8/10/2019 calibracion glucosa

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PONTFICIA UIVERSIDAD CATLICA DEL ECUADOR

ESCUELA DE BIOANLISIS

BIOQUMICA CLNICA I

Nombre: Carolina Lpez Grupo: 3

Tema: Curva de Calibracin Glucosa

OBJETIVOS:

Realizar una curva de calibracin de glucosa Determinar el rango de linealidad para dicho compuesto Realizar grficas en base a la concentracin y absorbancia obtenidas

INTRODUCCIN:

Denominamos espectro de una sustancia a la representacin de absorbancia (A) enfuncin de la longitud de onda (), este grfico presenta ondulaciones con mximos ymnimos. Para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud deonda correspondiente a un mximo, pues el error de medicin es mnimo y la sensibilidadmxima.

Para verificar el cumplimiento de la ley de Beer, se debe realizar la curva de calibracin;absorbancia (A) en funcin de concentracin (c), para lo cual se preparan soluciones de lasustancia de concentraciones conocidas y se mide la absorbancia a la longitud de ondaelegida. Si es vlida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relacindebe ser una recta, que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observandesviaciones debidas a diversos factores.

CLCULOS:

Curva N. 1 Escala: (Y) 1cm = 0.4UA ; (X) 1cm = 76.92 mg/dL

y = 0.0016x + 0.0955R = 0.9725

00.20.40.60.8

1

1.21.41.61.8

0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000

A b s o r b a n c i a

( U A )

Concentracin (mg/dL)

Absorbancia vs Concentracin

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Rango de Linealidad: 0 450 mg/dL

Pendiente: 0.0016

Ecuacin: y= 0,0016x + 0,0955

Coeficiente Pearson: 0.9725

Curva N. 2 Escala: (Y) 1cm = 20UA

(X) 1cm = 76.92 mg/dL

Clculos:

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90100

0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000

% T r a n s m i t a n c i a

Concentracin (mg/dL))

% Transmitancia vs. Concentracin

Solucin Absorbancia Concentracin # (UA) (mg/dL) 1 0,002 02 0,119 503 0,362 1504 0,648 3005 0,956 4506 1,156 6007 1,33 7508 1,426 900

Solucin Concentracin Transmitancia

# (mg/dL) %1 0 99,542 50 76,033 150 43,454 300 22,495 450 11,076 600 6,987 750 4,688 900 3,75

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Curva N. 3 Escala: (Y) 1cm = 20UA ; (X) 1cm = 0.33

Rango de Linealidad: 0 450 mg/dL

CONCLUSIONES:

Las curvas de calibracin constituyen una herramienta muy til para lacuantificacin (e identificacin) de sustancias a partir de sus espectros deabsorcin.

Para poder cuantificar una sustancia por interpolacin a partir de su espectro esnecesario que su concentracin se encuentre en el intervalo de linealidad de lacurva de calibracin, ya que valores por encima (muy concentrada) o por debajo(muy diluida) no sern cuantificados de manera confiable. Las curvas de Ringbomconstituyen una ayuda valiosa para determinar dichos rangos de concentracinptimos.

La eleccin de la longitud de onda ptima para la elaboracin de la curva decalibracin es determinante a la hora de cuantificar una sustancia por el mtodoestudiado en esta prctica, pues es a esta (546nm) en donde la relacin entre

Absorbancia y concentracin es ms marcada (mayor dependencia).

0102030405060

708090

100

0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50

% T r a n s m i t a n c i a

Log Concentracin

% Transmitancia vs Log Concentracin

Transmitancia Log% Concentracin

99,54 0,0076,03 1,7043,45 2,1822,49 2,4811,07 2,656,98 2,784,68 2,883,75 2,95

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RECOMENDACIONES:

Se debe tener en cuenta la tcnica de pipeteo para lograr mayor exactitud yprecisin al momento de realizar las curvas

Es importante revisar que los controles y reactivos de trabajo estn en condicionesptimas de uso

BIBLIOGRAFA:

Casares, W. A. (2006). Anlisis Ultravioleta-visible. . Yucatn: Ediciones de la Uiversidad Autnoma

de Yucatn.

Harris, D. C. (2007). Anlisis qumico cuantitativo. Barcelona: Revert.