PROGRAMA DE LICENCIATURA EN BIOLOGÍA

CROMATOGRAFIA EN PAPEL

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Determinar la composición de una mezcla problema por medio de la cromatografía en papel.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Establecer y desarrollar un manejo correcto de la técnica instrumental de la cromatografía en papel.

MARCO TEÓRICO

Cromatografía

La cromatografía en papel es un método físico de separación de mezclas homogéneas, ya sean líquidas o sólidas. En el proceso de cromatografía se encuentran dos fases distintas: La fase estacionaria y la fase móvil. La primer fase está constituida por un papel filtro, en el cual se sitúan pequeñas gotas de la solución a separar y la segunda fase está compuesto por el disolvente que es funciona como “fase móvil”  y asciende por capilaridad en el papel.El proceso cromatógrafo da como consecuencia de los continuos procesos de sorción y desorción producidos por el movimiento de los componentes de la mezcla,

cuando son arrastrados por la fase móvil a lo largo del papel filtro, como consecuencia se produce la separación del compuesto debido a la diferencia en las constantes de distribución de los componentes de la mezcla generada entre la fase estacionaria y la fase móvil. Al resultado final, es decir, la distribución final de los constituyentes de la mezcla se le denomina cromatograma.Si los compuestos tienen color, en el cromatograma podrán ser  visibles una serie de manchas ubicadas en diferentes posiciones a lo largo del papel. En el caso de que los compuestos sean incoloros, es necesario realizar un procedimiento adicional que de color a los componentes, para poder localizarlos.El valor Rf de una sustancia.Una vez se ha realizado el montaje para la cromatografía y transcurrido un tiempo en el experimento, el solvente ha recorrido una distancia L centímetros, el soluto se ha esparcido en una zona difusa, y cada uno de sus componentes se ha desplazado una distancia D centímetros. La distancia máxima recorrida por el solvente se denomina frente del solvente y se usa como referencia para expresar las distancias recorridas por las distintas sustancias en una

cromatografia. Se ha encontrado que la distancia relativa D/L,  es una constante que se encuentra dada bajo condiciones constante y de forma independiente a la cantidad del soluto. El símbolo para designar la distancia relativa es el valor Rf ; el valor máximo que puede tener Rf corresponde a 1,por lo que se suele expresar como un decimal,menor a uno o también como porcentaje.

Rf= D/L

Donde D es la distancia recorrida por el soluto y L es la distancia recorrida por el solvente.

El proceso cromatógrafo da como consecuencia de los continuos procesos de sorcion y desorción producidos por el movimiento de los componentes de la mezcla, cuando son arrastrados por la fase móvil a lo largo del papel filtro, como consecuencia se produce la separación del compuesto debido a la diferencia en las constantes de distribución de los componentes de la mezcla generada entre la fase estacionaria y la fase móvil. Al resultado final, es decir, la distribución final de los constituyentes de la mezcla se le denomina cromatograma.

PARTE EXPERIMENTAL

Materiales Un frasco de vidrio

Un vidrio de reloj Una probeta de 10ml Una pipeta de pasteur Una tira de papel de filtro

Reactivos Indofenol azul Amarillo de alizarina Sudán rojo Fenolftaleína Tartrazina Mezcla Problema n-Pentanol Etanol absoluto NH4OH 2N (4 mL conc. + 26 mL

agua)