Métodos de estudio de Métodos de estudio de enfermedades óseasenfermedades óseas

Algunas consideraciones Algunas consideraciones sobre la Biopsia ósea sobre la Biopsia ósea

Prof. Dr. Julio Carzoglio Prof. Dr. Julio Carzoglio Cátedra de Anatomía PatológicaCátedra de Anatomía Patológica

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Examen macroscópicoExamen macroscópico– Sólo fragmentos aisladosSólo fragmentos aislados

• Es necesario informar el sitio de origenEs necesario informar el sitio de origen

– Cuando se toman de diferentes sitios Cuando se toman de diferentes sitios el cirujano debe identificar el cirujano debe identificar procedencia de cada unoprocedencia de cada uno

• Piezas de resección óseaPiezas de resección ósea

MixomaMixoma

G.P.B., mujer, 27 años Dr. KerteszG.P.B., mujer, 27 años Dr. Kertesz

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Piezas de resección óseaPiezas de resección ósea– Documentación RX y fotográficaDocumentación RX y fotográfica– Corte con sierra a 3-5 mmCorte con sierra a 3-5 mm– Mapeado de la lesiónMapeado de la lesión

• Fijación en formol al 10 %, si es posible Fijación en formol al 10 %, si es posible tamponado (buffer)tamponado (buffer)– Tiempo de fijación de 12 horas (adecuado Tiempo de fijación de 12 horas (adecuado

para IHQ)para IHQ)

• Muestras pequeñas de hueso esponjoso:Muestras pequeñas de hueso esponjoso:– Líquido de Bouin (fija y decalcifica Líquido de Bouin (fija y decalcifica

suavemente)suavemente)

MixomaMixoma

M.A., mujer, 46 años Dra. S. VázquezM.A., mujer, 46 años Dra. S. Vázquez

Recidiva de QQORecidiva de QQO

M.T.J., hombre, 25 M.T.J., hombre, 25 años Dr. Acostaaños Dr. Acosta

Osteosarcoma JC 03-4635Osteosarcoma JC 03-4635

Tumor de células gigantesTumor de células gigantes

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Decalcificación óseaDecalcificación ósea– Sol de ácido nítrico al 5 %Sol de ácido nítrico al 5 %– Volumen de solución: 10-20 veces el Volumen de solución: 10-20 veces el

volumen del tejidovolumen del tejido– El ácido es neutralizado por el CaEl ácido es neutralizado por el Ca++++

por lo cual debe ser cambiado 2 por lo cual debe ser cambiado 2 veces al díaveces al día

– Conviene utilizar agitador de tejidosConviene utilizar agitador de tejidos

Biopsia óseaBiopsia ósea• Para obtener buena coloraciónPara obtener buena coloración

– Lavar bien el ácido con agua corrienteLavar bien el ácido con agua corriente

• Con este método es imposible valorar la Con este método es imposible valorar la cantidad y cualidad de la mineralización cantidad y cualidad de la mineralización óseaósea

• Para Para valorar la mineralización óseavalorar la mineralización ósea se se requiere inclusión en plásticorequiere inclusión en plástico

(metil-metacrilato)(metil-metacrilato)• Para M.E.: fijación en paraformaldehido Para M.E.: fijación en paraformaldehido

o glutaraldehidoo glutaraldehido– Decalcificación con EDTADecalcificación con EDTA

Biopsia óseaBiopsia ósea

• TincionesTinciones• Colágeno:Colágeno:

– se demuestra con tricrómico se demuestra con tricrómico

(técnica de Van Gieson o Masson)(técnica de Van Gieson o Masson)– Microscopía de luz polarizadaMicroscopía de luz polarizada

• ProteoglicanosProteoglicanos– Alcian blueAlcian blue– Azul de toluidinaAzul de toluidina– PASPAS

Actividad Actividad osteoblásticaosteoblástica

Actividad Actividad osteoclásticaosteoclástica

Ameloblastoma Ameloblastoma uniquístico uniquístico marsupializadomarsupializado

Sarcoma óseoSarcoma óseo

Displasia Displasia fibrosafibrosa

Biopsia óseaBiopsia ósea

• TincionesTinciones• Componentes mineralesComponentes minerales

– Micro-radiografía de tejido Micro-radiografía de tejido – Solo en material no desmineralizadoSolo en material no desmineralizado

• Rojo alizarin (tiñe de rojo el CaRojo alizarin (tiñe de rojo el Ca++++ de la de la hidroxiapatita)hidroxiapatita)

• Von Kossa: negro el fosfato de CaVon Kossa: negro el fosfato de Ca++++ y y otras sales de Caotras sales de Ca++ ++ (carbonato, oxalato)(carbonato, oxalato)

Von KossaVon Kossa

GoldnerGoldner

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Estudios histoenzimáticos de Estudios histoenzimáticos de osteoblastos y osteoclastososteoblastos y osteoclastos– fosfatasa alcalina fosfatasa alcalina – fosfatasa ácida tartrato-resistentefosfatasa ácida tartrato-resistente– en tejidos “no fijados” en tejidos “no fijados”

• IHQ: para estudios de diferentes tipos IHQ: para estudios de diferentes tipos de colágeno y para identificación de de colágeno y para identificación de tumorestumores– El material desmineralizado es adecuadoEl material desmineralizado es adecuado

Tumor fusocelularTumor fusocelular

Tumor de células Tumor de células fantasmas fantasmas calcificante calcificante

(Gorlin sólido)(Gorlin sólido)

Tricrómico de MassonTricrómico de Masson

Citoqueratina AE1/3Citoqueratina AE1/3

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Marcación fluorescente con Marcación fluorescente con tetraciclinatetraciclina– Los niveles marcados reflejan la Los niveles marcados reflejan la

interfase de hueso mineralizado-interfase de hueso mineralizado-osteoideosteoide

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Biopsia intraoperatoriaBiopsia intraoperatoria– Dos razones:Dos razones:

• Diagnóstico preliminarDiagnóstico preliminar• Evaluar adecuación del especimen para estudio Evaluar adecuación del especimen para estudio

ulteriorulterior

– Limitación: tejido calcificadoLimitación: tejido calcificado– Utilidad en valoración de márgenes de Utilidad en valoración de márgenes de

tejidos blandostejidos blandos– Determinación entre metástasis, Determinación entre metástasis,

inflamación o necrosis (en lesiones líticas, inflamación o necrosis (en lesiones líticas, blandas)blandas)

Biopsia óseaBiopsia ósea

• Si se plantean estudios moleculares Si se plantean estudios moleculares – Hibridización in situHibridización in situ– Reacción en cadena de polimerasa (PCR)Reacción en cadena de polimerasa (PCR)

• No se puede desmineralizar el materialNo se puede desmineralizar el material– Los AANN son degradados por la Los AANN son degradados por la

decalcificacióndecalcificación