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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

ESCUELA DE POSTGRADO UNIDAD DE POSTGRADO EN CIENCIAS BIOLÓGICAS

Maestría en Ciencias, m. Biotecnología Agroindustrial y Ambiental

TESIS Para Optar por el Título de Maestro en Ciencias

Asesora: Dra. ZULITA PRIETO LARA

Co-asesor: PhD. Eric Mialhe Louis

TRUJILLO – PERÚ

2017

Exoproteoma de Fusarium solani y Fusarium oxysporum

cultivados in vitro en presencia de pared celular de raíz de

Persea americana “palto”.

Autor: NESTOR ESTUARDO CARBAJAL CABALLERO

Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación

Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/

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ASESORES

La presente Tesis ha sido asesorada por Zulita Adriana Prieto Lara, Bióloga, con grado de

Doctora en Ciencias, Docente Principal de la Universidad Nacional de Trujillo, quien es

Coordinadora del área de Genétíca de la Escuela Profesional Ciencias Biológicas de la

Facultad Ciencias Biológicas-UNT y Docente de la Escuela de Postgrado-UNT.

La presente Tesis ha sido co-asesorada por Eric Mialhe Louis Mattonier, Biólogo con grado

de Doctor en Filosofía y Doctor de Estado, quien es Gerente y Director Científico de

Inca’Biotec S.A.C.



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APROBACIÓN DE LA TESIS

Los profesores que suscriben, miembros del jurado examinador de la presente Tesis,

declaran que esta reúne los requisitos fundamentales y formales exigidos, por lo que ha sido

aprobada por UNANIMIDAD, en fecha 03 de febrero de 2017.

JURADO EXAMINADOR

…………………………………………………….

Dr. Manuel Roberto Rodríguez Lacherre

PRESIDENTE

…………………………………………………….

Dr. Juan Héctor Wilson Krugg

SECRETARIO

…………………………………………………..

Dra. Zulita Adriana Prieto Lara

ASESOR



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DEDICATORIA

Este trabajo está dedicado a:

- Giovanna García Aguilar, mi esposa, por su amor y apoyo durante la realización de

mis estudios de Maestría y todos los días de mi vida en general.

- Aida Caballero Amaya y Manuel Carbajal Mercado, mis padres, por brindarme

también su amor y apoyo incondicional y ser motivos de búsqueda de superación.

- Mis hermanos, Fabio, Mónica y Norton, y todos los integrantes de nuestra gran

familia, por complementar mi vida.

- A mi abuelita Marcela Amaya, por su recuerdo infinito.

- Finalmente, esta Tesis va dedicada a mi hijo André Said, quien aunque es muy

pequeño, es mi adoración y centro de mis motivos.



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AGRADECIMIENTOS

Agradezco a:

- Eric Miahle por permitirme integrar parte de un grupo de investigación científica,

BIOTEC, de donde, estimulados por sus múltiples ideas, surgieron muchos

proyectos de investigación, entre ellos, el que culmina con el presente Informe.

- Al grupo D&C, en la persona del Ing. Piero Dyer, por su apoyo a la investigación

científica y haber creado el Centro de investigación BIOTEC, donde fue realizada la

presente investigación.

- A Gabriel Morey, por su asesoría técnica y científica, durante la ejecución de la

etapa experimental.

- A Peter Baca, por su apoyo técnico durante la ejecución de este y otros trabajos de

investigación.

- A Kelly Núñez, por su apoyo durante el presente trabajo, así como a Eddy Ortega y

demás compañero de BIOTEC.

- A Carlos Condemarín, por ser el nexo inicial entre BIOTEC y mi persona.

- Al Dr. Felix Bocanegra, por brindar sus puntos de vista en las etapas iniciales de la

redacción del presente Informe.

- A la Dra. Zulita Prieto, por aceptar asesorar la presente Tesis, por sus observaciones

y aportes al presente Informe y a mi persona, así como por su apoyo y amistad.

- A los miembros del jurado examinador por sus observaciones y aportes puntuales al

presente Informe, los cuales fueron cruciales para su mejora.



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CONTENIDO

PÁGINA

ASESORES ................................................................................................................... i

APROBACIÓN DE LA TESIS .................................................................................... ii

DEDICATORIA .......................................................................................................... iii

AGRADECIMIENTOS ............................................................................................... iv

CONTENIDO ............................................................................................................... v

RESUMEN ................................................................................................................. vii

ABSTRACT ................................................................................................................ ix

LISTA DE TABLAS ................................................................................................... xi

SECCIÓN 1: INTRODUCCIÓN ................................................................................. 1

1.1. Pared celular vegetal .................................................................................. 5

1.2. Fusarium spp. y la infección en vegetales ................................................. 9

1.3. Exoproteoma ............................................................................................ 18

SECCIÓN 2: MATERIAL Y MÉTODOS ................................................................. 19

2.1. Material biológico .................................................................................... 19

2.2. Métodos y técnicas .................................................................................. 19

2.2.1. Medio líquido de sales ............................................................ 19

2.2.2. Suplementación de medios ..................................................... 20

2.2.3. Condiciones de cultivo ............................................................ 21

2.2.4. Extracción de proteínas ........................................................... 22

2.2.5. Digestión y separación de proteínas ....................................... 22

2.2.6. Espectrometría de masas ......................................................... 23

2.2.7. Análisis bioinformático ........................................................... 24

SECCIÓN 3: RESULTADOS .................................................................................... 26



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SECCIÓN 4: DISCUSIÓN ......................................................................................... 47

SECCIÓN 5: CONCLUSIONES................................................................................ 61

SECCIÓN 6: RECOMENDACIONES ...................................................................... 62

SECCIÓN 7: REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................. 63

ANEXOS .................................................................................................................... 80



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RESUMEN

El palto es un cultivo económicamente importante en el Perú, que al igual que otras plantas

es susceptible de ser infectado por microorganismos. Fusarium solani (Mart.) y Fusarium

oxysporum (Schlecht) son dos especies fúngicas con un amplio rango de hospederos y se

les ha detectado en suelos de cultivo de palto. Las proteínas y enzimas son elementos

fundamentales en la interacción patógeno / hospedero; por ejemplo, un conjunto de enzimas

hidrolíticas son secretadas por los hongos para degradar la pared celular vegetal. En

relación a este problema, la presente investigación tuvo como objetivo caracterizar los

exoproteomas de F. solani y F. oxysporum cultivados in vitro en presencia de pared celular

de raíces de palto.

F. solani y F. oxysporum fueron aislados en el Centro de Investigación BIOTEC CMC a

partir de suelos asociados a raíces de palto de la empresa Camposol S.A. Los aislamientos

fueron cultivados por separado en medio líquido de sales (MLS) suplementado con pared

celular de raíces de palto (PCRP, 0.3 %) más trazas de glucosa (0.005 %) y, con fines

comparativos, en MLS suplementado solo con glucosa (G, 0.5 %). Las proteínas en los

sobrenadantes fueron precipitadas, digeridas, desalinizadas y luego los péptidos tripsinados

fueron separados en base a su polaridad. Las fracciones resultantes fueron sometidas a

espectrometría de masas MALDI TOF/TOF. Los espectros de masas de oligopéptidos

fueron colectados con el software Protein PilotTM y comparados con la base de datos

UniProtKB; análisis adicionales fueron realizados para encontrar funciones probables de las

proteínas detectadas.



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164 secuencias de oligopéptidos fueron detectadas, correspondientes a 80 proteínas: 56 de

F. oxysporum y 24 de F. solani. El número de proteínas fue mayor en medios

suplementados con PCRP (22 en F. solani y 40 en F. oxysporum) que en los suplementados

con G (2 y 16, respectivamente). La proteína SP1.10 de F. solani fue identificada como una

posible enzima con actividad galacturonasa, y las proteínas OP2.9 y OP2.10 de F.

oxysporum serían enzimas con actividad ramnosidasa y una β-glucosidasa,

respectivamente. Este tipo de enzimas implicadas en la degradación de carbohidratos no fue

observado en medios con glucosa, por lo que probablemente su presencia en el

exoproteoma fúngico obedezca a una respuesta a la presencia de la pared celular de las

raíces de palto. El exoproteoma de F. solani y F. oxysporum presentó otras proteínas con

funciones metabólicas diversas en ambos tipos de medios utilizados, algunas de las cuales

(OG2, probable Citocromo p450 y OP1.13, probable arilesterasa) son más frecuentes en

hongos fitopatógenos.



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ABSTRACT

Avocado is an economically important crop in Peru, which like other plants is susceptible

to be infected by microorganisms. Fusarium solani (Mart.) and Fusarium oxysporum

(Schlecht) are two fungal species with a wide host range and have been detected in soils

from avocado cultivation areas. Proteins and enzymes are fundamental elements in the

pathogen / host interaction; for example, a set of hydrolytic enzymes are secreted by fungi

to degrade the plant cell wall. In relation to this problem, the present research aimed to

characterize the exoproteome of F. solani and F. oxysporum grown in vitro in the presence

of avocado root cell walls.

F. solani and F. oxysporum were isolated at the BIOTEC CMC Research Center from soils

associated with avocado roots of the company Camposol S.A. The isolates were cultivated

separately in liquid salts medium (MLS) supplemented with avocado root cell wall (PCRP,

0.3 %) plus glucose traces (0.005 %) and, for comparison purposes, MLS supplemented

with glucose alone (G , 0.5 %). The proteins in the supernatants were precipitated, digested,

desalinated, and then, the tryptic peptides were fractionated based on their polarity. The

resulting fractions were subjected to MALDI TOF/TOF mass spectrometry. Oligopeptide

mass spectra were collected with the Protein PilotTM software and compared to the

UniProtKB database; additional analyzes were performed to find probable functions of the

detected proteins.

164 oligopeptide sequences were detected, corresponding to 80 proteins: 56 of F.

oxysporum and 24 of F. solani. The number of proteins was higher in culture media

supplemented with PCRP (22 in F. solani and 40 in F. oxysporum) than in those



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supplemented with G (2 and 16, respectively). SP1.10 protein from F. solani was identified

as a possible enzyme with galacturonase activity; OP2.9 and OP2.10 proteins from F.

oxysporum would be enzymes with rhamnosidase activity and a β-glucosidase,

respectively. This type of enzymes involved in the degradation of carbohydrates was not

observed in culture media with glucose, so they were secreted by fungal isolates probably

induced by the presence of avocado root cell walls. The exoproteome of F. solani y F.

oxysporum included other proteins with diverse metabolic functions, some of which (OG2,

putative Cytochrome p450 and OP1.13, putative arilesterase) are more frequent in

phytopathogenic fungi.



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LISTA DE TABLAS

Tabla 1. Número de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium oxysporum (Schlecht)

y Fusarium solani (Mart.) en medio líquido de sales (MLS) suplementado con pared celular

de raíz de Persea americana (Mill.) “palto” (PCRP) o glucosa (G)…………………… p. 31

Tabla 2. Exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium solani (Mart.) en medio líquido

de sales suplementado con glucosa. ……………...……………………………………. p. 31

Tabla 3. Exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium solani (Mart.) en medio líquido

de sales suplementado con pared celular de raíz de Persea americana (Mill.) “palto”.

………………………………………………………………………………………….. p. 32

Tabla 4. Exoproteínas de Fusarium oxysporum (Schlecht) detectadas en medios de cultivo

líquidos suplementados con glucosa. ………………….………………………………. p. 34

Tabla 5. Exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium oxysporum (Schlecht) en medio

líquido de sales suplementado con pared celular de raíz de Persea americana (Mill.)

“palto”. ………………………………………………………………………………… p. 36

Tabla 6. Datos funcionales de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium solani

(Mart.) en medio liquido de sales suplementado con glucosa. …………....................... p. 39


(Mart.) en medio liquido de sales suplementado con pared celular de raíz de Persea

americana (Mill.) “palto”. …………………………………………….……………….. p. 40



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Tabla 8. Datos funcionales de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium oxysporum

(Schlecht) en medio liquido de sales suplementado con glucosa. …………………….. p. 42

Tabla 9. Datos funcionales de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium oxysporum

(Schlecht) en medio liquido de sales suplementado con pared celular de raíz de Persea

america (Mill.) “palto”. ……………………………………………………………...… p. 44



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1. INTRODUCCIÓN

Perú es uno de los principales productores de Persea americana (Mill.) “palto” a nivel

mundial (Ministerio de Agricultura y Riego, 2015), con una producción total de

368,100 toneladas en el año 2015. El departamento de mayor producción de palto en el

2015 fue La Libertad, con 30.64 % de la producción nacional (Dirección General de

Seguimiento y Evaluación de Políticas, 2016). Es por tanto un producto

económicamente importante, cuyo cultivo y comercialización representa una

significativa fuente de ingresos para muchas personas.

Las plantas, al igual que otros organismos, son susceptibles de ser atacados por hongos,

y, en cultivos económicamente importantes, de producción intensiva, la infección por

hongos es uno de los factores que reducen su productividad. Teniendo en cuenta

cultivos como trigo, arroz, maíz, papa, soya y algodón, una pérdida de alrededor de 10

% de la producción agrícola global ha sido atribuida a la infección por hongos (Oerke,

2006). Una plaga clave limitante en el cultivo de palto es el oomiceto Phytophthora

cinnamomi (Rands), sin embargo, otros microorganismos podrían llegar a afectar el

cultivo.

Uno de los grupos de hongos ampliamente reconocido por su capacidad fitopatogénica

es el género Fusarium. Este género es capaz de infectar gran número de especies

vegetales hospederas y ha sido causante de grandes pérdidas en cultivos

económicamente importantes (Agrios, 2005; Chandra et al., 2011).

En la interacción hongo – planta hospedera los hongos secretan diversas proteínas

buscando infectar exitosamente la planta. Estas moléculas intervienen en el



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reconocimiento, penetración, reducción de la respuesta de defensa de la planta y

colonización de los tejidos vegetales. Uno de los componentes principales de la

infección fúngica son las enzimas degradadoras de pared celular, las cuales son

secretadas fuera de las células y hacia la superficie vegetal para romper la rígida barrera

que representa la pared celular (Kubicek et al., 2014).

Las proteínas extracelulares involucradas en la interacción Fusarium – hospedero han

sido analizadas extensamente en forma individual. Sin embargo, análisis de proteínas

secretadas bajo un enfoque proteómico han sido realizados en su mayoría solo en la

especie F. graminearum (Brown et al., 2012; Kikot et al., 2009). Hasta donde se

conoce, son pocos los estudios de exoproteomas/secretomas en otras especies de

Fusarium (Scully et al., 2012; Tian et al., 2015).

En el 2005, Phalip et al., reportaron por primera vez un bosquejo global del

“exoproteoma” de F. graminearum, usando como fuentes de carbono pared celular de

su hospedero Hordeum lupulus “lúpulo” o glucosa. De las 84 proteínas únicas

encontradas en medios con pared celular, la mayoría (45 %) eran glicósido-hidrolasas.

Los resultados indicaron que el metabolismo fúngico de este hongo fitopatógeno se

orienta hacia la síntesis y secreción de un arsenal entero de enzimas capaces de digerir

casi la totalidad de la pared celular de una planta.

Paper et al. (2007) ampliaron el estudio del “secretoma” de F. graminearum utilizando

mayor variedad de medios de cultivo diferencialmente suplementados. Además,

analizaron las secreciones del hongo in planta, es decir directamente en espigas de

trigo. En total 229 proteínas del análisis in vitro y 120 del análisis in planta fueron



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reportadas, encontrándose diferencias en su identidad y frecuencia según el medio

suplementado utilizado. Además, detectaron proteínas sin péptido señal en el estudio in

planta, que mayormente eran enzimas housekeeping, como enolasa, triosa-fosfato-

isomerasas, fosfoglucomutasa, calmodulina, aconitasa y malato-deshidrogenasa, cuya

presencia y función no es totalmente clara en el proceso.

Yang et al. (2011) identificacron las proteínas secretadas por F. graminearum cultivado

en medios líquidos elaborados solamente con agua y harina de cebada o harina de trigo.

Sesentainueve proteínas fúngicas fueron identificadas, incluidas enzimas involucradas

en la degradación de pared celular, almidón y proteínas, de las cuales el 35 % no habían

sido identificadas en estudios previos, permitiendo expandir la base de datos sobre

proteínas secretadas de F. graminearum, posiblemente involucradas en la fusariosis de

la espiga.

La composición proteica de exudados de un aislamiento de F. solani durante la

degradación de medios basados madera de roble ha sido identificada por Scully et al.

(2012). En cultivos in vitro de este hongo aislado de larvas de Anoplophora

glabripennis “escarabajo cornudo asiático” alrededor de 400 proteínas fueron

identificadas aplicando MudPIT (“Tecnología Multidimensional para Identificar

Proteínas”). Muchas de las enzimas detectadas estaban relacionadas a la degradación de

polisacáridos de pared celular (glicosil-hidrolasas y pectato-liasas) y de lípidos

(cutinasas, esterasas, lipasas, deacetilasas). También fueron detectadas proteinasas y

ureasas, así como lacasas, peroxidasas y otras enzimas involucradas en la producción

extracelular de peróxido de hidrógeno, que anteriormente habían sido implicadas en la

depolimerización de lignina.



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Un aislamiento identificado como Fusarium sp. fue identificado por Tian et al. (2015)

como un hongo con alta actividad degradadora de pared celular. El secretoma de este

aislamiento fue caracterizado a partir de medios de cultivos suplementados con polvillo

de avena, como medio inductor, y suplementados con glucosa, como medio basal. De

las 28 proteínas diferencialmente expresadas en PAGE 2D, 10 fueron glicósido

hidrolasas, de las cuales 4 (exo- y endo-glucanasas y una probable celobio-hidrolasa)

fueron expresadas también en medios con glucosa. De igual modo, 4 proteasas y 2

esterasas fueron detectadas exclusivamente de medios con avena; también fueron

identificadas algunas oxido-reductasas que podrían participar del metabolismo de

lignina. La asociación al proceso degradativo fue menos clara para otras enzimas.

Dado que algunas especies de Fusarium son comunes tanto en suelos naturales como

agrícolas (Gordon y Martyn, 1997), algunas especies patógenas podrían ser frecuentes

en los arenosos terrenos costeros de cultivo agroindustrial de producción intensiva de

palto, particularmente en aquellos que fueron anteriormente ocupados por otros

cultivos. Dos especies de Fusarium presentes en estos suelos son Fusarium solani

(Mart.) y Fusarium oxysporum (Schlecht), las cuales podrían tener capacidad

metabólica para causar problemas fitopatológicos importantes en el cultivo del palto.

Bajo estas premisas, la investigación reportada en la presente Tesis se centró en

caracterizar el exoproteoma de F. solani y F. oxysporum cultivados in vitro en

presencia de pared celular de raíz de P. americana “palto”, teniendo como patrón de

comparación la composición del exoproteoma de estos mismos hongos cultivados con

una fuente de carbono simple como la glucosa. El otro aspecto importante del estudio

fue identificar a qué familia de proteínas pertenecían las proteínas detectadas o qué



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dominios presentaban dichas proteínas, para conocer las funciones biológicas de dichas

proteínas o procesos biológicos en los que participarían. En este sentido se plantearon

las hipótesis de que el exoproteoma de F. solani y F. oxysporum presentaría mayor

número de proteínas en cultivos suplementados con pared celular de raíz de palto, en

comparación con los cultivos en medio suplementado con glucosa y que dicho aumento

en el número de proteínas involucraría la expresión y secreción de enzimas que

degradan componentes de la pared celular vegetal, específicamente, en palto.

Dada la relevancia de las proteínas y enzimas secretadas en el exoproteoma fúngico en

la interacción de los hongos con otros organismos es necesario conocer su composición

en organismos potencialmente fitopatógenos como F. solani y F. oxysporum, que están

presentes en suelos agrícolas del cultivo de palto. Dado que algunas de estas

exoproteínas podrían servir como moléculas diana para ser bloqueadas, esta

caracterización es la primera fase en estudios aplicados para generar herramientas de

control específico necesarias contra hongos fitopatógenos.

Por otro lado, hasta donde se conoce solo un estudio a nivel proteómico que involucra

raíces de palto ha sido reportado (Acosta-Muñiz et al., 2012), el cual se centra en la

respuesta de la planta (a la infección por P. cinnamomi), por lo que se puede indicar que

el tema de estudio específico de la presente tesis no ha sido analizado anteriormente.

1.1. Pared celular vegetal

Una de las características celulares de los organismos del reino Plantae es la presencia

de la pared celular, estructura extra-citoplasmática de naturaleza polisacárida

principalmente, con funciones de resistencia, rigidez y protección, pero también de



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interrelación con el ambiente (Ochoa-Villareal et al., 2012; Sarkar et al., 2009). En las

células jóvenes, la pared celular primaria es una red altamente especializada, formada

principalmente por mezclas heterogéneas de celulosa y hemicelulosas, embebidas en

una masa amorfa de pectinas, con algunas pocas proteínas y compuestos fenólicos

(Ochoa-Villareal et al., 2012). La composición de estos polipéptidos varía según la

etapa de desarrollo, el tipo celular y entre especies vegetales (Alberts et al., 2002;

Harholt et al., 2010). En las células vegetales ya maduras, por ejemplo, la pared celular

primaria es revestida por una secundaria que presenta alta concentración de lignina.

La molécula de celulosa es un polímero lineal de residuos de β-(1,4)-D-glucosa, en un

número aproximado de 500, cada uno unido por enlace covalente e invertido en 180° en

relación al siguiente (Alberts et al., 2002). Puentes de hidrógeno formados entre

moléculas adyacentes de celulosa causan una fuerte adhesión entre estás (40 cadenas

aproximadamente) en una disposición en paralelo, todas con la misma polaridad,

formándose lo que se denomina microfibrillas de celulosa, de gran fuerza de tensión.

Estas microfibrillas son sintetizadas por grandes complejos de membrana que contienen

enzimas sintasas de celulosa vegetal, los cuales expulsan las microfibrillas a manera de

una telaraña (Cosgrove, 2005). Estas microfibrillas de celulosa son químicamente

estables y resistentes al ataque enzimático y son el núcleo de la pared celular vegetal,

donde representa la tercera parte de la masa total (Ochoa-Villareal et al., 2012).

Las hemicelulosas son un grupo heterogéneo de polisacáridos ramificados pero con un

armazón central, lineal, común, compuesto de un tipo de azúcar. Los principales

heteropolímeros de hemicelulosas son xilano, manano, galactano y arabinano,



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constituidos por los monómeros xilosa, manosa, galactosa y arabinosa, respectivamente,

pero incluyen otros residuos de hexosas que crean ramificaciones (Bastawde, 1992).

Las hemicelulosas forman enlaces de hidrógeno con microfibrillas de celulosa, uniendo

microfibrillas y entrecruzándolas con otras moléculas como las pectinas (Alberts et al.,

2002). En la hemicelulosa xilano el esqueleto está formado por residuos de xilosa

ligados con cadenas laterales de ácido glucorónico y residuos de 4-O-metil ácido

glucorónico; unidos al esqueleto de xilosa suelen encontrarse muchos residuos de

arabinosa y se les denomina arabinoxilanos o glucoarabinoxilanos.

En las dicotiledóneas, la hemicelulosa xiloglucano está formado por el esqueleto de

carbono (glucosas, una invertida en relación a la siguiente) con ramificaciones de α-D-

xilosa y también β-D-galactosa y L-fucosa-α-(1,2)-D-galactosa; en monocotiledóneas

gramináceas, el xiloglucano consiste de uno o dos residuos de xilosa adyacentes ligados

por enlace α-(1-6) al esqueleto de glucosas. Los mananos y glucomananos se

caracterizan por ser ricos en manosa o en manosa-glucosa en un patrón repetitivo

(Ochoa-Villareal et al., 2012).

Las pectinas son el complejo familiar más amplio y diverso de polisacáridos en la

naturaleza. Están implicadas en diversas funciones y procesos celulares como el

crecimiento, desarrollo, morfogénesis, defensa, adhesión célula-célula, estructura de la

pared celular, señalización, unión de iones, porosidad de la pared, desarrollo del tubo

polínico y desarrollo del fruto, entre otros (Mohnen, 2008).

Las pectinas están formadas por residuos de α-(1,4)-D-ácido galacturónico y

estructuralmente incluyen tres clases principales: homogalacturonano (HG),



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ramnogalaturonano I (RG-I) y ramnogalaturonano II (RG-II). HG es el tipo de pectina

más abundante y que consiste en largas cadenas lineales de α-D-ácido galacturónico

con algunos grupos carboxilos parcialmente esterificados con metilo; los no-

esterificados, interactúan con Ca2+ para formar un gel estable con otras moléculas de

pectina (Ochoa-Villarreal et al., 2012). RG-I es una pectina ramificada que contiene un

esqueleto formado por repeticiones de disacáridos de ácido galacturónico y ramnosa,

con los residuos de ramnosa parcialmente sustituidos con residuos glucosídicos

neutrales o con cadenas laterales poliméricas predominantemente de α-(1,5)-L-

arabinanos y β-(1,4)-D-galactanos, arabinogalactanos y posiblemente galactoarabinanos

(Obro et al., 2004).

La estructura de las cadenas laterales puede variar entre plantas, a diferencia de RG-II

(Harholt et al., 2010). RG-II presenta un esqueleto de 7 a 9 residuos α-D-ácido

galacturónico con 4 ramas claramente diferenciadas y varias clases de sustituyentes, que

incluyen 11 – 12 residuos, algunos de los cuales son azúcares raros en la naturaleza,

como 2-O-metil xilosa, 2-O-metil fucosa, ácido acérico, ácido 2-keto-3-deoxi-D-lixo

heptulosárico (Dha) y ácido 2-keto-3-deoxi-D-mano octulosónico (Kdo), entre 28 y36

azúcares individuales interconectados por más de 20 enlaces glicosídicos hacen de RG-

II las pectinas más complejas y ramificadas, aunque menos abundantes (Ochoa-

Villarreal et al., 2012).

La denominación de “lignina” representa a un complejo y variable gran grupo de

polímeros aromáticos que resultan del emparejamiento combinatorio oxidativo de 4-

hidroxifenilpropanoides (Vanholme et al., 2010). En gimnospermas, la lignina puede

estar formada en gimnospermas principalmente por alcoholes hidroxicinamilicos o



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monolignoles, el alcohol coniferílico y pequeñas cantidades de alcohol p-coumarilo, y,

en angiospermas, por alcohol coniferílico y alcohol sinapilico, principalmente (Jouanin

y Lapierre, 2012). Estos polímeros son depositados predominantemente en la pared

celular secundaria, haciendo a las células más rígidas e impermeables; además, su

biosíntesis puede ser inducida por estrés biótico o abiótico (Vanholme et al., 2010).

Ejemplos de la composición molecular de la lignina y otros polisacáridos de pared

celular mencionados se muestran gráficamente en Anexo 1.

A pesar de la presencia de todas estas moléculas recubriendo la célula vegetal y el alto

grado de rigidez y resistencia que brinda a las plantas, la cubierta vegetal puede ser

vulnerada por muchos organismos fitopatógenos, como insectos, bacterias y hongos.

1.2. Fusarium spp. y la infección en vegetales.

Fusarium es un género de hongos que son muy abundantes y pueden ser recuperados de

ambientes de todo el mundo, como patógenos, endofitos y saprofitos (Lesli y

Summerell, 2013). En realidad, algunos representantes de este género son tan comunes

en los suelos que se les considera parte de la “micoflora global” (Gordon y Martyn,

1997).

Algunas características morfológicas, principalmente de estructuras reproductivas,

permiten identificar a los hongos del género Fusarium. Estos hongos producen

macroconídeas, las cuales son esporas mitóticas y se caracterizan por ser largas y

esbeltas, puntiagudas en ambos lados, curvadas en forma dorso-ventral, en forma de

hoz, septadas y con una célula pie basal. Estas macroconídeas son fialosporas, es decir



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que son producidas en una fialide, que es una pequeña abertura en la punta de un

conidióforo a partir del cual las esporas emergen una a una (Smith, 2007).

Otros tipos de esporas (mitóticas) pueden o no estar presentes en Fusarium. Las

microconídeas son por ejemplo esporas pequeñas, generalmente de una sola célula oval,

aunque la forma puede variar. Las microconideas están involucradas en el transporte de

los patógenos dentro de los vasos del sistema vascular de la planta hospedadora. Un

tercer tipo de esporas, son las clamidosporas, las cuales funcionan como esporas de

dormancia, que aparecen en algunas especies cuando los nutrientes disponibles

comienzan a escasear. Las clamidosporas son el propágulo real de los verdaderos

habitantes del suelo de este género y solo con la aplicación de nutrientes frescos salen

del estado de dormancia, germinan y producen nuevas hifas (Smith, 2007).

Las variantes morfológicas de las esporas de Fusarium y las estructuras que las

contienen son utilizadas para identificar las especies del género. Cabe señalar que los

métodos actuales de identificación de hongos incluyen la comparación de secuencias de

segmentos específicos de ADN, como TEF 1-α, tub2, gen de calmodulina, ITS e IGS,

identificadas a través de técnicas moleculares de análisis de marcadores de ADN como

RFLP, RAPD, AFLP, SSR, SCAR, SNP, microarreglos, código de barras de ADN y

pirosecuenciamiento de ADN de siguiente generación (Chandra et al., 2011).

En algunas especies de Fusarium se ha registrado un estado sexual o también

denominado teleomorfo. Este estado, en el que se presentan peritecias que contienen

ascosporas, se ha detectado en medio natural y/o en laboratorio, bajo condiciones

apropiadas de luz, temperatura y humedad (Smith, 2007). Sin embargo, el rol de la



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reproducción sexual en el género no está esclarecido en las especies teolomórficas de

Fusarium y tampoco sería generalizado o útil en todas las especies. F. graminearum,

por ejemplo, es una especie homotálica que se basa en el desarrollo sexual para la

formación y diseminación de ascosporas infectantes que producirán la fusariosis de la

espiga en trigo y cebada; en F. solani las ascosporas pueden ser importantes pero no

esenciales y, por otro lado, no se ha observado reproducción sexual en F. oxysporum.

Además, para la mayoría de especies el estado sexual no predomina en condiciones

naturales, incluso en aquellas especies en las que dicho estado ha sido observado en

condiciones de laboratorio (Trail, 2013).

Es necesario señalar que la alternancia en el ciclo asexual/sexual de algunas especies de

Fusarium ha generado complicaciones y duraderos debates sobre la categorización

taxonómica de estos organismos (Lesli et al., 2001; Geiser et al., 2013). Esta situación

queda graficada al encontrar denominaciones taxonómicas diferentes para el estado

asexual o anamorfo y el estado sexual o teleomorfo del mismo organismo. Así, por

ejemplo, F. solani (anamorfo) es también nombrado como Nectria haematococca

(teleomorfo); lo mismo ocurre con F. graminearum y Gibberella zeae, entre otros

ejemplos. Por tanto, para hongos como los del género Fusarium la identificación

taxonómica debe estar basada en una “descripción polifásica de especies”, la cual

considera más de un concepto de especie: especie morfológica, especie biológica y

especie filogenética, que refieren a aspectos morfológicos, reproductivos y moleculares,

respectivamente, siendo la tendencia desfasar la denominación dual y señalar la

alternancia sexual como “estados” de un solo género: Fusarium (Lesli y Summerel,

2013).



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Un aspecto que también caracteriza al género Fusarium es la dinámica estructural de su

genoma. El número de cromosomas y tamaño de genomas en cuatro especies de

Fusarium con genoma secuenciado (F. graminearum, F. oxysporum, F. verticillioides y

F. solani) varía notablemente, siendo el más pequeño el de F. graminearum, con 4

cromosomas y 36 mega bases (Mb), y el más grande, el de F. oxysporum, con 15

cromosomas y 60 Mb; aunque el número de cromosomas de F. solani es el más alto

(17) su genoma tiene un tamaño de 51 Mb; F. verticilloides presenta 11 cromosomas

con 42 Mb en total (Kistler et al., 2013). Estas diferencias genómicas se presentan

también dentro de las especies, como en el caso de F. solani (Taga et al., 1999) y F.

oxysporum (Migheli et al., 1995), donde hasta cromosomas homólogos no son

homogéneos.

En especies de este género también se presentan cromosomas supernumerarios (Covert,

1998). Aunque su presencia o ausencia no afecta la viabilidad del hongo, por lo que se

les denomina “cromosomas condicionalmente dispensables”, estos cromosomas pueden

contener determinantes patogénicos (Cover et al., 1996; Miao et al., 1991), como es el

caso del cromosoma 14 de F. solani y F. oxysporum. En F. solani, este cromosoma

contiene el locus PEP que codifica varios genes que influyen en el tamaño de la lesión

en epicótilos de Pisum sativum (Han et al., 2001); además, otros genes (HUT, por

ejemplo) le confieren ventajas adaptativas a su hospedero (Rodríguez-Carres et al.,

2008).

De modo similar, los genes SIX del cromosoma 14 de F. oxysporum le confieren

resistencia frente a la respuesta de la planta de tomate que está siendo infectada (Van

der Doe et al., 2008). Estos cromosomas de patogenicidad serían transmitidos por



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transferencia horizontal (Ma et al., 2010) y estarían relacionados a la aparición de

formae speciales ("f. sp."), es decir agrupaciones especializadas en la infección de una

especie vegetal en particular (Gordon y Martyn, 1997), de origen parafilético y que son

tan comunes en algunas especies de Fusarium (Ma et al., 2013).

Dentro del género Fusarium, al igual que en otros grupos de organismos, existen

aquellos patógenos y no patógenos (Gordon y Martyn, 1997). Probablemente, la

mayoría de hongos Fusarium sean endófitos, saprófitos y, en general, inocuos, pero

como es de esperar cobran mayor notoriedad aquellas especies/cepas patógenas de

humanos, animales y plantas. F. oxysporum y F. solani, por ejemplo, son frecuentes

agentes causales de enfermedades en humanos y animales (Lesli y Summerell, 2013),

estando asociados ambos a infecciones dermatofíticas principalmente; F. graminearum,

además de deteriorar la planta hospedera, produce metabolitos secundarios que actúan

como toxinas y son causantes de toxicosis por consumo de alimentos contaminados por

parte de animales o humanos (Desjardins y Proctor, 2007). Sin embargo, el género

Fusarium es principalmente reconocido como fitopatógeno, es decir, por su condición

de infectar plantas vivas, reconociéndosele un amplio rango de hospederos y especies

causantes de importantes pérdidas económicas en cultivos agrícolas y ornamentales

(Agrios, 2005; Chandra et al., 2011), que han llegado a producir fuertes impactos

económicos y sociológicos en agricultores, industrias y comunidades.

En plantas, Fusarium puede causar enfermedades como marchitez vascular, tizón del

brote y las semillas, pudriciones de tallo, raíz y de corona, entre otras, y existen

especies capaces de producir síndromes diferentes y simultáneos (Lesli y Summerell,

2013). Varios miembros del complejo de especie F. oxysporum, el cual incluye



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alrededor de 120 formae especiales, provocan la marchitez vascular, que se caracteriza

inicialmente por la pérdida de turgencia en las hojas y luego aclaramiento de venas y

epinastia foliar, seguido de amarillamiento de las hojas inferiores, marchitez progresiva

de hojas y tallos, defoliación y finalmente, la muerte de la planta (Di Pietro et al.,

2003). Otro ejemplo es la fusariosis en espiga, granos y semillas, que en cereales es

causada por F. graminearum, y por F. verticillioides y F. thapsinum en maíz y sorgo,

respectivamente; en este caso se afecta la producción del cultivo, pero además los

granos producidos son contaminados con toxinas fúngicas (Lesli y Summerell, 2013).

En el caso de las pudriciones ocurridas en raíz y corona, que son probablemente el

síndrome más extendido, son causadas con más frecuencia por F. solani, F.

pseudograminearum y F. culmorum; la pudrición resulta en un sistema radicular

deficiente y con alta probabilidad de muerte de la planta (Lesli y Summerell, 2013).

El proceso de infección de especies como F. oxysporum y F. graminearum ha sido

descrito en otros reportes científicos (Di Pietro et al., 2003; Urban y Hammond-Kosack,

2013). En la etapa inicial de la infección del hongo a la planta ocurre el reconocimiento

de la planta hospedera. La presencia de raíces (y sus secreciones) en el suelo cercano

activa, por ejemplo, la germinación de la clamidospora de F. oxysporum que se

encuentra en el suelo (Di Pietro et al., 2003). Posteriormente, las hifas del hongo

colonizan la superficie externa de la planta y comienza el desmantelamiento de las

defensas de la planta, es decir, de la pared celular vegetal en la parte externa, y de la

secreción de gomas, tilosas, fitoalexinas, etc., como parte de mecanismos de defensa

internos (Smith, 2007). Esto suele llevar rápidamente a la proliferación del hongo

dentro de los tejidos de la planta, con generación de micotoxinas, para, finalmente,



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culminar probablemente con la esporulación profusa del hongo en la superficie de la

planta luego de su muerte (Di Pietro et al., 2003). Es necesario reconocer, sin embargo,

que no siempre la infección es exitosa, dado que la planta infectada responde con

mecanismos de defensa que pueden bloquear la infección (Smith, 2007).

Durante la infección fúngica de la planta, el hongo debe activar secuencialmente un

conjunto de genes, de forma regulada. Hongos de suelo como F. oxysporum presentan

mecanismos de señalización moleculares para la detección de señales ambientales y la

modificación de la expresión génica en respuesta, que involucran las cascadas de

señalización MAPK-PKA y cAMP-PKA (Di Pietro et al., 2003).

Otro componente crucial de la infección de hongos fitopatógenos es la secreción de un

gran número de enzimas hidrolíticas que le permiten penetrar e infectar los tejidos a

pesar de la resistencia que ofrece la pared celular vegetal. Estas enzimas han sido

denominadas en conjunto como enzimas degradadoras de pared celular (EDPC) (Kikot

et al., 2009). Estudios iniciales de inactivación de genes codificantes de EDPC

mostraron un escaso efecto de algunas de estas enzimas en la virulencia de los hongos,

sin embargo, luego se demostraría la presencia de genes similares codificantes de

enzimas funcionalmente redundantes (Walton, 1994).

Las señales iniciales en el reconocimiento planta-hongo incluyen el factor de

transcripción CTF1-α que controla la expresión de genes de cutinasa en F. solani f. sp.

pisi. Los ácidos grasos dihidroxi-C16 y trihidroxi-C18 liberados desde la cutina por la

enzima cutinasa secretada de forma constitutiva activan la transcripción activa del gen

de la cutinasa (Mendgen et al., 1996), lo que inicia la degradación de la pared celular.



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F. oxysporum presenta un gen Ctf1, ortólogo funcional de CTF1-α, que regula la

transcripción de genes de cutinasa y lipasa (Rocha et al., 2008).

Dada la composición heterogénea de la pared celular, un set igualmente heterogéneo de

enzimas es secretado por Fusarium. Las pectinasas presentan un rol primordial en el

proceso de infección dado que la degradación de las pectinas de la pared celular vegetal

resulta en el ablandamiento de la estructura y la consiguiente penetración del hongo.

Estas enzimas están entre las primeras enzimas degradadoras de polisacáridos a ser

inducidas en F. solani cultivados con paredes celulares de plantas y en tejidos

infectados de melón (Zhang et al., 1999) y estarían involucradas en la pudrición

vascular producida por F. oxysporum (Di Pietro et al., 2003). Basta la aplicación de una

de las pectato-liasas (PL) de F. oxysporum en tomate para producir los mismos

síntomas de la pudrición vascular causada por el hongo completo; la presencia de estas

enzimas ha sido reportada en tejido de tomate infectado por el hongo (Huertas-

González et al., 1999). La incubación de F. solani f. sp. pisi con anticuerpos

monoclonales contra PL reduce las lesiones en epicótilos de arvejas, señalando su

importancia durante la infección fúngica (Guo et al., 1996).

La vía enzimática de degradación de la celulosa incluye endo-1,4-β-glucanasas, es

decir, enzimas de la familia Glicósido hidrolasa 5, las cuales cortan enlaces internos en

la cadena de celulosa. Luego intervienen exo-1,4-β-glucanasas o celobiohidrolasas, que

rompen las moléculas de celobiosa en los extremos de una cadena de celulosa. En una

tercera etapa participan β-glucosidasas, enzimas que hidrolizan la celobiosa en 2

moléculas de glucosa (Glass et al., 2013).



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Para degradar la pared celular vegetal requiere también la intervención de enzimas

hemicelulasas. La degradación del xilano requiere, por ejemplo, una gran variedad de

hemicelulasas, como endo-β-1,4-xilanasa, α-L-arabinofuranosidasa, β-xilosidasa, acetil-

xilano esterasa y ácido felúrico esterasa (Glass et al., 2013). Análisis de expresión

génica indican que algunas xilanasas actúan durante todo el ciclo de infección de F.

oxysporum mientras que otras se expresan solo en algunas etapas (Ruiz-Roldán et al.,

1999).

Una exitosa colonización de la planta hospedera por parte de un microorganismo

patógeno también ha sido relacionada a la capacidad enzimática para degradar proteínas

(Walton, 1994). F. oxysporum f. sp. lycopersici presenta el gen ptr1que codifica una

proteinasa fúngica semejante a subtilisina y se expresa durante todo el ciclo de

infección (Di Pietro et al., 2001). Por otro lado, actividad proteasa ha sido detectada en

F. solani f. sp. eumartii, en la infección de tubérculos de papa susceptible,

encontrándose incluso que en una proteína extracelular de la papa, con homología a

inhibidores de proteasa de la familia Kunitz, era el blanco de la actividad proteolítica

esta enzima (Olivieri et al., 2004).

El componente proteico/enzimático de los hongos que participan en la infección de una

planta hospedera es amplio y complejo (Glass et al., 2013; Kubicek et al., 2014), por lo

que nuevas tecnologías de análisis de proteínas de alcance ya no individual sino de

conjuntos enteros (“proteoma”) han sido aplicadas para su estudio (Harris et al., 2013).



