el grado de metoxilacion en la posiciones C3 y C5 en sus anillos aromaticosluego de que estos alcocholes se incorporan en el polmero de lignina reciben ciertos nombres; p-hidroxifenil (H), guayacil (G) y siringil (S). La estructura polimrica de la lignina se entrelaza con las microfibrillas de celulosa, y tambin se une a las hemicelulosas y pectinas mediante enlaces ster. El resultado es una red hidrofbica que rodea los dems componentes de la pared a la que confiere mayor resistencia y rigidez. NO SE SI SI PONER ESTO, SUENA COMO MUY TEORICO

En el caso de la cutina de trabajo con los cortes de tallo de geranio los cuales antes de teirlos se les agrego etanol al 70% ya que sirve como fijador, fijo la muestra por deshidratacin para poder as con mayor facilidad teirlos. Posteriormente se dej incubar en la solucin de sudan III es utilizado generalmente para demostrar la presencia mediante tincin de triglicridos, aunque tambin tie otros lpidos .Pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que son aquellos que no tienen afinidad por estructuras cidas o bsicas. Son insolubles en el agua y tien aquellas sustancias que tienen un poder de disolucin superior al del lquido empleado para preparar la solucin colorante. En este caso colorearon a la suberina de la pared suberizada del geranio, la cual est constituida por cidos grasos (principalmente C18) y algunos componentes de naturaleza fenlica pero en distinta proporcin a como se encuentran en la cutina. Y est localizada fundamentalmente en una o dos capas de clulas prximas a la interfase entre el medio externo y el correspondiente tejido vegetal, como se observan en las imgenes (vase tabla Pared celular vegetal). Su funcin es que acta como barrera entre las plantas y el ambiente, es impermeable, es un biopolmero producido por las paredes celulares de algunas clulas de las plantas. Para la identificacin de la cutina se utiliz la solucin de Sudan III que de la misma manera que la suberina tienen la misma naturaleza de cidos grasos, por tanto; es un polmero que consta de varios cidos grasos (no saturados y oxidados saturados), de cadena larga que estn unidos entre s por enlaces tipo ster, formando una red tridimensional rgida. La diferencia de la cutina y suberina radica en que la cutina solo suelen estar presentes muy pequeas cantidades de compuestos fenlicos. Pero al observar la imagen teida del tallo de geranio, (vase tabla Pared celular vegetal) se coloreo la pared externa de las clulas epidrmicas ya que est incrustada de cutina. Esta se deposita por adcrustacin formando una capa delgada, continua e impermeable, sobre la superficie externa: la cutcula. Tanto la cutina y suberina son sustancias hidrofobicas que impermeabilizan las paredes, por ello se depositan en tejidos protectores. La cutina se deposita en la paredes de las clulas epidrmicas y el proceso de impregnacin se denomina cutinizacin; la suberina se deposita en el tejido suberoso el proceso se llama suberificacin.Posteriormente se observaron 2 laminillas de bacterias E. coli y estafilococos de las cuales se identific por ayuda de la composicin qumica de la pared celuar en Gram negativas y Gram positivas. La pared celular es responsable de lo que le sucede al colorante utilizado en la Tincin de Gram .La propiedad de teirse o no de violeta oscuro (Gram positivas o Gram negativas) por esta coloracin es un criterio de clasificacin importante correlacionable con otras propiedades bacterianas. Tanto las Gram-positivas como las Gram-negativas (coloracin azul violeta) captan la misma cantidad de cristal violeta (CV) e iodo (I). El complejo CV-I sin embargo es atrapado dentro de la clula Gram positiva (coloracin roja) por la deshidratacin y la reduccin del tamao de los poros de la pared resultante del proceso de lavado con solvente. En contraste en las Gram negativas la final (y probablemente discontinua) capa de peptidoglucano no impide la extraccin por el solvente del complejo. Por tanto la coloracin que se observ en la laminilla de Estafilococos estos son cocos que se agrupan en pares o racimos y cuyas clulas individuales muestran variaciones de tamao, presentan un color violeta, fue debido a que pertenece a las Gram-negativas y lo que permite esa coloracin se debe a que su pared celular tienen un contenido relativamente bajo de pptido glucano, que no suele sobrepasar el 5 al 10% del peso de la pared, las cuales exhiben una grado ms bien bajo de entrecruzamiento entre las cadenas de glucanos. Sus principales caractersticas son:En cambio para la laminilla de E.Coli por su coloracin roja pertenece a las Gram-positivas; algunas de las caractersticas fundamentales de su pared que permiten dicha tincin son: En conclusin las bacterias Gram positivas y negativas no solo se diferencian por esta caractersticas, existen, adems, otras diferencias tanto bioqumicas y morfolgicas, Por ejemplo, todas las bacterias con flagelos polares son Gram-Negativas y las bacterias Gram-Positivas son ms sensibles a los antibiticos que las Gram negativas.

El objetivo de la ltima parte experimental, fue identificar las membranas celulares, en clulas animales con solucin de azul de tripan, la muestra se obtuvo de realizar un raspado de la mucosa bucal de un integrante de nuestro equipo. Posteriormente se procedi a colocar el raspado en una suspensin celular de PBS pH=7; el cual es un buffer de fosfato salino biolgico, es comnmente usada en el aplicaciones biolgicas, y ayuda a mantener el pH =7 constante las concentraciones de iones y osmolaridad de la solucin generalmente coinciden con los del cuerpo humano (isotnica), adems de que es altamente soluble en agua. Suspenderlas en este medio fue necesario, ya que fue un mtodo de fijacin, el cual busca interrumpir el desarrollo de los procesos orgnicos fijando y conservando de la manera ms fidedigna posible el estado y la situacin en que se encontraban los tejidos en vida. Los tejidos deben ser fijados inmediatamente despus de extirparlos; sta es la nica forma de interrumpir instantneamente los procesos vitales. Si la fijacin se produce algn tiempo despus de la obtencin del material, puede suceder que ya hayan comenzado los procesos de post mortem. El cual da lugar a la autolisis, que consiste en la destruccin de los tejidos por sus propias enzimas locales producidas por los lisosomas. Teniendo la anterior mencionada suspensin se continu con la tincin de azul de tripan; es un colorante vital que se utiliza para los tejidos o las clulas muertas de color azul de forma selectiva. Las clulas vivas o tejidos con membranas celulares intactas no son de color. Dado que las clulas son muy selectivos en los compuestos que pasan a travs de la membrana, en una clula viable de azul de tripan, no se absorbe, sin embargo, que atraviesa la membrana en una clula muerta. Por lo tanto, las clulas muertas se muestran como un distintivo color azul bajo el microscopio. Puesto que las clulas vivas estn excluidos de la tincin, este mtodo de tincin tambin se describe como un mtodo de exclusin del colorante. Logrando as la identificacin de que por 16 clulas teidas se encontraron 3 no teidas