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1.3. El exoproteoma

Hasta hace pocos años los términos “exoproteoma”, “secretoma”, “proteoma de

superficie celular” han sido usados de manera indistinta por los investigadores para

referirse al conjunto de proteínas naturales secretadas por una célula, tejido u

organismo, en un momento o condición dada, y la maquinaria celular involucrada en

sus interacciones (Tjalsma et al., 2000). Los datos generados del análisis proteómico

moderno han permitido diferenciar estos conceptos. Actualmente, el término

“exoproteoma” refiere al contenido proteico presente fuera de la célula e incluye tanto a

proteínas secretadas activamente como a proteínas extracelulares no secretadas,

resultantes de la lisis celular, fricción celular y la degradación de proteínas (Armengaud

et al., 2012; Desvaux et al., 2009). La importancia de su estudio radica en que estas

proteínas secretadas controlan o regulan diversos procesos biológicos y fisiológicos, lo

cual faculta su utilización para el descubrimiento de biomarcadores y blancos

terapéuticos (Armengaud et al., 2012; Hathout, 2007).



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2. MATERIAL Y MÉTODOS

2.1. Material biológico

Dos aislamientos distintos fueron utilizados en el presente estudio: uno correspondiente

a la especie F. solani (codificado como F. solani-C30) y el otro a la especie F.

oxysporum (codificado como F. oxysporum-FM4). Estos aislamientos ya identificados

fueron provistos por el área de Microbiología del Centro de Investigación en

Biotecnología BIOTEC (Tumbes). Cabe señalar que estos organismos fueron aislados a

partir de muestras de raíces de palto de cultivos ubicados en el distrito San José,

provincia Chao – Dpto. La Libertad, pertenecientes a la empresa agroindustrial

Camposol S.A; la identidad de estos hongos fue establecida por análisis de secuencias

conservadas de ADN.

También fueron utilizadas raíces de plantones de Persea americana “palto” var.

Antillano de 5 meses de edad, obtenidas a partir de semillas procedentes de la Empresa

Camposol S.A.

2.2. Métodos y técnicas

2.2.1. Medio líquido de sales

El cultivo de los hongos para la obtención de proteínas secretadas fue realizado en un

medio líquido de sales (MLS) suplementado con dos tipos de fuente de carbono. La

composición de MLS fue la utilizada por Suárez et al. (2005), con algunas

modificaciones: 1.7 g de (NH4)2SO4 (~13 mM), 0.2 g de KCl (~2.7 mM), 0.2 g de

CaCl2 (~1.8 mM), 0.2 g de MgSO4.7H2O (~0.81 mM), 2 mg de FeSO4.7H2O (~0.007

mM), 2 mg de MnSO4.7H2O (~0.008 mM), 2 mg de ZnSO4.7H2O (~0.007 mM), 0.68 g



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de KH2PO4 (~5 mM), 0.87 g de K2HPO4 (~5 mM). Estas sales fueron disueltas en 1 L

de agua destilada y luego llevadas a pH 6.8 antes de ser autoclavado (121 °C y 15 psi,

por 15 min.).

2.2.2. Suplementación de medios

Dos fuentes de carbono distintas se utilizaron para suplementar los medios: pared

celular de raíz de palto (PCRP) y glucosa (G, reactivo comercial).

Para obtener las raíces de palto, las semillas fueron primero germinadas en agua y luego

sembradas en maceteros de bolsas plásticas de vivero con tierra tratada por calor (80 °C

por 15 min.) para reducir la carga de microorganismos. Las plántulas fueron mantenidas

en una habitación expuesta al ambiente pero bajo sombra y protegida contra insectos

por el uso de mallas.

Para obtener el suplemento a base de raíces de palto se siguió el procedimiento descrito

en Sposato et al. (1995), con algunas modificaciones, según se describe a continuación.

Las raíces de palto colectadas fueron lavadas con abundante agua potable hasta eliminar

todas las partículas de tierra, luego enjuagadas en agua destilada y secadas con papel

secante y calor (en horno microondas). Una vez secas, las raíces fueron trozadas e

inmediatamente pulverizadas usando nitrógeno líquido, mortero y pilón. El pulverizado

fue homogenizado por 30 min., en buffer KH2PO4 0.1 M, a pH 7, al que se le adicionó

fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF, por sus siglas en inglés) a una concentración

final de 0.2 mM. El homogenizado fue centrifugado a 9,000 rpm por 15 min., a 4 °C.

Luego de extraer el sobrenadante, el material vegetal fue sometido a lavados con

solventes en la secuencia siguiente: agua destilada, etanol 50%, metanol,



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metanol:cloroformo (1:1), metanol, agua destilada (2 veces) y acetona. En cada lavado

se adicionó con 8-10 mL de solvente, se agitó por vórtex unos minutos, se centrifugó en

las condiciones antes descritas y se eliminó el sobrenadante. Luego del último lavado se

dejó evaporar la acetona dentro de una cámara flujo. Luego de eliminada toda la

acetona, el polvillo de raíces (pared celular) obtenido se guardó en refrigeración a -80

°C hasta su utilización.

2.2.3. Condiciones de cultivo

Los cultivos del hongo Fusarium para la obtención proteínas secretadas consistieron en

50 mL de MLS suplementado con 0.3 % de PCRP o con 0.5 % de G. Luego de haber

realizado las primeras pruebas, se determinó que los medios suplementados con PCRP

debían contener una cantidad mínima de glucosa, para asegurar el desarrollo inicial de

los hongos por lo que a estos medios se le adicionó también 0.005 % de glucosa. Los

medios contenidos en frascos de vidrio de 250 mL, fueron autoclavados a condiciones

estándar antes de la inoculación de los hongos.

Antes de ser sembrados en los medios líquidos los aislamientos de Fusarium, que eran

conservados en placas Petri con agar APD a 10 °C, fueron sembrados en nuevas placas

Petri con medio APD e incubados en oscuridad a 25 °C en promedio, para verificar la

viabilidad de los hongos. Luego de 10 días, los hongos reactivados fueron sembrados

nuevamente, bajo las condiciones ya descritas. Luego de 10 días adicionales, las

estructuras fúngicas fueron colectadas, principalmente estructuras de reproducción, por

raspado de la superficie del cultivo con una navaja de bisturí. Esta masa de estructuras

fúngicas fue dividida en partes iguales e inoculadas en los medios ya suplementados y



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esterilizados. Los cultivos fueron incubados a temperatura ambiente (24 °C,

aproximadamente), sin agitación perenne y sin exposición directa a luz, por 10 días (el

crecimiento de los hongos en los cultivos se muestra en Anexo 3).

2.2.4. Extracción de proteínas

Los cultivos fueron primero filtrados primero usando capas de gaza y luego a través de

filtros de jeringa Milliport de 0.45 µm. Las proteínas fueron obtenidas por precipitación

con ácido tricloroacético (TCA), modificado de Dangott (2009). 0.11 volúmenes de

TCA al 100% fueron adicionados a los filtrados, con incubación por toda la noche y

posterior centrifugación a 11,000 rpm por 30 min., a 4 °C. El pellet de proteínas fue

lavado con 500 µL de acetona al 90% más 50 mM de ditiotreitol (DTT) helada, dos

veces, en tubos Eppendorft de 1.5 mL. En cada lavado el pellet fue disgregado en la

solución y centrifugado a 10,000 rpm por 5 min., a 4 °C, para luego eliminar el

sobrenadante. De esta misma forma se aplicó un último lavado con acetona al 100 %,

helada. Finalmente, el pellet de proteínas se dejó secar al ambiente por unos minutos, en

una cámara de flujo y fue luego almacenado a -80 °C hasta su uso.

2.2.5. Digestión y separación de proteínas

Las muestras de proteínas fueron digeridas por tripsinización, según Gundry et al.

(2009), con algunas modificaciones. El pellet de proteínas fue resuspendido en 50 uL de

una solución de bicarbonato de amonio (HN4HCO3) 250 mM y úrea 2 M. La suspensión

fue centrifugada a 12,000 rpm por 5 min., a 20 °C. Del sobrenadante se colectaron 25

µL y se mezclaron con 25 µL de H2O grado HPLC en un tubo de 0.2 mL. Fueron

adicionados 2.5 µL de una solución 200 mM de DTT (en NH4HCO3 100 mM). La



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solución fue incubada por 5 min., a 95 °C, para luego dejarla enfriar por unos minutos y

adicionar 20 µL de solución de iodoacetamida 200 mM en NH4HCO3 100 mM. Las

muestras fueron incubadas en oscuridad por 45 min., a temperatura ambiente. Este paso

fue repetido luego de adicionar 2.5 µL de DTT. Finalmente, 2.5 µL de solución de

tripsina de una concentración de 0.1 µg/µL en NH4HCO3 100 mM fueron adicionados a

las muestras y mantenidas a 37 °C toda la noche. La digestión fue detenida adicionando

10 µL de ácido trifluoroacético (TFA) y manteniéndolas a 4 °C hasta su uso.

Las soluciones peptídicas producto de la digestión de proteínas fueron desalinizadas y

separadas por cromatografía, usando puntas ZipTipTM, las cuales presentan una

microcolumna de medio de cromatografía, en este caso, resina C18. El fraccionamiento

de péptidos se realizó de acuerdo a Aitken (2005), con algunas modificaciones. Las

puntas fueron primero humedecidas en solución de acetonitrilo (ACN) al 50 % en 0.1 %

de TFA y lavadas en una solución de 0.1 % de TFA. Luego, se aspiró y dispensó por al

menos 10 veces la muestra (un volumen de 10 µL). Las puntas fueron lavadas con una

solución de 5 % de metanol en 0.1 % TFA y finalmente, los péptidos fueron eluidos en

un gradiente de concentración de ACN: 5 %, 20 %, 40 % y 60 % (4 µL en cada

solución); antes de eluir las muestras en cada solución con mayor concentración de

ACN, las puntas fueron lavadas en la solución al ACN 5 %.

2.2.6. Espectrometría de masas

Las fracciones peptídicas fueron sometidas a espectrometría de masas MALDI

TOF/TOF en un espectrómetro de masas MALDI TOF/TOF plus 4800 ABSCIEX.

Antes de ingresar al equipo las muestras fueron combinadas con la matriz de ionización



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CHCA (ácido α-ciano-4-hidroxicinámico), a una concentración de 50 mg/mL, disuelta

en una solución de ACN 50 % en TFA 0.1 %. 1.5 µL de muestra fueron combinados

con el mismo volumen de matriz, y así colocadas en los respectivos spots de la placa de

muestras OPTI TOF. Las muestras fueron “leídas” luego de observar la completa

evaporación del solvente.

Para la programación de modos y parámetros de lectura el analizador de masas se

utilizó el software 4000 Series ExplorerTM. En lectura de masas se utilizó un método de

adquisición en modo ión positivo de tipo reflecton, en un rango de lectura de 500 a

4,500 Da (bajo peso molecular), con una masa central de 2,500 Da, intensidad de láser

Nd:YAG de 4500 nm, 0.5 de tamaño de recipiente y 0.91 en el detector de voltaje. En el

método de procesamiento se estableció considerar los picos con un coeficiente

señal/ruido mayor a 5. Un ejemplo de los espectros de masa registrados se muestra

gráficamente en Anexo 4.

Luego de la primera lectura, se efectuó automáticamente la secuenciación de todos los

picos monoisotópicos precursores obtenidos que presentaron una tasa señal/ruido ≥ 20,

con una tolerancia de masas entre fracción y fracción del precursor de 200 ppm. En esta

segunda lectura (TOF/TOF), los picos precursores fueron fragmentados por disociación

inducida por colisión (CID) en una cámara de colisión con oxígeno, con una energía de

colisión de 2 kV; fueron realizados 50 disparos por cada sub-región.

2.2.7. Análisis bioinformático

En la identificación de proteínas se utilizó el software Protein PilotTM, usando el

algoritmo ParagonTM. En el programa se seleccionó características del análisis como



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factores alquilación por “iodoacetamida”, digestión por “tripsina”, focalización en

identificación de “modificaciones biológicas” y esfuerzo de búsqueda “total”. Los datos

de masas TOF/TOF fueron comparados con la base de datos UniProtKB

(http://www.uniprot.org/), específicamente con las correspondientes a Nectria

haematococca y Fusarium oxysporum, en enero de 2013; la identificación de proteínas

se basa en el mayor puntaje obtenido en el análisis de identidad, es decir en relación a la

semejanza de su secuencia respecto a las entradas de proteínas de la base de dato.

Las secuencias peptídicas ya obtenidas (algunas pocas con nombre propio e

información funcional) fueron comparadas manualmente con la misma base de datos en

marzo de 2016, encontrándose mayor información en relación a su función o la

presencia de dominios, la cual fue analizada con mayor detalle en las bases de datos

funcionales de proteínas de donde procedía la información de UniProtKB: InterPro

(Protein sequence analysis & classification; https://www.ebi.ac.uk/interpro/), Pfam

(http://pfam.xfam.org/) y PROSITE (Database of protein, domains, families and

functional sites; http://prosite.expasy.org/). La presencia de péptido señal fue verificada

en el servidor SignalP 4.1 (http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/), bajo parámetros

estándar de análisis.



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26

3. RESULTADOS

Un total de 80 proteínas fueron identificadas con los 164 oligopéptidos registrados por

espectrometría de masas MALDI TOF/TOF, a partir del sobrenadante de cultivos de F.

solani y F. oxysporum. En ambos casos, el número de proteínas fue mayor en cultivos

en medio líquido de sales suplementado con pared celular de raíz de palto (MLS +

PCRP) que en los suplementados con glucosa (MLS + G). En relación a F. solani, 22

proteínas de fueron detectadas en cultivos MLS + PCRP y sólo 02 proteínas en MLS +

G. En relación a F. oxysporum, 40 proteínas fueron detectadas en cultivos MLS +

PCRP y 16 proteínas en MLS + G (Tabla 1). En el caso de F. solani, este tuvo un

desarrollo hifal limitado en los medios con glucosa, incluso en una de las repeticiones

no se detectaron proteínas ni hubo crecimiento.

Los niveles de confianza de la detección peptídica fueron iguales o mayores a 95 % en

6 secuencias (3.6 %), y menores a 95 % en 7 secuencias (4.3 %) y menores a 50 % en

las restantes 151 secuencias restantes (92.1 %). Los porcentajes de cobertura de las

secuencias peptídicas en relación a las proteínas identificadas están comprendidos entre

0.2 % y 4.7 %, con un promedio de 1.6 %. El parámetro denominado “no usado” está

comprendido entre 0.05 y 2.07, con un promedio de 0.2. Los datos se muestran en las

Tablas 2 - 5; en Anexo 5 se muestran los olipétidos detectados dentro de la secuencia

aminoacídica de la proteína correspondiente.

De las 80 proteínas detectas en total, solo 10 proteínas (02 de F. solani y 08 de F.

oxysporum) estaban identificadas con un nombre propio en la base de datos UniProtKB:

Glicosil-transferasa de la familia 2 (SP2.2), ATPasa transportadora de fosfolípido



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

27

(SP2.4), Citocromo P450, familia 51 (Esterol 14-demetilasa) (OG2.2), O-acil-

transferasa (OG2.7), ATPasa transportadora de calcio (OG2.8, OP1.1), Factor de

elongación 3 (OP2.1), Oligopeptidasa Thimet (OP2.5), Beta-glucosidasa (OP2.10) y

Triptófano sintasa (OP2.23). Las proteínas restantes (70) no presentaban una

denominación precisa, sino que figuraban bajo las denominaciones “proteína no

caracterizada”, “proteína presuntiva no caracterizada” o “proteína predicha”, como se

observa en las Tablas 2 - 5. En todos los casos las proteínas identificadas

correspondieron a proteínas de Fusarium y en ningún caso a proteínas de palto.

Catorce de las proteínas detectadas (03 de F. solani y 11 de F. oxysporum) pertenecían

al núcleo celular (Tablas 2 - 5). Esta información fue obtenida de las anotaciones de la

base de datos UniProtKB, ya sea porque se indicaba explícitamente su localización

nuclear (proteínas SP1.3, SP2.3, OG2.6, OP1.6, OP2.4, OP2.7 y OP2.21) o porque las

anotaciones de la entrada con mayor similitud indicaban actividades o funciones

relacionadas a procesos desarrollados en este orgánulo, como transcripción (SP2.6,

OP1.11, OP2.3, OP2.22), reparación de ADN (OG1.4, OG2.4) y replicación (OG2.10).

Diez proteínas (03 de F. solani y 07 de F. oxysporum) no presentaron información

funcional alguna en la base de datos UniProtKB, hasta la última fecha de revisión

realizada en marzo de 2016, contando solo con información de la secuencia

aminoacídica. Estas proteínas son las identificadas con los códigos: SP1.8, SP1.9,

SP2.5, OG1.3, OP1.2, OP1.3, OP1.7, OP2.13, OP2.17 y OP2.19. En ningún caso las

secuencias presentaron péptido señal.



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TECA D

E POSGRADO

28

De las proteínas identificadas, 36 presentaron información funcional referida a

“Función Molecular” (18), “Proceso Biológico” implicado (3) o ambas (15),

adicionalmente a la información sobre la familia de proteínas perteneciente y/o

dominios presentes. Las 20 proteínas restantes solo presentaron información de familia

y dominio. Estos datos se muestran en las Tablas 6 - 9.

Las únicas 2 proteínas detectadas de F. solani en MLS + G fueron la proteína

codificada como SG2.1, perteneciente a la Superfamilia Facilitadora Principal, una

familia de proteínas relacionada al transporte de membrana, y la proteína SG2.2 con

actividad proteína quinasa (Tabla 6).

En MLS + PCRP, las proteínas detectadas de F. solani incluyeron a SP1.10 identificada

por homología como una enzima activa por carbohidratos, con código de accesión

C7YJ62_NECH7, de la familia glicosil-hidrolasas 28, con actividad poligalacturonasa

en el espacio extracelular; no se encontró péptido señal en esta accesión, pero si en otras

con menor porcentaje de homología correspondientes a otra especie (Accesiones:

A0A0B7JZD7 y A0A0B7K526). También la proteína SP1.11, de ubicación en

membrana, podría estar involucrada en el metabolismo (catabolismo) de lípidos. Otras

proteínas y enzimas identificadas incluyen glicosiltransferasas (SP2.2), ATPasa

transportadora de fosfolípido (SP2.4), enzimas relacionadas a procesos de óxido-

reducción (SP1.7, SP1.12), una proteína con dominios relacionados a la síntesis de

antibióticos peptídicos (SP1.5). Estas y otras proteínas detectadas se presentan en la

Tabla 7.



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TECA D

E POSGRADO

29

En cultivos de F. oxysporum en medios MLS + G fueron detectadas 02 enzimas

involucradas en el metabolismo lipídico: OG2.7 identificada como O-aciltransferasa, de

la familia de aciltransferasas unidas a membrana, y OG2.3 que podría participar del

metabolismo de ácidos grasos. OG1.5 presentó dominios de la Superfamilia

transportadora principal y OG2.8 fue identificada como ATPasa transportadora de

calcio, posiblemente involucrada en el transporte mitocondrial de electrones de

ubiquinol a Citocromo c y el proceso catabólico de proteínas. Cabe señalar la

identificación de OG2.2 como Citocromo P450 familia 51, de actividad óxido-

reductasa, y OG1.2 como proteína semejante a N2227, por su relación con

características de toxicidad y respuesta de defensa frente a condiciones de estrés,

respectivamente. Otras proteínas identificadas incluyen a OG1.1 y OG2.1, relacionadas

a la transferencia de grupos fosfato y proteínas adicionales con funciones diversas que

se muestran en la Tabla 8.

En MLS + PCRP, las proteínas detectadas de F. oxysporum incluyeron a OP2.10 y

OP2.9, posiblemente relacionadas a la degradación de pared celular. OP2.10 fue

identificada como β-Glucosidasa (accesión: F9GBQ6_FUSOF) de la familia Glicósido

Hidrolasa 3 que participa del proceso catabólico de celulosa y la degradación de

polisacáridos; las anotaciones no indicaron su ubicación extracelular y no se encontró

péptido señal en la accesión. La proteína OP2.9 fue identificada como una proteína no

caracterizada (accesión: A0A0D2XLG8_FUSO4) pero que presenta dominios alfa-L-

ramnosidasa bacterial N-terminal, dominio semejante a dominio de unión a galactosa,

dominio semejante a glicosidasa seis-bucles; OP2.9 además es idéntica en 62% a la de



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TECA D

E POSGRADO

30

una enzima alfa-L-ramnosidasa de Verticillium dahliae (G2X7U5_VERDV, query

cover =92%, E-value =0).

También fueron detectadas la enzima oligopeptidasa Thimet (OP2.5) de la familia

Peptidasa M3, con actividad metal-endopeptidasa, y una proteína (OP2.24) con

actividad hidrolasa diester fosfórica, involucrada en el proceso metabólico de lípidos.

Adicionalmente, fueron detectadas una proteína (OP1.12) con actividad hidrolasa que

actúa en puentes C-N no peptídicos, con dominio característico de la familia Amido

hidrolasa 1; una proteína (OP1.13) con dominio característico de la familia Alfa/beta

hidrolasa 6, y una proteína (OP1.15) con dominio lectina/glucanasa semejante a

concavalina y presencia de péptido señal. Otras proteínas detectadas incluyen a OP1.5 y

OP2.2 que presentaron actividad oxido-reductasa (OP2.2 está involucrada en el proceso

de asimilación de nitratos); OP1.1 que es una ATPasa transportadora de calcio

involucrada en el transporte de electrones mitocondriales y el proceso catabólico de

proteínas y la proteína OP2.15 con dominio de complemento de conjugación de

ubiquitina a la degradación ER (CUE), entre otras proteínas de funciones metabólicas

distintas, que se muestran en la Tabla 9.



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E POSGRADO

31

Tabla 1. Número de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium oxysporum (Schlecht) y Fusarium solani (Mart.) en medio

líquido de sales (MLS) suplementado con pared celular de raíz de Persea americana (Mill.) “palto” (PCRP) o glucosa (G).

Organismo PCRP G

Repetición

1

Repetición

2 Total

Repetición

1

Repetición

2 Total

F. solani 16 6 22 0 2 2

F. oxysporum 16 24 40 5 11 16

Tabla 2. Exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium solani (Mart.) en medio líquido de sales suplementado con glucosa.

Código Péptidos

Detectados1

%

Cobertura

Factor

No

Usado

Identidad Accesión Componente

celular2

SG2.1 AHTFK 1 2 Proteína presuntiva no

caracterizada C7ZM26_NECH7

Componente integral

de membrana

SG2.2 ELVDK,VPIMGA 1.9 1.36 Proteína predicha C7YIQ9_NECH7

s/i

1 Niveles de confianza de identidad peptídica según software Protein Pilot; verde: ≥95 %, amarillo < 95, ≥50 %, rojo: < 50 %.

2 s/i= sin información



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32

Tabla 3. Exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium solani (Mart.) en medio líquido de sales suplementado con pared

celular de raíz de Persea americana (Mill.) “palto”.

Código Péptidos

Detectados1

%

Cobertura

Factor

No

Usado


celular2

SP1.1 EPDR,PEASL 0.8 0.61 Proteína presuntiva no

caracterizada C7ZNJ3_NECH7 Citoplasma

SP1.2 EPASL,MAKMK 0.8 0.22 Proteína presuntiva no

caracterizada C7YSK2_NECH7

Componente integral

de membrana

SP1.3 SAAAGK, EKRK,

EPDR, KERK 1.1 0.16 Proteína predicha C7ZPN2_NECH7 Núcleo

SP1.4 ASAKK, LSGRK,

KAASK 1.9 0.15

Proteína presuntiva no

caracterizada C7YK31_NECH7 Citosol

SP1.5 RTRK, VPPAPK 0.4 0.13 Proteína presuntiva no

caracterizada NhNSP3 C7YJM5_NECH7 s/i

SP1.6 GTAKK, MSSRK 1.4 0.11 Proteína presuntiva no

caracterizada C7YK28_NECH7

Componente

extrínseco de

membrana vacuolar

tipo fúngica;

Complejo Iml1

SP1.7 GGDKK, APSLPL,

SSHEK 1.6 0.09


caracterizada C7Z530_NECH7

Sub-unidad

ribosomal pequeña

mitocondrial SP1.8 FGTRK, AWRK 2.9 0.09 Proteína predicha C7ZB13_NECH7 s/i

SP1.9 MLPR, CEATK 1.7 0.08 Proteína predicha C7ZLU4_NECH7 s/i

SP1.10 DNKK, DGGKK 2.1 0.08 Proteína presuntiva no

caracterizada C7YJ62_NECH7 Extracelular



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33

SP1.11 VPGAHK 1.2 0.07 Proteína presuntiva no

caracterizada C7ZJK1_NECH7

Componente integral

de membrana

SP1.12 SINPK, PGPVM 3.5 0.07 Proteína presuntiva no

caracterizada C7ZHE0_NECH7 s/i

SP1.13 PEDR, SAAKK 2.7 0.07 Proteína presuntiva no

caracterizada C7YRS8_NECH7 s/i

SP1.14 EQPLK, FTRSS 1 0.06 Proteína presuntiva no

caracterizada C7Z8K3_NECH7 Citoplasma

SP1.15 EQIPK, GSIRK 1.9 0.05 Proteína presuntiva no

caracterizada C7Z3E4_NECH7

Componente integral

de membrana

SP1.16 SHSTR, QDDR 1.3 0.05 Proteína presuntiva no

caracterizada C7YZG1_NECH7 Mitocondria

SP2.1 AFMR, KLNK,

KPGSK 0.7 0.1 Proteína predicha C7Z8M0_NECH7

Citosol, vesículas

asociadas a Golgi

SP2.2 YPVK, FDPK 0.4 0.08 Glicosiltransferasa de la

familia 2 C7ZPL3_NECH7

Componente integral

de membrana

SP2.3 FPDK, SGQPK 1 0.07 Proteína predicha C7YTA2_NECH7 Núcleo

SP2.4 YEGR, YVPK 0.5 0.07 ATPasa transportadora

de fosfolípido C7Z424_NECH7

Componente integral

de membrana

SP2.5 TSPEK, EYGR 1.1 0.06 Proteína presuntiva no

caracterizada C7ZAI6_NECH7 s/i

SP2.6 SMMR, SMMR,

LAGNK 2.9 0.05


caracterizada C7ZLE5_NECH7

(Factor de

transcripción) 1 Niveles de confianza de identidad peptídica según software Protein Pilot; verde: ≥95 %, amarillo < 95, ≥50 %, rojo: < 50 %.




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34

Tabla 4. Exoproteínas de Fusarium oxysporum (Schlecht) detectadas en medios de cultivo líquidos suplementados con glucosa.

Código Péptidos

Detectados1

%

Cobertura

Factor

No

Usado


celular2

OG1.1 WGPPGD 3.4 0.94 Proteína no

caracterizada F9F0T9_FUSOF s/i

OG 1.2 FTEK, YFTM 1.8 0.22 Proteína no

caracterizada A0A0D2XIQ0_FUSO

4 s/i

OG 1.3 GAESGIGNK 0.8 0.12 Proteína no

caracterizada A0A0D2XQH8_FUS

O4 s/i

OG 1.4 DSDEEKLQKKL

GAK 2.9 0.07

Proteína no

caracterizada A0A0D2XGV6_FUS

O4

(Reparación de

escisión de bases)

OG 1.5

GLIYPPAYAVGF

NLLWNATTSVS

MAK 4.6 0.05

Proteína no

caracterizada A0A0D2YIW8_FUSO

4

Componente integral

de membrana

OG 2.1

QIEK, DDFK,

DDFK, GCRK,

NSASK, ELEK,

LPVFK

0.8 2.07 Proteína no

caracterizada F9FC23_FUSOF s/i

OG 2.2 DAAHAK 1.2 1.1

Citocromo P450,

familia 51 (Esterol 14-

demetilasa)

A0A0D2Y5I9_FUSO4 Componente integral

de membrana

OG 2.3 QSGNAK 0.7 0.49 Proteína no

caracterizada F9FMU4_FUSOF s/i

OG 2.4 SHEK, ELEK,

SNTGK 1 0.17

Proteína no

caracterizada A0A0D2XAX2_FUS

O4

(Complejo Mre11,

Reparación de ADN)

OG2.5 KAPGR, EGMDK 1.1 0.05 Proteína no

caracterizada F9G3T0_FUSOF

Componente integral

de membrana



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35

OG 2.6

AQKEK,

ELEK,HSEK,

RHYK 1.8 0.15

Proteína no

caracterizada F9FZJ1_FUSOF Núcleo

OG 2.7 GTHGLK, HRYK,

GNSTK 2.9 0.15 O-aciltransferasa F9G8P3_FUSOF Membrana del RE

OG 2.8

QGVGR, EVVFK,

GCRK, QLEK,

EPFK 0.6 0.11

ATPasa transportadora

de calcio F9FZ51_FUSOF

Complejo 3 de la

cadena respiratoria

mitocondrial

OG 2.9 ADAQAK,

SNTGK, QDEGR 1.8 0.17

Proteína no

caracterizada A0A0D2XUZ9_FUSO

4 s/i

OG

2.10 EPFK, PDPFK 0.7 0.06

Proteína no

caracterizada A0A0D2XCN5_FUS

O4 (Actividad helicasa)

OG

2.11 LVPFK, DEEK 1.1 0.05

Proteína no

caracterizada F9GCW6_FUSOF s/i





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36

Tabla 5. Exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium oxysporum (Schlecht) en medio líquido de sales suplementado con

pared celular de raíz de Persea americana (Mill.) “palto”.

Código Péptidos

Detectados

%

Cobertura

Factor

No

Usado


celular2

OP1.1 PVQPRGMLRPK,

PPRVF 1.3 0.19

ATPasa transportadora

de calcio F9FZ51_FUSOF

Complejo 3 de la

cadena respiratoria

mitocondrial OP1.2

SAGEAYLASLFS

LKTREHFR 1.8 0.17

Proteína no

caracterizada A0A0D2YCQ9_FUS

O4 s/i

OP1.3 DYTTQETVERV

VSDMGRPAL 0.8 0.16

Proteína no

caracterizada F9FSU0_FUSOF s/i

OP1.4 ADMYQIKIGAQ

TLRGESGCGK 0.4 0.15

Proteína no

caracterizada A0A0D2XY25_FUSO

4 s/i

OP1.5 TVAQWGCGAEF

ITGSTDSPVK 2.9 0.14

Proteína no

caracterizada F9GAZ8_FUSOF s/i

OP1.6 TFEK, TIYK,

PEEK 0.2 0.13

Proteína no

caracterizada A0A0D2XE28_FUSO

4 Núcleo

OP1.7 TEFK, VGSTEK 4.7 0.11 Proteína no

caracterizada A0A0D2YJ09_FUSO

4 s/i

OP1.8 DDYR, LIEK,

EPEK 0.5 0.08

Proteína no

caracterizada A0A0J9UBC0_FUSO

4 s/i

OP1.9 GSTVEK, PETR 1.4 0.09 Proteína no

caracterizada F9F6P5_FUSOF s/i

OP1.10 LLEK, SGTVEK 1 0.08 Proteína no

caracterizada A0A0D2XKJ8_FUSO

4 s/i

OP1.11 SGSELK, LIEK 0.6 0.08 Proteína no

caracterizada A0A0D2XK71_FUSO

4

Complejo mediador

(Co-factor de

transcripción)

OP1.12 GSQNSK 0.3 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0C4DIH0_FUSO

4 s/i



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37

OP1.13 GSVTEK 2.5 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0D2YG23_FUSO

4 s/i

OP1.14 GVTTDK 0.8 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0D2Y7U8_FUSO

4 s/i

OP1.15 SGKSNK 2.4 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0D2Y3S0_FUSO

4

Componente integral

de membrana

OP1.16 GSSQNK 3.7 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0D2XUK3_FUS

O4

Componente integral

de membrana

OP2.1 MLTSK, ETEK,

LAAMK 0.3 0.06 Factor de elongación 3

A0A0D2Y596_FUSO

4 s/i

OP2.2 SWFK, DPFK,

GNNEK, APTYK 1 0.06

Proteína no

caracterizada A0A0D2XIL5_FUSO

4 s/i

OP2.3 DDEK, MVEK 2.3 0.06 Proteína no

caracterizada F9FTB2_FUSOF

(Factor de

transcripción)

OP2.4 LHMK, AKPGR 0.4 0.05 Proteína no

caracterizada F9FPW2_FUSOF

Núcleo

OP2.5 QIEK, YKDPAM 1.4 0.17 Oligopeptidasa Thimet A0A0D2XWV3_FUS

O4 s/i

OP2.6 AALAVK, MDWK 1.8 0.05 Proteína no

caracterizada F9F9J4_FUSOF s/i

OP2.7 NGDKK, ADVFK,

PRVE 0.7 0.05

Proteína no

caracterizada A0A0D2X8J9_FUSO

4 Núcleo

OP2.8

HIMK,

INKNENVHQDL

KDMLDTIK,

DHTK, EADVK

2.3 0.05 Proteína no

caracterizada A0A0D2XAP8_FUSO

4 s/i

OP2.9 GRLGFK, QDGER 1.3 0.19 Proteína no

caracterizada A0A0D2XLG8_FUSO

4 s/i

OP2.10 VLPFK, VGGCK,

ELEK 1.7 0.06 Beta-glucosidasa F9GBQ6_FUSOF s/i



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38

OP2.11 LAFW, AAALVK 0.8 0.16 Proteína no

caracterizada A0A0D2XYP8_FUSO

4 s/i

OP2.12 AAVAIK, VMEK 0.4 0.15 Proteína no

caracterizada A0A0D2Y2H3_FUSO

4

Componente integral

de membrana

OP2.13 DTHK, QDWR 2.9 0.14 Proteína no

caracterizada F9FCQ9_FUSOF s/i

OP2.14 AAADPK, EPFK 0.2 0.13 Proteína no

caracterizada A0A0D2YEZ5_FUSO

4 s/i

OP2.15 APAADK, TEEK 4.7 0.11 Proteína no

caracterizada A0A0D2Y4G4_FUSO

4 s/i

OP2.16 APAWK, EPFK 1.4 0.1 Proteína no

caracterizada F9G927_FUSOF s/i

OP2.17 APASVK 1.4 0.09 Proteína no

caracterizada A0A0D2XFJ4_FUSO

4 s/i

OP2.18 AALLGK 1 0.08 Proteína no

caracterizada F9G2S6_FUSOF

Componente integral

de membrana

OP2.19 APAGEK 0.6 0.08 Proteína no

caracterizada A0A0D2XVC0_FUS

O4 s/i

OP2.20 ISTMK, SWFK 0.3 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0D2XDB6_FUS

O4 s/i

OP2.21 GNNGTSK 2.5 0.06 Proteína no

caracterizada F9F9A8_FUSOF Núcleo

OP2.22 HGSSK 0.8 0.06 Proteína no

caracterizada A0A0D2YJF6_FUSO

4

(Factor de

transcripción)

OP2.23 YSGNK 2.4 0.06 Triptófano sintasa A0A0D2Y8Q2_FUSO

4 s/i

OP2.24 AAAVIK 3.7 0.06 Proteína no

caracterizada F9GD21_FUSOF s/i





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39


(Mart.) en medio liquido de sales suplementado con glucosa.

Código Nombre de proteína Datos funcionales

SG2.1 Proteína presuntiva no

caracterizada

B: Transporte de membrana

F: Superfamilia facilitadora principal

SG2.2 Proteína predicha M: Actividad proteína quinasa serina/treonina

D: Proteína quinasa eucariota 2 M= función molecular, B= proceso biológico, F= familia de proteínas, D= dominio.



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40


(Mart.) en medio liquido de sales suplementado con pared celular de raíz de Persea

americana (Mill.) “palto”.

Código Nombre de proteína Datos funcionales

SP1.1 Proteína presuntiva no

caracterizada

M: Actividad editora de aminoacilos de ARNt

B: Aminoacilación de ARNt

F: ARNt sintetasa clase I (I, L, M, V)

D: De unión a anticodón de ARNt


caracterizada F: Proteínas de incompatibilidad de heterocarión (HET)


caracterizada D: Dominio HTH tipo La (estructural, de unión a ARN)


caracterizada NhNSP3

M: Actividad catalítica

D: Semejante a proteína acarreadora de acilos;

Condensación; Sintetasa/Ligasa dependiente de AMP


caracterizada

B: Respuesta celular a inanición de aminoácidos;

regularización negativa de la señalización TOR

D: Regulador 3 de nitrógeno permeasa


caracterizada

M: Actividad metil-transferasa

B: Homeostasis celular redox

D: Sitio activo de tioredoxina

SP1.8 Proteína predicha s/i

SP1.9 Proteína predicha s/i


caracterizada

M: Actividad poligalacturonasa

B: Proceso metabólico de carbohidratos

F: Glicosil-hidrolasa 28


caracterizada

M: Actividad hidrolasa diester fosfórica

B: Proceso metabólico lipídico

D: Fosfo-diesterasa semejante a PLC


caracterizada

M: Actividad oxido-reductasa

F: Deshidrogenasa/reductasa de cadena corta


caracterizada

M: Posiblemente relacionada a la actividad transferasa

de glutatión

F: Glutation S-transferasa


caracterizada

B: Organización de pared celular tipo fúngica

D: Helical semejante a tetraticopéptido (estructural)


caracterizada F: Proteínas de incompatibilidad de heterocarión (HET)



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41


caracterizada

M: Actividad ligasa (que forma puentes C-N); Unión a

ATP

B: Procesamiento de t-ARN en traducción mitocondrial

F: ARNt (IIe)-lisidin sintasa

SP2.1 Proteína predicha

M: Actividad de factor de intercambio ARF –

nucleótidos guanilos

B: Transporte mediado por vesícula de ER a Golgi

F: SEC7

SP2.2 Glicosiltransferasa de la

familia 2

M: Actividad transferasa de grupos hexosilos

F: Quitina sintasa

D: cabeza de miosina-dominio motor

SP2.4 ATPasa transportadora

de fosfolípido

M: Actividad de ATPasa translocadora de fosfolípido;

Unión a ión magnesio

F: ATPasa tipo P, sub-familia IV (ATPasas E1-E2)


caracterizada s/i

2 M= función molecular, B= proceso biológico, F= familia de proteínas, D= dominios.

s/i: sin información



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42

Tabla 8. Datos funcionales de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium

oxysporum (Schlecht) en medio liquido de sales suplementado con glucosa.

Código Nombre de

proteína Datos funcionales

OG1.1 Proteína no

caracterizada

M: Actividad proteína quinasa

D: Proteína quinasa

OG 1.2 Proteína no

caracterizada F: Proteína semejante a N2227; secuencia con péptido-señal

OG 1.3 Proteína no

caracterizada s/i

OG 1.5 Proteína no

caracterizada

M: Actividad transportadora de membrana sustrato-

específica

B: Transporte

D: MFS (Súper familia facilitadora principal)

OG 2.1 Proteína no

caracterizada

M: Actividad fosfo-transferasa con grupo alcohol como

aceptor.

D: Quinasa relacionada a PIK, FAT; Semejante a proteína

quinasa; Fosfatidilinositol quinasa 3 y 4.

OG 2.2

Citocromo P450,

familia 51 (Esterol

14-demetilasa)

M: Actividad óxido-reductasa, actividad mono-oxigenasa

D: Sitio conservado de Citocromo P450

OG 2.3 Proteína no

caracterizada

M: Actividad 3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa

B: Proceso metabólico de ácidos grasos

F: 3HCDH_N (3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa, NAD

dominio de unión)

OG 2.5 Proteína no

caracterizada D: Hélice transmembrana (estructural)

OG 2.7 O-aciltransferasa

M: Actividad diacilglicerol O-aciltransferasa

B: Proceso biosintético de triglicéridos

F: Aciltransferasa unida a membrana

OG 2.8

ATPasa

transportadora de

calcio

M: Actividad ATPasa transportadora de calcio, Actividad

ubiquitina-proteína-transferasa

B: Transporte de electrones mitocondrial, de ubiquinol a

Citocromo c; Proceso catabólico de proteínas

F: ATPasa tipo P, subfamilia IIB; Complejo Citocromo b-c1

subunidad 9



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43

OG2.9 Proteína no

caracterizada

F: Con dominio de función desconocida DUF3684

D: ATPasa semejante a histidina quinasa, C-terminal;

OG

2.11

Proteína no

caracterizada

M: Unión a ión metálico

F: Proteína de función desconocida (DUF)

D: Semejante C2H2, dedo de zinc

M= función molecular, B= proceso biológico, F= familia de proteínas, D= dominios.

s/i= sin información



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44

Tabla 9. Datos funcionales de exoproteínas detectadas en cultivos de Fusarium

oxysporum (Schlecht) en medio liquido de sales suplementado con pared celular de

raíz de Persea america (Mill.) “palto”.

Código Identidad Datos funcionales

OP1.1

ATPasa

transportadora de

calcio

M: Actividad ATPasa transportadora de calcio, Actividad

ubiquitina-proteína-transferasa

B: Transporte de electrones mitocondriales, Proceso

catabólico de proteínas

F: ATPasa tipo P, subfamilia IIB; Complejo Citocromo b-c1

subunidad 9

OP1.2 Proteína no

caracterizada s/i

OP1.3 Proteína no

caracterizada s/i

OP1.4 Proteína no

caracterizada D: Secuencia con péptido señal

OP1.5 Proteína no

caracterizada

M: Actividad óxido-reductasa

F: MaoC_dehydratas

D: Semejante a MaoC

OP1.7 Proteína no

caracterizada s/i

OP1.8 Proteína no

caracterizada D: Espiral enroscado (estructural)

OP1.9 Proteína no

caracterizada D: Dominio que contiene repetición Ankyrin

OP1.10 Proteína no

caracterizada

M: Unión a ATP

D: AAA (ATPasas Asociadas con una variedad de

Actividades celulares)

OP1.12 Proteína no

caracterizada

M: Actividad hidrolasa, que actúa en puentes C - N (pero no

peptídico)

F: Amido-hidrolasa (algunas enzimas relacionadas a la

formación de purinas a partir de adenina o su utilización

como fuente de nitrógeno)

OP1.13 Proteína no

caracterizada

F: Alfa/beta hidrolasa (presente en proteasas, lipasas,

peroxidasas, esterasas, epoxi hidrolasas y deshalogenasas)

OP1.14 Proteína no

caracterizada D: Secuencia con péptido señal

OP1.15 Proteína no

caracterizada

D: Lectina/glucanasa semejante a concavalina A

(estructural); Secuencia con péptido señal.

OP1.16 Proteína no

caracterizada D: Hélice transmembrana



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E POSGRADO

45

OP2.1 Factor de

elongación 3

M: Actividad factor de elongación traducción; Actividad

ATPasa

B: Biosíntesis de proteínas

D: Transportador ABC

OP2.2 Proteína no

caracterizada

M: Actividad oxido-reductasa

B: Asimilación de nitrato

F: Molibdoterin oxidoreductasa eucariótico; NADH

Citocromo b5 reductasa

OP 2.5 Oligopeptidasa

Thimet

M: Actividad metal-endopeptidasa; unión a ión metálico

F: Peptidasa M3A/M3B

D: Neurolisina/thimet oligopeptidasa; Sitio catalítico de

metal-endopeptidasa OP2.6 Proteína no

caracterizada

M: Actividad transferasa

D: Transportador de acilos, con sitio de unión a

fosfopanteteina

OP2.8 Proteína no

caracterizada D: Espiral espiralado (estructural)

OP2.9 Proteína no

caracterizada


D: Alfa-L ramnosidasa bacterial (incluye a la fam. glicósido

hidrolasa familia 78)

OP 2.10 Beta-glucosidasa

M: Actividad beta-glucosidasa

B: Proceso catabólico de celulosa, degradación de

polisacáridos

F: Glicosil hidrolasa 3

D: PA14

OP2.11 Proteína no

caracterizada

M: Unión a ión zinc

D: Plegamiento tipo armadillo (estructural); Tipo anillo de

dedo de zinc

OP2.12 Proteína no

caracterizada

F: Con dominio de función desconocida DUF2405; Proteína

mitocondrial de FMP27; Proteína Fmp27 promotor de ARN

pol II

D: Proteína Fmp27 de promotor ARN pol. II; Dominio de

Proteína de localización en cuerpo de Golgi OP2.13

Proteína no

caracterizada s/i

OP2.14 Proteína no

caracterizada

D: Hidrolasa nucleósido trifosfato con bucle P, Dominio

semejante a tetratricopéptido (estructural)

OP2.15 Proteína no

caracterizada

D: Componente CUE del sistema ubiquitina; dominio

semejante a UBA

OP2.16 Proteína no

caracterizada


F: Superfamilia histidina fosfatasa (rama 1); con sitio activo

de fosfoglicerato/bifosfoglicerato mutasa

OP2.17 Proteína no

caracterizada s/i

OP2.18 Proteína no

caracterizada D: Hélice transmembrana (estructural)

OP2.19 Proteína no

caracterizada s/i



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46

OP2.20 Proteína no

caracterizada

B: Posiblemente relacionada a la transducción de señales

D: Semejante a dominio PH; Homología a Pleckstrin (PH);

Semejante a START

OP2.23 Triptófano sintasa M: Actividad triptófano sintasa

F: Enzima dependiente de fosfato-piridoxal (PALP)

OP2.24 Proteína no

caracterizada

M: Actividad hidrolasa diester-fosfórica

B: Proceso metabólico lipídico

D: Glicerofosfodiester fosfodiesterasa; Aldolasa/citrato-

liasa; Semejante a piruvato/fosfoenol piruvato quinasa

2 M= función molecular, B= proceso biológico, F= familia de proteínas, D= dominios

s/i: sin información



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47

4. DISCUSIÓN

La composición del exoproteoma de Fusarium solani y Fusarium oxysporum fue

determinada usando una plataforma de análisis proteómico, basada en espectrometría de

masas MALDI TOF/TOF, que requirió utilizar algunas variantes técnicas alternativas a

lo aplicado en estudios relacionados. Si bien su aplicación permitió detectar

exoproteínas, pero los valores de confiabilidad obtenidos fueron menores a 50 % en

muchos casos, a diferencia de otros trabajos (Phalip et al., 2005; Paper et al., 2007;

Yang et al., 2011; Scully et al., 2012). En este sentido, el algoritmo de análisis

(PARAGON) fue deliberadamente modificado para aceptar niveles bajos de

confiabilidad, opción que es modificable en el software. Un aumento en las

restricciones del algoritmo habría reducido el número de proteínas registradas, a favor

de un aumento de los valores de confiabilidad. A pesar de la modificación del

algoritmo, proteínas de palto no fueron detectadas en las muestras, favoreciendo la

premisa de que estas corresponden a proteínas de Fusarium y que las diferencias en los

exoproteomas dentro de cada aislamiento se relacionan al efecto de los componentes en

los medios de cultivo (PCRP o G) sobre los hongos.

Escaso desarrollo de los hongos fue observado en los cultivos MLS + G. En estos

cultivos la recuperación de exoproteínas fue escasa o nula, particularmente en F. solani.

Esta ausencia de crecimiento y recuperación de exoproteínas también fue observada en

cultivos de T. harzianum en medios suplementados con glucosa (Suárez et al., 2005).

Respecto a la fuente de energía, la presencia de proteínas de la Superfamilia

Facilitadora Principal en los cultivos de F. solani y F. oxysporum, cuya función es el

transporte de compuestos través de la membrana celular, incluyendo carbohidratos,



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48

podría ser vista como indicador de la captación y transporte de glucosa para ser

utilizada en el metabolismo celular. Sin embargo, la detección de la proteína OG1.2 que

presenta el dominio semejante a la familia N2227, con posible relación a la respuesta de

defensa frente al estrés en el cultivo de F. oxysporum, podría indicar que algún tipo de

estrés puede haberse generado bajo las condiciones de cultivo. Ambos factores:

exigencias nutricionales y estrés, podrían haber causado el escaso desarrollo de los

hongos, particularmente de F. solani.

El número de proteínas detectado en MLS + G (02 y 16, en F. solani y F. oxysporum,

respectivamente) fue mucho menor que el detectado en MLS + PCRP (22 y 40, en F.

solani y F. oxysporum, respectivamente). Este resultado concuerda con los de estudios

similares en los que el número de proteínas fúngicas detectado en medios

suplementados con una fuente energética simple (glucosa o sacarosa) ha sido siempre

menor al registrado en medios suplementados con componentes celulares que el hongo

podría utilizar en su alimentación natural, ya sean de vegetales (Phalip et al., 2005,

Paper et al., 2007) o de animales (Suárez et al., 2005), donde expresan diversas enzimas

hidrolíticas degradadoras de estos componentes. Sin embargo, el menor desarrollo de

los cultivos en MLS + G habría aumentado la diferencia en el número de proteínas

detectadas, lo cual es notoriamente cierto en los cultivos de F. solani, donde solo 2

proteínas fueron recuperadas del sobrenandante de los medios.

Las proteínas identificadas en MLS + G no incluyeron enzimas degradadoras de

polímeros. Estos resultados difieren con los de estudios referenciales en los que se han

detectado algunas enzimas degradadoras de polímeros, como celulasas, en medios

suplementados solo con glucosa (Phalip et al., 2005) o sacarosa (Paper et al., 2007),



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49

cuya expresión obedecería a un mecanismo centinela de ocurrencia natural en el que

estas enzimas son secretadas de modo constitutivo liberando oligosacáridos y

disacáridos a partir de la pared celular de un posible hospedero; estos oligosacáridos

inducirían la expresión del arsenal de enzimas degradadoras del hongo (Mendgen et al.,

1996; Phalip et al., 2005).

Por otro lado, Niture et al. (2006) mostraron que se producía represión de enzimas

degradadoras de polisacáridos, como poligalacturonasas y pectato liasas, en especies de

Fusarium, en medios con concentración de glucosa de 1 %, como se había observado en

trabajos anteriores (Zhang et al., 1999); sin embargo, dicho efecto de represión no

siempre ha sido observado (Phalip et al., 2005). Con la finalidad de evitar un posible

efecto represivo, la concentración de glucosa en los medios de cultivo fue solo del

0.5%. Pruebas adicionales deben ser realizadas para determinar si existe o no inhibición

de la expresión de enzimas degradadoras de carbohidratos constitutivas y también la

concentración óptima para su detección en las secreciones de estos hongos. Por otro

lado, es de esperar que la baja cantidad de proteínas que en general fue detectada en el

sobrenadante de los cultivos MLS + G asociada a un menor desarrollo de los cultivos

disminuyera la probabilidad de encontrar un tipo de proteína en particular, como las

referidas enzimas hidrolíticas.

Proteínas adicionales con diferentes funciones fueron detectadas en MLS + G en el

cultivo de F. oxysporum. Por ejemplo, la secuencia polipeptídica registrada como

OG2.2 fue identificada como “Citocromo P450, familia 51” (FOXG_11545). Genes que

codifican proteínas monooxigenasa Citocromo P450 han sido asociados a rutas

metabólicas de producción de micotoxinas, particularmente de butenolido (4-



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50

acetamido-4-hidroxi-2-ácido butenoico lactona), producida por F. graminearum y otras

especies del género productoras de tricocenos (Desjardins y Proctor, 2007). Existe por

tanto la posibilidad de que F. oxysporum FM4 sea un organismo con capacidad para

producir micotoxinas.

Otras proteínas de F. oxysporum detectadas en MLS + G fueron enzimas del

metabolismo lipídico (O-aciltransferasa y una proteína no caracterizada con actividad 3-

hidroxiacil-CoA deshidrogenasa), proteínas con funciones generales dentro del

metabolismo celular (proteínas con actividad proteína-quinasa, fosfotransferasa, oxido-

reductasa) y proteínas del núcleo celular (Tabla 4). Tales proteínas no estarían

relacionadas a la degradación de la pared celular de palto ni tendrían actividad

extracelular sino que podrían ser producto de la lisis celular ocurrida durante el

procesamiento de muestras, a pesar de los cuidados que se tomaron para evitarla. Es

común encontrar proteínas citoplasmáticas e incluso nucleares en este tipo de estudios

(Cobos et al., 2010; Paper et al., 2007; Phalip et al., 2005; Yang et al., 2011) y han sido

aceptadas como resultado inevitable del tratamiento de muestras. Por otro lado, lisis

celular y la correspondiente presencia de enzimas citoplasmáticas y nucleares en el

entorno circundante se producen normalmente durante el crecimiento vegetativo, por lo

que estas proteínas están consideradas dentro del concepto de exoproteoma

(Armengaud et al., 2012; Desvaux et al., 2009).

Respecto a enzimas degradadoras de carbohidratos, algunas proteínas con sitios

catalíticos y dominios relacionados con enzimas glicósido hidrolasa fueron detectadas

en los medios MLS + PCRP, aunque en un número reducido. Bajo una abordaje similar,

estas y otros tipos de glicósido hidrolasas ha sido detectados en cultivos de F.



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51

graminearum en medios suplementados con pared celular del lúpulo (Phalip et al.,

2005), de cebada y trigo (Yang et al., 2011) o en análisis de secretoma hechos in vivo

en trigo (Paper et al., 2007). Estas enzimas han sido identificadas en otras especies de

Fusarium, como F. solani, durante la degradación de madera de roble rojo (Scully et al.,

2012) y en Fusarium sp. cultivado en medios suplementados con polvillo de avena

(Tian et al., 2015); también han sido identificadas en especies fitopatógenas de otros

géneros, como Diplodia seriata (Cobos et al., 2010) y Verticillium dahliae (Chen et al.,

2016), indicando que la secreción de enzimas glicósido hidrolasas es un mecanismo de

acción común entre especies de hongos fitopatógenos, que tiene por finalidad degradar

la pared celular, buscando conseguir una infección exitosa.

Respecto al conjunto de enzimas degradadoras de pared celular se incluye, aunque en

menor proporción, enzimas hidrolíticas de proteínas e incluso lípidos también presentes

en las paredes celulares vegetales, las cuales aparentemente no fueron detectadas en el

presente estudio. Algunos aspectos técnicos aplicados en el procesamiento de muestras

(precipitación de proteínas a partir de muestras no concentradas, menor velocidad de

centrifugación, separación en gradiente de polaridad discontinuo y reducido en puntas

ZipTips) como alternativa los procedimientos requeridos pueden haber causado la no

detección de un mayor número de enzimas.

En relación a la proteína SP1.10, esta presentó mayor homología con la entrada

C7YJ62_NECH7, que identifica una proteína extracelular con dominio de “plegamiento

pectina liasa”, perteneciente a la familia glicosil hidrolasas 28. La función de las pectina

liasas y otras pectinasas es degradar pectina, un polisacárido estructural de la lamella

media y pared primaria de la pared celular de las plantas, principalmente de



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52

dicotiledóneas (Yadav et al., 2009). La presencia de la enzima pectina liasa en el

exoproteoma de Fusarium no ha sido reportada en análisis proteómico de las

secreciones de F. graminearum (Phalip et al., 2005; Paper et al., 2007; Yang et al.,

2011), pero el análisis in sillico del secretoma predicho de esta especie realizado por

Brown et al. (2012) señala la presencia del gen codificante. Por otro lado, Yadav et al.

(2014) caracterizaron una pectina liasa aislada de F. decemcellulare, especie reconocida

como patógeno del mango. Estas referencias permitirían relacionar la detección de

SP1.10 a un hecho no fortuito, sino a la estimulación de su expresión debido a la

presencia de la pared celular de palto, siendo una de las enzimas secretadas relacionadas

a su degradación. Otras enzimas funcionalmente interesantes para los objetivos

específicos de la presente tesis no fueron detectadas en F. solani.

En el sobrenadante de cultivos de F. oxysporum en MLS + PCRP fueron identificadas

dos posibles enzimas relacionadas a la degradación de carbohidratos de pared celular

vegetal. La proteína codificada como OP2.10 presenta mayor homología de secuencia a

la entrada F9GBQ6_FUSOF, correspondiente a una enzima β-glucosidasa. Las enzimas

β-glucosidasas forman parte del conjunto de enzimas que degradan polisacáridos; su

actividad hidrolítica se da a nivel de los oligómeros de celudextrina formados

previamente por acción de exo- y endo-celulasas a partir de la celulosa (Kubicek et al.,

2014). Al igual que en el presente estudio, enzimas β-glucosidasas han sido

identificadas en el sobrenadante de cultivos de F. graminearum conteniendo pared

celular u otros componentes de plantas (Phalip et al., 2005; Paper et al., 2007; Yang et

al., 2011). Su ausencia en medios MLS + G indicaría que la enzima fue secretada por

estimulación de componentes de la pared celular de palto. Dada la actividad de las β-



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E POSGRADO

53

glucosidasas se puede indicar que OP2.10 actuaría en la degradación de la celulosa de

la pared celular de palto. Enzimas de actividad previa en la degradación de celulosa no

fueron detectadas en el presente estudio, pero si en estudios de referencia mencionados.

La otra proteína de F. oxysporum con posible actividad catalítica relacionada a la

hidrólisis de carbohidratos es la proteína codificada como OP2.9, que aunque está

denominada como proteína no caracterizada, presenta dominios relacionados a la

actividad ramnosidasa. Los dominios α-ramnosidasa bacterial, dominio semejante a

dominio de unión a galactosa y dominio semejante a glicosidasa 6-bucles, presentes en

la entrada con mayor homología a OP2.9 (A0A0D2XLG8_FUSO4) se encuentran

también en las enzimas α-ramnosidasa de Colletotrichum gloesporioides

(L2G5M3_COLGN), Aspergillus parasiticus (A0A0F0IBV2_ASPPA) y Verticillium

dahliae (G2X7U5_VERDV), entre otras especies. Además su secuencia aminoacídica

tiene 62% de identidad a la de α-L-ramnosidasa de V. dahliae, como se muestra en

Resultados. Por tanto, es altamente probable que OP2.9 sea una enzima α-L-

ramnosidasa.

Las enzimas ramnosidasas catalizan la hidrólisis de enlaces α-L-ramnosilos en

compuestos que contienen L-ramnosa. El glucósido L-ramnosa forma parte de los

polisacáridos estructurales ramificados que conforman la pectina de la pared celular

vegetal (ramnogalaturonano I, principalmente), con mayor proporción en dicotiledóneas

(Ochoa-Villarreal et al., 2012); en su degradación intervienen ende- y exo-

poligalacturonasas, endo- y exo-ramnogalacturonasas, xilogalacturonasas, α-

ramnosidasas e hidrolasas de glucoronil y ramnogalaturonano insaturados (Van de

Brink y De Vries, 2011). La detección de la proteína OP2.9 en el medio extracelular



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54

concuerda con otros estudios en los que ramnosidasas han sido purificadas y/o su

actividad hidrolítica ha sido observada a partir de medios de cultivo (sobrenadante);

estos estudios incluyen a F. oxysporum (Monti et al., 2004), otras especies de Fusarium

y otros hongos (Elíades et al., 2011; Scaroni et al., 2002). Estas premisas permitirían

señalar que F. oxysporum habría secretado al medio la probable α-L-ramnosidasa

detectada (OP2.9) inducido por polímeros pécticos de la pared celular de la raíz de

palto, como parte de su arsenal de enzimas degradadoras.

Al igual que en el caso de la probable enzima β-glucosidasa (OP2.10), en el que no

fueron detectadas celulasas, en relación a la probable α-L-ramnosidasa (OP2.9)

tampoco fueron detectadas poligalacturonasas y ramnogalacturonasas, en los cultivos de

F. oxysporum (si se encontró una probable pectina liasa en cultivo de F. solani). Debido

a que estas enzimas actuarían en etapas previas a la acción de las β-glucosidasas

(Kubicek et al., 2014) y α-L-ramnosidasas (Van den Brink y De Vries, 2011),

respectivamente, y dado que si han sido detectadas en otros estudios similares ya

mencionados, la posible causa de su no detección sería altamente atribuible a las

variantes no óptimas utilizadas durante el procesamiento, bajo la premisa de que son

enzimas degradadoras de pared celular. Sin embargo, otra explicación puede ser

propuesta, particularmente en el caso de OP2.9. Se debe considerar que las plantas

presentan compuestos, como flavonoides, entre otros, que contienen ramnósidos y que

estos pueden inducir la actividad ramnosidasa. Por ejemplo, Elíades et al. (2011)

señalaron la inducción de actividad ramnosidasa de F. equisettum en medios de cultivo

suplementados con naringina, un flavonoide de plantas que contiene rhamnosa y

glucosa, en comparación al cultivo no suplementado. El palto presenta compuestos



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55

fenólicos formados por residuos de ramnósidos, como afzelina y quecetrina (De

Almeida et al., 1998). Es probable que estos compuestos estén presentes no solo en las

hojas del palto, sino también en las raíces. Por ejemplo, la composición de aceites de

Cinnamomum zeylanicum, otro miembro de la familia Laurácea, fue similar en hojas y

raíces (Paranagama et al., 2001). En este caso, la presencia de una α-L-ramnosidasa y

ausencia de otras enzimas de la hidrólisis de pectinas de la pared celular podría

explicarse por la presencia de compuestos fenólicos que contienen residuos de ramnosa.

No se puede descartar tampoco que el procesamiento de las raíces de palto (tratamiento

con alcoholes, para la obtención de pared celular, y el tratamiento térmico de la

esterilización de medios de cultivo) hayan modificado a los polisacáridos complejos y

liberado elementos más simples.

La presencia de probables enzimas con funciones pectina liasa, glucosidasa y

ramnosidasa muestran características alimenticias de los aislamientos de F. solani y F.

oxysporum, es decir la utilización de componentes celulares vegetales, en concordancia

con su amplio reconocimiento como organismos fitopatógenos (Agrios, 2005; Lesli y

Summerell, 2013). Aunque no fueron realizadas pruebas in vitro para verificar la

infección entre estos organismos, es factible señalar una posible relación

patógeno/hospedero con el palto, considerando el amplio rango de hospederos que tiene

el género Fusarium y la fuente de aislamientos de estos organismos (ver Material y

Métodos). Sin embargo, también existe la posibilidad de que estos hongos pudieran ser

organismos saprofíticos. En realidad, en el ambiente natural existen genotipos que

cumplen funciones diferentes, incluso, dentro de una misma especie de hongo (Gordon

y Martyn, 1997). Además, la proporción de hongos Fusarium patógenos es mucho



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E POSGRADO

56

menor a la de Fusarium que no lo son (Lesli y Summerell, 2013). Esta hipótesis podría

explicar en parte el bajo número de enzimas hidrolíticas (y proteínas en general)

detectado en el presente trabajo, comparado con estudios referenciales, en los que los

hongos y plantas utilizados presentaban una comprobada relación patógeno/hospedero;

el mismo principio ha sido aplicado también en análisis de exoproteomas en hongos

controladores, con resultados similares (Grinyer et al., 2005; Monteiro et al., 2010;

Murad et al., 2008; Soller et al., 2016; Tseng et al., 2008; Yang et al., 2009). Datos

adicionales permitirían corroborar una u otra hipótesis.

Tres proteínas detectadas en el sobrenadante de cultivos de F. oxysporum presentaron

péptido señal con escaza información funcional adicional. Debido a la posibilidad de

que fueran exo-proteínas y puedan estar relacionadas a la degradación de PCRP, se

realizaron comparaciones de secuencias peptídicas con otras proteínas usando la

herramienta BLAST, tanto en UniProt como en NCBI. Ninguna información funcional

se obtuvo de la proteína OP1.4 ya que las secuencia peptídicas semejantes en mayor o

menor grado correspondían a proteínas sin denominación específica (proteínas no

caracterizadas), sin anotaciones respecto a su función molecular o dominios.

La proteína no caracterizada OP1.14 es similar a una proteína no caracterizada de F.

oxysporum f. sp. cubense (N1RTF1_FUSC4, QC= 75%, EV= 0.0, I= 91%) que presenta

un dominio semejante a proteína quinasa y dominio aminoglicósido fosfotransferasa

ubicados entre los aminoácidos 10-251 y 167-230, respectivamente, pero sin péptido

señal. Estos dominios se ubican en una región en la que la identidad entre ambas

proteínas es casi nula, por lo que no es posible indicar una posible función para OP1.14

basándose en los dominios de esta otra proteína de F. oxysporum. OP1.14 presenta



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57

mayor homología de secuencia con las enzimas Alcohol-isoamílico oxidasa de

Colletotrichum gloeosporioides (L2G0H1_COLGN, QC= 99%, EV= 5e-162, I= 46%,)

y la enzima denominada “Alcohol-isoamílico” (no se indica el sustantivo “oxidasa”,

pero fue asumido) de F. langsethiae, (A0A0N1J283_9HYPO, QC= 99%, EV= 0.0, I=

69%); al igual que OP1.14 ambas proteínas presentan péptido señal. Por tanto, OP1.14

podría estar relacionada funcionalmente a las alcohol-isoamílico oxidasas.

En cuanto a las alcohol-isoamílico oxidasas, estas enzimas actúan en la ruta metabólica

de la formación de zearalenona, una micotoxina poliquétida producida por algunas

especie de Fusarium, como F. graminearum (Kim et al., 2005) y en la generación de

isovaleraldehido por el hongo Aspergillus oryzae a partir de alcohol isoamílico en el

alcohol de arroz (“sake”) no pasteurizado (Yamashita et al., 1999); asociada a esta

última característica, actividad enzimática de alcohol isoamílico oxidasa ha sido

detectada en el sobrenadante de cultivos y extractos de arroz fermentado con A. oryzae.

Existe la posibilidad, por tanto, de que OP1.14 sea una alcohol-isoamílico oxidasa

secretada al medio por inducción de componentes de la pared celular de raíz de palto,

como el alcohol cinámico o esteres de alcoholes (2-feniletil acetato, 3-fenilpropil

acetato, por ejemplo) u otros componentes de la raíz presentes en miembros de la

familia Laurácea (Paranagama et al., 2001), que pudieran haber formado compuestos

similares a 3-metil-1-butanol (alcohol isoamílico) debido a las condiciones de

esterilización u acción de enzimas no detectadas.

En relación a la proteína OP1.15, esta presenta péptido señal y un dominio

lectina/glucanasa semejante a concavalina. Este dominio se presenta en enzimas

degradadoras de carbohidratos (familias GH 7, 16, 32, etc.), en enzimas involucradas en



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58

la degradación de otros polímeros (peptidasas, liasas) y en proteínas sin función de

degradación (lectinas, receptores, toxinas, etc.). OP1.15 presenta homología con la

enzima WSC2 Glucoamilasa III (α-1,4-glucano-glucosidasa) de F. fujikuroi

(A0A0I9YT63_GIBFU, QC= 100%, EV= 0.0, I= 93%), denominación que podría

sugerir participación en la degradación de polímeros de glucosa de la PCRP. Sin

embargo, OP1.15, al igual que WSC2 glucoamilasa III, no presenta los sitios activos de

enzimas con actividad glucano 1,4-α-glucosidasa, presentes, por ejemplo, en la

glucoamilasa de F. oxysporum f. sp. cubense (N1S1Y3_FUSC4), enzima con la que

además presenta escasa homología (QC= 15%, Ev= 2.8, I=30%). PO1.15 podría ser una

proteína que actúa como sensor acoplada a la membrana celular del hongo (de acuerdo

a las anotaciones de UniProt presenta dominio transmembrana y es un componente

integral de membrana) y parte inicial en la transducción de señales activadas por estrés

y la ruta de integridad de la membrana celular, función señalada para proteínas de genes

WSC2 (Mizutani et al., 2004; Verna et al., 1997).

También fue detectada una enzima peptidasa (OP2.5) en cultivos de F. oxysporum en

MLS + PCRP, denominada Oligopeptidasa Thimet. Esta enzima corta

preferencialmente enlaces con residuos hidrofóbicos en P1, P2 y P3’ y un residuo

pequeño en P1’ en sustratos de 5 a 15 residuos de aminoácidos. Aunque se encuentra

presente en diferentes especies de hongos, es escasa la información sobre los procesos

biológicos en los que participa. A partir de estudios realizados en Aspergillus

fumigatus (Ibrahim-Granet y D’Enfert, 1997), a esta enzima se le asocia a la

degradación intracelular de péptidos citoplasmáticos pequeños. Es poco probable que la



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oligopeptidasa OP2.5 participe de la degradación extracelular de proteínas que forman

parte de la pared celular vegetal.

La proteína PO1.12 presenta los dominios hidrolasa dependiente de metal (dominio

compuesto) y dominio relacionado a amido hidrolasa, pertenece a la Familia Amido

hidrolasa. Esta familia incluye enzimas como adenina deaminasas, dihidro-orotase, N-

acetil glucosamina-6-fosfato desacetilasa, el sitio catalítico de la subunidad alfa de la

ureasa. Su secuencia es similar a la enzima 5-metil tioadenosina/S-

adenosilhomocisteina desaminasa de F. oxysporum f. sp. cubense (QC= 100%, EV= 2e-

113, I= 93%), por lo que es posible relacionar a OP1.12 con la función desaminasa. En

bacterias la enzima está involucrada en el reciclaje de 5’-deoxyadenosine, donde el

motivo 5’-deoxyribosa es posteriormente metabolizado a deoxyhexosas usadas para la

biosíntesis de aminoácidos aromáticos en metanógenos (Miller et al., 2014).

La proteína OP1.13 es similar en secuencia (y dominios) a la enzima arilesterasa de F.

oxysporum f. sp. cubense (N4UCV7_FUSC1; QC= 86%, EV= 0.0, I= 98%). Las

arilesterasas están involucradas potencialmente en el catabolismo de compuestos

tóxicos (detoxificación) al romper ésteres organofosforados (Primo-Parmo et al., 1996)

y son más comunes en hongos fitopatógenos que en especies no fitopatógenas. Soanes

et al. (2008) encontraron que dominios arilesterasas (entre otras proteínas) eran al

menos dos veces más comunes en el proteoma de especies de ascomicetos filamentosos

fitopatógenos, como por ejemplo Botrytis cinerea, Giberella zeae, Sclerotinia

sclerotiorum, Stagonospora nodorum, que en especies de ascomicetos filamentosos no

patógenas. La presencia de OP1.13 per se en el aislamiento de F. oxysporum estudiado



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no define un comportamiento fitopatógeno, aunque señala una posibilidad; como se ha

indicado en anteriormente estudios adicionales son requeridos.



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5. CONCLUSIONES

El exoproteoma de F. solani y F. oxysporum presenta mayor número de proteínas y, en

ese sentido, es más complejo, cuando los hongos se desarrollan en medios de cultivo

suplementados con pared celular de raíz de palto.

El exoproteoma de F. solani y F. oxysporum cultivados en medios suplementados con

pared celular de raíz de palto contiene enzimas del catabolismo de glúcidos, como

poligalacturonasa (SP1.10), β-glucosidasa (OP2.10) y α-ramnosidasa (OP2.9).

El exoproteoma de los aislamientos de F. solani y F. oxysporum cultivados en medios

suplementados con pared celular de raíz de palto incluye también proteínas de

funciones metabólicas diversas, como enzimas de actividad metil-transferasa, hidrolasas

diester fosfóricas, óxido reductasas, ATPasas, sintasas, otras hidrolasas, entre otras.

Los exoproteomas de los aislamientos cultivados en medios suplementados con glucosa

no presentan enzimas degradadoras de carbohidratos, sino proteínas y enzimas

relacionadas a procesos del metabolismo intracelular, como proteínas de transporte

transmembrana, proteína quinasas, fosfo-transferasas, deshidrogenasas, acil-

transferasas, ATPasas, entre otras.



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6. RECOMENDACIONES

La aplicación de espectrometría de masas MALDI TOF/TOF para detectar e identificar

secuencias de aminoácidos exige un procesamiento cuidadoso de las muestras de

proteínas previo a la lectura de masas, siendo fundamental la disminución de la

complejidad de la muestra. En este sentido, se recomienda que antes de la lectura en el

espectrómetro de masas las muestras peptídicas sean adecuadamente fraccionadas, ya

sea por cromatografía liquida de alta performance o por electroforesis en gel de

poliacrilamida, siendo lo más recomendable utilizarlas en modo bidimensional.

Dado que las exoproteínas se expresan en cantidades reducidas, es recomendable que

las muestras de donde se estas serán obtenidas (sobrenadante de cultivo, en este caso)

sean previamente concentrados por métodos físicos. Esto permitirá aumentar el número

y la cantidad de proteínas en las muestras y procesar muestras de mucho menor

volumen, lo que aumenta la eficiencia del proceso.

Por último, si bien es cierto los datos moleculares pueden darnos luces sobre el

comportamiento de un hongo, es recomendable realizar también pruebas sencillas,

como el enfrentamiento in vitro de un fitopatógeno a un potencial huésped, que sirvan

como datos de apoyo para analizar los resultados de las pruebas moleculares.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

63

7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Acosta-Muñiz, C.H., Escobar-Tovar, L., Valdes-Rodríguez, S., Fernández-Pavia,

S., Arias-Saucedo, L.J., Espindola, B.M.C. y Gómez, L.M.A. (2012).

Identification of avocado (Persea americana) root proteins induced by infection

with the oomycete Phytophthora cinnamomi using a proteomic approach.

Physiologia Plantarum, 144, 59-72.

Agrios, G.N. (2005). Plant Pathology. (5 ed). Burlington, Estados Unidos: Elsevier

Academic Press.

Aitken, A. (2005). Sample Cleanup by Solid-Phase Extraction/Pipet-Tip

Chromatography. En: The Proteomics Protocols Handbook (pp. 307-310), J. M.

Walker (Ed). New Yersey-USA: Human Press Inc. Recuperado de:

https://books.google.com.pe/books?id=1bS58zzvx0oC&pg=PA307&dq=The+Pr

oteomics+Protocols+Handbook+J.+M.+Walker+Aitken&hl=es-

419&sa=X&ved=0ahUKEwjxxbSFqNXQAhUIPiYKHSOjDbEQ6AEIIzAA#v=

onepage&q=The%20Proteomics%20Protocols%20Handbook%20J.%20M.%20

Walker%20Aitken&f=false. Fecha de último acceso: 01-12-2016.

Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K. y Walter, P. (2002).

Molecular Biology (4 ed.). Recuperado de

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26928/. Fecha de último acceso: 08-

09-2016.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

64

Armengaud, J., Christie-Oleza, J.A., Clair, G., Malard, V. y Duport, C. (2012).

Exoproteomics: exploring the world around biological systems. Expert Reviews

Proteomics, 9 (5), 561–575.

Bastawde, K.B. (1992). Xylan structure, microbial xylanases, and their mode of

action. World J Microbiol Biotechnol, 8, 353-368.

Brown, N.A., Antoniw, J. y Hammond-Kosack, K.E. (2012). The Predicted

Secretome of the Plant Pathogenic Fungus Fusarium graminearum: A Refined

Comparative Analysis. PLoS ONE, 7 (4), e33731.

DOI:10.1371/journal.pone.0033731.

Cobos, R., Barreiro, C., Mateos, R.M. y Coque, J-J.R. (2010). Cytoplasmic- and

extracellular-proteome analysis of Diplodia seriata: a phytopathogenic fungus

involved in grapevine decline. Proteome Science, 8, 46.

Covert, S.F. (1998). Supernumerary chromosomes in filamentous fungi. Current

Genetics, 33, 311–319.

Covert, S.F., Enkerli, J., Miao, V.P.W. y VanEtten, H.D. (1996). A gene for

maackiain detoxification from a dispensable chromosome of Nectria

haematococca. Mol Gen Genet, 251, 397–406. (ABSTRACT, recuperado de:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8709942. Fecha de último acceso: 11-09-

2016).

Cosgrove, D.J. (2005). Growth of the plant cell wall. Nature Reviews, 6 (11): 850-861.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

65

Chandra N., S., Wulff, E.G., Udayashankar, A.C., Nandini, B.P., Niranjana, S.R.,

Mortensen, C.N. y Prakash, H.S. (2011). Prospects of molecular markers in

Fusarium species diversity. Applied Microbiology and Biotechnology, 90: 1625-

1639.

Chen, J.-Y., Xiao, H.-L., Gui, Y.-J., Zhang, D.-D., Li, L., Bao, Y.-M. y Dai, X.-F.

(2016). Characterization of the Verticillium dahliae Exoproteome Involves in

Pathogenicity from Cotto-containing Medium. Frontiers in Microbiology, 7:

1790. DOI:10.3389/fmicb.2016.01709.

Dangott, L. (2009). DIGE Training Manual – Chapter 1. Disponible en:

http://ecoliwiki.net/colipedia/images/0/0f/Chapter_1.pdf

De Almeida, A.P., Miranda, M., Simoni, I.C., Wigg, M. y Lagrota, M. (1998).

Flavonol Monoglycosides Isolated from the Antiviral Fractions of Persea

Americana (Lauraceae) Leaf Infusion. Phytotherapy Research, 12, 562–567.

De Hoffmann, E. y Stroobant, V. (2004). Mass Spectrometry.Principles and

Applications (3 ed). Chichester, Inglaterra: John Wiley & Sons Ltd.

Desjardins, A.E. y Proctor, R.H. (2007). Molecular biology of Fusarium mycotoxins.

International Journal of Food Microbiology, 119 (1-2), 47-50.

Desvaux, M., Hébraud, M., Talon, R. y Henderson, I.R. (2009). Secretion and

subcellular localizations of bacterial proteins: a semantic awareness issue.

Trends in Microbiology, 17 (4), 139-145.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

66

Di Pietro, A., Huertas-González, M.D., Gutierrez-Corona, J.F., Martínez-Cadena,

G., Méglecz, E. y Roncero, M.I.G. (2001). Molecular Characterization of a

Subtilase from the Vascular Wilt Fungus Fusarium oxysporum. Molecular

Plant-Microbe Interactions, 14 (5), 653-662.

Di Pietro, A., Madrid, M.P., Caracuel, Z., Delgado-Jarana, J. y Roncero, M.I.G.

(2003). Fusarium oxysporum: Exploring the Molecular Arsenal of a Vascular

Wilt Fungus. Molecular Plant Pathology, 4 (5), 315-325.

Dirección General de Seguimiento y Evaluación de Políticas (2016). Boletín

Estadístico Agrario – Diciembre 2015. Recuperado de:

http://minagri.gob.pe/portal/download/pdf/herramientas/boletines/boletineselectr

onicos/estadisticaagrariamensual/2015/bemsa_diciembre15.pdf. Fecha de último

acceso: 20-10-2016.

El-Aneed, A., Cohen, A. y Banoub, J. (2009). Mass Spectrometry, Review of the

Basics: Electrospray, MALDI and Commonly Used Mass Analyzers. Applied

Spectroscopy Reviews, 44 (3), 210-230.

Elíades, L.A., Rojas, N.L., Cabello, M.N., Voget, C.E. y Saparrat, M.C.N.

(2011). α -L-Rhamnosidase and β-D-glucosidase activities in fungal strains

isolated from alkaline soils and their potential in naringin hydrolysis. Journal of

Basic Microbiology, 51, 659-665.

Figeys, D., Gygi, S.P., Zhang, Y., Watts, J., Gu, M. y Aebersold R. (1998).

Electrophoresis combined with novel mass spectrometry techniques: powerful



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

67

tools for the analysis of proteins and proteomes. Electrophoresis, 19 (10), 1811-

1818.

Fournier, M.L., Gilmore, J.M., Martin-Brown, S.A. y Washburn, M.P. (2007).

Multidimensional separations- based shotgun proteomics. Chemical Reviews,

107 (8), 3654-3686.

Fränzel, B. y Wolters, D.A. (2011). Advanced MudPIT as a next step toward high

coverage. Proteomics, 11, 3651-3656.

Geiser, D.M., Aoki, T., Bacon, C.W., Baker, S.E., Bhattacharyya, M.K., Brandt,

M.E.,… Zhang, N. (2013). One fungus, One Name: Defining the genus

Fusarium in a scientifically robust way that preserves longstanding use.

Phytopahology, 103 (5), 400-408.

Glass, N. L., Schmoll, M., Cate, J.H.D., Coradetti, S. (2013). Plant Cell Wall

Deconstruction by Ascomycete Fungi. Annual Review of Microbiology, 67, 477-

498.

Gordon, T.R. y Martyn, R.D. (1997). The evolutionary biology of Fusarium

oxysporum. Annual Review of Phytopathology, 35, 111-112.

Grinyer, J., Hunt, S., McKay, M., Herbert, B.R. y Nevalainen, H. (2005).

Proteomic response of the biological control fungus Trichoderma atroviride to

growth on the cell walls of Rhizoctonia solani. Current Genetics, 47, 381-388.

Gundry, R.L., White, M.Y., Murray, C.I., Kane, L.A., Fu, Q., Stanley, B.A. y Van

Eyk, J.E. (2009). Preparation of Proteins and Peptides for Mass Spectrometry



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

68

Analysis in a Bottom-Up Proteomics Workflow. Current Protocols in

Molecular Biology, 88 (10.25), 1-23.

Guo, W., González-Candelas, L. y Kolattukudy, P.E. (1996). Identification of a

novel pelD gene expressed uniquely in planta by Fusarium solani f.sp. pisi

(Nectria haematococca, mating type VI) and characterization of its product as

an endo-pectate lyase. Archives of Biochemestry and Biophysics, 332, 305-312.

Han, Y., Liu, X.G., Benny, U., Kistler, H.C. y VanEtten, H.D. (2001). Genes

determining pathogenicity to pea are clustered on a supernumerary chromosome

in the fungal plant pathogen Nectria haematococca. The Plant Journal, 25, 305–

314.

Harholt, J., Suttangkakul, A. y Scheller, H.V. (2010). Biosynthesis of Pectin. Plant

Physiology, 153, 384-395.

Harris, L.J., Ouellet, T. y Subramaniam, R. (2013). Applying Proteomics to

investigate the interactions between Pathogenic Fusarium Species and their

Hosts. En: W. Brown y R.H. Proctor (Ed.), Fusarium: Genomics, Molecular and

Cellular Biology (pp. 81-92). Reino Unido: Caister Academic Press.

Hathout, Y. (2007). Approaches to the study of the cell secretome. Expert Review of

Proteomics, 4 (2), 239-248.

Huertas-González, M.D., Ruiz-Roldán, M.C., García M., F.I., Roncero, M.I. y Di

Pietro, A. (1999). Cloning and characterization of pl1 encoding an in planta-

secreted pectate lyase of Fusarium oxysporum. Curr Genet, 35 (1): 36-40.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

69

(ABSTRACT, disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10022947.

Fecha de último acceso: 16-11-2016).

Ibrahim-Granet, O. y D’Enfert, C. (1997). The Aspergillus fumigatus mepB gene

encodes an 82 kDa intracellular metalloproteinase structurally related to

mammalian thimet oligopeptidases. Microbiology, 143, 2247-2253.

Jouani, L. y Lapierre, C. (2012). Lignins: Biosynthesis, biodegradation and

bioengineering. Recuperado de

https://books.google.com.pe/books?id=Wa7i9ZzjUVMC&printsec=frontcover&

source=gbs_ge_summary_r&cad=0#v=onepage&q&f=false. Fecha de último

acceso: 16-10-2016.

Karas, M. y Hillenkamp, F. (1988). Laser desorption ionization of proteins with

molecular masses exceeding 10,000 daltons. Analytical Chemistry, 60 (20),

2299-2301.

Kikot, G.E., Hours, R.A. y Alconada, T. M. (2009). Contribution of cell wall

degrading enzymes to pathogenesis of Fusarium graminearum: a review.

Journal of Basic Microbiology, 49 (3), 231-241.

Kim, Y.T., Lee, Y.R., Jin, J., Han, K.H., Kim, H., Kim, J.C.,… Lee, Y.W. (2005).

Two different polyketide synthase genes are required for synthesis of

zearalenone in Gibberella zeae. Molecular Microbiology, 58, 1102-1113.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

70

Kistler, H.C., Rep, M. y Ma, L-J. (2013). Structural dynamics of Fusarium genomes.

En: W. Brown y R.H. Proctor (Ed.), Fusarium: Genomics, Molecular and

Cellular Biology (pp. 31-42). Reino Unido: Caister Academic Press.

Kubicek, C.P., Starr, T.L. y Glass, N.L. (2014). Plant cell wall-degrading enzymes

and their secretion in plant-pathogenic fungi. Annual Review of Phytopathology,

52, 427-451.

Lesli, J.F., Zeller, K. y Summerell, B. (2001). Icebergs and species in populations of

Fusarium. Physiological and Molecular Plant Pathology, 59, 107-117.

Lesli, J.F. y Summerell, B.A. (2013). An overview of Fusarium. En: W. Brown y R.H.

Proctor (Ed.), Fusarium: Genomics, Molecular and Cellular Biology (pp. 1-9).

Reino Unido: Caister Academic Press.

Ma, L.J., Geiser, D.M., Proctor, R.H., Rooney, A.P., O'Donnell, K., Trail,

F.,… Kazan, K. (2013). Fusarium pathogenomics. Annual Review of

Microbiology, 67, 399-416.

Ma, L.J., van der Does, H.C, Borkovich, K.A., Coleman, J.J., Daboussi, M.J., Di

Pietro, A.,… Rep, M. (2010). Comparative genomics reveals mobile

pathogenicity chromosomes in Fusarium. Nature, 464, 367-373.

Mendgen, K., Hahn, M. y Deising, H. (1996). Morphogenesis and mechanisms of

penetration by plant pathogenic fungi. Annual Review of Phytopathology, 34,

367-386.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

71

Miao, V.P., Covert, S.F. y VanEtten, H.D. (1991). A fungal gene for antibiotic-

resistance on a dispensable (B) chromosome. Science, 254, 1773–1776.

Migheli, Q., Berio, T., Gullino, M.L. y Garibaldi, A. (1995). Electrophoretic

karyotype variation among pathotypes of Fusarium oxysporum f.sp. dianthi.

Plant Pathology, 44, 308–315.

Miller, D., O’Brien, K., Xu, H. y White, R.H. (2014). Identification of a 5’-

Deoxyadenosine Deaminase in Methanocaldococcus jannaschii and Its Possible

Role in Recycling the Radical S-Adenosylmethionine Enzyme Reaction Product

5’-Deoxyadenosine. Journal of Bacteriology, 196 (5), 1064–1072.

Ministerio de Agricultura y Riego (2015). Comportamiento del Comercio Mundial de

la Palta y Perspectivas del Mercado Chino. Informe Técnico N° 2. Recuperado

de:

http://agroaldia.minag.gob.pe/biblioteca/download/pdf/agroeconomia/agroecono

mia_palta2015.pdf. Fecha de último acceso: 20-10-16.

Mizutani, O., Nojima, A., Yamamoto, M., Furukawa, K., Fujiota, T, Yamagata, Y.

Abe, K., Nakajima T. (2004). Disordered Cell Integrity Signaling Caused by

Disruption of the kexB Gene in Aspergillus oryzae. Eukaryotic Cell, 3 (4), 1036-

1048.

Mohnen, D. (2008). Pectin structure and biosynthesis. Current Opinion in Plant

Biology, 11: 266-277.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

72

Monteiro, V.N., Silva, R.N., Steindorff, A.S., Costa, F.T., Noronha, E.F., Ricart,

C.A.O., De Sousa M.V., Vainstein, M.H. y Ulhoa, C.J. (2010). New Insights

in Trichoderma harzianum Antagonism of Fungal Plant Pathogens by Secreted

Protein Analysis. Current Microbiology, 61, 298-305.

Monti, D., Pišvejcová, A., Křen, V., Lama, M. y Riva, S. (2004). Generation of an α-

L-rhamnosidase library and its application for the selective derhamnosylation of

natural products. Biotechnology and.Bioengineering, 87 (6), 763-771.

Murad, A.M., Noronha, E.F., Miller, R.N.G., Costa, F.T., Pereira, C.D., Mehta, A.,

Caldas, R.A. y Franco, O.L. (2008). Proteomic analysis of Metarhizium

anisopliae secretion in the presence of the insect pest Callosobruchus

maculates. Microbiology, 154, 3766-3774.

Niture, S.K., Kumar, A.R. y Pant, A. (2006). Role of glucose in production and

repression of polygalacturonase and pectate lyase from phytopathogenic fungus

Fusarium moniliforme NCIM 1276. World Journal of Microbiology &

Biotechnology, 22, 893-899.

Obro, J., Harholt, J., Sheller, H.V. y Orfila, C. (2004). Rhamnogalaturonan-I in

Solanum tuberosum tubes contains complex arabinogalactan structures.

Phytochemistry, 65, 1429-1438.

Ochoa-Villarreal, M., Aispuro-Hernández, E., Vargas-Arispuro, E., Martínez-

Téllez, M.A. (2012). Plant Cell Wall Polymers: Function, Structure and

Biological Activity of Their Derivatives. En: A.S. Gomes (Ed.), Polymerization

(pp. 63-86). InTech. Recuperado de



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

73

http://www.intechopen.com/books/polymerization/plant-cell-wall-polymers-

function-structure-and-biological-activity-of-their-derivatives. Fecha de último

acceso: 16-11-2016.

Oerke, E.-C. (2006). Crop losses to pests. Journal of Agricultural Science, 144, 31-43.

Olivieri, F.P., Maldonado, S., Tonón, C.V. y Casalongué, C.A (2004). Hydrolytic

activities of Fusarium solani and Fusarium solani f.sp. eumartii associated with

the infection process of potato tubers. Journal of Phytopathology, 152, 337-344.

Paper, J.M., Scott-Craig, J.S., Adhikari, N.D., Cuomo, C.A. y Walton, J.D. (2007).

Comparative proteomics of extracellular proteins in vitro and in planta from the

pathogenic fungus Fusarium graminearum. Proteomics, 7, 3171-3183.

Paranagama, P.A., Wimalasena, S., Jayatilake, G.S., Jayawardena, A.L.,

Senanayake, U.M. y Mubarak, A.M. (2001). A comparison of essential oil

constituents of bark, leaf, root and fruit of cinnamon (Cinnamomum zeylanicum

Blum) grown in Sri Lanka. Journal of the National Science Foundation of Sri

Lanka, 29 (3-4), 147-153.

Phalip, V., Delalande, F., Carapito, C., Goubet, F., Hatsch, D., Leize-Wagner, E.,

van Dorsselaer, P.D.A. y Jeltsch, J.M. (2005). Diversity of the exoproteome

of Fusarium graminearum grown on plant cell wall. Curr Genet, 48 (6), 366-

379.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

74

Primo-Parmo, S.L., Sorenson, R.C., Teiber, J. y La Du, B.N. (1996). The human

serum paraoxonase/arylesterase gene (PON1) is one member of a multigene

family. Genomics, 33, 498-507.

Rabilloud, T., Chevallet, M., Luche, S. y Lelong, C. (2010). Two-dimensional gel

electrophoresis in proteomics: Past, present and future. Journal of Proteomics,

73 (11), 2364-2377.

Rocha, A.L., Di Pietro, A., Ruiz-Roldán, C. y Roncero, M.I. (2008). Ctf1, a

transcriptional activator of cutinase and lipase genes in Fusarium oxysporum is

dispensable for virulence. Molecular Plant Pathology, 9 (3), 293-304.

Rodríguez-Carres, A., White, G., Tsuchiya, D., Taga, M. y VanEtten, H.D. (2008).

The supernumerary chromosome of Nectria haematococca that carries pea-

pathogenicity-related genes also carries a trait for pea rhizosphere

competitiveness. Applied and Environmental Microbiology, 74, 3849-3856.

Ruiz-Roldán, M.C., Di Pietro, A., Huertas-González, M.D. y Roncero, M.I. (1999).

Two xylanase genes of the vascular wilt pathogen Fusarium oxysporum are

differentially expressed during infection of tomato plants. Mol Gen Genet, 261

(3), 530-536. (ABSTRACT; disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10323234. Fecha de último acceso: 16-

10-2016).

Sarkar, P., Bosneaga, E.y Auer, M. (2009). Plant cell wall throughout evolution:

towards a molecular understanding of their design principles. Journal of

Experimental Botany, 60 (13), 3615-3635.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

75

Scaroni, E., Cuevas, C., Carrillo, L. y Ellenrieder, G. (2002). Hydrolytic properties

of crude α-L-rhamnosidases produced by several wild strains of mesophilic

fungi. Letters in Applied Microbiology, 34, 461-465.

Scully, E.D., Hoover, K., Carlson, J., Tien, M. y Geib, S.M. (2012). Proteomic

Analysis of Fusarium solani Isolated from the Asian Longhorned

Beetle, Anoplophora glabripennis. PLoS ONE, 7 (4), e32990.

DOI:10.1371/journal.pone.0032990.

Smith, S. N. (2007). An Overview of Ecological and Habitat Aspects in the Genus

Fusarium with Special Emphasis on the Soil-Borne Pathogenic Forms.

Pathology Bulletin, 16 (3): 87-120.

Soanes, D.M., Alam, I., Cornell, M., Wong, H.M., Hedeler, C., Paton, N.W.,…

Talbot, N.J. (2008). Comparative Genome Analysis of Filamentous Fungi

Reveals Gene Family Expansions Associated with Fungal Pathogenesis. PLoS

ONE, 3 (6), e2300. DOI:10.1371/journal.pone.0002300.

Soller R., M.E., Steindorff, A.S., Bloch, C.Jr. y Ulhoa, C.J. (2016). Secretome

analysis of the mycoparasitic fungus Trichoderma harzianum ALL 42 cultivated

in different media supplemented with Fusarium solani cell wall or glucose.

Proteomics, 16 (3), 477-490.

Sposato, P., Anh, J.H. y Walton, J.D. (1995). Characterization and disruption of a

gene in the maize pathogen Cochliobolus carborum encoding a cellulose lacking

a cellulose binding domain and hinge region. Molecular Plant-Microbe

Interactions, 8 (4), 602-609.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

76

Suárez, M.B., Sanz, L., Chamorro, M.I., Rey, M., González, F.J., Llobell, A. y

Monte, E. (2005). Proteomic analysis of secreted proteins from Trichoderma

harzianum Identification of a fungal cell wall-induced aspartic protease. Fungal

Genetics and Biology, 42, 924-934.

Taga, M., Murata, M. y VanEtten, H.D. (1999). Visualization of a conditionally

dispensable chromosome in the filamentous ascomycete Nectria haematococca

by fluorescence in situ hybridization. Fungal Genetics and Biology, 26, 169-

177.

Tanaka, K., Waki, H., Ido, Y., Akita, S., Yoshida, Y. y Yoshida, T. (1988). Protein

and polymer analysis up to m/z 100,000 by laser ionization time-of-flight mass

spectrometry. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2, 151-153.

Tian, F., Xie, Z.-I., Zhao, L.-Z.., Guo, J., Han, X.-B., Xie, L.-F., Wang, Y. y Chang,

X-Y. (2015). Comparative secretome analysis of Fusarium sp. Q7-31T during

liquid fermentation using oat straw as a carbon source. Annals of Microbiology,

65: 2131. DOI:10.1007/s13213-015-1051-z.

Tjalsma, H., Bolhuis, A., Jongbloed, J.D., Bron, S., van Dijl, J.M. (2000). Signal

peptide-dependent protein transport in Bacillus subtilis: A genome-based survey

of the secretome. Microbiology and Molecular Biology Reviews, 64 (3), 515-

547.

Trail, F. (2013). Sex and Fruiting in Fusarium. En: W. Brown y R.H. Proctor (Ed.),

Fusarium: Genomics, Molecular and Cellular Biology (pp. 10-29). Reino

Unido: Caister Academic Press.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

77

Tseng, S.C., Liu, S.Y., Yang, H.H., Lo, C.T. y Peng, K.C. (2008). Proteomic Study

of Biocrontrol Mechanisms of Trichoderma harzianum ETS 323 in Response to

Rhizoctonia solani. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 56, 6914-

6922.

Urban, M. y Hammond-Kosack, K.E. (2013). Molecular Genetics and Genomic

Approaches to Explore Fusarium Infection of Wheat Floral Tissue. En: W.

Brown y R.H. Proctor (Ed.), Fusarium: Genomics, Molecular and Cellular

Biology (pp. 43-79). Reino Unido: Caister Academic Press.

Van den Brink, J. y De Vries, R.P. (2011). Fungal enzyme sets for plant

polysaccharide degradation. Applied Microbiology and Biotechnology, 91 (6),

1477-1492.

Van der Does, H.C., Lievens, B., Claes, L., Houterman, P.M., Cornelissen, B.J.C. y

Rep, M. (2008). The presence of a virulence locus discriminate Fusarium

oxysporum isolates causing tomato wilt from other isolates. Environmental

Microbiology, 10 (6), 1475-1485.

Vanholme, R., Demedts, B., Morreel, K., Ralph, J. y Boerjan, W. (2010). Lignin

Biosynthesis and Structure. Plant Physiology, 153, 895-905.

Verna, J., Lodder, A., Lee, K., Vagts, A. y Ballester, R. (1997). A family of genes

required for maintenance of cell wall integrity and for the stress response

in Saccharomyces cerevisiae. Proceedings of the National Academy of Sciences

USA, 94 (25), 13804-13809.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

78

Walton, J.D. (1994). Deconstructing the cell wall. Plant Physiology, 104, 1113-1118.

Watson, J.T. y Sparkman, O.D. (2007). Introduction to Mass Spectrometry:

Instrumentation, Applications, and Strategies for Data Interpretation (4 ed).

England: Jhon Wiley & Sons, LTd.

Yadav, S., Dubey, A.K., Anand, G., Kumar, R., y Yadav, D. (2014). Purification and

biochemical characterization of an alkaline pectin lyase from Fusarium

decemcellulare MTCC 2079 suitable for Crotolaria juncea fiber retting. Journal

of Basic Microbiology, 54, S161-S169.

Yadav, S., Yadav, P.K., Yadav, D. y Yadav, K.D.S. (2009). Pectin lyase: A review.

Process Biochemestry, 44, 1-10.

Yamashita, N., Motoyoshi, T. y Nishimura, A. (1999). Purification and

characterization of Isoamyl Alcohol Oxidase (“Mureka”-Forming Enzyme).

Bioscience. Biotechnology, and Biochemistry, 63 (7), 1216-1222.

Yang, F., Jensen, J.D., Svensson, B., Jørgensen, H.J., Collinge, D.B. y Finnie, C.

(2011). Secretomics identifies Fusarium graminearum proteins involved in the

interaction with barley and wheat. Molecular Plant Pathology, 13, 445-453.

Yang, H-H, Yang, S.L., Peng, K.-C., Lo, C-T. y Liu, S-Y. (2009). Induced proteome

of Trichoderma harzianum by Botrytis cinerea. Mycological Research, 113,

924-932.



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

79

Zhang, J., Bruton, B.D. y Biles, C.L. (1999). Fusarium solani endo-polygalacturonase

from decayed muskmelon fruit: purification and characterization. Physiological

and Molecular Plant Pathology, 54, 17-186.



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E POSGRADO

80

ANEXOS



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81

ANEXO 1

Se muestra la estructura molecular de algunos polisacáridos principales que conforman

la pared celular vegetal.

- Celulosa. El polisacárido está formado por unidades de β-(1,4)-D-glucosa; el

disacárido formado por 2 glucosas de posición invertida se denomina celobiosa.

Adaptado de Alberts et al. (2002).

- Xiloglucano. Molécula con un esqueleto de polisacárido de β-D-glucanos, con

cadenas laterales que pueden contener α-D-xilosa, α-D-galactosa y α-L-fucosa.

Adaptado de Ocho-Villarreal et al. (2012).



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82

- Homogalacturonano. Tipo de pectina formado por un polímero lineal de α-(1,4)-D-

ácido galacturónico, esterificado con grupos metilo y acetilo.




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83

- Ramnogalacturonano I. El esqueleto está constituido por repeticiones de un

disacárido formado por α-(1,2)-ácido galacturónico-α-(1,4)-L-ramnosa; en rojo:

residuos de β-D-galactosa; en azul: residuos de α-L-arabinosa.




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84

- Ramnogalacturonano II. El esqueleto compuesto de residuos de α-(1,4)-D-ácido

galacturónico, con 4 cadenas laterales de oligosacáridos de diferente tipo (A – D).


- Lignina. Representación de un polímero de lignina de álamo.

Adaptado de Vanholme et al. (2010).



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85

ANEXO 2

Se presenta información adicional sobre la técnica de espectrometría de masas MALDI

TOF/TOF y el análisis proteómico.

La espectrometría de masas o MS, por sus siglas en inglés, es una técnica analítica

usada para medir la masa molecular de un analito. MS se basa en la formación de iones

que pueden ser aislados o diferenciados eléctrica o magnéticamente con base en su

relación masa/carga. La espectrometría de masas y el instrumental utilizado, el

espectrómetro de masas, brindan información cualitativa y cuantitativa de la

composición elemental, isotópica y molecular de muestras, tanto inorgánicas como

orgánicas (El-Aneed et al., 2009).

Para que una muestra pueda ser “leída” por espectrometría de masas, el analito debe ser

ionizado. En la técnica “ionización/desorción por láser y asistida por matriz” (Karas y

Hillenkamp, 1988; Tanaka et al., 1988), también conocida por sus siglas en inglés como

MALDI, la ionización se logra por la aplicación de pulsos de láser. Además, la energía

del láser también causa el paso de las moléculas del analito a una fase gaseosa y su

desorción (Fenómeno por el cual un gas abandona un sólido cuando este alcanza cierta

temperatura). Pero como señala el nombre, la ionización y desorción son facilitados por

la utilización de una “matriz”, la cual es en general una solución de moléculas orgánicas

pequeñas, frecuentemente ácida, que se aplica (mezcla) con la muestra. Su función más

importante es la absorción de la energía del láser y su transferencia al analito para

producir una ionización y desorción indirecta y, por tanto, “suave” de sus moléculas. En

el espectrómetro de masas, los iones en fase gaseosa son acelerados por un campo

electroestático hacia el analizador de masas (De Hoffmann y Stroobant, 2004).



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86

El analizador de masa permite separar en espacio o tiempo los iones en fase gaseosa

producidos en la fuente de ionización, en base a su relación masa/carga (o “m/z”) y su

comportamiento característico en campos eléctricos y/o magnéticos. Uno de los

analizadores de masa es el Tiempo de Vuelo o TOF, por sus iniciales en inglés (De

Hoffmann y Stroobant, 2004; Watson y Sparkman, 2007). El analizador TOF separa los

iones cuando viajan en la región de campo libre denominada tubo de vuelo. Los iones

son caracterizados en base al tiempo en que tardan en pasar por el tubo de vuelo hasta

alcanzar el detector, luego de su aceleración inicial producida por la generación de una

diferencia de potencial eléctrico; en este sentido, un ión se mueve a una velocidad

distinta respecto a otros a razón de sus diferencias en masa (De Hoffmann y Stroobant,

2004).

Antes de salir de la fuente de ionización, un ión con una masa m y una carga total q=

z.e es acelerado por un potencial Vs; su energía de potencial eléctrico Eel es convertida

en energía cinética Ek, lo que se puede expresar de la siguiente manera:

𝐸𝑘 = 𝑚𝑣2

2 = 𝑞𝑉𝑠 = 𝑧𝑒𝑉𝑠 = 𝐸𝑒𝑙

Así, la velocidad del ión que deja la fuente de ionización está dada por:

𝑣 = (2𝑧𝑒 𝑉𝑠 𝑚⁄ )1

2

Esta velocidad es constante hasta alcanzar el detector, luego de la aceleración inicial. El

tiempo t requerido para recorrer la distancia L hasta el detector está dado por la

ecuación:

𝑡 = 𝐿

𝑣



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87

Al reemplazar las ecuaciones resulta que:

𝑡2 = 𝑚

𝑧 (

𝐿2

2𝑒𝑉𝑠 )

O,

(𝑚 𝑧⁄ )1 2⁄ = (√2𝑒𝑉𝑠

𝐿) 𝑡

En la ecuación se muestra que m/z puede ser calculada a partir de una medida de t2, con

los términos entre paréntesis siendo constantes. Además se observa que a menor masa

el ión toma menos tiempo en alcanzar el detector, es una relación lineal. Pero como no

se conoce el momento exacto en que comienza el ión, se introduce una constante B, que

representa al valor de calibración que se debe hacer antes de los análisis, con estándares

de masas conocidas (De Hoffmann y Stroobant, 2004).

En principio, todos los iones adquieren la misma energía cinética cuando viajan en la

región de campo libre de la fuente de ionización. Sin embargo, esto no es lo que ocurre

exactamente, por lo que inicialmente en los espectrómetros de masa que utilizaban el

analizador TOF la resolución (capacidad de diferenciar masas muy similares) de los

picos no era óptima. Dos métodos fueron incluidos en los espectrómetros TOF para

optimizar su resolución: Extracción pulsátil retrasada y el uso de reflectones.

La extracción pulsátil retrasada es un método incluido con el fin de corregir la

dispersión de energía cinética en iones con el mismo valor m/z al momento al dejar la

fuente de ionización, de no aplicarse, los iones formados son extraídos inmediatamente

hacia el tubo de vuelo por el voltaje continuo aplicado. Así, los iones de igual m/z pero

mayor energía cinética se moverán más rápido y alcanzarán el detector con una pequeña

diferencia de tiempo, lo que resulta en un pico menos definido. En el modo retrasado, se



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88

permite inicialmente que los iones se muevan en la región de campo libre de la fuente

de ionización y luego de unos microsegundos se aplica otro pulso de voltaje para

extraerlos de la fuente. Esto transmite más energía a aquellos iones que permanecen por

un tiempo mayor en la fuente. Consecuentemente, los iones menos energéticos recibirán

más energía cinética y alcanzarán a los iones que inicialmente eran más energéticos, al

momento de llegar al detector.

Por otro lado, el reflectrón es un reflector electrostático que actúa como un espejo

iónico que deflecta a los iones enviándolos de vuelta al tubo de vuelo. El detector se

ubica a un lado del reflectrón para capturar los iones reflejados. La utilización del modo

reflectron corrige la dispersión de energía cinética de los iones de igual m/z que dejan la

fuente de ionización, dado que los iones con mayor energía cinética viajan a mayor

velocidad y penetran más profundamente en los espejos que los iones con menos

energía. Consecuentemente, los iones más rápidos pasarán más tiempo en el reflectrón y

alcanzarán el detector al mismo tiempo que los iones más lentos de igual carga, como se

muestra en el siguiente gráfico:



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Adaptado de Watson y Sparkman (2007).

Cabe señalar que el método mejora la resolución pero disminuye la sensibilidad de la

lectura y se realiza en un rango de masas restringido.

Dos procesos TOF pueden realizarse en tándem (TOF/TOF), lo que puede entenderse

como la generación del espectro de masa de un espectro de masas. El ión precursor de

masa específica generado en el primer TOF sufre “disociación inducida por colisión”

(también denominada “disociación activada por colisión”), lo que forma un sub-

conjunto de fragmentos iónicos específicos que pasan por un TOF adicional (De

Hoffmann y Stroobant, 2004). Este análisis de masas doble revela mayor información

de la muestra y aplicado a la identificación de proteínas permite obtener la masa de

péptidos que conforman un péptido más grande, lo cual asociado al procesamiento

previo (tripzinación) y software y bases de datos que utilizan valores m/z, permiten



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90

obtener la secuencia de aminoácidos más probable. Estas características han hecho de la

espectrometría de doble masa, una herramienta idónea en el campo de la proteómica.

El análisis proteómico implica el fraccionamiento de una mezcla compleja de proteínas,

la lectura por espectrometría de masas y la utilización de software bioinformáticos para

la interpretación de datos de masas en secuencias de aminoácido y los análisis

estructurales y funcionales, según sea el caso. La separación de proteínas se realiza por

electroforesis en una (PAGE 1D) o dos dimensiones (PAGE 2D) (Figeys et al., 1998)

y/o por cromatografía líquida de alta performance (HPLC o simplemente LC) con un

flujo a escala nano, que permite identificar proteínas que se encuentran en cantidades

menores al umbral de detección por PAGE 2D (Rabilloud et al., 2010). El HPLC ha

conllevado a la aplicación de estrategia de procesamiento “shotgun”, en el que toda la

muestra compleja inicial es disgregada generalmente por digestión enzimática y cada

pequeña parte es utilizada para llegar a la identificación de los componentes de la

muestra usando poderosos software bioinformáticos (Fournier et al., 2007). La

tecnología elaborada en este sentido se denomina “MudPIT” (Tecnología

Multidimensional de Identificación de Proteínas), en la que se utiliza LC en más de una

dimensión, acoplada con la técnica de espectrometría de masas (Fränzel y Wolters,

2011).



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F. solani-C30 F. oxysporum - FM4

Cultivos en PCRP Cultivos en glucosa

ANEXO 3. Cultivos de Fusarium solani (F. solani-C30) y Fusarium oxysporum (F.

oxysporum-FM4). En a y b se muestra el crecimiento de los hongos en placa con medio

APD, con 10 días de incubación, tanto de F. solani (a) como de F. oxysporum (b). En c y

d se muestra el crecimiento de los hongos en medio líquido de sales suplementado con

glucosa (c) o pared celular de raíz de palto (PCRP; d), luego de 10 días de incubación.

a b

c d



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ANEXO 4. Espectro de masas obtenido en el espectrómetro de masas MALDI TOF/TOF 4800 ABSCIEX, correspondiente al

primer TOF de una muestra de exo-proteínas digeridas por tripsinización de F. oxysporum (FM4) en medio MLS + PCRP; se

utilizó el modo reflecton, en un rango de lectura m/z de 500 – 4,500.

499 1302 2105 2908 3711 4514

Mass (m/z)

1.6E+4

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

Final - Shots 700 - SPOT SET BAJO PESO M9OLECULAR 41450 III; Run #7; Label K12

2210.9253(R13847,S732)

2235.0010(R14416,S481)

615.3292(R6113,S135)2267.9407(R15534,S299)

2294.0098(R15082,S127)520.0796(R8386,S86)

543.0948(R8564,S66)

517.1119(R8532,S44)

2340.0029(R16468,S157)508.2559(R3175,S39)899.4447(R8572,S52) 1892.6934(R12835,S119)2325.9656(R14348,S52)527.2262(R2207,S24)1179.5182(R9538,S50)1713.6670(R13485,S66)

2264.8452(R16105,S34)698.2946(R3780,S10)1142.4702(R9266,S19)1863.7556(R16523,S13) 2952.1550(R18489,S43)3411.9375(R25090,S16)3897.6460(R17562,S13)



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ANEXO 5

Péptidos detectados por espectrometría de masas MALDI TOF/TOF y el procesamiento bioinformático de los datos de masa, a

través del software Protein PilotTM y la base de datos UniProt. Los péptidos detectados son mostrados en colores dentro de la

secuencia de aminoácidos de la proteína a la que corresponde (en gris); el color verde indica un valor de confianza > 95%;

amarillo, 50 - 95%; rojo, < 50%. Los datos se presentan según especie y medio de cultivo. La denominación de las proteínas

identificadas son las registradas en el primer análisis, realizado enero de 2013.

5.1. Aislamiento: F. solani C-30 / Medio: glucosa

5.1.1) Repetición 1: 0 proteínas

5.1.2) Repetición 2: 2 proteínas

SG2.1: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca

MRALGISPERRIKVTPEDDARVLRRIDLVVLPLMLAVYFLQGLDKATMAYASIFGIIEDTGLKGDQFSWLGSIVYVAQLIAQFPLAWLLVKLPIGRFTSLMVILWGLT

LTLMAAAHTFKTLLLARFWLGAFEASIAPSFIAITQMFWRRREQPLRMSYWYAMNGFTNLFGSLITWWLAQFQFGLRPYQTIFIFFGIATVLFSFVLFAYMPDSPAEA

KFLSKHDKLIAIERLRMNQTGVMSRRWRWDHLWETIRDLKTWLWFALIFSISVPSGGVASFGPLLVRSFGFDSFQAILFNAPFGLVQLVSTVGGSFVATKYHKKGPVI

AFLTLFPIAGCMIMLSTPHSDDRKATLLFGYYMISVFPGIVPLIYSWSSSNTAGDTKGKCNSSALFIGQSLGNIIGPLLYRPSEAPEYFRGLYWNLILYCTIIVLVGITSVY

LAHLNRDHSRRRVLAGKDAIIQDYSLHSLEEADRLRRLKTMEEQQVDNAPDETGRRVGSHAFDDLTDLMNDEFVFVF

SG2.2: Predicted protein OS=Nectria haematococca

MSTIQQLKNFIRHGKQARAGNPDESPRKNEASQPAPAQHKNESDPGHGHSSEREPIDDYANDEYSSKKKRYDDEKLAKLVAEENASKSKFPRYPGLERWELVDKM

GDGAFSNVYRARDTTGERGEVAIKVVRKYEMNSMQRSNILKEVQIMRQLDHPNIIKLVEFSESRQYYYIVLELAPGGELFHQIVRLTYFSEELSRHVIVQVAKALEYL

HEEKGVVHRDIKPENILFNPIPFVPSKHPKPKQPGDEDKVDEGEFVHGQGAGGIGQIKIADFGLSKIVWDNQTMTPCGTVGYTAPEIVKDERYSKSVDMWALGCVLY

TLLCGFPPFYDESIEVLTEKVAKGQYTFLSPWWDDISKSAQDLISHLLTVDPEKRYTITEFLAHPWIRGNGPTPREEKKKPEVLRAFDATKFEDSGKRYDFRSPGAVNL

REVFDVGYAVHRQEEEGKRRAQIGAKGGPARFIGALNEEDEEDEDVMQIDGQDPNAAAKPNAATQALEQSMRKTNIRDQEQHHETRGRERERTERGYGQHSATV

AAAARQQVRDRNRQRGAFELNLENATLLGKRNKKVPIMGA



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5.2. Aislamiento: F. solani C-30 / Medio: PCRP

5.2.1.) Repetición 1: 16 proteínas

SP1.1: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZNJ3|C7ZNJ3_NECH7

MANVDAPSARESPQFPKTKELKGTEKRDSIIAVEKKYQKIWVDSNIFEVNAPSIDEYPPDSITPAELRERVPIWMGTMAFPYQNGRLHAGHVFSVSKVEFGAGVARM

QGKQALFPMGFHATGMPIKAVADKLKMEIQRFGKDFSMYQDDQPVIDQAPAVDQKREDFAKNSSSKSKANAKTPNLKYQFQIMESMDIPKEEIHRFADPQYWLTY

FPPQAKEDLISLGCRIDWRRSFITTDINPYFDSFVKWQMRVLKKQNKIKFGKRYTIYSIKDGQPCMDHDRSEGEGVGPQEYTGLKMKVLEWSKRPRELPPGAKVFVIP

ATLRPETMYGQTAVFVSPKITYGIFKASEGEYYLVTHRAARNMAHQGIFSKDGEIDHLVDVSGADLIGTLLHAPLSVHVGGVRVLPMESILPAKGTGVVACVPSDSP

ADYITTMDLRKKADFYDIEQKWAELEIISIIDTPRSDMLAKTLVEELKINSPKDTIQLEKAKETAYTEGQVTFYKGKMKIGPYAGEAVETAKPKVRQYLIDEGLAFAY

AEPDRKVISRSSDECIVALMDQWYIDYGEESWKKVVLHHLHNGLNTHGDETRNAFDGVLNWLNQWACARRFGLGSKLPWDPEFMVESLSDSTIYMAYYTICHLL

HADIYGHLKGSLNVDACQMSDEVWDFIFCRRELGDDVLQSGIPEASLLTMRRSFSYEYPLTLRSSGKDLINNHLTFFLYVHLAIWEDQPEYWPRGIRCNGHLMLNGE

KMSKSTGNFMTLQDLVSKYGADATRIGLADAGDGIGDSNLVEDSIDSAILRLYTLREWIQETLKSTLRSGELNYMDKMFANEMNSLAREAITHYGETNYKLALKVG

FYDFNNALSFYREQSAVSTLHRDVVRRFVELQCLLLAVIAPHWAEGIWLEILEKPESIQLARFPTLPDVDTALSAARRYISQTASSINSAEGVQLKKKAKGKEGSFDPK

KHKKLTIYMSENFPAWQAAQVELLRELWDPVTKSVDDKVLISRIDKADKKRAVPFVQALKKRLLAGETERTVFDRKLPFEEKGVLVSMMETLKRSANLTEIQVVN

VQNGGIQGVDIITGETAGEILPVAQSAVPGNPTFFFTNVM

SP1.2: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7YSK2|C7YSK2_NECH7

MHKDTPEQAEPGLLEGPWALKRLLTTTLDLALAIVALAFVLFGGLIYVSDGTPATPGSTSKLLLDIAKYGPTVFPVLFAAIAGAALKTFATWRLQNGTRIGLIEQLVG

SHTVAEAVFTQARLKAFNALAIAILLLWCLSPLGSQAALRAISADQAFRNGTGNLTVLETFAPFRFMLTASDTAQARRLLVPPTVATMISARLLQGRNQDLWGNIRV

PMIERLTESASDTNWVDVSKMDDIEYSALVGVPVVSLPSKGNHSFTFSASYINPECTTLKVNAQYNFTTIIPDFNSTDRTNCNWTTVQPEYTLRASISQPCWDDIEALG

EKYRSGKDRTARVFIWESRTFGQETHSYAECHLYTTYVDVKMDCQGTLCSPSSVRRSPKPPRNGNWTALDLRYNFHDPEGFVNLFANMFPGSYNSGGQTPTIVYLA

DPFNALSARNKTEPASLPRATFETRLSHLINSQLLLGIHPGDVAGGFTEENANNLSVSFVNRDTYTRDEIVQYSTLWLIMLLASSTVLFGVALAAIVVRFKIMVPEVLG

SLALGMLDNRCDDIKHSSFMSGDDKMAKMKEVKVMLGDVEPHAEIGRIALAAPMEDVVVEPVDHSPMQLFWALATNPPLSHLFPCALPFHRSSNKLTSGDTMTQP

DQLCHKCQDLFTQPDLEPGNCDCWQDPAFASWKRRGRDVLEAAESGCPLCRIVWNEASSRLGDRINVEQAVIGPKICWDDDTAGFSVGDMLPDCPRPPNSVDACQ

SIATLWLFECATQHEKCRVRDHQSWLPTRLIDVGPAWSTQDPKLVMASSLSSSSPSPLYISLSHRWGTSNMLKLKKSNTNDFMQRIRPADLPFTFHDAIRLCRSLGIR

YIWIDSLCIIQDSKTDWLKESSNMGKVYEYSFCNFAATSASHGQGGLYSWRDPHLITPHTAHVNWKGHESEYVFFLNSHWFKSISRATLNGRGWVFQERLLSPRTLH

FSSQLFWECRTLKACETYPCGLPSEPSILGDDVDQDFPGSTKDWRDGLERDGVEHWELLMQMFCRCYLTKESDRLVAIAGIASQAQALLNDEYLAGLWKRQLPHG

LLWKLQNMVGQDDLIVTRPTTYRGPSWSWASLDFEAANINMLDREGIGRYLVEITEVKIESSTDQIYTNVTGGYIRVLGKLGQVNLANLEDAEWRGDRGGHYTFEF

SLDVDDDIDIEEEAPYCLPILTHDRANRNTFKSLEVHCLLLQKIETNSTEFRRIGSLQVLLDWEAEIIDEFRWITDYTREENTLAQSLDTLMIY



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SP1.3: Predicted protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZPN2|C7ZPN2_NECH7

MADDAPDASPKNEPLNIETKEDAETRAARRELKQSSISDTTPSAAEGSDTANASDAPDSDLKDQVASPKKKRAHDQLEGGKEAEDNDANSVASTDSAKDRASRLEP

EKKRPRDEDSNDAEPVCRLERPLKRARQTADSTQTSTAASSQEATKEDEAGKSTAKNAQPQTSASAFASSGFGKLSSGSSPFASLGGSQGGSVFGSAAAGKPSLSSFA

SPAPSTDAQPPAAPKLTFGSTSGASPFAGLSSGTNGFGSAFGSSAFGSALGGTKPLSSFAAPGKEPLKSEKPARPFGAPESSDDEEEDGDEDGDENEPQEVERALSPEK

DSDEKRKLKLQKIEVNDGEDGEATIISVRAKMFYHDKEAGWKERGAGMLKINVPQACVEYDDNGAVVPGSFDASALEVDDPESASAHGHKVARLIMRQDQTHRVI

LNTALVAAMKFQEKASLKSVGILFTAFEGEQAKPVSITMRPIRVREQRFVWMTARTGRLDADAGAIGRAIISLKGYRALPGLEQTRGKRKREPDREPRDESPAASESS

GSGSKRGAKGSKGKPSLKKQASNVVVPCVMEWPEAFKQLEKTHRALSLVYTFCTTRKHLATTFDTIKSAVEAHTKRDLSIEEIASMVALRPEGIYFAYVDEVMLQL

DIKGSERDDVFRNGRSSRSQAPAHDASVGGYSGMESLDKQYDRELEPTGREVLFLEFLDGDLKRQVPSKTGEPTNPNRRLRAEQLRMPVFSQKQMTNLIERRNQKF

ANAINVFLNKCVEDKLDPQEALTERTKSHIPMPSTNEDFSPEKAADSIPESIPKERKSIPEIVQELKDSPWYTGQIVPDGHRVFEQQEPVYGDLNFLLSQDLVNALYNA

KGITKFYAHQSEALNSLHDGQHVVVSTSTSSGKSLIYQLPVLYALEQDYNSRAMYIFPTKALAQDQKRSLKEMMGYMPGLEETMVETFDGDTPMTDRNMIREQARI

IFTNPDMLHITILPQEERWRSFLKNLKYVVVDELHYYNGQMGSHMSFIMRRLRRICAAVGNRRVKFISCSATVANPEQHFKTIFGIDNVRLIDFDGSPSGRKEFLCWN

TPYKDPGDPASGRGSAKFECARLFCALMLRGVRIIAFCRVRAQCEVLVSAIKQELEALGRPECINLVMGYRGGYTAQDRRRIETEMFQGQLLGIVATTALELGIDIGS

LDCVMTWGFPYTIANLRQQSGRAGRRNKDSLSILVGDGFATDQHYMQNPDELFTKPNCELQVDLENMLVREGHIQCAAYEMPIRPNEDKKYFGKDLPKICDERLLR

DEMGFYHCHDRFRPIPAKYVAIRDTEDEHFAIIDITNGRNVVLEELEASRATFTIYDGAIFLHQGNPYLVRDFLPDKRMAKVERVKVDWTTVQRDYTDIDPTETEAIR

TIPGSRSHAYYGTIKIQQNVFGFFKVDRKGRVLDAVQVDNPPVIRFSKGMWLDVPKKAIDILQTRRLHVAAGIHAAEHAIMSLLPTFVVSMPGDVRTECKIAKKEFA

KQETQRKRPARLTFYDAKGGAGGSGISTKAFDHIDQLLRDALQRVEGCRCERGCVECVASELCKEANEVMSKAGSQVVLKTLLNMEVDVDELPMGPELNTPVGIE

TVVVAEAVPYRTKDAVFGNKPAVQEGQGSSGDVSGDAAKPGGSGTPDGDGGFERWLGGSM

SP1.4: REVERSED Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca / AC: RRRRRtr|C7YK31|C7YK31_NECH7

SQATQAHEAHVGNTLPAAAEVQGNQLQTSVEAKSTPSVDGDLGTLPVTGSPSFDPVEASLQSVGNTNIAGNVGQAAQTNDVFHQFSPDHANVPYGHQGYPLGHFG

NFHGNAYNYSRNKFTLHMPGDNRALEDRDEMPLVFKQWDERRRLRECDDEGVVYDVDVSDECVARILNMDASLDRMRKFATIFHLPVFGQSDMRQRLYMDKCL

NEISFYYEIQSKLMPMVMNDWYPHPQLPMGAMPAMSYDYAAFQAQVAPMRSSGNPLSLRHYNGAGNRGGRGRQTPPAFMGGHSGQRLPPSYHGQARGAGAGQG

HFGSTASASHQHQSQGNGHTGRGRYGGRGREGRGEPRDRPTQTTDSSQAASDKAKDAGANASAKKQGNAADLSGRKAAAPQSTTGNPGDRPKADNSKNVPASSA

KDTVGNTTARTSADRGSRAGGRPKSGRMQPLQTEFSVTPVYDYTVWKQRPKGQSDNEQADKDSRDSRDSAKDVTKKKDEKIATIATEPTPWHTSDQVSPPVEAKG

EKDSIRSGRPGNREPRSVSAAKQQPKVGNTYPAPTSEEAKAASKDDDKQASTGNVAAEAPTPAPKAKALHAEKRQHWINVSPIPAEALEVKPPEPAAEQEKDAAQE

SPQKEAAKSKKGRRAKRSDQEETSRTTNSSSRPTKENRRWPRDLRGADDDRRSEPRREQTSESRADSESSPVSELDQKESAVARPELSETAESVEATTAQEPAPTATK

LDWVPVAVPAQTDQAPAVANTPASNNSVPAAGQGKAAQAYSFTSPTAMENSEVIASPTM

SP1.5: Putative uncharacterized protein NhNSP3 OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7YJM5|C7YJM5_NECH7

MSLGKQQQQQQPLSQQHSQPPPERLIQAVAQTLGISRDDILLYDSFSELGGDETKAEALRLACRRRGIDVKSEDVLNCPTLAELQTRITAFPDPLPLDSTTNSSLSSEDS

IRSPVVDDDVFSPKSRKWADSMSSYDSVSTDDDSIKPIRSSLDGLLRSFPKVKNVCLATPKAGPFDGQLVAFLSIATSNGSTAGAEVDEITLPPRREMEAQRKEMRSL

RMAVQEWAADSRRPQIWIPLTYMPFTDNQEPDVRRLQVWAQDISNSTYDEVMRIQVAEPRRRRDISPGKWRKKVQSWAESRKSMLVVHDAEELGETVCFPLSPMQ

QLYFQALKQKGESIAEPECRYTRSVMLRVRGGAKSSHVEKAVEALVARHEMLRARFRPVLQEWLQVTVPATSSSYRFAHHIDVDDDEIRGLVEGAQAAINPTKGPV

FAVQHIQNENKQMLHLTAHHLIVDPLSWRIIIHDLDQLLQRGTSLSKPSTSFPRWIEYQNYEMSQRLFEPTLPFEVLSADLEYWNLTQEVNTYGNTQQSSFSLTPELVY



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

96

ILKNASANVLRTEPADVLLAALLLSFSHMFPDRALPTLWKQEHGRGAFDGDLDIMDTTGWFASLCPIGVLLDSTIDLIQAIKLIKDTRRTVPREGIPYFAAEFSTSKGA

AASLPVEVMFNCADTAEQLQRKNGLLEPVIAPGQKTASLTSEAGSEVGRIALFEVSVLMDASGAQVDFTYNKTAKYQDKIETWVQVFERLVLEAIGKLQNHEPELT

LADAPLLRSSYKALARLTSDRLAGVPIPNVRDIETIYPVTPSQQEVLIAQTQNIDTFNVHAVYELRARQGRSIDTARLCTAWEAIVTNKPALRSIFIDGVSREGLFDQVI

LKKASPSMLFIESIDPDEAVSTLPELNMPLTEPRHRLSVCHNPDRTLVRLDTSQAICDLASLDLLVTELSRVYSGEESTHNEALHRKYLYHVSSTDTAYSMEVWKIGL

SHARPCLFPHLSPSSGDAFQSQSYTLDVTRPQLQAFCAQQHVEPHAVVQLAWALVLRSFVGADHVTFGYQFSGRDEQLLDGINQVVGSFATVLPCSIEVSPDYLIGA

CLASVGESFTTSRKHDNVTMAKIQHAMRMKEKLFSTCLFFQDSDPFEDNPLENRRAADLVLSPVTSGRRTDCDLSLTAIFANSRLQVSFTSRHLSHNQTQSIISSFEAA

LKRIMENPDSSVDEIDLFTDRHYAQLVVNDWESTQRSRKISACVHDVILQHSLTRPDALAVCSWDGDMSYALLSTLVTRLRTYLVNLGVGPGMAVPVVLDKNHWA

PVMLLAVMQAGASFVALDCHDPATVKSTIDHLRPHIVLAAETAWRDLSAMVLNLVIVNDTLFANLPPHMSSLAREASPEQAACVFISPRASRSIFFTHSSLCSIFVSQ

GQALRMDSFSRVLQLSAFNVDISLVEILGTMVHGGCICIPSAKDRAQDLTGAMARMGVTWSYMTGILARRIAPASVPSLQTVCFRTRKLDPDTYGPWLESRNVLLA

YGAPDICPLGISITEITRDNPLNVITPPVTGRFWVLNPEDPKKLMPVGAIGELAIDSPLVTPHRFALDRPLVAPSIPYQGEKQKARYLKTGHRVRFLDNGNIQFLSSIRDD

IVVDGSTIDVTEVEQHIRRCLGKGIDVVVDSIRTRDSAPFLAAFIELDPTLFHGQGSFCDVSERVRERTFLAKKMFDESIENPGPHTPKIPRHCIPSIFIPVKELPVSTSLK

VNRRKLQRMVSQVSGQELLAMSTVPNPTEIQRLVLAQKPLPLTRPEQVMRSIWAGVLRIPPGEIKGSDNFFSVGGNKLLATEVVIACRKYGLHVSLLDILNEVSLTD

MCRAAESSNKPTKKTLDIFTPSHLAFSMDKFDNALVKDVIAPQLNCSPRNILDVTEASSQQIRSLELGMFSSRADIVCLVIKFNGPLKLSKLEAACDDLTAMHPALRT

AFVAHEHRVYQVHLASPAPFRTYPCESKLDKMTETIVKEEQSFAFDPRTPATQFTFLDSNKQGTLIMRLSKTQIDSTSSHLIVQDLVSLYEGAASTTPRSSFLEYTRAS

RINRDQGLEFWKCQLENISMTNVINDIKPTPPTAVAQIKSLQHTTSQGRLVDYGMTPDTALKAAWAIVLATLSGVNDVLFGEVIHTQNVPPPFAMDLSSMVGPLTNV

IPVRVQFPAIHSTPLDLMACVQKQRQSNARFDMFGFQELVNECTNWRACTQFSTIVQHDVKSPLDGSSTLNIDGMTFTYKTVDPPAQDFPHLFVRSTVEGADRVTLE

IKYSEERLSTSFVQSCLSLLVAAWETLTHADTIHQPMVQSAEEISRSVKQIPFPPKESSTLHVPVDVVLQPAQRKDLDKAIARAWNEVIKPSSNIPQRQLETIPFYAISRS

ILSAHSLTTHLNQALRSLNIPNLNTITLRVEDILSNPSSLSQLEHITHLLRTAGTLALPVPPAPKSDASSTLRRPNSRSGPQSERTVSWRKSFLGLRGRSSMKDLSQKASE

WIKSKKSTSDTSLPSNGVHELDGASRGKTVAELPAQSAPVPRLGSLLSENEKHIAELEGTILSYDSGGRGSPVDRSSIGDSSWRSVEDAESSCRSIEEVVEVSPVGPFHA

DKRKSIWGSVLELPRRSITPRFLR

SP1.6: REVERSED Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: RRRRRtr|C7YK28|C7YK28_NECH7

IGCGLYRDNYITIMATLTNWVLKRKMDEQLAIRELACRGDFYKCMVQWSNALKEDNFRRAIASLYRSEKGTAKKADLIIHPTLGALHPHDNVSPHATVVPVVKRA

HATAKEAADRQAKSAIRELRAKEAAQEAVTPVHSGDTGSHDESSESTRPAGTAATSSGSKSDIDAAARIEEAEMEYEVEYLIEPWVVVYAFTCLQTVWGRRMLWA

LMLLYTPRHAKSPSFQKYPRPTQSLEALFNPLPPALPFARQWELTDLSLRSLDCNPSLIYQDKAHLPPIAIARRWFIFHQAYKRVQGLTLINSQGVQYFSQTPKSLRVF

EVVSATTPDPDAQLESIIKKEDDTLLLAFNRDLFGPEELADQSIFTNATTLWLGRQTGEEGQPLDDIYFPIPVQVSPTLAGAATDLHLAAIKNQSVAEYIDHMAAALSS

SQIIERWLVSMKKREERAKDKAVLIRKSEKWVFESHQQSYKFVKSVKKIIHDYLTEVVDKVENSSPNLIFVLNFMTMSSRKEDDKDKGEEKKVEKEEVPQEPAKGP

ALPDIEHPGTPDDTYTSLKKSRATKKPKKWKGNEPVHIPYSVCYLPDLSLQFLRKHYPRAPTLIGALDRAPFGAVREWPVIQTGSETVFHDDPNRAQKPLSADDDAV

DQYGQQSLRELIIDELESGPAPGSGSAPQVHAPYHFVFAPGDRSRNVVLAVALFNDSTVSPVAM

SP1.7: REVERSED Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: RRRRRtr|C7Z530|C7Z530_NECH7

RGKKSDEELEAEVEEDMQKAIMKEEEEEAELIEKLLRSKKDQKNKGRRERPANKENASIGGPGMVIEVRRPKKGEGARKGGDDHGKGARVQRLVRTKAGLAWLD

GWRAKRADHYAAKGFSKPVTWREFKGEPTCLDLTVHGKRKLPPLITRPLTQMDPKTESHEYGKFAEETAQKGTWPSEKAVGRRLAVYSFEVEGQNDQSNGLMRT

YFTPRVFRQNFHCFDKRGTSKGTAQYMPCVGQNTCPAIVHGPEKERQYAPNFDEPSVESQGSQPLLFQKLVTDRVHAVAEFGRPHAKELVILVGGDKKLLSWLNNL

IAQRYHDQQEKLFLHSAIIVDYSKRAQPKDGADLHQGRMEGSHEYDPLRPLFTTNHLFTKARHRLRDSGVVVTRKGPPDSGKVQGNEILLDWEARVIEDWAILGAG



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

97

GSGADLVSLGTGDKLKSQLWESGVRKRVERLTAAVSAYAPPLFGAIFADAEIETMHRSDAHIGAARQGGNRKGEPTAPSLPLGAGGFADEAASKVHDIHTRQLLDR

IPMILEDRPLSIEVPSGHFRGEISLPHFRLTEGSVRERWQEEPWQPTEEAEALHEALEEEEAAVKDEAEQQQRRTEEFDKALKQMADYERQNRAVLDVYGPPEHLSEE

MALDALESQPLEEDSEEVIEDVIEDEAGEERPIQYVIEEFEGGEIERLITGENDPRPPEPGMDAHEPIGVDEPRTERLPAGYLREYLAYEEDNLYGKPLTDRFRQKADR

VVQEIEEPSARPAVAEQRLCRSTSFAQTIATSKNSQSAQLPSIRRLRLSPASHTYFRTSVPRSAGGVTGGSSVTPQRYLNFVSKEAAKYSDLSFLSVFYLGFFTIFMDML

KKLSWRRALSASKTDGGLTRGPTKFADGPKTAGGLKVANNIAATLAPPNAGRITEICNGNHFIKFTPMASVGQTRAIGAQSDVNVKAFAVKRPSSHEKALSDFTPAI

MKCPGCWDAYFDAIVVNTGALLSSWESESGISIPGSM

SP1.8: REVERSED Predicted protein OS=Nectria haematococca/ AC: RRRRRtr|C7ZB13|C7ZB13_NECH7

AMDKVIMLDGLQSALTTATQLLLSLRILFGTRKGHEARVRNGKLILGNTMAALIDCFLSEQAHRELELSQEAELLQRELRFWVHWGCFDTDNDQIRQFSDDIVFAND

GINEAWAEFEKSVANHQRTMGLELESIRTEVLKIRDRIAKECELFWKYRDQTILRTLEQIETAAISVHDEQTKPGLVAGPAVQHHFSFNPPYPAFTGIHLFAWRKGLR

KALGLQCPARCNTDLRGTENLYKLEDRIMYITETLEDDHAQKRHKPPRSLRPLVVIPLPQGVNLLVFQARLSLERDYDQDFVCPLQSKDFVFERNQAAM

SP1.9: Predicted protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZLU4|C7ZLU4_NECH7

MATPAIDDDSTRTEERIGTPTADIGGVRPEQDETMQSNVEGDNGDVTDDNTPAFDDLFDNDNANPGRKDMDISSSDDDSDHESDLEEIEPVRPRKFGGRYLLPSSAP

GSSGGAAHRRYQEHIDKLMNSRITGSNDEDDSFSGTYADYRFDGPVRGSATKKVWTRTDALQCLHVEFWLCSLEHTAGEQPDFDCSRPDGDYPEWDLFLRVERLIN

EYYDGIESGELDEEMADDDTLVAGNGKIATPVTGKGKETAGTKRDKTKGESNVVRKTKNRVRDAAKAYMNGGYGESRGNKKWWTDYLPDQAELMLPRFVDPY

GATNGTIAGHLATMQRGWMIQIGGRPATGVSGKQARVDDNMSAVAANAAATSIATSKEVDEIKANVNKLRDQLVNKVRQMDGEQKQIVKKVSKLRRESDYYHD

EIGNQAIRITACEATKDAVDEYNKNLKEFNAQMEKIVVAEVTPVLVDPTTEKRANPAVRNPAARSSTAARGGISKANAFLQQVAKPAKKRAPGPAKSTGKTGASNG

DEIGWDQNFFDDE

SP1.10: REVERSED Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: RRRRRtr|C7YJ62|C7YJ62_NECH7

ADVCGVGNLDLLEEDMNRCAWKADKGSPPTVTVNEARINDCSDESSCILSGAVPDNKKSVTGWFDKFLIDTLIVKSPDAECEAASVAGYCQDIKIAGDNNDNFFRE

YTVNRVRGEGGGGIWGEPKQVDAGPWVKLRAGDTANSMSINYIYLNEINDFVGPYQGLSGVSIGHSSNCVLGQVIINTSNPKFSVCDDDHDIYSNQIVINDSRYTDW

GDLNKAFNKSTSRSFIDIDSILIDSSNAILNHWNPSQRLKLGTISGGEWGDTVFLLPRKVKSDAAHADYWAQGNGDITGTGAGYINIDEGGFLWWSSGDQFPFQFTRP

LWREVDDCFKVTGTLAIDVHKLFRLDLQTCITYEQDLVVTGGNNCKKFARLIKSADDGGKKGPKVFCTKRRPSSTPFAKYPQLPTPEYHPRIIPRLLM

SP1.11: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ NC: tr|C7ZJK1|C7ZJK1_NECH7

MRARHESNRGERKSHVFSLPSMPLLTDCSHVLLHLHRYPPVVDIQANMGIQAYFRGGNLADAIEYQLLTPQRGGDSWQGEHHQPQLELRVPGAHKGLVYFWFTAV

CGTTLIVAPFFLLASVILPKTLDAYETSRFAFADRFEQNGNSTSNVAVWLAELSPLVFPVMCHSHNDYWRLHPLFSALAVGCASTEADVWLSPDGKDLLVGHDRQS

LSSSRTLRSLYLDPLLQILNSMNPLVLQEGLNSTAQARGVFAIQPNTTLILFVDVKDDPVSTWPLVLEQLGPLRDRKYLARHEKMHTMTTNQSFWPGPVTIVGTGNIL

KRRDINMGADPEKWQQYHDVFLDAPLDLLTETGFSPSSDFSCHDESENEFYTASASFKKTIRGVRAGFNKHQLITLRDQIQIARQRNLKSRYWGLPCWPISYRDYVW

RILTREGIDLLNADNVVSAAMKHWDSDYTREAVWICITTSYLFVCSIGLIWYTRRFTDQQVSIR



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

98

SP1.12: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZHE0|C7ZHE0_NECH7

MGASSDAKVHQGKLAIVTGAARGIGSYIARALAARGANILVNYATESSDAPAATLCKELEEKHAVKAVPCRADISKAESCESLIAVCKEHFGGDDLKIDIIVHNAAV

LYLGPVESVKQDEFDHIYRVNVLGPALLTGVCKPYLPTDRSGRIVMMSSINPKIGTPHTTLYAGTKASMEAMARVWARELAENCTVNTINPGPVMTDMYMTAPDEI

KQALALWNPLTPLVPVRETDGPEVQELGRKFGGRAAYPEEIANLVAMICSPESSWMTGSLVSANGGLTFST

SP1.13: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7YRS8|C7YRS8_NECH7

MANPRVIVYHYSYSPFARRLIWYLTLRGIPYSQCIQPPLMPRPDVSRLGISYRRIPILAVGRDVYLDTRLQMRKLEAMFPKLPRLGATSPDQIAVERLLSTLTNDTDILA

TALPLLPQDLPLLKDPAYYRDRGDFLGTELNGSGMDAKKPEALVELASDIGFLENALLADGRDWISGTEKPSLADIEAIWPFHWITGIQGALPEDRFSPSVYPRVYAW

IRRFQSAVSAAKKRVGAPVTLSGEEAASEIRAGSFCEPEKDVEASDAVVLAQSLRKGVAVMVWPTDTGSSGRDEGTLVSIDADEVVYETGGVEGFVRVHAPRHRFR

VEGVKEAKL

SP1.14: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7Z8K3|C7Z8K3_NECH7

MANSSALGSALRSGHYASIILSSGPSAGESTPGSASASSAPAPVAGALIQAFAAHLTGAAGSSPAPDADVAQVLSVGVAALNAFLQVNVTGPILPESNALSARLTKAW

ADTQSDSSKGTQDHLHKACLGDLEVDGVSPYTYIPHLELFALARHIITQSLSQASSDVVEVPPDEQPLKYSLAWTRLRVNVWHYKLLTQPSLGPGSNFTRSSQWSDV

PTLASQILDGIDSVRSQIVGEEVWASGDDTWSREDKVQFLVEAANNYILLGRDDKAREVLQEATQTSGFAYALSGALGKRTKFQEKNISQLVVLAKSGAEQQTDAG

DDEAKPEALQLNNDTLLEEIHFSKEENGNGNDKKAILPAALADLAPDDQPQLSPLDQIILLTEATLKDAFSPVDTLTSAEVLPYAVRVISDKSTNWQIYTQALLVRSRI

EVHRSRTLERGVLQLQAVSDQVLTDTTAEAQHKAEAKEEGTETDAPAIQVTTPEQDTRSLQSKPTTFLPAPKASESAPAHVRLQYIHALSSPPRWHLESELAYAWVG

VGSLASALEIFKRLRLWAEVALCLATAAASEDEDGRGSGGEEKAKGILRWRLFHRTGDTASPSDPDEEDIGDDVTRLKGSDFEGPERDPPPPNAPRLFCILGDTENEP

AHYERAWDISKHRYARAQKSLGEHYLQNKEWEKARDAYKKATTVNRLSPEMWSRLGDINLRLAHALWSLYCEVSAEPKDETAKEVVTQAPAEDEEDDMVTAVS

SRPSDRDPATLLAQSLAAYKKGASIAHDNWRIWDNVLTLGSRMQPPALGDMILALNHIIRIRKSEDAIDVDVVSALLQDAVLSVEKKTSSGIYDPPRGSPERLVMRLF

EEEMVPLITQRSELWTLVSRLRAWRRDHAGAIEAAERAWRAAVGTAGSGLLPGTASTTADEARDWTVNEGAWLIVVTRTDELVSMLENWGPDVETIGTKWKGKA

RSAIRSVMGRGKENWEGSEGWKLLESLMEGLKTS

SP1.15: REVERSED Putative uncharacterized protein (Fragment) OS=Nectria haematococca/ AC:

RRRRRtr|C7Z3E4|C7Z3E4_NECH7

KQSAEEYKGVDRLLLGMSALRAAGDLCTDPKAHRSVRSRLLCKYDGRSPVREQSTEWDWVLFVDRPFTTIRQLLNPWDMAAGEAREDDTPTVAIAVIVCYDECLR

IITPKPAGQLLCVFDGEQIPKASSQLTWRGSWEPFCGSIRKLAVDVSQREDWTSKGPTKIEGLVSAKTKIVAIEDEDCTEVSAREGMFSKILQYFIDKWSKTYDPSLGV

PIDSSMGLLAYIKDRRDTADRNHYMDVPEGLPRIHLSFRDPHSVTAKPRFIAGKILYITSRIRSQLHADESDLNLAQLGFCFAYGDIETSHCMILVHRAAAVEQLVWIR

RFWSHQLLSLVAQHKTEDGSPKPPVGRAAAGLEELAHHSNRIAEKDVPGCGTTAEELWVIVRNAGAYIKAMSQVQREREKMDGQNICIADTWIVRQLSHDRLRSL

AAYLNETVPLHGENTVIFRPKKPSGWVYSLAEYLHTGKASDLLHYHFLQCQIPAHEDQNPMLRLLRIHGDQLASYRYKPAACSPM



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

99

SP1.16: REVERSED Putative uncharacterized protein/ AC: RRRRRtr|C7YZG1|C7YZG1_NECH7

RRPGHKGMLRLRQRRAPGFLPRYYSHSTREGRPHHGLLTKDVNRYRVEYKVWRELGPIHIGLSPLALLTLTTTVHQSYHDREREVGYMAPLSYRIKGPAYHKLLKE

LRARRMPPLAKRFAKAHEARYPQVLFLPRNNYGIRVWYRGDFMKSRKWGMIRSGPNAEAIQKAEEKDFRVRHDLVGFLKAMPLPQNSTYPARSLLWKVSNGQVIP

DFLVGSMAFAKPPSPSPNPALDPILRNVVNDLNALPPLHYEPTVFDILKRVAIAMILRRHEKRLENEPSLSRRKRRGKFPRSNPFQILLTGANPDFDKIIAERVLYRHAE

AEELKTRRKAREALALIAPKQLAKPLEHNRVLYRIANRTTLTPDKNTRDEVWPINNAECTAILRDKDFELLPRYITVGGDEIELPKLFPRNPERETPNHGPYREILETG

GFPKFGDWSEAKKQDRFISRLRRMERIPPRFSLFPSQNRQDDILGSKYVGHMDYCEPISNAERIGQLGRYGHGGLLRMLVTEYQDDRHHAFFLSTAGQYNCHNGLA

RYRYTRALGELNPLKRPDLGNRKEEKWALATVTTKLDLKRLEKAVQMAEETSEDRLRHDIVVALAGHAPNDAIKARRFTQLMRSTLYALAMSDVGGIGVRQPRAS

RAAPFRPRCVADVADRFEAISIPRPAHHFVHAATTM

5.2.2. Repetición 2: 6 proteínas

SP2.1: Uncharacterized protein (Fragment) OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|C7Z8M0|C7Z8M0_NECH7

LMRRADAEHDAITGETTRSVVSDRRDDGARSMSEIGLGVVGVRRLVVLLAARLDPTLDKILLDIALPYFDPIHTKFADEPFTAFGELVDVVVPRWAIINRHQSEDELT

SYSHVIDKCLPVLAAEVDPRSELREPANDAFMRFLISIYTAASGSEQKLLNPPQKMFGERWLRMRLEKDENFRRAFQFSRKLLAMLRLLEASPIHTYVTDNSFLENVT

EIMLLQLVCRSIIRNFFRRRAATVVIPQQQLNSSPKFEELPAQHNEATPTRLDEEAHGPSLPPAASEDDAEETGNIKLSKEDVPVDTQPTSSFDLGNPPPEISATSNIATA

TFLQYATTREFLECFAGVLKNWHQPKFKTVNKLILQQLCNSGIRSITDNEQCICLALLELFRDLMYELADFYHTFLTIMNRLAQIMTTSLWVSLEEHNLVNSMEPRSR

LVMFIPYLQQRWLIDWFESPFDGGYRLLTEFFYELANSRVELDEGTMLVDHFAFLVPFWYGEEVSTNSRSRKIEPSKPAGEPAATKNYKQSLPCEPTRLMAPILSKLL

ELAALSKKQFKLNKSFETLCVILDTFAGQSIVVGFKTKYVQNVNEYALNVISEYPERAAVTFVGFMTRWGSRINDGRAQIMQILCRLVMDKVTVNHSNALVHEFPK

LFDKQFKFGALEEIEMFRMSLQRLSDLAFFVINMNNHCGVRNFHEGFVDWINSWEFRVRDMNYYSIEVIKQLSYTRPSDNSGSVKIEDWSVETLAKAFQVMAEGTL

NATNTFIRDVSRIVEDSRSELAIETSFGKSGATGSRQRPRKSQTSSRSDSTETRQPPLFRAKSVDPVASEDVGGSILQLRDLQSICMLIDKWSDKLVNGETQGLELIVKL

AEINKALIEQPNNLNTANKLASMFAERPTSLDFLCAIKTALKMGELCLKNVELNHSKQIQSSLTWFISMWTVDFMPGVHKFSTAEIYKPGSKTANRRQSKFLNKFLQ

ESRLAIEESQQVYAERQLDRGVNSLAQGLGAAIGVSPAPANGAAAAADRESKLVIENAAIEDYIGLLYDDPLDANDNIGRNNKIFEEKSMRKAVKVSHLDTNLLIVS

YALVYATDANAFANPNGLVYREAFKLMFRDIKQAEGPLRFSQLFQRLADVFRRKAFEMTDVFAHMTDINFQDGEGLYEGIQAKDLKDEKLLFEAIDKPTESAIFGD

RLLLKIGKKPKFNFQRIANTLATKRAKEKELQDPDDELIPTSPPLPTEIRSSSDNISPDISPRIYDLSAKNDTNENRAPEADGRIPASWNVLSRLTEVLAEISLRKIAYEKP

YDPEPEQHPAIHAVTLPPPLTAKLQWESAPNTKARMEEYVQEHITTITIPTTSFKSLDEIITQYINDVTQDCDYNLYIEVLAKPDACLRNLVTVFQLKQSLPATKRALLA

LYIENLFVEIEKNFIRDVSSAGNRTISLCLYFKIAQLFSTPENSKSNKITCLPSTFVAINNNLLTHILHLSILKSRMPQGRVDYLQDPPLVKTSLNCFSRFVLYADRIYVED

EADLVEGDEVSGSDHGTHDSTSADTEKHHKLRTVMTPGDGLNSDDFSKRHELDKLTLKVASESPEVSASATEPTAPSDDRDHGDHAGNTSDAQDFTVNSSGHKLN

ELNLRAEKMHLRTKVREFVTGVMQTLTGQAVQQNATSRSLLFVNYVQRVAKLLGAGHVVIKDNLVAALLSKVIQLQIEVATTEGQFCNCITDIAREILPPAPEAGEE

TGEPPSGPVSFYSYSILKGICDLATTTLQVNTSRSALQLPAFVIEPDPLQDQEKIADLAKTTSDALQKNRQADKSSAIAELSSVVFKLSSM

SP2.2: Glycosyltransferase family 2 OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZPL3|C7ZPL3_NECH7

MAMSLPHLGSGGGPHTQPSLPSLPAHLQSDTHLTAHLASRFHVSLPTAQLSSHALISLNTYTSSTKGPDGGKEGSAMAGAEDLADRAYLRLGHRSENQALVFLGESG

SGKSTVRAHLLTALLNKSSTPLSTKLSLAAYVFDTLTTTKTATTPTASKSGLFYELQYDTSATTNPILIGGKLLDHRLERSRIADVPTGERNFHVLYYLLAGTSDAEKS



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

100

HLGLEDSAGPTGTSQKRWKYLGHPTQLKVGINDAEGFQVFKNALRKLEFPRAEIAEICQILASILHIGQLEFESTSQTSVTGDDSGGFSHEGGSTVTAVKNKDVLSIIA

AFLGVSAADLQTTLGYKTKMIHKERVTVMLDPNGARAHAGELARTLYSLLVAWILETINQRLCAPEESIANTVSVVDFPGFSQQTATGSALDQLLNNAATESIYNM

TLQNFFDRKADMLESEEVSVAPTSYFDNSDAVRGILKPGNGLLSILDDQTRRNRSDMQLLESLRRRFDGKNAAIEVGAATAKLPGSNFMTENTSACFTVKHFAGEV

DYPVKGLIEENGEIISGDLLNMINGTKSEFVARLFGQEALQTVTHPNERTAVMQATVSSKPMRAPSVMSRKTHRTARPNTAYRRQQQDAMEDLEQKSQAGESRKN

VKMTIEQGASGQFLSSLENVQKAVTDPGTNAYFIFCLKPNDRRIANQFDSKCVRTQVQTFGIAEISQRLRSADFSLFLPFGEFLGMADAETILVGSERERAEMVIEEKQ

WPNNEVRVGATGVFLSERCWMEVAQLGEMVSVSGRFGGLPSSDAGDGLTPAESTPFGASKEHLVSGGNTPLMYGEKAKGGYFTDDSRSEAGVSAFGGGDMFKNL

DTREQMAERGNEKSLEEVEEYRDKPSRKRWVALVFVLTWFIPDFLVRLVGRMPRKDVRMAWREKLAINMLIWLMCGIAGFVMVGFPLLICPRQHVYSTAELSSYD

GKKGSDGAYAAIRGFVFDIGAYQINHFPNKLVSEDTFLKYAGKDISALFPVQVSALCQGKDGSIRHEVLLENRDTNITGQPQLLLQRDVDLNSKYHDFRWFTNDSRP

DWYFEQMYMLRHTHMKGRMGYTAKYVKKLADTKSQYIAILNGRVYDMTMYLNGGLRMKGKNDKDAPNIPGATRFMDSKVEGLFQSKAGSDLTKYWDQLRLD

ELTKARMLTCLNNLFYIGDVDTRNSTRCQFASYFILAISCVLASILVFKFLAALQFGGKNAPENLDKFVMCMIPAYTEDEDSLRRAMDSLSRMKYDDKRKLLVIICDG

MIIGQGNDRPTPRIVLDILGVSETVDPEPLSFESLGEGQKQHNMGKVYSGLYEVQGHIVPFMVIVKVGKPSEVSRPGNRGKRDSQMVMMRFLNRVHYNIAMSPMEL

EMYHQIRNIIGVNPTFYEYMFQIDADTMVAPDSATRMVSSFIDDTRLIAVCGETALTNARSSFITMIQVYEYWISHNLSKAFESLFGSVTCLPGCFSMYRIRAAETGKP

LFVSKEIVEDYSTIRVDTLHMKNLLHLGEDRYLTTLLLKYHSKYKTKYLYSAQAWTIAPDSWAVFLSQRRRWINSTVHNLAELIPLAQLCGFCCFSMRFVVFVDLLS

TIVQPVIVMYIVYLIYQVIANPSVVPITAFLLLAAIYGLQAIIFILRRKWEMVGWMIMYILAIPVFSFALPLYSFWHMDDFNWGNTRVIAGEKGKKIVVSDEGKFDPKSI

PRKKWEEYQAELWETQTARDDVRSEVSGYSYATKAQGPFSEYGGYQPSRPGSTVGFAPQNMSRMSLAHSEMPGNRMSQFGGSQFFSPEEMVGMPSDDALLAEIRD

ILKTADLMTVTKKGIKQELERRFNVPLDAKRAYINSATEALLSGQL

SP2.3: REVERSED Predicted protein OS=Nectria haematococca/ AC: RRRRRtr|C7YTA2|C7YTA2_NECH7

SSAVPGGLFFDLEGGHGNQSRHENEALQELLALFPDKEEGQGTGISGNNSRAGPSPAAATAQHLNLKNHNDEGQWAAPSGFANTPVTGFMADYGGNAENIMGPGT

NTVSSGSGYSYPPSFPAGAMPHMGHASVPHTGPSLTFGAAAAAAVAANNASTEDMQEHLAYMEQGEHHPPLSTPTTLLSPSSHPMMGATYSFSRRASGPTPLGTTP

PQLSSIVKVDPRRRNTPASPATNKRKLSPRQPGDTSRPTEQVPLSGSGFDISVDSLRLNAADFSFSQGGPGGINSYRDFFDESHFGPTYRMSNRALAKVLEGHAHIIDQ

LTERQHQVCAWAYRLEGLFQMERSLFDSSSGFVNVEGQSSQKSYHAGHVHVTGATCICFGVFAPWDVIGAQKGLQVLEMIANAHLFCMNTAEIQWSQHQGTEALE

ALDIPLFPRYILCHILHYIVKSLVLVTSDAQGFLANLNSFVDETGSSWVDLDQRIKSLTSLTHWPFHSDGKVGGAALYRNTKGLVRTIDILMGMSGQPKKDSGQFYQL

NSGTQFFEGEVPLSSSNPSWSPLRLLITSDSILSPRKSGTTQFRDLLYCTWFLRRRMEREVPTMRAQADTERHIELAVAMGTASTMLMYARKGKGTATFASVLLLLA

QLADISPEDTNIERRARAAFDESLNAAAQYGSPDTTHRAAVASIAYSLFKPLQNLQLRQRISSEDVIYYPKGHFRAFYTDLLAEAQAPPPSLDRPLPTHPSLSATDGPS

ARAEIAVRKAAPEGAEAGLSVSGSGEGKGAGPMNSSTPSSDDEGKERLKAELGDVRKLLAELVDTKPGRKKPVADYICPCQFVQCAECSPRLRNCKISVKRKRCSK

CNMSERPENSMRRTPLREIGVQPRPIAVPHVGPIHPVNMPDYVSATM

SP2.4: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7Z424|C7Z424_NECH7

MAPSRRNDPERRLSHSRNDPEDPSDEAARDLAALEERYPRTSTNFSRPRNSRRSHTDPNNDPSQRTSTDSYVRSGPRHPDNEGPRVRTGDPYELQPIPSRTELSSDLPR

VPHYSMDRTDKSLTSPADKASLNFNETTNAKSSVRDDIKKYLHERRQRKLGPKAKPTWKDRARKQLGEFHQKVILETILRQKPLVPLADGRHIPLNPDHRKPEGLTD

ERSGKPYVSNFIRSSRYTVYDFVPKQLIFQFSKLGNFYFLVVGTIQMIPGLSTVGRWTTIAPLGVFVAFSMLKEGYDDYRRYILDRVENRSEAWILGARDRVGEKGRV

RHAEKMRRKKKRQPENGEEHMLEDIETGTVSTAKTSDDGEWTSVQWQNVRVGDVIRLRRDDPVPADIILLHATGPNGIAYIDTMALDGETNLKSKQACSLLAERCS

TMEGLRSTQATVVSENPNLDLYTYEGRVTIDGETLPTSHSNIVFRGSTLRNTVEAIGIVVNTGEECKIRMNANKNVKAKKPAMQSVINKMILVQIFIVLMLTMGLTIG

YYLWKDRTEDIAFYIKRPGIYNASVPWKEIFFGFLIMFNTLIPLSLYISLEIIKLGQLLLLQDAEMYDPATDTPMVANTTTILENLGQVSYVFSDKTGTLTENIMRFRKM



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

101

SVAGVACLHDMDIQREEEAMRKRLEELDRPKKGKSKMRGQSKIKGFDGEYDDDAAGNGFQRPQPSRTLSTRSASHWRSSVHIADDTDMKTEDLLNYIQRKPNSTF

SRKAKHFLICIALCHTCLPERTDDGDIAYQAASPDELALVEAAKDLGFLVIDRPAQAIKLEFRDADGNLQTESYEVLDVIEFSSKRKRMSIIIRMPDGRICVFCKGADN

VIMQRLRLNHLAEQKMKDIGRRASVRKVSEQDRALRRMSTQASDPYGSPRNSFGFSRGESSNREGLRLSLGRRSTDFNKYSQQHMASPRESMEMSSPRQSLGRAPS

FDEVDRRIDESVAASEGAVFEKCFQHIDDFASEGLRTLLYAFRYIDDDSYRQWKAQYREAETSLVDRQERIEAAGDLIEQKFELAGATAIEDKLQDGVPDTIDKLRRA

NIKVWMLTGDKRETAINIGQSARVCKPWSEVYVLDATVGDLKETITTTLNDVSRGMAPHTVVVVDGQTLAKIDDDDDLSLLFYDLVVRVDSVICCRASPSQKTNLV

RSIRRYVPKCMTLAIGDGANDIGMIQASHVGIGISGREGLQAARISDFSIAQFRFLQKLLFVHGRWNYMRTGKYVLGTFWKEILFFLVQAHFQRFNGYTGTSLYESWS

LTVFNAAFTSLPVILLGIFEKDLKAETLMKVPELYMFGQRNLGFRFTQYFGWMVQGVAGSFVIWYFTFCEYDKTLFDEDTSLFAMGMVGFTVAVVFINIKLLILEVH

TKTIITFGGCVISVAGWFFWMLINSALYSEHIGPYIVRNAFIHNFGHTLAWWTSVLLQLVALIVMDLVVQAIRRVYFAGDQDLMQRIEKDGNVDKIFNPASLEDGDE

EQKVQQEDTAPRTREDHHRPRFTPPAEERESPADQWRR

SP2.5: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZAI6|C7ZAI6_NECH7

MSDGLRDPNRPRCEGWHSRDRWEGIEEAYEAPKEAQPQEKWKDKVGKFAVHFVHFTGLQQSIFGERRPSPLRDRKHRPEPDEHRHRRETNTRPKGRHRSPDSRRER

TNLSNHPRPQAYPFDTSQPTESGSSRSRASSHTAVEDPYDSQVDAHKVATPSDSDDDCDGLSVDVKCHPSGSGDTHERDVSKTLAGLDINQKKDVDIIAPSNPCGGH

NSDVNQPLSSLEPAGNKDLNVGTPSNSDGESTAGFHDTRPHSQELPTTAINVDTLPDADEDDDGLCTDISSSPSDSDRSHGSDLSNALSGLEIDHDEDLDVTTLSDSEK

EMTASLRRLRPCSPGLLTGASRDTSAVPNKGSLKDHGDASHPLHAILDPDHRDTTADSDSDDGGDHHGTPSSSDEASSSDEVYSSDEEFPLDETSSSDETSSSDETSSS

DELYSSDETSSSDEVYSLDGTSPLDEISPLDGLSSSDEVYFSDETPDRDEDEDSDLESGPSDSDENWDAPLSASPLHPGEDHEVEDTPNSAIRPQRSVEANVGDTSSSSE

DEDLVTSDSDGSNDVSSENEEQVDDELGQDEEYTTINPHTSPEKREGASTIVAVDSVEPVVPSSPQENVGSSEDSKTDAASSHSTPNTEGPGSPPQSSSLDKLPDYLFV

GSFVRRKSRHDLHPYLIIRIEQDEDGKVCIRACLCTSRPQYDKLKQQYKEPDQGKKNFIYLGGKEVNPAGFKSDGIELPTEPELEIQGPEMRYFTYLELDEYGRFKPDD

FKKLSGGPRQLTSSDLDEVLSQCQLHGCKKSPLRASPSRNRECSR

SP2.6: Putative uncharacterized protein OS=Nectria haematococca/ AC: tr|C7ZLE5|C7ZLE5_NECH7

MVSRSTQGRQAPKADLMFVSITRPDQIKDRNTQRKINRHVMKPIGMARRRKQKNEKMEVALKSVETPSSTAVVPWQADDNIEFASRLYMQSIPSPMSADQELNYR

HFSGRAHKIIAFLVREWDSPVCSMMRELSFTLAMMEDSAMHVALALTLVFAQEHRQHLLEESNSSLDHYNKSVGLINQRLTTIGNQVCDALVGVVITLACYDICIFN

LDRWVIHMQGLCGSMMRDSPSFFEPLEDPLPQQGASRAPGAIASTLQKRLPDDSDLCTLLESMSEFATAAREKLQWTKDPMLMQELQLVVSKMLRLPRHDFLDIRD

DGVALHEVLRLASLLFLSGPSTKLAGNKNGNTILCYHQGRLPMLLKSHKLDWTGLEDLELWVLVIDALVETGQDQEWILGQINRTMLVRRLSWDDVLGAVARIAW

SDGLWTRTVDQLRVELEQI



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

102

5.3. Aislamiento: F. oxysporum FM4 / Medio: glucosa


OG1.1: Uncharacterized protein (Fragment) OS=Fusarium oxysporum/ AC: tr|F9F0T9|F9F0T9_FUSOF

NNWMHGDLKPANIGIRTWTAECKSIVLLDLDDAEESPFPGRHHPARPGTGGTIGWLAPEREMTGYNELADIWSIGVIAIEMIWGRHPWRQWKNPWRTGSEASQLQK

EFQDMYGEAIESLNKLHNEALRNAVLGMVRHPYAETPAQCQSRLTAKEALSLLTDAENGENSKWGPPGD

OG1.2: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici / AC:

RRRRRtr|J9MLN8|J9MLN8_FUSO4

PKMSRRAVWFQANYASKTLAKNNFGYVAEMSRITRGEFTLPGCSEETDLYEFGMAETVQVIEELTLQVFPGTGYLLPGLNVWHGDPKLVKKITDLYSMLNRATDIF

FYTVIIDYYGTKDNFVTTFDGETLVVSTSNLSTDPFTLERIMDSETAHHSWGDIFPHFSHTNQARNAEIFRYAINMYMSWENVTVEFGGLRAIDHGLRGLGSGPVLVK

VPSEDDRVPFLGQLTKVLCAFTEKRESEGEETWDRVYHKLAQSVSIKDALRGSSQAASIHRQLEEENIGYFTMANQVIVDCLEQNKKLLANIRTFKKSYNVQHELLS

KQARSVHKYLGEFRDVEAKQREHYRRYGYLADLLRHRPHQANWNGWGIAMSKDLKKKAEVHRPTDPNCSFQELSTVVSGSLNPISALNPNNQKLADVKINEDAS

TCLPAFLLTLAM

OG1.3: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MTI6|J9MTI6_FUSO4

MEATMQTVPSLVGTGTAIAAAASGLVFGQPTTEPNSFSHPTRRPSHSRRVSIDREPSKQSQSPGDFASTRPATSNTAASALGASHYHTLPRPTTASRPPLSRYQRPSMP

QTQSTPPPLALSRNSSFVRQTDSPAIIPESRDSISSNGSWIRRLSIRPLSRHESTRSSIGPDAPSIFSHGSAAPILRNPTTATLPPNKLVKRSTSTRIDPDPLPRRRAKSHLQIL

PVLRRPATSHQRSATLQQFRPDSALNTPTDSNNFSFDNPSRPHEFLAPSPLEPPSRSASARSGWKSYFHSKRLSISGRTGSGRFGELSPHGRAISSRRICIENDERNRVHL

VKPRMVSAASAPRGLLPAAQIQPDTCTHQSTAEEKTPSPEGTPSRTPRKSISMPFASAGNWAVRTTGSIRRSKRGAESGIGNKRHVSEPLTGAQSGAEPRTNPPLESTL

PAPSPLSGRQGSFLGSAAAVQLKGRKRNSSSPIPTVPRLANFNVDSSRLGSSAGVSTHQARPNQPSGSSTSSTAMSQLRAPQHDRTSTTESSEGDTRDCTSGDDDDTD

FKSDTMFDSLRTVGSGRARAVETPLESMYDESPPSTAGNGTKTKRLSIHEILGRTWDEDDKIMEEDENASTPVRTVKRSEASPRFRLESRFNSSPYDVLTTTTKEYSRL

SLDDEFDDDWARDDEFPCNPLSPPSKGSSLNSRGINPNVRLALANISGNGLPDTNGHDATNDRPLSTLFDWSEPPTHDKFDTGRCLRPKTAYAKEMDSRGGRSAIRK

GPTPTHVRSQSVPVVHDAPEDSKTTGSKYGTWGMGTKTVSEDWDDDFEFGAGPVGSNDKNDKIFAVPESIRATQPSVKAHSGHIREFSLLVNDLKRLCRHGRDMD

MLEGSQRHLWKEADGIIALASPDEESLDENDDRKSTSSINFDAFDIDETFGDEGFDAHSMNRLDAAFDGHEPAMSKTTVVRERHSPRRRSVFSPEDDIFGNWPLNDN

PPSNRPSRPRTPENKYNKAHDVSGVVRSVIGAMQHRAPEQAPDNGKVHFDTNSLKALVKRAGDLRDTLSDIVRQADQITHSPMRTPRHERQHDSSPAFTRVFDDPG

SSPPRRVARSRGNNSLVEAASSENSPSSGLPQRMQMMTVN

OG1.4: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: RRRRRtr|J9MJT5|J9MJT5_FUSO4

DSDEEKLQKKLGAKGGYQRKGTREMLGDLPCKSKSWEKSGESTNARCRICSRGHQVFLKHLGYKLHNPIRVELHSFTQDRTAKPPIWKLWGSIRHVHTDVAFSPQQ

LCFLIVCSATKVGIGPFKTLTQMAEDPAMGHIHDLSLIDQETKLIELDKQGQTKNDAGTIGSLNGGKKEQMFAERRKTNEEHVLELIAKIDKGKVQALGGTKISEVITP



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

103

LPAVRVKNWDVSGKGIGKDVTGFTAVLGRFAASSNRNSTNASLRTRILADLVSPVEGCGSVELSPAPIKEPAKAEGHVKALRRYVEECEEASPASWEPFPTMGPTLG

YPNDKTKKVTKWVPAEIAVQLDEDKVEKRVSSPKVQLKTITEDDSEFYSSKAASKRPRLSRRTALEMVQASGQNAAKMGSKAVPSVEEVKASKKLDQTEKLDEPP

TPITEIDKRPARVPGLNHPLDDLYENEVQDKAKRGTKRKKVSAEERSAVKRKRLTRAAM

OG1.5: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC:

RRRRRtr|J9NMQ3|J9NMQ3_FUSO4

YSFDLNAMPTTSGHANDPRIPATEHTEDDTSNVNSTSHGDGAQQEPQGNAAWGANQMQQFSWTPNFGPSEWAYRVREYMEDIQELTMKSTEYVMLWVFAISLLC

CTGWIFFIKLGFANAGRGLIYPPAYAVGFNLLWNATTSVSMAKARVKLPFIESTVVWAVPGWSSAYFFVNIACFIVLVMNSAGGHSKEMKDNAASYVAAILLQSVG

MGLAGAMLLKRRGWSEIVILGPVTCVCNIIIMALNTLFPKNIGANSFFTTGYYMVFNIGTLQQLMQLGCGTMTRRGLSSNRAFLAKYTDHGLTLEYQHNAIIEQLED

VLAPHTMDLRRFRSLSIGAEVLRGKKVLFRPTEPLYLIGAALILGPVLQLGLPIRYAADSNINSTGVNITTATLIGVTISFQYACIITGRIWKPATESQYLPVLVSIAGVA

VGALLRGVLLMPTARACIQFIAGICFTTVAALLTKRRGISDGSPAAVLAGIAAGGSLIAVILSSDEPCLDIHGEDDKCSHNTSFHDKFVSMALIGNIVGLDYGFLLGGS

AVFLGITIARSSSGAFNDPKHWGMGLVM


OG2.1: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9FC23|F9FC23_FUSOF

LYPMWLADCQALNMPNVAKAIADIVTQNAPLNGVPSHALSLARKVISESNVQVSDRLQGETIVGNRHSGTFWFLMEDRVLLTLAHELEYEPETLCRAIAMLSCAFIG

ETALPGMLTQLNPTLRFPVPEPNHFFPKNASMYSMMESGWVKGTARSINIKQPYRNHMYMIYTIFTLAALQYSFQRRFLWFEAFQPFVKQFYEIAVTSPVWKEQIAN

FVELRATAAQEPKNSSKSELAGRLKEMTFLVPDDKSMGMNRCHDEYVGQLTTYSTDEQVLRIHPAFPVMIPITFQLDRRRSEKKRGLTQNLSRFLQLIREERRCHRA

APHQIAWKHISGDHGRMKIRRYSASISRVLDINPLFRDIRIFDQNKDKHQLYQGPVEVEDFKGYRFESLHPSFNELFARPIRHDLKEEFKNRWRRLKYIYEYMTPKVT

VFDAEFSKKIHSPLITEAFRTINTETAAPLKVNKAFSPPTRSVYALADNLLAVILRYADEDPPCKFNKQIQDVMTEMSLALLPFATKLVSMVEETYDWPPKKQPQGPQ

GPQPTAKQAAKSPDPTQGNTPAPTGAANSGNAEGEAKVPTGDAANATGPRSSATGPRPPDQKTMSPSASAKGNSAVSQARQRATRDRAEQNKKIVLLDERNTRLQ

FYLAQPYSKAIKLLLQFVRPAEKHGLGTILQQIFTIWYWVPTEGKFDDFGLAITGKADDLSLLWLIRALLKRSKANKYSGAAQLYSTLAQRAANLDTPDEKFKRDNF

YGWEAWAKAAGIDFYLATGYASDAEDKQKLKELFMGKLTYFEAKQSPSFYNLNTNNIVDLGSSLEEPNEYHCKAQERLKLFAEQIEINPLTYIRSLQNICVDPLNHK

RAVHAFRNIIWATEHYGRYAFSSAGGANQQGQQPLLQLYTQNILSFIHQRWTVLDQWATIDDWVNPLRDRWAGLLLKLEGSKVDLNTQNTNALSQCIVSADHLEV

LQQFNQLLPVHANTLREPLQHWKRISLQIAEDCVRAFDTSAEKQNHFKLLSMFSQFFARRPTPADMVGKIINDLAERHQEDQWMETNRWACELLLDQFNEHKAFD

QLIEWQQLKQACLVWHDEWLMYEAQSFPIVGTRAKIQANEYLKQAKDWMGNQEYSLAANTEVFQCRRRWTGYFLDDEQLSAYLEVLADLNSERVTASDVQPKI

ASNELQVLATYWADYTKAEFKLVHPPIKCEPWTKAAGDLISQIVNPRKDIQRSHYDKTLLAVIGRELDVRDDKAVSSWYIPFLTVWLNHALQSDVHQLQVLPEIVD

KVKIDGLESMFRRHTAMFSEFKDDIIVTPERAEMEKTFITLLRSIPLTRFDNQYLQINANTEVAGLLLQTAQALWYSDSLTDWNQSTLVYSLRASASKSLSKDFIAMF

RNRMEVDAARTGILFAHEMRVTLETRTIKPDEYIRIVLDLFKSLMTPDQRHEFSLMKHLVATKEKLTPWTGESRFVWGEVMNLIEECLEISMSKEVLTALVSLFPRRN

DGLVEMRLAVVQIEKIMIKTQIELDYASMEGSPTNPDQNRNVGAAQNAIANYHQVHERAHKSQLAKMLSNIHQDIVNPKRQGLSWLINVGSTFNSSNMAETAVQSL

YAVIESTQTETEGDADADEMPTDDPVSDLIRKVISRLERNDDFKKDSLHLCDQIEPNESKLCKELVKQIAPMSKQIWEDSKSNLVIRVVQLTNIINTLFKDDFKEKDTP

DATLITQTRESALIVQTVNPFLDLDLDGWYQPQVLNYLLKMAKKCLDTLALPVPPISSSVHDRPKASPLEYRENLQAIFEVLYKIMKLRFLPPIQYEARGVPQSSTNA

QDSELKRKKTNPSQSLSRAGFAASKGEVRREEWTWILWMMNLCLRKSEHSANQPTALKRLSSIMLTIYRDRAEYFLDPHRVLFHYISTMQQANQGEDVLVRRPAIA



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

104

WAAVRENQGTGCRKPLMPAILELAQTVLARGENQNAKLLSLYVQTVIKPPTEYHAIFYGIVVYAAHKNIVDELRIFTWGFKIIDKRADQLPTHYYKVLMASLQLVE

YRTHDIGPQAQDDTTSEPQVKWIKSSVADIVTRDMLRPTRNQDLQKWNRMVDMAVIPNVIYHLLFHKMKNSASKGAYTDLCRLVITKWFDVADSCIIKQYIFSFLE

QTIRLEDSTVCEILNFLPDLDKPARELSKVLITMLEEAAQYAPLRLHAPLTHQRLHTELEKGISKLWDLHEKKDMWKEASPFHSLSEFIHIANVMAIFKAENNQSILEN

CRTILGDLNEIAVERLASSDAHALVQALLRGYKLDEVKGFLYAWIEKPYRNMYRYIPLRFPSLQTRRLKEELGLFCDILREKFAEAPAPLLHFITLIATIIKMQPHQDFF

TFSIQQLASPEVISDIQELLRAGIEVKFYSTLLKLLRSLNDLGATSLRKPDSLSQLVPRLGGQLLEKPLRRDVSLVSKLADNAAIITPKSESYLCKFFVSLIKTKTPQNSFE

EFTMATTLLKICSVRLNVIHEHTRFEAPKNALSEDSADALALSEMLLRNLNEDFPVWDNKLSMHYTMANIYGIQISFPLARLPKAFIPQLIKDKCPELLEWVECKAAT

AILELSHKATERVHKNMHYLDNGFQQCIQSLRPQKLQPNQPQGPQQTIPLTDEKTIDKTIRKLLVELSTQALCRTKEPLDQPMDKVVYTLARIFETQKSTIWTDGLDL

ETLLYNIGLSGGTKTFWEEEYCSHCFTSSLHSFFPLKGVDSESGFIIATADYMERIASKGAERVDPHDSALSEVIADSLNRTDIHLPGEGANPDFPSFTRKLDVLARGIEI

IAFHKCVNLLFTSAEDKFEPFSHAFMIAKLLRKVVLDESEKKPISRERDSVEFNATNIEYRRAVLDEAQLRLLRPLDDPLQDYGIRLKLQAKILHLAQKKYYGDYQKN

HNNKTAKPFEMLKQIAFDIGMDAPFARDKKSGLLRLDFSSPDDAYERYTLPVASTMFKRNRGGLKGLIRMTTHAHFHSYPHPKLHDFLATMLEDIVPAMIPDLYDA

TLNDVCLELTRLGQGVLDTGARLAVVLPRMLFSLHPLLHSLRAPVTLCLEVYLDRESPKRAAMLLNNLVDLLMELLPLIQKYLQEFKGGGISRFLSRLLLFYNMPEE

AKTSLEISKTVISVVHPLLVQENQNAFLTVAMFALKFLRLLISSKKVDASGVQDIREMLFQLLMGCFSPSTAESALFFQPIHLLATHEFIMDYLHPIEQQFVEHFTAPDI

AHFVTAFTELLDKEEKSCSVMYFNAMYEVPSMYQSEAAPKEIEYYRFVYAGERFLKIIVKVEEATFGYSVDQWHTPANQADIPSGVNCTRLQYFTNKLGTMLNRFL

FKNDVVPDAGRDRPNSTKIPVASFIDTEDWDPPSDKDALYTEPTGAKMQERYLASLKVANPYQRNMAAFKDAIANLIMILYHRADVKNPLKAICEAMNLLLKASM

TQFSTGPFNDQLNRTYVEVTKRIQEPKLSDRVHHILDALMSYALPRMTEHVTLGDGTLTREDLLEDIKPIFIKRFNYNIIHRIAVILEKRTGSKERPCDKLLRLVIDPLRP

LFDNLHSAYQRLLYALFSMTKVQATIFDAFAVRNKIAPSVGTHITGKAAADAHAQQQASAQLCLVNQILPVFKRVNQQVTNRYVQFISVVIIPCESLVKFSHMGKLL

PRNQQQTDTGLDNVSAVPSGPRPSQFNTQSNGPTSPAGPQSPANHPANDLQERVVKEMQEFLEQILTLFLQVKGQLVKHQHRMIDSIIKVCITANEENDTRVLQMLL

DVTEEAHPEFPEPPAPQTPLRHIVELIAMRLKQRVNAAPQDKPIGFQGPRTLQKSLHM

OG2.2: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9N8N2|J9N8N2_FUSO4

MFSLLYYPLWAFASCLVIITLNVLYQKLPRNANEPPLVFHWLPFVGNAVAYGLDPYGFFVKCREKHGDVFTFILFGRKIVACLGVDGNDFVLNSRIQDANAEEIYSPL

TTPVFGSDVVYDCPNSKLMEQKKFVKFGLTQKALESHVQLIEREVLEYIQAVPSFSGKSGTVDVSKAMAEITIFTAARSLQGEEVRRKLTAEFAALYHDLDLGFTPV

NFLFPWLPLPHNRRRDAAHAKMREIYMDIINGRRRGVGDLEKGTDMIANLMNCEYKNGQPIPDKEIAHMMITLLMAGQHSSSSASSWIILHLASSTDIAEELYQEQLI

NLSADGVLPPLQYTDLDKLPLLQNVVKETLRVHSSIHSILRKVKRPMQAPGSPYTITTDKVLLASPTVTALSEEHFTDAQRWNPHRWDNKPQEEAVTDDVIDYGYG

AVSKGTKSPYLPFGAGRHRCIGEKFAYVNLGVIVATLVRNFRLSTLDGKPGIPATDYTSLFSRPAQPAYINWERRRA

OG2.3: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9FMU4|F9FMU4_FUSOF

SKGYDYFGRGSKVGLNGEDLFKQLYERPASPINGRADAYHQEIDLVVDLGVVDMQEFPGKPTKLVGKFIDDIEEPTAAGESAALLAERKIAAWIRNYIYGMSPSKVH

FPSFGHAKCQEMMLTIYSPNTTEHGMIEIEPTEPPWYSHASLFRSENRLNLGKLIESCSYSSSNSAIITDRPALSDLESIVKTKLEIQEPVCEVVLWAAQLAERLSEPSHTI

IRGWFANRNSSSQRFEEIAKISAQLQAEQGDVLHVDNGRSSWMFALRRGQTGAGILTVSTLALDMADTHANLGVVKSNEDATTSFKAIAAQVSKSSQPLHRLTREL

TSLLSQYTEETIKGIGFDRDIAKRLLQVGAVAHHPYPDISVIPVTFVTQRRSFGDSEISDRPRKLTFTNHLGFALTNMVTNEADICIDTIDPLLDQRDTAEIIDVLMLISLH

YHLMLSFWRLKTQQGLFPMRKHCEDLLPRYIIGFQKVSDVVALYARRVESEEHGDRLAEKFIATVKWGLLKWSAGAAIIQNAREDTMDSSGQKWQRANEDFMKA

CTKVLRWPLESEFGFLGSSLLSRCNLTLSASTDFTLAAWYVTSEANIFGSTEISEPTTVIAQSKLSPSVKSGSFQLNRQRARLTQIQQLAAHVCAQGSIGDTEEEESIGEP

IPTLAFLLLSLMSRYSPRNIVRLMDRRAHRWLTQVLSCHDENSNPEPSTVPLWRAAFASITSQLSQEIDRCRGVLQSDGTDVICGDLHRCLDSISVYKDALNHGFLFPC

AYRGMWSGFVAEFGEPIYGHSSQRTNVIHRKYATDDRSAVQAKDRWQKDQCKSAVAFSKMLRQSGNAKITVYKSPVRM



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

105

OG2.4: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MDT9|J9MDT9_FUSO4

MSRIDKLSISGVRSFSPSVREAIQFNTPLTLIVGYNGSGKTTIIECLKYATTGELPPNSKGGAFIHDPKVPTCEVMAQVKLQFRSINDRQHVATRSLQLTVKKTTRSQKT

LDCSLVVVNNGERTTTSTRQAQLDEMIPERLGVSPAILDAVIFCHQDESLWPLSEPAALKKRFDEIFEAMKYTKAIDNLKVLRKKQVEQLGKLQNDEAHNKVNKDR

GDRAEKRMKALQAEIEGSRETCESISSEMEETQDKIRNIRETANSHLAIVQNLNTKREQLEYREEAVKELKATIDELPDDDGKLEGDLAHYEDRMQHLQDEADQNK

AQYNELQTELGKSRKELSAKLSEQGKHQSDKDKYERQLKIRMETIQEAAQSYGFSGFDGDLSDHHVKSFNDRLQKLLSEKKRDLERLQKENSAELDRATGVITELE

GRKAARIQDRVSAKQRMGAIEKRTSVLQNESSQIDVDEGAKAVLDGQMQDLEIRFHTAQKTFENADWDRQISDENDKLHQLENENDKLGRELVECTRLASERAQL

DYRKKELGDRKRKLDTLASTWKPKLDKILGSDWQPETLDSKFQALVKDQSKIVSEVQKCREQIRQKQQKVDFKLRTSKESHEKKSKEAATCQQQVVNALLAVRDN

ATVEDYKEEIEVTESQVEELRNDLSLFDALVDYYTKCKRLLDTKRKCLLCDRHFDDNQAASMERLSKRIDKHLDPKGKVDTEKDLKDTVANLEKLRSVRGSYDTY

ERLTAELPSLREECKVAEAEFDALERQVEEQGSVVSAEEEKQKDLEDMSKTVLSIAQTVKDIAESENQVDRIMSQQMSGGVTRSPDEIHELQAGLSDQMRNLKNRIV

KLTTDRQRTKDQLNSLELEKSELRNKISRAAGQLDKKQDLQNQIQALKEEASHQRDVIQRADEELETIEPSITEARSARDEVLRRGRAKEQVIADARDAVANSVNEM

KMMDADIQDYIDRGGPSNLASNERSIATLEKTIASTEKEVTDLTVRTNKLKQDIDNGDRKKKNIKDNLNYRKNLRTIDVIRQEIAELEDRNADEDYERLQAEARMQE

NHYNRLLAERGSVMGSMKTKDEELGRLLQEWEMDYKDAKRKYRESHIRVETTKAAIEDLAQCSSAVDKAVMQFHSMKMAEVNRIAGELWQSTYQGTDIDTILIR

SDNESNTGKRSYNYRLCMVKQDTEMDMRGRCSAGQKVLASIIIRLALAESFGVNCGLIALDEPTTNLDRDNIKSLAESLHMIIKARQAQSNFQLIVITHDEDFLRHMR

CSDFCDSFFRVKRDERQNSVISRESITKIF

OG2.5: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|F9G3T0|F9G3T0_FUSOF

MARLSHCTVPSINRSAIDIASAELGNLLLRLQKTVLHTDSDRERRLRSSEFERARVASNLEYARNSLTKLEHDALGIKAPGRRAEVQSDLNGKRELLELLLDRLEDLR

QVAIEEDEDDGSTDGEDILSEIIPTPSDSMVDSISTGQPTESSGQDDDAESEPPEATTIPVTTATVPAPASTTPSDTSTTSQEHKQQPTQTTQNLRSRGAPSSPSTPAHSTA

RAALFANRSKPPTPQTSTATAEALLDHQRAEQEALSESILQMASALKSSSQRFSTTLEADKDIVARAGEGMDKTEQSMEAAKGRMGMLKRMTEGKGYFGRLLLYA

YIALLAVACILVVFVLPKLRF

OG2.6: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: tr|F9FZJ1|F9FZJ1_FUSOF

MGVQKKTRKFAEVKRVIGRRDARLKENKLKAELAQKEKEKKTINGELIREAPQMPSNMFFQHNTALVPPYNVLVDTNFLSHSVQRKLSLLDSMMDCLYAKCNPIIT

SCVMSELEKLGPKYRLALRVARDERWTRLECDHKGTYADDCLVDRVQKSRIYIVGTNDKALKQRLRKIPGVPIMSVARANTSLLESFLDLQIPLTPAHYLTQMDSSP

NDNDQSSTSEARQKRSRVLLSCAPCRNSKLKCDREQPCGQCSKKGRASQCAYAPKPERKRPAKGMSARLKRLEGMVREMMDSEGTAPGTHASAGAGAGLANGTA

TGPDVQGHVVHSEKGATYVGATHCMAMLEDIEDLKDYFEQPEEAGEDQILDDEIDPTEVMLNTRAGPRNREELLSRLPERKVADRLLSRYFASMSPSQHIVHRPVFT

RQYSKFWQDPNEASLHWIAQLFMMLSLGVFFNNFINSSELEGDSPLPAQDRIRHYKACAGWALVWGKYTQPSSATLPAFLLYVESSFLFNRAAQMNCYVLSGVCIR

LMLKMGLHRDPSKLANISPYEGEMRRRMWNMAIQVELLVSFHMGLPSMLQDDHDFDEDSTELPLSRPPTDWTSMTYPIHKTQILRVFGQIARQAHALTPPSYAEVA

KLDNLLHETWKSVPSFMMVRPLDECVGDPPVLLIQRFGLTALYNKCRIVLHRRYLAEAIPQREHDYSRRQCLEGALSLLNYQHIIWEACKPGHVLSQHGWFVSSLA

VHDFLMAAMVLYLVVKNENYSEVGSDYDWMSQTAPTPTKDELICMIKRSWLIWADVSRDAVEVKKTADTLATMLAKLGAPVEEPANALEQAVPSVNGDKEYSS

LGAPSVDPSTLGSIGGDPALLSTLGLGSSTGSTSDQTPLDLNLAGDAGTSMNFTNMGTEGLQFDPAWMDTAANNMDWRYLDISLAHSHDAGRNEDTGQTWIERAP

PLEQMDIMGSGIWIPDHPKST



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

106

OG2.7: REVERSED O-acyltransferase OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9G8P3|F9G8P3_FUSOF

SSVTTMQKSVSGYKAQWAYFYMLAAFPQGFITFSVWFITNGVIKGTHGLKMNELPKTLAILPLQLFMGLFAVGAVTLQTVVLIEHLIASVLFVVFSAAQPSWGRGIM

PMYLHRKFYTYVPKNWTRWYAGLSESNWWDDYFSRDGFRLVEALANLFSQFLAFFGALWIVLSITSLKLLRELISMLDLSAIKDLSNRLVPAAYQASAVWMFVSL

GFIEGVRKAVFVWRIKDTRPYVPQYVLTPAWWFYVLNSFTINQPYPCQTYLEPVLEREGEVPHLYAHRLDRNTFAYSATKLWVAIAHMETLTGILPHHIKFYVVWT

TLVLALTINFLHAWAVVVWTKHFRKREQESPGGSPSDNVRKLSGRAQQAAALEILYAALLHCPILFYLLLGLYIDQRSYDHCRVCILVGYKQINELMLRLNGVVLVI

VMLNRFGIFSPAADSDHSLCSPRTQKHVAAVHRYKQGPKKPTTTTATGNGNGNTRNNPKNQTVDHGSRRSVSASGNSTKNHLVVM

OG2.8: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9FZ51|F9FZ51_FUSOF

LTDWGGNNIEAELKRSILSPVGHNLVTNRIMSDYRKQNLFLQRGHRLQPDTEGYKDIYPAPTFSGSLRFLYVVSCKRVNLFVGINRQCKRMHQQAGGIKTHETREAS

NDMKQCCTGQSCSLEGCFLCIVPDTLEKGTTPCKRRTAEEILADYNKPLGILEFIGPHSMMASLPIESYDGPWMVQHKVWGSVLVSTTQPWGCASANDTIAACMED

FTPVRLAETLRELEDADPSPSVHSNFDVGYKVYLFIVCKRLFTLAYKKSFTYWSELTDVGPQQFGRNEGFEVGEPFQAAHFDVGTKTVGLAFDAFNNIAPDQTHRNT

LNGVWSAVPINRGMHYVLKVLEALYCLRLVHSIEAKQLPVLGYSCEVLFLFSDMSLLPPYVDLPRRAYPTGTGFYRSMFLQCHQRESDKRFEAEIKNEAGGFQAGV

AIYSSVTESLVRLHSLIHEPIKELLTMGPQAEIGRQQVEISSITFGVSKVLTDSACLEGVNDGKADILHSTRLGNVRLTNRLRRYAALLENMLQSGDTNNNTTAPQPQV

PEPTVSDSFAYSAPTGVTSSHSEADDRGWSTDSSAQAPLLSEVLSGPLSPTFMDPVTPEDERAKSGGIWYASGMQKEVFEEFTGQSQLYGPYSEDIGKWIIPVFANGL

AKCLPCVFENRKTDEPHHRAIQHTHRRVTAEYYVEFCRYHMMHGCGSAVPGSRCVNSPFGKGITQREALFTEGQANIKEVMKRNEHAIGFPRVDEASRDLSCPTQS

AERVFDPDQFDTQRLIRSENFHAFTGYLHRDDPEEQCLICTGVPYKWNHKRDETQEGDGEEGEDEDIDSGWDFSAQNEMFSKQQQQFQAMVKAQRSLAAKKRRER

EEEASTNAPSATSIRDVSAGLNVYATEFTRPRKQRLRKLVLAIKPHVAKFEDKTSMMNLLSVITRSSHAEPMFNSRGFKTLAIYVFSKPSEESMDDDSSKDELIAILML

HLVVQLFTELRTFPVSPTFKGAVLPYLLSYYVVQAFMGTSTFAGLDEFMGSPVPRAKPEYVIEEATKGTRKAMKKRYALESEERQNKNYHAIYPDIEEIYEPRLEFTG

VDSVGEPPKFTAMEDLVRHFDEQEQYKEPLKNCIENFSLPKFCLVHTIDRRMALLRSKTEDESSILSTRDSLLVILLHIMDEVVDLHQADDQAESKLEFLGKVWSEMG

FRDIISALVRSPNCIVLATQLLFIDRHHSVDRQGVGRYTSAQHRLSIGNRVWMNAKIQALWACVRLPFDFSAILYDEANYNKRPVQPRGMLRPKSKLEQQTFSLLNR

MTSVPLSRGCEILWSLTYHLAHHFSIADKEVVFKVVDYSSSEGDFEFDSLTKFQVEDKIEGQKFRHREAGISNLIVTKTTFRIAQQLYHFEDPPCNRFAEALNRAQLNI

QRTVLSATIWSDAEYEVHEVVARVNPGICQHLKVLDLFQMLYRPECRVREQVHPAGFLYKLDQYFHYMRRNTVSGSEFGLVADPSVDWPHGVQRTTLFTYLIALL

STMFNGREVVEATISPTTLMQLSLNIISHDPERDGVLYLQALITYLSAFRLALVRKFEPITVVTSIYLARLDNRVKKWMRLDFLLLWDLRVRRFVDEAPPVNERQTYV

APTEIWYRGPRPVLKETKGPTKPIEANAKAYISPAILPEATDSDSPTAERDRARAPAESQTQAQGQGQSQAQAPPPPPPPPYGAMTAEDEELAQDNDRWNMGLDGV

DGRADVMMVDDDEDEDGGAVSSSPSHQGQDDMDADADEEDEGDDDSDDDIEIQVGTGTNAAAQLALIFRANMGDFRRRSDVIQDDEEEDDILGMTHTAQSGQR

WPNMVQECVTRRLISNDHGVSCGSIDSLWEVLAGCMQERFTDRASRITVTVRIAEMIAAMELLRKVDPMYTLISRGIADTEWANEAALKRSKRCARAVQDQVEQV

THKEDNWLILAFETCPEADPGYYKSSLRSSQEDELISEQTKAQRLQEPSCSIVDCIYDFVRGITMQLNTVLDEPLGAAEKGKGKDTGGQVHSHITCFLPTRWAEDDGC

DCCGSNGVSIHIRVMHGTHDTSDFCRACLCCTEDTGCTRCMYSAEGPKFIHGCRKGRAAETYEAGEVAGQSDSLKLTEGIKGDPFLLRMYESNGGALSWFLSTLLE

RSADETFRYNFRSPLDALFQCLQQEQTSMSQAMTLGVEDYCKNHSIFLSSPFSLFACVIDIATDAIDDPRNNIPLVSTPTRLYQLFTQHFLTRRIFVDAIQVTYFYFLLQ

NVQQRADQPQWDLGIWQVACTHIFQRLLELQLEKPVGRNNNDWVKDMVNNFGIEWAFGATFVTALMLYNTSFLSWKSLHACNLTQLVALLRHHVDAVISQSAET

SPHLPQVRERFGIHQQVRPGRISSMVRLPPRVFEDDSDLSKDVMLDEAPPSIWRRHLFGPLCAAIWEDPCLRILAGWPVSIAGLGISLGWEKGNLRVIEFADSGVFIILV

QGGIMILNIIIFFVNRHLGEFINLKNDLRRNNIENFIQLWVFTNFVLTKLQKTDHESDRYWGLLTKGGFNLVFTIVLQCIAQGIIMKAMRLTILPASKRDPKRDLVSRTP

PDTALALAAFTDMILNVWLLQVANLVSEQKSSAIASVFTLVVATINVTLQFQLFKKVSDNVARGWMLGKVISAFNDDLLIISSAEKAVETGAIGMSFGIDAMKLAPA

DNTGDGTVAVTEGLDKLTRVLIRKDDPSSRALVQLHRVKQKLEEPPLRRFEPGEMAIGGEDPRFIGCESAIASATQINDGTVMRVFVGARRCDELASIVTPRLPDKIG

YIGILTMDQHVANFDAYQPNDPSVAGEPPWSEFDRYSSGITRLTQGAYSSIIMGIMDRDAENLPVSMTEGQSVNELCKTCKELMIESAGKAYVRYKGSPLKVIVASY



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

107

KNKSDFPVTQVINASSRIEQIPGAGLHDRCYTLLAVETKSGVFTKQGDQDGEFATSNLVNSQILLTKVQQSLGNVFDADPVNPVTFAKREIFLSKDMPPDTGGFSTTK

GLTAAVITMKNQTLTGTKDSCVTTANGMTECAKLIRVLNNDRLMKVTAFSLALTVALPLGEPVAVVVVTVSVIFIKMFEQGKESPSGRNNPLQACFKIFLVVFLLLA

AGAGVKAIWDALINLKKQLPTDEQETRLAMSIRGYSSNVGVATVLFTGNGENVKSGSIIFPDLKEAEKTDLKQIADFVDAAPTKRLLDSEGTATSEDCKVASGQIFIG

DVPVIDGTALHMVDGVMVDNISIEQSKGSRIVNVMRDNTKKTLRTFQRQMHWDNITGVLVVISGAGGFTQYLGLALSIIAAITLLILVKDNYTTWAIELLSKTKKDP

LRNDRFIKQRDCFIGTPNPDEPPPIHVAAEANSEPIADGATGHKPTGKPAVEHFAVEGDVTSEDTSLGANRDTHLGKEMGDIGGLAYFANLSKPNLLKSLQGPSFAFK

SQETRFMDENGPDPTLADSTDLLSSKTAVHDNEPFKAEQSIDPAAM

OG2.9: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MY15|J9MY15_FUSO4

MDYSRLRAAALRDGEDEEAVTVDTRALIDKVLARYSGEWTTLRELIQNAADAQAKTVSVKWETLPSTQVPLPNTTSRSEILKHTLSNHTLRRLVVQNDGQPFTKTD

WGRLKRIAEGNPDETKIGAFGVGFYSVFADCEEPFVSSGNEAMAFYWKGNALFTKKSQIPADQATHHTTFVLDYRNTTTPLPNLLSVSQFLATSLTFVALEHIEFWID

DYQILSLKKKSSPSVELPLPRDLEARTKDGLMKVTSVDRTSTQIDASYMAAIGWKPQATTSTTKNESYGAPETPSLRSFFARLTSSASQAGIRTKAQHEENAAQVTISE

DVTKLSSSTIFLRATSASIRTSVASSFASELERATKKPPPKTTKIAILTSSYDETQASQEAATSGALGKATDVFASVLPNKKPGGRIFIGFPTMQTTGAGLHISAPSVIPTV

EREAIDLNARWVRTWNLEILRAAGIITRLAFANEMSDLSSRIKQVMAKESKFSPAVIAKFMPEALHIHKTFTFDDSTPSSQVGQIIEEAFWMCFKKASIETYSTRGVLQ

TVDVRIASDEMSKFVNSIPVVPEEMKGVPFVKKLIDFGLISHITVTDVKKELETKAMNKVQLMNFISWAGKKSLSGELDPGSRSALLEVAVGTMSDDGEQGEIIALGS

IRNHLIANRIPANLPIPPTTIPHALTANSQQAELRALGWEPLEILPWLRFLLDTNSSRSEEQNLTQSSKFAIQILTVLSKNFENSSPNARTTIVSLLQANTVVPTKQGMRK

PTESFFPIVKLFDDLPVIQGCEKIKEKFLVTIGVRKTVDLETIFTRLLNASSEGHQKWSHMELIKYLASVREDIPGEDLSKLKQTRFCPAEAGPKGMESTKGTTTLYKVS

ELFEPKDSLRALRLPILQWPGPPGSYRPGSPEARFINSLGLRPYPSVPELVELMSGKDESLRVSSLTYFLANHQINGYFASRITELGENNLVKLRNASIVPITRTTRSSEK

STSSMTHVSPSRVYLGASTTYGDIFDFVDFGPEANAFLFQCGAKSEPTKLEVAQMACSEPARLLGVLQSSEKYLDLLKSLAEASSTLHRDKELWRKMRTAPFLLAYK

ELAPPKGKSDDLEEEDEPIRQYQLASAGQIVILDDIISYRLFKDRLICAPEEDALEEFYLALGAQKLSSVVQEEVRIGPHSDKQKAALSLRKHVVERSKIFLFEYTNYRR

DAIKHDVRWLDKNLTVHIVRSVALRRTLKGQYQTHTEKRSAASEKTSNGWVLYVSDESKPDMYQIGQAICQMLLNRPNQQAYLFFEPFLTLDLYGLRNRGYNVDR

ILRAKAAEARIAEEERRKALEEEQRQIKEREEQWGAEAKAAEAAREATRIPEPLVSWIKPRKIEASGGSSSNTGKKPQQDEGRVTSPALVQQNLLNAIKSTRAYGSDS

VFSEPKVNEVKEQATYCDKTPAQNITFIAETSNGMKIFFSKDVKDPGSFLSKHLNNLNVFSSMLIEVGNTYSMSPKVLHIFYDEAGGTIAFNTGGSIFCNFRFFLQLHA

AQIEGRSGQAKAEAATWWWVVLAHELAHNLVSLHNADHSYYTES

OG2.10: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MFK5|J9MFK5_FUSO4

MVKKGKGKSSGGIDLSDPMPSAPPKDQGKGKKGQKGGTSTPEAVPSGPPKPTVKQLIGGSSWTGKLPVNLLSEYCQKQKWERPDYDTKKTPDGFSVWVTMSAKD

PKTQQITKLEPFKIPATHKHLIMRPTAIEAKHAAATYALFRVCSMQNKHTVLPPEHKSLWKEFQALKTQDVKEGKAWMYEPDPFKSLQERQEAKAAAEKKRKEIEA

AKAKAAAMPGASGLVLMSNAGKGDSRSSNIMKGWSTAPKVEMGKKTRAQLETLLRSGVKWNPNGVQMSKPQKDAIISELSKLSFRKSHVEEAVEYCKDREETLE

WLLIHVPEDDLPRWALPESYAAGVSVGATNLRREGIIKRLAQAGYSLELATRVLDEQGVDEDKAAETLQNLLFPRESQDSADADFLDLGSPEEQWEEEVGSLEAIYG

EGFEREGDNVIRIKLDSVKNGQQTVDASFQVRRPATYPANLILSIVANIPSYIKLSIIRKALKYIDESLRDEPMKIYLAMDWIQQNINGIIEEPGKLVDISAVSSAAAEYK

PVAAIAQNKRSTRAPKMIKWIKDEKSREQWLRRQESSSLKNMVSKRQGLPAWQMREAIIGTVRSNHVTIISGETGSGKSTQSMQFILDDLYAQGLGGCANMIVTQPR

RISALGLADRVAEERCTRVGEEVGYAIRGESRRSKDTKITFVTTGVLLRRLQTSGGRVEDVVASLADVSHVVIDEVHERSLDTDFLLNLIRDVMKAKKDMLKLILMS

ATLDAATFKRYFASEGLSVGTVEIAGRTFPVDEYYLDDVIRMTAYGVESSDSEFISGEALGKVIQKLGHRINYNLLVETVKAVDFELSYEKKPGGILIFLPGVGEINQA

CRALKAINSLHVLPLHASLETREQKRVFSGAPPGKRKVVVATNVAETSITIDDIVVVVDSGKVKETSFDVQNNMRKLEETWASRAACKQRRGRAGRVQEGRCYKLF

TQNLEQQMPERPEPEIRRVPLEQLCLSVRAMGMKDVAGFLGRSPTPPDATAIDGAMKLLQRMGALDGDELTAMGQQLAMLPADLRCGKLMVFGAIFGCLDDCVTI



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

108

AAILSTRSPFVSPQEKRDEAKEARMKFYRGDGDLLTDLQAFQEWDFMMQDHIPHRQIRSWCEENFLNFQTLSDISNTRAQYYTALGEIGIVAPSEATIEAHARGASSD

GSQLLRALVAAAFTPQIARIQYPDKKFASSMSGAVELDPEARSIKYFNQENGRVFVHPSSTLFGSQGFSGNAAYMAYFSLISTSKIFIRDLTPFNAYTLLLFSGPIELDTL

GRGLLVDGWLRLRGWARIGVLLARLRGMVDELIAKKVESPEMNVKDDEVIMLVRKMIELDGMDA

OG2.11: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: tr|F9GCW6|F9GCW6_FUSOF

MSQLSAQPSHAIHIPSGRGKSRIDQVDKDIIQEIRNRNLNTTLDSSQFVSDKVKSLRRRVWDEWVEYIKFSNIDSDQLWKDLCEGSTKAIQEFRCFLEYYIVTSTKLVP

CLGPEEYEKERTVKSAGTIQDVWCALVHVADEEVLTNIRRQHPAHRQLYILKYRTDAGGRGHGPAADVGKLIPRLATEHGLSRTQLFEKKEMTLEDQLMILRTVW

QRARYITCQPCQRLSFSAMLIMGGIGGWRYESLKQLTYRDIELGWVRDPRNPQKGQCVATIRIHHAKRKKDKIERDQTSSFTFGITLVPFKPVCLLTHIVSMAFFKDA

FSTNFTTPEDILFPKPDSEVDYVPLSWKDEIKDDLVFQLGYKLYWKLWHRVLLVGGLRENPKPYSVRVGAGNRLDGALTSAIRSYVFGNTDAVFRKSYLPADMRDD

LMGISYGEVSGKNEATVSFLHQTFTKRDESAPVYITEEEFQSFENRRDITEWRRQRLSLPCNSTESKAILGKIQHVKNVLEEKLLERRRKEYFRKADQLRSLGQSTSHL

HQTALISPRFRQNQSSSKAAEQLAPCFIAEDSNYAIASKIVRYLRQTPTDNDTADNDTADNDAADDDTTDNDTTDAEAKADRARSICFLCFKDFSNRTNLSAHVRNIH

LKDLEKPISCLECRHQGQEKTVPAGFPAWSSHTERYHGSENSPIPANKRPALCLLCNKTLTIAGFSNHLKKAHGSKFAAKFQCPACLDHSLQETIDGKDDWISHVKA

KHVGCRIAGAVLIGVPDKPAQRDDNDSCMIGMKRKLEDEEKTDQKRLRTNRSVFGVDRGVEEEEFWCTGRDEDYLDDIQDFD

3.4. Aislamiento: F.oxysporum FM4/ Medio: PCRP


OP1.1: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9FZ51|F9FZ51_FUSOF

LTDWGGNNIEAELKRSILSPVGHNLVTNRIMSDYRKQNLFLQRGHRLQPDTEGYKDIYPAPTFSGSLRFLYVVSCKRVNLFVGINRQCKRMHQQAGGIKTHETREAS

NDMKQCCTGQSCSLEGCFLCIVPDTLEKGTTPCKRRTAEEILADYNKPLGILEFIGPHSMMASLPIESYDGPWMVQHKVWGSVLVSTTQPWGCASANDTIAACMED

FTPVRLAETLRELEDADPSPSVHSNFDVGYKVYLFIVCKRLFTLAYKKSFTYWSELTDVGPQQFGRNEGFEVGEPFQAAHFDVGTKTVGLAFDAFNNIAPDQTHRNT

LNGVWSAVPINRGMHYVLKVLEALYCLRLVHSIEAKQLPVLGYSCEVLFLFSDMSLLPPYVDLPRRAYPTGTGFYRSMFLQCHQRESDKRFEAEIKNEAGGFQAGV

AIYSSVTESLVRLHSLIHEPIKELLTMGPQAEIGRQQVEISSITFGVSKVLTDSACLEGVNDGKADILHSTRLGNVRLTNRLRRYAALLENMLQSGDTNNNTTAPQPQV

PEPTVSDSFAYSAPTGVTSSHSEADDRGWSTDSSAQAPLLSEVLSGPLSPTFMDPVTPEDERAKSGGIWYASGMQKEVFEEFTGQSQLYGPYSEDIGKWIIPVFANGL

AKCLPCVFENRKTDEPHHRAIQHTHRRVTAEYYVEFCRYHMMHGCGSAVPGSRCVNSPFGKGITQREALFTEGQANIKEVMKRNEHAIGFPRVDEASRDLSCPTQS

AERVFDPDQFDTQRLIRSENFHAFTGYLHRDDPEEQCLICTGVPYKWNHKRDETQEGDGEEGEDEDIDSGWDFSAQNEMFSKQQQQFQAMVKAQRSLAAKKRRER

EEEASTNAPSATSIRDVSAGLNVYATEFTRPRKQRLRKLVLAIKPHVAKFEDKTSMMNLLSVITRSSHAEPMFNSRGFKTLAIYVFSKPSEESMDDDSSKDELIAILML

HLVVQLFTELRTFPVSPTFKGAVLPYLLSYYVVQAFMGTSTFAGLDEFMGSPVPRAKPEYVIEEATKGTRKAMKKRYALESEERQNKNYHAIYPDIEEIYEPRLEFTG

VDSVGEPPKFTAMEDLVRHFDEQEQYKEPLKNCIENFSLPKFCLVHTIDRRMALLRSKTEDESSILSTRDSLLVILLHIMDEVVDLHQADDQAESKLEFLGKVWSEMG

FRDIISALVRSPNCIVLATQLLFIDRHHSVDRQGVGRYTSAQHRLSIGNRVWMNAKIQALWACVRLPFDFSAILYDEANYNKRPVQPRGMLRPKSKLEQQTFSLLNR

MTSVPLSRGCEILWSLTYHLAHHFSIADKEVVFKVVDYSSSEGDFEFDSLTKFQVEDKIEGQKFRHREAGISNLIVTKTTFRIAQQLYHFEDPPCNRFAEALNRAQLNI

QRTVLSATIWSDAEYEVHEVVARVNPGICQHLKVLDLFQMLYRPECRVREQVHPAGFLYKLDQYFHYMRRNTVSGSEFGLVADPSVDWPHGVQRTTLFTYLIALL



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

109

STMFNGREVVEATISPTTLMQLSLNIISHDPERDGVLYLQALITYLSAFRLALVRKFEPITVVTSIYLARLDNRVKKWMRLDFLLLWDLRVRRFVDEAPPVNERQTYV

APTEIWYRGPRPVLKETKGPTKPIEANAKAYISPAILPEATDSDSPTAERDRARAPAESQTQAQGQGQSQAQAPPPPPPPPYGAMTAEDEELAQDNDRWNMGLDGV

DGRADVMMVDDDEDEDGGAVSSSPSHQGQDDMDADADEEDEGDDDSDDDIEIQVGTGTNAAAQLALIFRANMGDFRRRSDVIQDDEEEDDILGMTHTAQSGQR

WPNMVQECVTRRLISNDHGVSCGSIDSLWEVLAGCMQERFTDRASRITVTVRIAEMIAAMELLRKVDPMYTLISRGIADTEWANEAALKRSKRCARAVQDQVEQV

THKEDNWLILAFETCPEADPGYYKSSLRSSQEDELISEQTKAQRLQEPSCSIVDCIYDFVRGITMQLNTVLDEPLGAAEKGKGKDTGGQVHSHITCFLPTRWAEDDGC

DCCGSNGVSIHIRVMHGTHDTSDFCRACLCCTEDTGCTRCMYSAEGPKFIHGCRKGRAAETYEAGEVAGQSDSLKLTEGIKGDPFLLRMYESNGGALSWFLSTLLE

RSADETFRYNFRSPLDALFQCLQQEQTSMSQAMTLGVEDYCKNHSIFLSSPFSLFACVIDIATDAIDDPRNNIPLVSTPTRLYQLFTQHFLTRRIFVDAIQVTYFYFLLQ

NVQQRADQPQWDLGIWQVACTHIFQRLLELQLEKPVGRNNNDWVKDMVNNFGIEWAFGATFVTALMLYNTSFLSWKSLHACNLTQLVALLRHHVDAVISQSAET

SPHLPQVRERFGIHQQVRPGRISSMVRLPPRVFEDDSDLSKDVMLDEAPPSIWRRHLFGPLCAAIWEDPCLRILAGWPVSIAGLGISLGWEKGNLRVIEFADSGVFIIL

VQGGIMILNIIIFFVNRHLGEFINLKNDLRRNNIENFIQLWVFTNFVLTKLQKTDHESDRYWGLLTKGGFNLVFTIVLQCIAQGIIMKAMRLTILPASKRDPKRDLVSRT

PPDTALALAAFTDMILNVWLLQVANLVSEQKSSAIASVFTLVVATINVTLQFQLFKKVSDNVARGWMLGKVISAFNDDLLIISSAEKAVETGAIGMSFGIDAMKLAP

ADNTGDGTVAVTEGLDKLTRVLIRKDDPSSRALVQLHRVKQKLEEPPLRRFEPGEMAIGGEDPRFIGCESAIASATQINDGTVMRVFVGARRCDELASIVTPRLPDKI

GYIGILTMDQHVANFDAYQPNDPSVAGEPPWSEFDRYSSGITRLTQGAYSSIIMGIMDRDAENLPVSMTEGQSVNELCKTCKELMIESAGKAYVRYKGSPLKVIVAS

YKNKSDFPVTQVINASSRIEQIPGAGLHDRCYTLLAVETKSGVFTKQGDQDGEFATSNLVNSQILLTKVQQSLGNVFDADPVNPVTFAKREIFLSKDMPPDTGGFSTT

KGLTAAVITMKNQTLTGTKDSCVTTANGMTECAKLIRVLNNDRLMKVTAFSLALTVALPLGEPVAVVVVTVSVIFIKMFEQGKESPSGRNNPLQACFKIFLVVFLLL

AAGAGVKAIWDALINLKKQLPTDEQETRLAMSIRGYSSNVGVATVLFTGNGENVKSGSIIFPDLKEAEKTDLKQIADFVDAAPTKRLLDSEGTATSEDCKVASGQIFI

GDVPVIDGTALHMVDGVMVDNISIEQSKGSRIVNVMRDNTKKTLRTFQRQMHWDNITGVLVVISGAGGFTQYLGLALSIIAAITLLILVKDNYTTWAIELLSKTKKD

PLRNDRFIKQRDCFIGTPNPDEPPPIHVAAEANSEPIADGATGHKPTGKPAVEHFAVEGDVTSEDTSLGANRDTHLGKEMGDIGGLAYFANLSKPNLLKSLQGPSFAF

KSQETRFMDENGPDPTLADSTDLLSSKTAVHDNEPFKAEQSIDPAAM

OP1.2: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici / AC: tr|J9NB75|J9NB75_FUSO4

MSSGEPSVIWAAPTAPLTTSITRVAFPTLSDWYADVASSLASPALSWWACVDKSAGEAYLASLFSLKTREHFRKVILMLDSDGLFYDADSYMNPTICDTLLDNLSIL

GIVIEQPEPAHPYRAGRDNMNDEKEEWRAWLTTTLEYINQAIPNDAKVVVDTNKMTDATEIVERAMSGRCNFQDLRDGDRVFERAEYSYTGGYWDDDHGPTSCR

DIIDDCDYDYYYSD

OP1.3: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: tr|F9FSU0|F9FSU0_FUSOF

MQDYTTQETVERVVSDMGRPALY

OP1.4: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici / AC: tr|J9N149|J9N149_FUSO4

MKFNLIIIGTLAIGQGLAADYNLHATYTDELVNVGNLDSFWSVWNRMYDVSDDKGGLSDHTTWQYTGNCNSGYDKPKTSVRVQLDGQWGTVGKASGWQMRDA

LIQAMWATVQAAGQQNQYPVYTDCSGFTWQESTPNNKNAACGRATTTKVYCPCEYMVECQKFSWGRKLPSQVRINVYNRDGSLRADMYQIKIGAQTLRGESG

CGKAGAIAEVLASFVPGVGQYFDKGIKIACRQGSLW



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

110

OP1.5: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9GAZ8|F9GAZ8_FUSOF

LHTKALGRLVAVGGALCVKGTEKVETEFIVNKGQLWMKTKLSQGPEITGAFRVKISFIPGYTSVVHKTAIGFSCLGHLIPTEFGGAASATPDIHLPNRDGNLRYLAAQ

DRSTKEEVVQDPEGEPIAHVATGKSRDSRTPTGGFGGAGRLFLTLENYFIKEGTTKDCTTTGIIAVAAKGKDLIDILKSESVFTGVTPIPFRHIELYHEGHLLRKYSFNP

VLDKLDFPRAATTGPIVSFSPIVEFDPHKEFVLPLQSISAGISLNYLIIDKDVFSMETPQAKANKAKEIAKLWRQSGSLSKDLRAINAMIRQRTDAANTPTSTKGPTFSVI

DRWKELLLEPTLPSDVPFDYGDSRQYRTVAQWGCGAEFITGSTDSPVKSSSLLLVMAAVYEPKRSKVVEEPLVGKTLDTGASPSICNVVINNKRGEIALARSFGVIAT

KATAYNAQGYNGYTGSTSTTNVIRGYKQKVMYPYAARACKYTARLHINNVDDWMKDTMNQFAKDRLIGANNILIDIRGFARIATDIVADGDEVSHNDPVAVGGL

SKIENVVSQPDKWDNVVISAGLKALVEVEEQQRNPPLNQAHKLLEVLNATTTPYDPNTFDNIEDWKGLVAGPTLTEDCRLIAGKSREWRIKSVHGAGVEFISGNEST

NSQHSLVAVLPVVWEPTLHQLLDPPMVTATMRSAAVPAIINTLINYKLGEKALTEGLGIMGSKAAAYNCQGFNGYLGAASSTLIVRGFKQKRFQIWAAQTTKYVGR

MHVAQVSDWDADTMNKFSVDRLIGANNILIDIRGFSSIATQVIAAGDEVSHHDAVAKGGEAVIESVVADASQTKHLNAAFRALLTLTGRAKSGQGVGRLSTGLDNV

VISAGRAAFFKAYAKGLGSGAGTVVVVQGDYRLNM

OP1.6: Midasin OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MH03|J9MH03_FUSO4

MAMIDVSRQRRSLLADATVLEHLPAEILAIIQDQSSTKLLDAVAEAALCPPLTERIFAHFEHVFPDICARWILNPGNGQQRIRIYSALARILPFAPYLSTFIEYASSTPEQT

TNSPSLRLPPLRLDQNAMEQDGEILLQSLLVVWRLISFDSRNFGPLTSAALMQTLFKHESRAVRYLATRIFIQLLHGSDWKLESLIQEHIGKSEAILADFDGRSIDYGFL

SLYEQSRVKSFLALREEVQVAHEAATGDSPLAQTLTPYVVCYGNVILPRPLGPTGEPSNLVLTPTTVSNLERLATMLRESDPVMLYGLPGVGKTALVHEIAKQLGMY

SNMVTLHLNEQTDAKMLIGLYSTDSKPGSFQWRPGVLTTAVREGRWVLVEDLDRAPTEVLSTLLPLIERKELLIPSRGERIRAASTFRLFATVRTSRGMNGRENLPSL

VGIRFWQTLSTQALAASELEDVVAQTYPILRKFIPSILAVYARLYRLGSTPGALARGRNIMDRQVTLRDLLKWCRRLRECLVAAGSKTGEEPITKTTSDQMFLEAVD

CFVGSCPDPEIGKQLIIAIAEEMQLPKELAEHYFTTHIPNLNESDNQFSIGRAVLRKKKQSNRVQKSKRPFASTAHAKKLLEQIAVAVKLNEPVLLVGETGIGKTTVVQ

QLAESLGHKLIAVNLSQQSEVGDLLGGFKPVNTRTLAMPLKEEFEDLFSATGISASKNQKYLEQVGKCFAKGQWSRVSKLWKEAPKMFNKIVKELERVQTEQAETR

NDGEQPTKRRKTQSKLQTLLDLRPRWDMFARNLEQFDVQISGGSGSFAFSFMEGNLVKAVRNGDWVLLDEINLASPDTLESIADLLTGPDERPSILLSETGEIEKIEA

HPNFRIFGAMNPATDIGKRDLPVGIRSRFTEVYVSSPDKDLKDLLTIIKTYLGSSNSKNDQAADDIARLYINTKRLAEEKRLVDGANEVPHFSLRTLTRVLSYVNTIAP

YYGVRRALYEGFSMGFLTLLDRESEKMLVPLISHHLFEKHGNPQSLLSQAPKHPNDGKQYVRFKNKNRDRQYWLFQGSETPIEREDYIITPYVERNLLNLVRATSTR

RFPILIQGPTSAGKTSMIEYLANFTGNKFVRINNHEHTDLQEYLGTYISGSDGKLRFQEGILVQAMRQGHWIVLDELNLAPTDVLEALNRLLDDNRELLIPETQEIVKP

HENFILFATQNPPGLYGGRKVLSRAFRNRFLELHFDDIPEDELEFILQQRSRNTSPPDCRRIVNVYKELSRLRQTSRLFEQKDSFATLRDLFRWALREADTREEIAAHGF

MLLAERVRNEEERIAVKEVIEKVFKVKINPLDLYSATVAPELKQFTSKPNSQGVVWTHAMRRLYVLVSRALRNNEPVLLVGETGCGKTTVVQLLAEALKKELHIVN

AHQNTETGDLIGSQRPVRNRGAIVDALDVDLKSVLQSLGLDVSGSVEDRLDRYKALDLSVSSDIPQEVKERITAHETRSKALFEWADGSLVEAMREGHFFLLDEISL

ADDSVLERLNSVLEPSRTLLLAEKGIDNSFVVGADGFQFFATMNPGGDFGKKELSPALRNRFTEIWVPALSQTEDIYEIVKTKLHGDSKQLVEIVVKFAAWFSDTFRS

MASASFSVREILVWVQFINTFQSDEPIVSLVHGASTIFIDSIGANPSALLATDPKSLGQQRQKCLDKLSELIGKDVSGVYETHPELSMDDSSLTIGHFSIPRASTGVADPG

FAFHAPTTRLNAMRVLRALQMQKPILLEGSPGVGKTTLVAALSQACGQPLTRINLSDQTDLMDLFGTDVPVEGAEAGNFAWRDAPFLQAMQKGEWVLLDEMNLA

SQSVLEGLNACLDHRGEVYISELDQVFKRHPDFRLFAAQNPHHQGGGRKGLPASFVNRFIVVYADVFSDDDLNLIAAHNHPKISPSVISQLIQFVSQLDHKLAVEKSF

GAQGSPWEFNLRDVLRWLKLLDSPDPLLQNAYADDFLDIIVRQRFRTERDREEVNNLFTLISGSLPRQHSLYHDINPMFGQVGLALLDRHPHSQPERLPNIDIVPRLPE

LESIMICVKQNVPCILSSPSGYGKTVLLEHVAALAGKSLVVFPMNADIDTMDLVGGFEQADPLREVNAALRALQLDLQNTIMSAVPDDIPIGALHLLHLLDGFTGDV

DSLPPITTSVEHLLGSVPADSEVATALSKALIPLQHSLVLENPRFEWLDGVIVKALQLGQWLVLDNANMCNASVLDRLNSLLEPNGFLSINEHCGPGGEPRVVRPHPD

FRIFLTMDPRYGELSRAMRNRAVEIHIHTPPPSLDPSYHRVNSIEDQRCQAQVNKLTALNRLQRSLISDRVAAVSKDATVKLASFLLSAINTAKEWLGFKFESFETWM

ERVRIVRGTVCYLKRTVRLGIETDFDEAKFQAHLAQGANFLQKHLDASIGSQEKEFVSLLIERLSKDFTAGFKLSTGLSMELLWHIFRPTPLPTKMILDRTIELEKLGSR



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

111

FDSLRWKAGASIPDLTKAMATLEKASGILREDAPNVDSLLQDLTTEIQSLESRIGVDEVERKPFMMEEFEALRQVSMLKSLPSGDTELQVLSDIPTQAGMMLASSNR

QAALLQSVENLVYQNKFSWDGKFVTRLWYKLQSLGSVNLGSLALLEAELPIAGRQIMKLSADVVANPLTRLNNVLSQLVLEVFSAHKQSLKHAVIEAAQLASQDL

AHSSRAFDDLAPRIETDHFREIAVEHLIPALKALATLQYDIQREAQLSAFAWIHFSIGTVKLYVPDRIFDPQSRPKMEREFLQEMHAALNMGTESLRTFEKLFTGQDTN

ERIRLLEAESAALGPLPEEARPIYRPDQSELNRLHAEFSNVLKAVTGPTLSSALQILDKDPARATEELQLVRENVLRLLDRLSARFEAYQDMTRPTSNLLRCLMIGLSL

CDAASAHSLAPASYQLLEVTPFFGGSMWNQTDGQFSSRTFEFLNYMSVVASIEGIDNIEQQAREMVFRSFHSLFDEWTKRLEADRKEQTAKGSLYRFRGSLEDEEQV

DAEEFNELFPTFDDDETANVPTNKKPDEVRDQSLRVAEIHKSLFLNPPQATTALKDACKSVGDRITSETIDHKNIDRSLTSKMLAGTMFFLNDKLDSLVSHTVDKSYN

FYTDANVPEARQLVVLMHKIKSRFRELQMVDEIGHMQPLADVIHACEQVLELVYTEPLAKILPKVEYLHSHVYEWQFGGWASKIYGVLTLHNLLTDTVIRWRRLEL

STWANLFDMEQKKCQDDAYSWWFVAYQVVIAVPLSLVEVPNELEEYASSLISSLEMYFSTAIVGQYGARLALLCQLQSHLKLLTEDYPVLQLILHALSNFIQYYSRY

EKIMDETIYKGRLPIEKKMKDVLLMASWKDTNINALRESARKSHQKLFRIIRKFRGVLGQEAKQIIEQGLPDQDVHHANYVGDKSPITDVSADVFSKLNNALPGWTD

GHKRLANVSKTVSVMRKISDNPEMTSQVPQIVDDYVSSLSESMTELRKETPPFLTDENKDQVKHLKTRKRKLFADTLRDLRQMGFKHNLGQDKLAEQASLSVVLSS

MQPVHLPSNNSAEAMDYHLHKILDLAPKVRAASRDHSEDLTSAEVARSAGFVEGMLNLLLTQRYSITSGASLLSVLEQSTAQFNRLGLSHEHGLLIRKTAVSDWKR

LGPWLVQILQHAIHLIEIHEKLGEMKYTATIEQLKSWHGRFESLHTLNVGFGQLPDGVSSEAAARAEANFSSELASFRANLEELNTEQPELSFILVQIVGWTKITKEAA

PSLTSDDMEITTFANAVSTLCDKILVAMESVKKAAKGINHKEGEPAWLTTHADGFVNLFTKLRIAEVERSVASCIKMLKQIHLEEPNLSQAAMSLMTIACPVLNEYV

NLAQQTLMQVIDIHSAIAHMSYNMTKTFTQISSQGFCTPQEKSDETSGESGKVESGTGLGDGEGAEDISKDIQPDEDLSELAQEANKEENGEMEDEKDAVDMADEEL

EGDMGSVDGADDDDEGSKNGDEEEEENDMDEEAGEVDDLDPTAVDEKMWDGEDEEKADKDQQDSDDLDGLSDIEEEKKEGEDQEMSNEEEDGSDDAAAQAQL

QEEAGEEAEIQEDEEMPEEKAGGKDEIDEEAKPEEDEEDKDQEDATDQNQPPQDNATTDTDNAAPSDVKSSGQDQNADSMDVDDNFQSNAAQQEDGEMGEGAAD

QDTSAGNKGSTSQSKEIMDRAEQEQEKADSARSDPFKKLGDALERWHRQQEDIKDAESSDANEQNAPQDPGADQGRKEFQHLQDDETATETQAMGTADDEQVQP

IDESMAIDEERQDPTSRLMDDDKEETEQDTDKMDTADSGEAPDASKQDADNDQDETRSGVKTRQGNYDREISPSDQEAQLDEQEDEVDIQETWTQLSSTHISDEER

PLRDFGESMQQWTEFQTKTHSLSLALTSQLRLILTPSQSTKLSGAFRTGKRLNIKRIIPYIASSYKRDKIWMRRSIPTKRTYQILLCVDDSKSMGETSSGTLAMESLVM

VSRSLTMLEAGQVGVMGFGSDVFTAHGLTEPFAADAGAKVLQKFNFSQDRTDIALLIQRTIETFRLARQQGSGNSDLWQLALILSDGLTPSSAHEGIRRMLREAMEE

RIMIVFIIMDDTGKKKGDSVLELKEAKFVRDGGESKVVIERYLDTFPFQYYLIVHHLEELPSALAGLLRTWFAEVNA

OP1.7: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC:

RRRRRtr|J9NMU4|J9NMU4_FUSO4

NSSKFFTPMDDASDYESEEGSKGWCVASSLIVDNYATLYTENDFIPANFKTKQFTEFKPLQYVNAKVGSTEKSSVSHEDDSSSDHADDAQGIGELLNEVSDHLAGIA

RLRISEETWYDDIICAQLENIMEETAEVTVQFDSKPQLASKITDKQADLDVWADNPDLHDSVRDEDKGMDSLAEVLNIRGPIGYHKLHVDSPGLERNRAVTKKSTFF

SLM


RRRRRtr|J9MDL5|J9MDL5_FUSO4

NGYVVVENGQVSGADTGVNSETWESETYSYESYEDGDTYMDTSNTVVTGRSSRRLTENDSDGGEGGDAEEDNPTSEIVITEDTSAETAEPAAASKVDAEDVEEVTE

NVTNEKDNDALGKDLNGGWSRKRYTKGGGLPTRVSQSRKVGGSAVNNNIQSLSVIRRGAGNQVPAALNRKANLAMGVMSKRGHAGTEPSEEENAPKRVRKRSM

ADGGNRNAKAMLLVRSHDMVGELIRRELNEARSEMDYLEEKRMHLATELSSVDGTLRTKQRILSEQETRLTsMVSQRLREEEDRLSAVAAEVHDKEALKREVSAM

TEQLTKTHDEHAQEIRQKQASLFESIDAATQVVSAHVKDLTDLRSFAHDAVASHDVLKDLKEQVVADDYRGDLVLDLKERVLTDDYKSDMILDLKERVPTDDYKQ



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

112

DVLMGLIEKIPADDYKEEIIKDLKARVEADDYKSEIIKELKERIESDDYKSEIITALKQHVQSDDYKEDIIKDLKERVETDNYKEEIIKDLREKVESDNYIQEILKDLKEH

VHTNNFKDDTLLTLLTMLEEPSKHEVIKDQIDTTSSKSHEYHEGVLLLLDKVSELIKPHSESVEGKLSEVATLAETIQDRTQQHEAKDETHTEESRAVLEEVKTFVTKS

AEEMKELSDTVTSGLTDILLKLEDTVSKSSVVAAEMAEDRAESVKSRDDLTTQLTEYKTILEGIKEDIKTSLTETAEQLKENSEVKVGSVVAKSDEFETKITDLMDKL

DQHVNENKNIKEGVTELLKSISEVGTAGEELKVNITGQLEELFTKVETVREGVSTSEEDRVAIAKTQADVTTDLKDQFDKVISELGALDEKKVLLAELSTIDEKRALL

ALDTSTFSELATKVELALAEVAEVDAKTVKDPNESEKAAHEKIEDLSTSVQGLLTELATVEEKRSVTELQTTLSGMTERTELLLAEVNDIHDKRVAQEGDILDDLKG

KTNRLINEIAQMDEKSAPEDGDGVIARATEEEGDEKKKKVSASRTLTERSAIEDVSDQVTRLLDEMRSLDDKQLGQNESKVSDIKIALGAILVELNKIDDSRIKESPGD

DETNDTSVAALAREGNSDRLAEIDSRVSELGTKLADLIKEDTSSEAPAIARENNSERLTEIDSHLSELGTRLADLVEDNPKTDPVPALAKQNSEQLGEIDTRLSDLGNK

LAEIVEDNTTNDVPAAAAKQATAIAVIEAHLSDLGNKLTVIVEDNSTNEIPTDPKEQAALAAIEAHLSDLGNKLTVIVEDNSTDEGLAARDSNDRSLEIDAKLSELGN

KLAEIFETSSSNDVPAIAKESSDRVAEIDVRLSDLGNKLAEIVEDNTTNDVPAAPKESTSQRIAEIDVRLADLGNKLAELVEDNEKPEVVAVAKETQSDRLAEIDARVG

SLGSKLAELVEDNAPPTSELTAVARDNSSDRISEIDARVSHLGTKLAELIEDNATLDTPKNTVRDMGARLDNLGDNLADLIESTEARPRLVEQRLNNFGTNLAELIET

NNTQPPLAPVMSSNVIERLGELETQLQERSEQNTTSVIGAMEDKFDELSKLLDDMFEEQGAAGTARDVYSEMAQRLNEFGDKTVDRVQETERGNAAVTEKTEESLT

KFEHRLFEMIERLRDAVDDNSASAPVLARSSHVDLDQLGERVAHVVDEHTIDNGTGPAVPFEFEELCDRVADIIEERSLTAPQDVQPPVFHKLGDVVATFVEDRTVA

PPHDDRPAYEQLGQKLCALVEDRELGLQQVEIEPKYNEWADRVAEIVDERSLDPLNSKTAENDQIAARMANYIEQYDVASKQTNVSAASQRRHERLVHNLQDKMQ

ELGEDIVRAVEDKSPTDHDEVGRRSAQQELRRGIERGMGLVEGRLERVLAKVEATLGGGQSVSDKVSRIISILDDNLIEAGRASPESNRRAENKMIHEVRQSVASRA

QGPMIDSRSNESEFSLNRSRSAHPSGLSNGLIIAQESQAKVQEIVEDLKQSTAMGSLKNSVEQLRGLLSEQGEKTGMERIIRELLVVSPPAESGALSPTSISGREISDGFS

KPSPIRPLHFGRTSPPSLNHPKNDLYYGGFPDRAPPLRNHGDNGNGHSGLLERLSRRIDEDRSNTAEKLSLLDTANDRSRRSLQSMEKQLGTAISTLSLIQDSLAELNQ

PGKPLTLSGNTIDTLPNEPEKVPTSSTMHQLALMTSSQPPTNEGLISQPPPRRVAPRLIPTLSPGPVPTTSSVVSDKENPRNDADRPRSPTEPRQQREPSRSPSSHGSAGEI

MMSIDRVSSQLRRHGKTPSEIRKTPVMTSERARENLAAHASAIASSTGVRSTLPSGPNLPLPPPCREPDSSDWMPVLARFNPDSSASQQHRLQFDGDYSSDRESSSM

OP1.9: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: RRRRRtr|F9F6P5|F9F6P5_FUSOF

FQAFGPVFDCLLVPLVRGRMGRKMRAVRTLLDMTSETPLEPIEDGCGSVKYAAKRRGSWPKIPVFPGNHAAQTLCKTEYHRDILAWQLLRPYLKAAETVSRAIVEG

RRGTTLYALRAGHRVLLKFCKFAGISAAFMLPTGKGHWEREIDLGVDLLVQLLKPDDGLIVSCAPTYKEEPESNVLRARYKRPMRKIIAKLEMPSLNRNALIESLLLP

EQEALRYFDFNGNLVFSMGEPGGSIASTLTSGTGPSAEYPDAGLEILQRLVDVDGHVAEFPINYFTVPSAGNELLCRTVQLDGHALSRELASSGHACLLNPNAGARLL

SLVMDMQGYGAALHLPTVLESDQANVDAGSKILLKAVQHYTTAGYFQHGGDRALCHIVDHLVTSHTADTNGSTVEKRLNLAYRLVKEQISEDASFEFGATLGFAR

IKAWYVQAHETLHNIFIQLVRIQHEIIDHGSNRSSNFLAQIPSIPLHFWIMRAKLYGDLCLKFFSHAKEPPIFIDTAMLTRFNLCASLLANYGHPWHEECGAVFGSFGLE

VLELMPRIKNTTATYSLLTCGGCPMIASALDKRSTHDLISTFLPDRSLQYRDITDAIMAGLQRPESNKQEHTAEGHSSEPLSESDSDDDQDPVPNLSIIGMDQPNDYDL

LNDKMYQILEQNGGVIALFLPTRGSLDRVSFLSESYRKLIKVCDLSGAKAALHACTRGFRPSTATIKDALPTAELLTTLADRHGGAAAFQLANYTDRDEMHEYVGL

WPFEASGVKEIIMELIVVYGLKAALLYASISNPPALSADAGREILLRALLIRKSCIAITLLSPSSAPLRLPLAPTIELGDVDMGCDILQGLIEVAIAEDPVRVLETFTYHQQ

QRIQHPKTGCLLPRIMGVDLPQNDALFTEFVSKGELSRRPNHVNCGCQVLLKVFESMRFSVAKSLLHAAEDENFFGMIGLEGDQLNKDDFWTALIAAAFPIHWTEW

RPLSVSEQGKTAICSVAWKKTEKEYDALAGAKVLCSIAMCIFSTLFYLNTPHELSHRSLLPLVDQTFRLWIGRGTSDRSKLVEPTLLQMYASRTMSPSCSPHSSPSSTL

RGEKLLKVNTIVTEAATTGDAFPRSPGARDLVLSVLEPCASMNLSKLLLEDNMNAQPFLHFLQQVLGTNGWEVAWRALNENGEARLYGQSKELLFWAAFPAAATS

TKPSQQLAEVHCFASQLPTYGEEDVANLNRIKYPDNDWLFRLIDDENTAAFYHWVNRGGNDKDFTPAAHELILKAMPSVENCVMLPTRGSSDRARIEAGAQILMDL

IENQASEAAMHLLTEEKDYKFNPYFRPDKILRDVLIVNFDLVATRVVAAFNSDKLTDVKGDALPSLRINAHVMLRAVLEQLWNHETSEREIDVLTLDYIYTLLRAFR

TRHLLGRKVVPERQLLLCFSPDLAGGKAIDTSGQSANTFGKIINTFITEHKTKMATWFALGALSVEETANKWSYHFTCDAGKEVLLLITAAQDIESDNGVLLTSWSVP

ETRTILVKSGVLACYLPTGLLGPQNVNAGMSLLDRCLNPLGLAAAIHLPLVSGDCLADTLELLCRPSLAMTGFTRPYTERAYELVWQVFNYSKQMRFLSCVQPRLK

QWYIEAYKPWRIAAIRYAPEIIRRSQVLTIEKNYEAPERDNEPSNLINLWASVDEPRAEGQEDDYPTQVPSEIAEPDYEKQVLLQPLPESELLTLRLSIDELTDSIGLVFA



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

113

LKSRIDHLSSRAAKIGDSTALHHFSKIATLLIEYGDVIPWEQSPDNESGSASPTIGLTSDATDNDASLELILSELSYLTGGLLRLEITLSKLDNRDAKAGNGATVSASASA

KLHASICVCAEFTSDKLTRITKLLPPSM


RRRRRtr|J9MNJ6|J9MNJ6_FUSO4

MKDVAEDSMWHSGGACRFGGASQKIWEYGVPCVGMKMLKAKRAEIKKRKEEEALIRRVLNERDADKANQQAKKLRRFEEEDKAEQEKDKQLREWVEDSVGAD

RIGHPVTIAPLEEEPEEEKEETVTTANTTMAPPTFMPTDTLAKAIESAASPKKDTMRGRREAIMEDMTSRILEETLTLSKSSLDFKHFMKKALEKVDRANAWSDQESL

ERFKNTLETLFEREPRELCSLDVPIKGKLKSRSAQLQSTVLQICSAPTLPDFDISEPFRSSMGPNIGLLTNIDQVYGALIIILKGHYKPKTVCDVLEDVADRAFSSDSALR

YAEDIFLVRGLAKDLLQQVKPGTHGVYQGILETASVEIVETSALFGLDYYVQGMKRAATTKGTGPPGRFLFNFPIEPDIELQKAQRVRTQYGQLISILHDRGVDGEFL

KKVDTDGREARDFDEDFDIPELTGHRKVRGSSVRKQHSAMARALLIDIEGANGFNPRNRARRLVDLAVVKAKVTAKFGSKGLKLDLIKALAVDDFDEFVFASSIPFR

RSLGPNVNQFMEEMQEKYGLLLVCRDEGPVSQVEAVITDIVAAKYPDVVSGNVGGGYLGYAEDILLVKGVTAALIGKTQAESQGLAAGVFDAPNKTVVEGDSLLG

LDKLIKGYLTAVTTKGTGPSGLFVKNLSFEVLPQEALEREYNTRLTDMLVGLADKVEQLGILSKFERYAKSNLLAESPEPGIIDEKTLLLDNPKKGARREKQIRSAQR

QSIKQLCNEMARANGFGNKGRGRGVRRAAIRCFLGEVGQEVAMRGKFKRHIQLQLIQLLEKDTYDEFKMEIPFRSPIGPNHSFFSEMEKSYGALVFVIKGRLNEVEA

LLYDLVAKGGPSNGSSLQYAEDIFVCGGGNNNVDEILKECGAVGMNALKSGTVEKLCSGAIAGVTTLFEAYIRAVTTKGTGPNGLLSCSWREDGLSFGQRIKTDVA

SKISLIQDKVSELGIMGMLKDLAANRAGEVEKMNKWEKAASSIPDFQPATQPPPSTKQTTKMKKKNSDAQRLSELEEKKQKLEDAQKKEESEYKMARRLHDTEDEI

KQLKLRYKDQREQRKRELELDRKIRRQNDEYEKVCTVCIKSKDGCPVKTKHGKDCVREVKAFCEIKSHDQVRHCRRQCKHKGCSLPANCPEACGGDPCKKDFDEP

LKLLMSTDPHRECHIPVGDFISNNKKLAGLYQTWMKGGKKSKMFTEMNGFLIMGNRARSLLVVLRECAYLFGIDGSANSRTLSVIVIDCEEGQYNDITSLRLPKKNV

KAAAQTVLGARVLDHNDVDNLWPDMEKRLTEKLLFLQGLYPTLVVMNETKYGNQSLYRVMRLVMMAEHLNRKSAKATPDRREAVDDMTDEPREHHVFTVRTK

LGRIPQRDSTSPMDKLEPYALMRPYQSIDPHSRHQEELATFHRGQVVLREFLSVNLDYGEGKEKTLVYNGVKPRLQKHDGILILQKVSASMATIIHAELIEGAEEVLIV

DPNATEIISQYMAAATTTCAIIQKDKLVRRGREDLISKIETRVDSFRKSLDVFRASQEERVMQSWEYHCQRKVALPANWVTRARLDLSASLHGLRNVDGGDLWYQY

VSAPEIAKGDSGVTKFGDDEPVQFAEWATSFNESLELHELIDAPHAERAALKRSCEQLELSLRTEEVRLTNLINREEMKLWYKKQGDYERLLTSKTAETFKSGLRVM

QDSSVGIDMLDEMFQDLAHNTYSLVLIRSKTLRLITLLILAGLFSKGTGPPGQILALNSSIGHIFSKLQAGQLKIEKKLRLGAPMQYSHGSVLAEKLQHLLANLTTSRP

GDGSPQEPDILQAELPLEAITKLRRLIPEFAFTATDVIFFKVQDKLPSQLVDVAKKLESGDNFKIGVIPPTKLLNTVDRVLSGFAIITGNCCLAGFSDHKMFNKSEEIFAK

KGGKPLKNPFSIGQQCAVYLTYPPIHKTEIDHDANIGVLRLQGLAVPRRKSKKQSMAVQLDERLESLMDERLLRFLWDRYSQSRTEMPTDFVEGLRQLYPPDTSLLE

DSTPYISIDRFNAHDNDHRGGPTVGSSATEPQAFIKIIKDIRYAIKRVEPSDSRLLSKHEMLRKVADKHLDFNAQDSVIQLCLWAFAELGVNDLQDSHYADVAATWFT

TPELIATLMQRLFGGNSLAAVGEDSLTLLFPLATTNIFSFSLDVRVVRELAAIGAPNSIMVEVFKVPSNKCRYIGCAQVFLKASHANTIQQEGKIVAWFTKILKAARSG

SADQVLVM


RRRRRtr|J9MN68|J9MN68_FUSO4

RSGSELKAEKEKLIEKAKGWLEAEMDREVRTGRSNLWGAGINGVAGVGNPTPQPIIPGTKNLRPPPALSIINAEELAMVQRKIKVDVTHLARFFQDTASAFAEKQTG

PDLSPKTPEASPDMNQDTETSKPITLANLATATHKMLQIIQQDIANLQRINEEITFPENRSSEAGAMEIDNPSDM

OP1.12: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9NPM5|J9NPM5_FUSO4



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

114

MALASDRGSQNSKTFAQGHYPKKMRATVQEVFNLATIKAARAINMDKDIGSIAVGKLADLVIFDTTSPSLNCAADHDPLTAIVRHAGVREVQTVIIGGQIRKQNGIL

HNVNLTDGREAGFDFKYEAVDSKDGLSWKEVAKELSRSRSEIQGRINKVNKELAKEKLVGMIGGLQDILVDL

OP1.13: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9NJ86|J9NJ86_FUSO4

MPRYSSSVDGAELFYRYYAPEGRTPALTTQLPQPAKSLALVLLHQWPLSSRMYDSILLSLCETHGYRVIAPDRRGFGKSDWAGQQPTVPISYKELGQDLSDLLERIQP

GPFVFVATSMSTGEALMAYLNSSYVQENCQGMMWISTCLPYPTASPQNPKAMPQSAWDATIMALRQDRPNFIANGFKGPFGDSKSGSVTEKQVAFFENIFFEADPF

AVERCLQIYSREDLSEGIKRFGQMFHKPFLLIHGGGDKAVPAEVSAELVQKSVPGAKLTIYDEGGHVLVLAYSDRLLDDIVKFAEDIAG

OP1.14: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici/ AC: tr|J9NAZ3|J9NAZ3_FUSO4

MRTSFSSILFSLWLLCLGVLAHDEPCGCTVKYIVVEMPSQTVAAQTKPPTVTSVQTKPTNIRSKPNQTTVRASSTSAHHNTTATFLPKPPAKVDLSNPENAVPKKNISI

SYGDVEKPRNQTFPALNTTAPKGAIDMDLVMNHPAVVLDHIDAIVSVECTADSVKVQFGKSAAFEKAIDTWSDDEPFILITNNMGNCKTDIGQAFYLVDGVTTDKG

DKTITCHAAEQELADIAETCEMSFTSIPATKLTKRLTLNPSLSLNFGTGLERDTVLFQEQPWVTIKAEKAEFSSTVSFSGRAKYNFWRFKMEHLYFDLDTHFSADVAL

AADVAAAWSRSILYDPDTLTYTLVEVPGILSLGPGLSFAVGVDVDTSAAVAVRAGAGIAIPAANVHLDFLDSGKNAATGWEPQYTSYANITESVEVGLNASASLTV

QLTFKLLGGLVDLSSGLTATPEFVNKFTLDAAQSAHASNDGAGVNLLDAEKVAPATTPGSELAAVNEPKDCGVSFKSDFIFDLEGFATKWWKANLYHVEVPITDVC

YNFQ

OP1.15: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici/ AC: tr|J9N6V9|J9N6V9_FUSO4

MLKNLLVLTLASFAFGQEDDIPTNATVKDDEMGPAGFMWPPDRPWAGDVDNKGPCGSRASSGNRTNFPLTGGAVSLVAQDDYYNTKISISYSEDPTSNDDFETLIQ

EKSITDLNPGHTCVQVPDAPSKVSAGDNATLQIIYRADWDAPHNQTFYACADITFVKESELNFEIPCFNATEPGDDDKAAGATVGPSPTATHPSTSSESSDASEAESKS

GKSNKLSGGAIAGIVIGSIAGVVLIAGAILFFLRRSQQAKRNSRIARMEDNARKHQLATDGASGTSI

OP1.16: Uncharacterized protein (Fragment) OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MXL7|J9MXL7_FUSO4

LCGLWIATSGWPRESWGAWVAKLKGHNVGGDNIPYKFVHQLPIVVDLIDYSTPVAADGQPLLAASSVEDDDSDHLGGEGGSHDNPKVWAQGGGRLDEMFMATS

HAKFYSAINTSRLAPCAVGKSTMFCKTQLDHATDPALNPKIPRGKSLPTGVDYFSHNICEDHMIGDVLWNAEFAGYRNHGLVWGDIAVQPMSDMSVKAYAARRSR

WLRARKFTVLPATIFEPFTESFVFATYFTFAVTTLRIYGIPPTWPARVITWLTTITVWMLVDFLGYRHLHSGVTMEVDEDTPRFARGSMNRDGIKSRKFSEFLAAWIV

REALALPIWAYAVVFGNTVNWRGRRFRIRRDTTVEALDPEEEERSRQVPTPELERGSSQNKQRVD



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

115


OP2.1: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici/ AC:

RRRRRtr|J9N8D8|J9N8D8_FUSO4

LDDEDSFVEEGRKRRAMREKKKKRAESSSLKVKKKTTVIKNGMADFKEEEDGDDAKLRPGSGQGQVWNHGSPTMKGDMVAWVEETLDKTFEASHTIIIVGGEFK

KLAKSLAGLSDRDLYNTPEDLVILHPRQWSCAALVTKVRQGGSLGRMRSHSVLEADLGFNACHSEIEKRVLPRFQGSALAEKMDVDAVMKQHSALLENRPLWAN

DASMMPTWRENKMGVNEGLAFSCEYEYSNKFKRRSNIGIVRRQSGEIRFIKDMAKEDAETIVKNARDMTERDEGTQFRWQIYESPTKDLHNDIHAFAHQKIYAIRIN

EHQYIEGQTPILEGTLVNILTSKGAGNPGIVAIRSGLSCQFSIDQIQPKSTGPYQFSMNTARLIAKAKTKVGELFGPEPFTFEMESEGLEYYSKASPNRAVFAALNGKYR

KLKFREYHVIHQCVNDLFGSDHSVIISTCPSNILYEELWKVNKVDLHNTPEDLLLIDPAEFVARCLALKMKWGGSLASIEGKIMQETFGFENLQKEVDAQTTTVGAEE

LKKMTWDITTMETDASDLDHEVFVTKVESQKPFGEVQENNIARMLTSKGSGNPGCLGYRQGRKLRLHTQNLLIKAGYALSFTCNCLDEGEEEDEEAEAEAVAGPL

ATKRIAEVLSESNDIGAIVSVYAKLNDVWIMSETEKEDVLQGAIAAIYEAVPGMKEVYNAFKPSLAAKVKPLIVNIAGDHRAEPIVGDKINGVRTLTDLAQKTKDRA

EPDALNEYNKQLGPMMKPLFPAVINPDDVLKCMNDVIVASKRKIATDREALGRDLLPVMLALTPEQVETVFTTAGLLHVTEPVNEPKAICKILEPIFREIDKNVILQC

LQEMTKYAREKVEKKTDWMSESIVPILEPVRYALQAPSSKVLAEVFDLAAMKEPWKQATRISEMVYPLAAKVANANIGGAIALVASQAANKVATIKDGVAALVSP

LLVVLYPEVSASVESHSAIAEIAVCAKERAAADKKNALQKKLGEIVNEPVVQDGIRGNIFSALENSSEKIDASEKSVTLKQFLEDLVKISQQNETPM

OP2.2: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici/ AC:

RRRRRtr|J9MLK1|J9MLK1_FUSO4

RITLLWGNIVSSFMGKLAPLAAKQIMAPPGCLFVASKESPEFLSEKIIDENVHGTKGKWSDDAHSLVHTVKLQGHAKTEFDELEEKLLIDAETKNADVVRVETKDNN

SLLIRALLSYGPTIGSGGLVLSVRDFHRDKDEIVFDGNGNYVIEGTPGRLEVEEGIPMCDLINSLAGGPQNEDPFYTKVTLEFTADGDRLSKASGNTMNDGPAPLLPKT

PTYSRILMRDLMHFGIQVHQCTGLGLISKGEPLQFTYARTDKSLNKRDILKVPIWRHKELALHEDKNSSRSTDKAAAEANQKIFNAAKETVVGLACKAFEDSTEQHV

KGAHGLIAATGGPHWDLVSTADYVKGDVVLWCDDQTNHKEIEERTFEKQPAGAEQKAEAIKNEVSPKMWGGDKTAPEVPHRFLISPTESDNDETIEPRVTYWCNN

MMGMVNWNPERPQTNKFVNFCRVMISKARIVHSIEVDVHWHLWSWFKNGHRIPYDPFKRICYLWTAGDDLTVEVRQVEHGGGDYAYGEIRYNEGKKARGLPIRE

GQAPKVIISNLNQENCATDPHHFLAEAFPGDKETVFSPLVRNDWIHYYSDNEKESIWIKKLWKVNRGGVYGPIIVRVPYGHDPPLPVDNMEYALIVDNNPSMAHEFP

ICTAYNGESLDDTGEFNVWYRKEGLGPPKEPVGNALLVDRLLPGKWYACSAGGAGWNFGKSKKIMNLEKRRNGDCALAVAINITDFEKLDDMSLTQTKGDYTIEL

EHFEWLIRPVPGHNRVYHLENPTILGAEYLRTLPAEANLPHKGTLRILDPSRPLWNDPSFQDKEDISIQTLNKHQPSKRKGNNEKLHQIYNKEHELARLLAIEAPTYKD

SLKPKESSTKEQKKEENEKNKAYADHHKDKDSSRKWEHEQEPTDNKKDSKAEEEKKKKEEEEQKKLTAPWPEKNKVWDETANLVYRWGLSRNEPHRLHFDKFS

NAEEDQKERAVEERYEDDKHTLGPLRNNRDRFGIRHQHGSVWDPENRIEEATSGPHAQVKVVWPKSHPM

OP2.3: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: tr|F9FTB2|F9FTB2_FUSOF

MALVPYTKQQLDDCILMPHEPSTSEFHVFNKLPYDLRHKVWESSLLNYRHIKVLLADDNNWEFSIWNCRHRKVFLVDDDDEKQYEIFVKKSAAYHALLNTTSESRN

VAKTFYRVQMPCRRMGPDGSVDGTLFLCPELDTIQVETHCCSLQHFEKFSDAILTADKHNIGLVNLALDCEFRHIDGLFSLDQNEHTLFTDAIRRIEVLTFVGRVAKP

ELLMYGSDLRVVNSSPRFVDKRINTESYDRGVFNYESGLYENELKAVHIVKEDPRRGYYSFCLLMEELKIPEDVYKSNLTNELFMLTYNYEPEFIPTNGDPHEYRLA

YNNSQREYREYNQGPPPAIGFWLFPLSVIGPFFLDNLNPLTGLPSDRSEAKMVKERVVDVPSMTIPSSQSRLNVSNANEPRDAHETRTIIRFRWNKMNGIADSSARKEI

AFHFLPAITAEPNSRREVELRQSSARSHLAKSMHRRKRASKELPSEQESTELRKTNKGMAMAERSTIRNDRQLLLTSGQLSMCVIPDRMVDPHTKMLLHYCTQSFWP

GFEIGSAAFHIPPFALDYNTLVAQGPALVHACLWQAAVNLAFKRNSRVTDKQSLLHYNQAIAHISKDITKPVSEIPEQTLYAILSLCGPEMSPDDGNGIIKKAFDPPLA



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

116

ELSWIHVFGSRLLIDSHAKALMNLVDLKGGIHNVKYAGFQASFNYMDLVRATQKLVKPHLPVSQLYGRVKETHDRAKFFGYASDFVEHSPFEESSVIIDSLSVLGLA

EDVREVICDMRVWVKVIEAYHRSALTNPDLSLLAAHRDLIQQRLLATLPDGYDGKKPMQMDASGSTETTADRWINEIIQTALLIFSLGVTCPISYAPPYHHAAQRLQ

AQLILYKERATHLGLSDLLTWLGMLGLLCTEQVGSGLREWFVGFLSMVEKKRGVTGDARDWDLVKKESLELMLWSSVACDTAADTAWRDVQEVADETSWNWG

RTAWSTMLGTICG


RRRRRtr|F9FPW2|F9FPW2_FUSOF

AGEHKVTTDGEEEHHETQDAQETEGEAKGDKDMVNEFQSWLAEVSSFENGVATVAELSRNLKNINALVHEFSKLPLGYRIYKQTDKSPQPLNDNTEVRQALTLFN

QRPQKDHPRLGGRMMDRPDRPDGRPDGRPDGRPDRPDHGPYVPAGPPPQPPGRSDYSSIPTYSRGPIERPPGPGPTSAYRSYPQPPPVSEPGRSVTPPYRGQMQHQQP

PMGPGSAFYSNRGDDRMSMHHAQQPPPQSPPQSPAWSPAPTQPKSSPHQTPWPQQQQQQPPPQANPPQQSAWGPPQQMSSPPQQPPPWSAERGGQPVERARSASP

HLAYQGGPSGAHAPQGAAAYSTPYGQNQYQPPGPPGPPGPPAYRHGSQPSNTRSHSSPQYPNQRYYDREAAAELSVGISARSSGIHQPQPSDAYTPKLSPMVPTGRG

YPSYSEAEGRRMQSPPAPGPLTRGMAQPPPTPSPRTPTSTVDSVRKPQPPPDDNLLSMINLGGKRPEAPRPAAAPPQVPTGAQPTASGYQEHMSGSSPRHQLASMPRS

SPTNMQPSRVPTQEGMLNRVPQVPAQQQMPPAYSPPRGPEQPPRALPQGGLSGQQRHGFPEYRHPQPTVEPEQKVRRESQRALELQEQELRQIDMKQREMQANHEI

MAESRAPQLPQAAALPRQERPESGPPRSSAKQPLPVRVSQERDREREREGDPFGFQRVPARLPRQGPSMTQTVPQTTSHQGIPMPQQQPQVLPQQTVPAQAIPSGYM

GFPQGRPPQVSPEMKPQSTEGHLDIGPAVALPRSAAASSDYRRGRGGTSPQPPDPLKDGIARKRDADQVLVEWEAKGQDKQRVFYNKVMVATKSGMHAAIGTWD

SGFSRLLHPFDNSESVSWYSSAQTPAKRESPPHALNFTAMAPQPPPDPRLSPAAMVESISSPAVSQQRELTQIPQQQPQQQQQQQQQVSFPLQMGAPHQEFQGPLRHS

EAAPLPTSPGDTNLARSNSRSRGKGPGPAAALTQNAKAAKPEKEKPGRRRKRGDVKEPHDVKASGGRRGPTANPTSNETDVPPQEFGWTPAAARRPRRREGNEGT

DHNEETEGDGNGLESVLASSRQKAKGKRRRKPQKKLKEKLNLDKKNMYYYQICSGFDRHPIAEAVRGWQKPAELYRKEFLGAEEETFNNVPPLVRWASVLRDVPT

FGSKDLYKTNDKEEQNWIMNPIIAEKDTRYKEQQMRLEREKREEDERMSAQLVRELDRETAFRRGRGSGEHKPEPTVTGTIEIGTSVSFKGRSKVAAPDNSMTFDLY

REYNDKYIKRDHDQEASKELHMKDLHEVVFDDLTISSDLTKLFASDKDWPMCSYDPLSDIPPTTMYQRVADLNMFSDDESETEDDDVQSPTSPPKSATETTQLVVN

PCVVSVPAGEIAVQRHGLAEANETLNEPRPETFLEAPKESVADDPKGPTPEPLAETPKEVLTQTPQVGNAKATIDVPKDKDSKEKHSDECAGLPTRETKQPEFSETPA

TESAISPVDMAKKNSPSPPSEPAVRDTEIPPEDIDMDGSKPELEPAVFMETDENEAKQVPKEAHNEETEEAPKGISEEVPNEIRQEDSKEVHSQDPTKDLNPAAEEHSS

DDIKEGAAKAAHEVPRETTEQGVQASSEPTPAAEVPEESGKVQISHEPGPDLEVQVEQHLEKPPESDAKDTSDVADAMEVDEKKAQEIPTPDHIKEIVRKNVAEPLK

KVMKLLGEGEGIIKVMSGHSLAAFRAMVQTPLKPKELKSLEAETKGIEMDFYDAMDDDDDSESNQEVPAPKPPVEFRVARIIPQLRKRRPAEKPAERPDRARLESEQ

GFRPMNEMTPSPGSRYSDRRSANAPRTDRDMSARASQSERESKVTIEGPEASYNTRARNDYHPESKADSSRPRREDDHYHDYQSSGRRLPPRQQVFSPSRMLKPSDP

GKKLNPNIWQKSSPRPPPPQQARPGVPISPGDHMMGKGLGVSPMTPDHGASPPRDNFARPATPPVKTAASASVYGEGVSLGRNPVPGFASASPAAPPPSVEKSSLGS

DHGANARAELKNRFLERDRPDRDDRIDRRTDPDAYRDMRDMRDRDDRDRGWRGEQSRSRPYRDGRDDMYPGRGRGRESSWDGRGRGRGRHFGGGRPYPAMGF

QPDSSSSGASPPGGDRSGRRSRDADVGLPGDRDRFDRTPSRARGIPSRRSRFDRPERWERDRERDRDRERSRDDHYRDRFDIDRDRGRDRSDDRSSWGRGRGRGRG

GRFEGGFGGGRPGSPADILAKPGRPPERRLPDGFDRGPQFGGNSRLETLDTLRATVPHDPGNM


RRRRRtr|J9MZX5|J9MZX5_FUSO4

ATSSLGLEKYFAESSPERGLFERLFELEPISGGRELVTHRYRRGEKGDMPNKAFFSHFMDLSFVESYLYGYYGADYGGIFHGIGAHRNGWELGEGLDEPGKTGSIEHR

LTNWVRGANLKKVAEHSEPTHVTMDFLGIVLQGLAGIASNLRKTSVLKEILEDPIQEQTEWHKSLSKLVSPTWCWNELMQSPAEVFDLVTSTGHFYSYRTRGALDH



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

117

IGHGLEHFLTVVEHHKLLSPKKPTPKSFNCVLATVPYHKKGDETVYGPELNFNANHGYKNDRPHLDLYLYGNFSSGSAEDDWVSYILVDEHWVIDEAKGTPSLRAR

EEPKLEVFVFGFIEEFIKLMGAFTSEVPFYQSIAAEDVSYEKEKQIRSYFSTDWMYFSDDFSLGREEYDKKKYEKLANIEKAGGEALRNRLDDLFTRVAAPTKAMKEE

IRLAAHNDYGLLRAAEDRLTIIEQFIPVNVNAKNSEAITYKRRTDADIAYKILPFYHNYKFSLKVKGENEGTGKELSDIDIDDSPVGKLEEPTFWIAGKEENLNKQAKI

ELESLRKQIEKFRDRKPGAPLRLGNRIYKQREKELVHAQEKTLDQSARNAYAADVANFVDERMNCEIGFDNFASEAETSADRLEKNTSVHHYFTLIRRQTAALNEDI

LIPELVNAFSAKDATVNATVSDLVNKTADCLKKTDAAISEPTATFLPPAQPPNRYKDPAM

OP2.6: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|F9F9J4|F9F9J4_FUSOF

MLRSNGWKTEPVAIVGTSCRFPGGANSPSKLWQILRDPPDLRKEIPSTRFNQHSFHHPNSIQHGTSNVAHSYLLEEDVGEFDHGFFNLNPKEAESMDPQQRLLLETVY

EGIEAAGYTMPELRGSSTGVYVGQMTDDYYDILNKDVSCAPQYTATGSSRAIVANRVSYFFDWRGPSINIDTACSSSLVALHQAVQALRSGEISLAVAAGVNLILGP

EKYIYESQNKLSMLSPTGRSRMWDSKADGYARGEGFTAVVIKRLSQALSDNDDIECIIRETGVNQDGRSEGLTVPSSEAQAALIRSTYNKCGLDWRSKDDRCQYFEA

HGTGTQAGDPREARAIRDAFFPDSKDSNSKEEKLYVGSVKTVIGHLEGAAGLAGLLKAALAVKLGRIPPNLHFNVLNPKIKPFYDLLEVPTSLKAWPELPSGVPRRA

SVNSFGFGGTNAHAIIESWNPSDSYKDEGSAQRQHLGPFTLSATSQEGLMAATSNLSEALKANPAINLQDLAWTLQLRREHFPVRTAFAAVDREKLIQRLDVTSHDM

NTLSIQSSKATRVSEEYPARILGVFTGQGAQWPRMGAELYSQSARFRQSINELQESLDSLPDAPSWSLASELLALPESSRVKVAEIAQPICTAVQIALVDLAHVAGISF

HAVVGHSSGEIAAAYTAGYLSARDAIRIAYYRGLHSHLSSSPTSQPGKMMAIGLSFQAAKSFCERPQFLGRISVAASNARSSVTISGDADAIVEAKGVLDTEGVFARE

LQVDKAYHSHHMKPCSEAYLNSLLQCCITVRRTNIGGGCAWYSSVHGSAGRYTHEPETFSGQYWVDNLVKPVMFSQALDRAVQESQHLDLVIEVGPHPALRGPAS

DLIKALAGVALPYCGLLKRGENDFCSFSEALGFVWRHIQIDQNSQPLPDFEAYARACVSDPGDFSPQVCKGLPQYPWSHGKSLMWESRASKLWRGRKEPEHILLGIP

TISGNRQDVHWRKVMRVNEMEWLTGHKFQNQILFPAAGYVCMAIEAASYLDPDQPNKTRVIELSDMKIHRAITLSEQTSAGTEVIFTIHTRQKDSTTTIADFSCFSVE

ADASVDEQSKCNFTGSATIVTSSASAKTLGPSRGEPLLPLTHVDLDQFYSSVSSIGLDYSGDFVAKSIDRRLGFATVSMTQDDRFQLLVDPAVLDTSFHGVFSAFSYPK

DGRMWAAYLPTSIRRIRVTPTQRAEQWENPQNRPRQFNADCTLCEASNKIIVADVALYSGTGNTLECQLEGLTCTSFTTQSPDQDRKLFSRTVWRKDISSGIENNMM

IQVSHDDNRLYEVLERTSYYFLRCLRDNISPSEMRSDNMAWHYKASLGWVMERLLPCIESGHHPRVKAEWSTDQEEDIQSWRVEFGDEISLLAVHAIGQSYTEIVRG

TVPPLQILMEDNVLNRLYKDCIGGKTANRQVGELVGQLAHRYPQMNILEIGAGTGGTTNSALKCLNASFASYTYTDISPGFFEKAASAFASHAHKMIFKTLDIERDPG

EQGFKLHSFDVIIAANVLHATKHLEETISNCHKLLKPGGRMVLLEITSEALWIQTIFSALPGWWLGQEEGRMNHPTVSIGEWDDILRRQGFSGVDVECRDLEDENRY

TFSVFATQALDDRVQTLRNPLLMSPSHPLAPKIDHMVLIGPKSSGTVLTALVGNIKSLLSPYTRSILVADGLQDPVLAQGTLPIGSIVISVLDLQNATFREINDAKFNTL

KTIFNNSGTILWATRGCRADDPYSNIMVGLGRSVIQELPHLNLQFVDLDPTKTDEAAALLSNMLLRMVCTESPEFQDMVWSRETETTIQDGDLYIPRILPQEALNDRI

NSGRRTVQVQAELSQQPVTLRVDSPSGVCCFEESSAGMRERNDDNSLLVQICIQACSLFPLVMKDRQSYYIGVGRNVESTEVVFALTPTNSSMVRVSPDKVMPICQS

SSTHTTSFLHTLLQVVLIRVFCESAIMPLGGIKSTVWLHVADPLIAGLARNITSAYGLDFLWTTSSNVTLRPGDCFEAGPIAIHPFINDRELNAQVPSHVGCLLTFEQEPI

SGFYARLASCLDDGSAVYHFASQANSQGHVNVSLIFDEVRQTVQRIAKSPMTGYTTINSASTAVIPIDKLPTSWATAPHTSGPLDVVDWECVQQVTTIVKPLNTRHM

FSGDKTYFLVGLTGELGLGLCNWMIENGARHLALSSRKPNIESRYLRYWETKGAKVRVFSLDVGDERMLHDVHRQIVETMPPIGGVMNGAMVLRDRPFSAMSLED

FEAVLDPKVRGSEYLDTLFYSDSLEFFILFSSLSRVIGNPGQSNYAAANMFMASLASQRRARGVCASVIDIAMLVGFGWMWRNAGEILEAQMKAAAYMSISEPEFHT

IMAEAIRSGRADIGLEPEMHTGLAMSNTASWSRFPRFSHFVPSEDQKVAETDTGSKLVKTLQQCISEASSDRDILAAIESAFSHKLRLVLQLADNGSTPMDPKTALLSL

GIDSLVAVELRSWFLKELAVDVPTLRILSDATIADISIEVKSKLKAFSKEKELGPEEIKTNANEGEIASSGALAVASIPIASDEASSTPRSEASSERQAENDSWQNTPGWP

NSTASPSVAGSFIDGEDMPKQEGPNIDSYERAGRMSHSQEALHFLHEYLADRSSQNVLFYGRYAHHINLSQLQDALSLVARRHEALRSAYMVNSATQEAVQAVTGT

SGIHLIHKHLDTEADVDGHVKQLRKHVFDIAGGKLMIVAVFSISTNLHYIVFVHHHIIMDAQATLVFLRELTKAYARSPLDTSPPQAIELADKVSYWKAIHQVPLGAIP

LLPFARTQSRKPLLDYDLDTFDITLETDLCSLIRNKCSELRITPFHFYVTTFHALLSRCLDTSEDMNIGIVDSNRGQAKGDTEALGCYLNLLPLRLNLQPNETFDEAAQ

RTKGTVLQALGNTGVPFEMLLDQLKVPRHSTHHPLFQVIVNYRLGIPSSSQFGDGKIEWIGAMAAKNSYDLAVEVSDTPRGSCVLSFTTQRYLYSASDNRMLMKWS

CPLADPQAMGQAKMLGHGPSVDIKWNGTLVDQVLRIATEFPNSTAIKQDDGNQITYSGMIDKVDQFCRGLQARQISPGSRVAVLLSPDIDSVCILMSVLQQGLVWV



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

118

PLDARNHIKRLAAILQDSNPRHIIYSKDTEDLAKDLTSAGSEDIPKGDLLLSLEELIESRTFSISDEVLNLSKRDADAVLLYTSGSTGVPKGVRLTHMGLLNQIYILADV

VGEQQVVLQQTSHGFDMALDQIFNSLTRGGTLVVVGQLGRGDPRHLAKVMLSEGVTYTCIVPSEYHMMIQYGFDYLKQCHQWRFAHAGGEKVTHHLRRAFKDLS

LPSLKLFNAYGPTETYLGCARGLISYQTEEDIVADSDGIRVLPNYNLTIVDKDLNPVPSGFPGEICISSQYSISPGYNNRPEETQHRFIDSSLMGRGAGPSGVPAYRTGD

LGRLSPDDGTLTVLRRITSQLSQVKIRGQRVELDDIAATIIRCSNKVISNAAVSWRPDDEMLVALIVLGRDVDQDSVDWAMNELGQQLPLPQYMRPSVWIPVPEIPRN

SNGKADRFAIDQYPIPSSDAQDQRQSKFKVDGLNTCLSEDECQVARIWKQVIGDFTLDALDPSTDFFHLGGNSRNLIELRLLLEKEFAPAKLRLPELFQHSSLGDMVA

LVGYSDSPKSQSSQMDWKGEIAYWCQEALRPQHNAHNNGATRTNPDRLVVVLTGATGFLGSSIAQRLVDDDRVGEVHCIAIRDSDTQANRVPVWSDKIYEHAGNL

ESPLLGLSYDEFQSLSNRADMIIHNGAQVSFLKTYQSLRRSNVSSTVELCRMALVQSIPFHFVSTGAVALIPTTTDCRDRSSTLLEQSSSNRIPEPVSQSGYQDSKWVAE

NILEEVSNRCGLPVVIHRPASIVGAGAPKLDLMAAILDTSRALGMVPELEDHIEGPLDLISVQDVSRQLVNCALETARATHTKQELTAKFVHHCNANKLHVSQLKEY

LEDHDGQETKYSLVGLDNWLHAAAQTDIEFLLTTSCN

OP2.7: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MBG3|J9MBG3_FUSO4

MPPRKSSSRKSDTSTARFVPMDDVSPSEQSPAPAPTHDNDSMATQVPAPAPAPAPPAASETAATEAEADSSMTQNGDKKDKDKDKDKEHKEHITIEDLTLPKSIITRL

SKGVLPPNTQIQANAIMALSQSTTVFINYLASHANENTVNAGKKTISPADVFKALEETEFAFLKEPLEAEFAKFNAIQTEKRTSYRQKVRAKKSDGPDTDMPDTSNM

ETDADTTAVSTGPLTKRPRVEPGNAEAEEDAVTEDEVEIPEDSEDDEVEEEDEEEAEASGDDTQDALELKEGKEERDEALDGDESD

OP2.8: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MDL5|J9MDL5_FUSO4

MSSSERDSSYDGDFQLRHQQSASSDPNFRALVPMWDSSDPERCPPPLPLNPGSPLTSRVGTSSAIASAHAALNERARESTMVPTKRIESPTKGHRRLQSSVRDISMMIE

GASGHSSPSRSPERQQRPETPSRPRDADNRPNEKDSVVSSTTPVPGPSLTPILRPAVRRPPPQSILGENTPPQSSTMLALQHMTSSTPVKEPENPLTDITNGSLTLPKGPQ

NLEALSDQILSLTSIATGLQKEMSQLSRRSRDNATDLLSLKEATNSRDEDIRRSLRELLGSHGNGNDGHNRLPPARDPFGGYYLDNKPHNLSPPSTRGFHLPRIPSPKSF

GDSIERGSISTPSLAGSEAPPSVVLLERIIREMGTKEGQESLLGRLQEVSNKLSGMATSQKLDEVIEQVKAQSEQAIILGNSLGSPHASRSRNLSFESENSRSDIMPGQAR

SAVSQRVEHIMKNEARRNSEPSARGAEILNDDLISIIRSVKDSVSQGGGLTAEVKALVRELRGEVLGMGREIGRRLEQQASRRGVEDHDTPSKDEVARVIDEGLEQM

KDQLNHVLREHRRQSAASVNTQKSAVDYQEIYNAMRAAIQDNEATKSNLPDLSREDVIEAVRDAWENYKPEIEVQQLGLERDEVLACLKQGLQEYAPRDDHPPAV

TRDEVFTAVVDGLKHFVPPQVDQPATLSREEIIDAVRDCLEEFEFPVAPGTGNDITHEDVVHAVREGLQDLDVHSSRALVPASASNDDVADRLREIMEFLRHEFKTLS

EETKETVAANGRETEQVRDVTKDGFENLRQAMESYVDRATGAAGQEEFMDDLLKSLEDFKDEMAGIVSTTNQESREQLQTELEGLREIVNSSMVPALPPQTNNTEI

LEALNTGFNNLRQEVLRPRAETSEILDALNDGLNDLRAGMDRVTNKPTDLTANDEILEALKTGLHSVRADIESIRDSSNDRAVATLESTPPANDEVLEALKSGLSGVR

ADIEALRDSQTEKAVAVVEPKENDEVLEALKNGLDALRVDIEAIRQSTSEKPAAPVDNTTNDEVIEALKNGLDSLRVDIEAVRDSSEKAIAPVDNSSSTEFIEALKNGL

ESLKADIELSRDNSDRAALGEDTSNDEVIVTLKNGLDSLHAEIAALAAQEKPDTPIENTSNDEVIVTLKNGLDSLHAEIVAIATAQKAAAAPVDNTTNDEVIEALKNG

LDSLRTDIEGLQESNQKALAPVPDTKPNDEVLDALRTGLESLHSDIETLRESNNERAIAPAESSTDEKILDALKTGLESVRSDIEALRDSNGERALAAVSTDNTEDDGP

SEKIRSDDIKNLEVLIAGLAIKIDSVKSENQGLQKDDLSRMEDLLRTVQDSVDEIASRETLTRSASVKKKKEDGEEETARAIVGDGDEPASKEDMQAIENILRNTKGKL

DDLIDGEQAVRKDHIDNVEALLLETRETMGSLTTQLETVSRKEEVTALETLLGQVSTSLDEIKEHAAKESENPDKVTKADVEAVEALALEVKTALESFTSTDLALLA

RKEDITSLEALLVKKEDLAGLESIVKDFQDKLDTTVDAQTKAIAVRDEESTSVGERVTEVKTFLEELQGTINVKLEEGATGVESISKLLETVGEKINKNENVHQDLKD

MLDTIKTEFEDSKAVVSGVKVESNEKLQEATETLSTKIDEKIGELITKYETLQTTLDDRSKVSEARDEAMEAAVVSSKSVTDELKLLIDTLGSTVTDSLEKMEEASKT

VFTKVEELVARSEETHTEDKAEHQQTRDQITEALTAVESLKGEVSESHPKILESVKDLLLLVGEHYEHSKSSTTDIQDKIVEHKSPEELMTLLTLLTDDKFNNTHVHE

KLDKLIEQIYNDSEVKERLDKIIEEKYNDTEVREKLDKIIDEKYDDSQVHQKLATIIESKYDDSEIREKLEKIIESKYDDAEVRAKLDKIIEEKYDDAPIKEILGMLVDQK

YDDTPVREKLDLIMDSKYDDTLVREKLDLVLDGRYDDAVVQEKLDKLVDHSAVADHAFSRLDTLDKVHASVVQTAADISEFLSAQKQRIEQAHEDHTKTLQETM



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

119

ASVERKLAEKDHVEAAVASLRDEEERLRQSVMTLRTEQESLIRQKTRLTGDVSSLETALHMRKEELYDMESRAENLERRILEGVMDHSRVLLMAKANRNGGDAMS

RKRVRKPANEEESPETGAHGRKSMVGMALNAKRNLAAPVQNGAGRRIVSLSQINNNVASGGVKRSQSVRTPLGGGKTYRKRSWGGNLDKGLADNDKENTVNET

VEEVDEADVKSAAAPEATEASTDETIVIESTPNDEEADGGEGGDSDNETLRRSSRGTVVTNSTDMYTDGDEYSEYSYTESEWTESNVGTDAGSVQGNEVVVYGN

OP2.9: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MPG6|J9MPG6_FUSO4

MSSPRVSKPKFEHHHNGLGVDTSRPRLSWSFETSPSTAASWVQTSYEVEITFSNTVDAQLFIIESEESVLVPWPARSLSSRESASVRVRVYGKSLDQESAVVKPSSWST

AAIVETALLETSDFKANFITSAERIGPYGPLRPIRFYREFTLPQDTTTIPRARLYITSLGVFEATINGQRVGDEVLAPGWTSYNHRLIYRIHNVTSLLLPGKNVISAEVAE

GWYAGRLGFKGGKRFRYGDELGLFAQLEIQDTAGKVSWDLVSDETWSSTTSPIVTSEIYDGEVHDMNHIPPKPLKTRVLQRPSAQLVAPDIPPVRVTETISCKRVFGS

QRGKTVLDFGQNLVGKLFIPCLPTEKDKCITFRHAEVMENGELGTRPLRDAKCCDTVIGSGEILLNWSPKFTFHGFRYVEVEGWPGDGPSPDDIRAVVLHTDMERRG

FFECSNPYVNQLHNNIVWSMRGNFLSLPTDCPQRDERLGWTGDLQVFCPTATYLYDTLGILSNWLQDVSAEQLEEGKGGIPPLVCPNAISSNWPHMAQAIWDDVTV

LAPDALFQYSSDKGLLERQFDSMHAWLERGVDRAPDGLWNPDKWQLADWLDPSAPPEDPGNGRTDNILVANAYLVHTTLVFSKLCSVLGKTELAAKYAQDGERL

KVLFQRRYITAEGNLMSTSQTGLGLAIRFGLYPENDEQRKTAGKALDRLVRTARFHISTGFAGTPVISHALSEIGRSQLAYRMLLETTCPSWLYAVVSHDATTVIGST

EQSVAYHLKSQAGASFECVRFLEGISLVPRYRSMDLMDLLRVNGSSKVKDLLCR

OP2.10: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum/ AC: tr|F9GBQ6|F9GBQ6_FUSOF

MADINVDEVLKLLTLSEKVDLLAGIDFWHTKALPKYGVPSLRMSDGPNGVRGTKSFNGVPAACFPCGTALGATFNQALLEEAGKTMGAEAIAKSAHVILGPTINMQ

RSPLGGRGFESIGEDPFLAGIGAAALVRGIQSTGVQAAIKHFLCNDQEDKRMGVQSIITERALREIYALPFQLVVRDARPGAFMTAYNGINGTMCSENPKYIDGMLRK

EWGWDGLVMSDWYGTYSTTPAVVAGLDLEMPGPPRFRGEALKFNASTNKPFIHVINARAREVLKLVKKCAPLKLEENGPEREANTPETAALLRKIGTESIVLLKND

GNVLPFKKEKTTLVIGPNAKVATYHGGGSAALPAYYATTPFDGISEKLGAPPTYTVGAYTHRFLPLLGAQCTAPNGQPGVRWTVYNKPRRAAVRGDPVDELYVIKT

EMHFFDYSNPKVRDVWWADMEGSFVSEEDCTYEVGCVVCGSAKIFVNDELIVDNATKQVAGESFFNATTREERGRVAMKKGETYRFLVEFGSAPTFTLKGDAFVP

GHGSLRVGGCKVIDDDDEIAKSAALARRHDQVIVCAGLNSDWETEGADRASMKLPGALDRLIATVAIANPNTAVVMQTGTPEEMPWLGATRAVVQAWYGGNEA

GNAIADVLFGDANPSGKLSLSFPCRLQDVPSFLNYRTEAGRTLYGEDIYVGYRYYEFADRDVNFSFGHGLSYTTFSFSDLSVTIVPSSSSSPLERKITATLKITNTGPVA

GAEVAQMYISPRQPAKVNRPIKELRGFAKVDLAPAQTKTVVIEELEKYAAAYWDEERDQWCVEAGEYEVIVGNTSAVGADGACVVQRTVTVEETYWWSGV

OP2.11: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9N1S3|J9N1S3_FUSO4

MKRSQGKPTGRGFEGPRSGFSGFGGFGTAASGTSLSYLAEPPSFAAVSDPNVVVSLKNILKKDSTTKAKALEELLAYVQAHPFDKDGGVEEGILDVWVQIYPRTSID

NSRRVRELTHNLQFELMKSARKRFERHLPKIVGAWLAGLYDRDRVVARAASDGLTSFLNTPEKVLAFWTKCQGQILDYAIDAIQETQDTLSDERSTTAEDAEAKYY

RVVTASLSLVLSLLQKVEPSSLEKLQSRYDDYFAEENVWKTITFNDSSVRKTVCQLLFASIDRKLPYADDTKVKQAFITGGLKTNQAGSALEYVRALTKMTQTYPDV

WTSAKTSSGPKSPLGRLQAFVAKGSQGSPPKFWEYLDQLLMVLPSDLITPEVASQFLTSLKSGITHRDEPRTNTSYAWKCFIDTAKRLLKNLPADDQLPFVQEHLFPLI

EQFLFSVSEKTVPIPLGPNAISVLVEAYIATVQASPSVVSASKEEWDRLASVFCAKISGSLPEVSREYQQSQEKISEEGRRWFGLVGQIEEKIADLEEDVQDHTAQPSLK

AISQSIALLENRNLKPFGAARIIEYALSMAPRLFDGDGAAKLSTFFTTLARDDAAKAVTSPSSRYLLSSLHLFGSVSTQFAPIWNSWVEAVLDLPSEATRDVALASLIS

NDRGAVLAKGNMDLQKHIIGQAALLAVGGSNDWELLEAAVTYQTLTDSNYRELVQALVEILEKEPGKTESTLQALEIAAKGRPELFSRDERVHTTLVALLLGLSEL

EDSTISSKATAIRTLLDTHTDGKLPVIAVVQANLERAGTQSLDINTLVSQAYNAASSDIPSEELFPSTNVWMKELAPFLELSVNPALSITNSIGGAAALVKAAPRSTNLR

IYRDRKGRAIPTRMALYVSQLSEKLPLSQLPKPFQLELLYLQCLTVQLISDQITCMEENRLWQTLKHAEASAQAEEFVSKTRGILNQLAADASAWSDSEEKPIIQDLID

LLTQHSQELTPRGLYSARALSELVQFLAEAHGASSSFEDALLKPDVLKIDPTTVLPASAIIAGFGETLQPSKIASNFCNKVVSEIAGAKADSDKTLMTLVLLSQCAQIYE



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

120

AGEMPVANNRIVFAVRQITSWLDEPESLSPALCAEICRALNKLLPCMKDVYGSYWEKTIEFCISLWNRAHEFELNEALPFIHSSLRLFKTIESLQEPNDDLEDALKEYA

SAKPRALIELLRLPRDTRSQPLEIVDAMLCREVQKISLRHVPDLSDIFGLVASESRDIQTAAFNLLHQALPEQQQQKSIDALLEKTDARLPDELLSLLLDAPTLEKYSDE

MLAEFPSPIRSYLLSWKLVFDAYSTSSFKIRNDFTDNLKQDNCVGPLLDFMFDVLGHSAAHPLKLEKVNLTSEHIQDYDVKLAESEPEEKNMQWLLVHLFYLLHKY

TPGLFRAWYIDCRSKQTRIAVESWTTKYFSPIIVTDVLDEVQKWADSQEPPAMDEKELVVRVARSSREIIAGYEVDEDQAAIAIKIPQNYPIENVSVQSLNRVAVNEK

KWQSWIMTTQGVITFSNGNIIDGLQVFKRNILGALKGQSECAICYSIISTDKRMPDKRCTTCKNLFHRTCLYKWFQSSNQNTCPLCRNPIDYLGSDTKRRQG

OP2.12: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9N5K9|J9N5K9_FUSO4

MALLNPTFVFGCIVLLYLSSFVLLAVFRIITGISIQRIGYFSLRRLAYTPRDGCRIEIRGLGLHVHRPTFAQPTWLSIVLSELVVTLDINELEGNKQVDVDPEDSDAETSK

DKKPDAKTTARQQPQLPRRATSTVVRSETWKKLTNIKEKIKRLHRNISWLKLVDVVATNSAVNIVDVGNVQVGSFTLAVDTRRKMVDRVRFFARLADRHGKDQQ

AEWTVSLRSVLFTADGNESMEVLDQLFINVHGHLYKSMDGLREAAVAIKMGRLHIPFDDLQTCMSRLKQRRAEVKTPGAEEEPVDIFLGKVAQEIDDPGTTNEDLM

RTVSDSKEFFSSILRGIKEIQFAVSFLGMSKKVQSIKPGSTPIQLNAAMKEVGIDLHRLDSKSPAHRMYFPAEAIAHEALAAALSISVGLDDGHGQPERLLYVPMATTTI

KTTLLSKTVEVLRASTVDERNANIMFANSVVTSPSVDLDPHHLPLLIALFKSKPRAPRAQNDNHHLISRLLPKANYKFSMHEPVVRIKLQPLQKAEDPDDFDLIISSISS

ISLDVESSHSLMADMHYSLDGSFRLQSHDLYYQTNNGERFNLITTESLDMKLHLGARPDVYVDVSGNLQSASISMVRPEIIDGLRQIVQELRIDVEPEKGTISRPRGGQ

NFLRSMPNWLLRAQFDASDFNVEIAGIDEEISDDTRGVFLHWDTVSTEYRAHRLDGLQRRASRRRANSRSISQSDSEWTPPSSSPRPKKKPQNIGDGRKLTLFASGIEA

QIMDAVDTLEPEPFLSVPRLELSLSAASDASGPTFNIQVGVRSIRAKYSLYRHYAIGVAVMTLRKAFMQSGRDIPRTKQHGSYVDIIPSANRLAPPGTPDFDPGSSTITP

ELVTLDFKAALVQLKADMPHDPAMMLHMYGLELGRQRWSTPYIAAKLVRLYTEPPRMRNVWARLVSIKSGRLDFRESRRKTAYGGVVDEKMVDIVTEAVRIAVP

HEVIVSRVSDNFINVIKAVQQLHHRFKTGTNEYILEKKPEGPKSVPKVSVRTRNFLFELEDGGFEWKLGMIYRTGLIEQTQRLARENAFKVKLKRVREEEIRRGSSKF

RSRSTFPRGRPEMGDRPSSRSRSADAFEGTDARPSSQYGRIPRYNPNIESLRVNGVSKVTEHYARGHLDMFNAQSWKKRIDRAYQMSQDSMKESRGQFWGANQIPE

DMEDSENLLEVPPRPALMAAVISDLHFMIDKPTFPMKDLPDFLHKIGKGMPKDMQYSLLVPMHLSIAMGEAKVTLRDYPLPLVHIPPMKYGQSAKIQAVSLKANFV

VAEEFRGVESTRRVRVNVVPPRSTLPGSSNEGSFAIEVRRTIGPVKSYSDVYMDVNSALPTRITWGPCYQPAIQDMMMVIESFTKPQFDPSERVGFWDKLRLNFHSRI

HMSWKGDGDVHLALKGTRDPYAMTGNGAGFLMCWRNDIRWNINADDDPKGFISVESGEYILAVPDYSHEVRDQARRLYDAEGHLPEDNYKSEASFKKVVMKLS

GKVKVMAGLIFERAIEDGQRSFEFRPHYDIVLKNPHFAKPDANGLPYDAMRGFRSRHIHLSIAIHAPADRDWLSDSPEPSRSYNTIHLTPRFFTHFFNWWGLFGQPLSL

PIRQGSLFPGREKNSKKFGRHLATVKYNILLAPLFLSHIYKHKDVEDHSENAVSATGLKVRFDSFSLDLHQRREEFNTLGKGKHGDDTSKTSGIKIHAAQLDLVSADV

RAVSASLKGTTTEAIKKGSIATLMSESDEKPDLSRFTIPDNDFSWIDMDDFVELDWITPTEPHPDTKILPLAYAPRLTYFRQTDIGGVIAGDPTRTSPFGSEPTHFCVMR

HDDDPRRIQGQLIRDRLDQLGRQMESHDREMGEAELRVIKCDAKDRVAVEEFKAFQKHTDVLQEKKEFLESMLNQAKIRAPSSTNRSSNDGRKQSGESSIPFQDET

MEIPATSEFESEFNNRFVIHNLQLKWNNTLRNIVLRYLHQNSQRRGFTYYLSRPAIKFILDIVEEQNKAKSNNKPGKAKSTHSRQGGRRSSRASSIHDDETPLDIEERIK

RILNDGRKFTSATWGTNAEGFVEGSIEDLVTGIAEEFTPQSSYHIRIIAPQIQLQSDKNKKNVVLATAKGMELKVMEVMEKERISDNVSGLVQRRFLVNMDSVQFFVT

HRKWFQTSLVSMYVGSKYGAPSGSSWPPWVPIEVVFDFQADPFGFKRVVQKTSAMVRYDKFNTLRLKYNDEVNTDGNENASQVNMENRMDNLWVEFPTARALC

NSSQYYALYVIVLDLLMYNEPMEKTRSERLEKIILASDFSDLSGAPAMVQKLQQRIRQMEEIKDHFQIYAKHLDKKGWQDRLHLEKDLAACEDELFFMMKAITSSQ

RKYDVNSDDSTGLLKWNITIRDIVWHLMQDSNEPLVELQLKDLEYDRTDNSDGSHVNLIRVGKVLGLNLLPDATYPEMIAPYIDPEKPHTQEGEHKEMIRVYWYML

EAIAGIPVMDRFEVNLFPIKVQLEREVGKRLFEYIFPGINGEKSAGTKNDSPFMLKQVTADGEEDEDYEDGNGLTPSYTRQSSSSSFSAGSGSLELRLRPTLTSNTKTE

APPGKALSVNTGNEGHSFRLFRTPGTSKTMLKKASHESLRSNMGPRVGLTRASTGLSSREGRESRDGDKKSRFGLGKKHHNEKQQSDDLTKMMTRASQYMTFSSIK

MPSVVLCLSYRGKDNRNIEDVHDFVFRMPSIEWENKTWSNLDLALALKKAVVKALISHTGALIGNKFSKHRPNAEQRDKLRVLANSSVLIAPSSSGGSQHYPGSLND

SDDSSLYGSSPVDFSRSPPRSIRAGSTHSSVRPGSAMRRRSRSSSVKSRRSHRNGGTGHGLQAPHGPNVPAFLMMTPPTPIDDHHRNDRHHHGVELLRPATASPQSSIH



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

121

SMNNSMYSQQGQTYGITPSNSHASSVNSASTHSSIPVPVAQQHRPGFRRIPTGIERPASSMSNHDSGVRRKNGASNLKDKLSALTSRIGNRESSSPSQQEDDSEAVDD

QLTPAGPISRSRRSSSHTGSRLSWTPSRMKTG

OP2.13: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|F9FCQ9|F9FCQ9_FUSOF

MLGHGDYKSARPSAFLPHQPSNERREKRRRPDTPPETQSDKSTIEWSPTPPPILRRATEKYQQLVASDRNHGSNKDWDVASMRRPFQPELIRAKITKVLNSVPFDNDQ

GAYTARNPLICRIRSLISTRTVGCALCAFYQPGPNVDTHKLKRCSHRDEAGEARPWLEMFRHYQAQGGGPGARCSHCRFPLMLCWRTVYREEMDLQYGSEKEARE

KDNVWYKEVQCNWVKTIHRFVTSCMVVHGSAKNGGVSRLGGTVLDVMGWQDWRGLEENGPEHIQPWLEETGEIGGLRCPRLLVLFWLLAECSSLDERGADSSW

OP2.14: REVERSED Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: RRRRRtr|J9NI58|J9NI58_FUSO4

FADGAWLREWAGKCVERELMKLFEGMSMRELGDVRLIGNKVGRWGEVPLKLKDQGIGYFYRGKFKKEGRQIADYEAQCEDCIMASAFTTYLYMSSNGWWHYE

RMPNCFGGCAYMADDPDLLDGEDTPPTGISDEDDSTDSTEADGEETQEEQSKPEAPSEKAEEAEAPADEATDEAAEEEGDNETGDVKSFVSSGVIRAYRRLMEDGR

LATSMLALAQALLLYFYSDNWGVTDALGVFCDDLISQVTEQFKDLPGMVMYMYAAGVRPSSTWGLSTPPVCLPLPRQMIGALSALREAKYAPDRSKRFLELQVNT

MHGVAGIMVYLATVGLLPYRIGTARSDFVQDLVALAKEPEQCVEFYIIALDVRLPTGADLNDMFAIAEEYFKVIFKQEGTESAIDCFHAHRDEGENIYDSAIWTIREV

LTWQKLMQIYESKDKKREAVKLEDVLDEGPTIGEPDSAKAKAFSELAADSHGLKRQARACTTYVLRKLAPPVEHTSLAEVATNAVEYAEKKKKRELLLTSLVTSAR

YWEDDNPNCLELAQRCTKEAPDDLDLQALVQSIARHAAADPKMEEGFLNLIGLSAATEDFPDIDKSYADEGEFLEPFNIVAQDMLLKTSAAATLVGQLNGWAEVA

EKENQAQHLHRLYGKAMDLRCTPPNKAVRQWWEVSFDSTKEKIEANDLLKAWDSVKGDTVTTGGLSGYRYGTKGFIETVGTKNSMVEAFAELVEIQEQATYDEI

KLMTFHTVFCVACYKLLSESVSSRPQHLLDASTVLMRRNAESPGWRFPSANQASNTFYHRMSREKFTVPLPGDDYINDHGDDEDQKLDQVATAKSAQIRAMVETD

YGPGGINFFKDFLEHIEEISFKEDQGLFKVLSQVETLTLLRKAFAVWHLLSAAVEKHKPPMRRQCEELHIEYIEHLTKPKEGGLARLIAGERGMGDLRALMHQAYLM

NPSAEEITNAIRQQVYRNFRRLNNLSNMESWILARLDQTQKKKTAEIKVLKTKEPIDDLREPRSTVAISIRLGKDNYFDSLFLKFNGWDRLEDLGDFVIFLNFKSEPGF

VDALLHQVLEQWLNANIENDDKAIQANIRECAAHNTEAIRNIVTIIGGLFIGWSDDQERFYFHAVCTNGTEDEAARQALKDHLSAAMHSKGAGPEAILALIPRTGEPF

KLWEEWEPESFVWSCSDPLLTEKLAQYEHDDNPVIPMFNRISSSSPPKNAQPKEM


RRRRRtr|J9N7K4|J9N7K4_FUSO4

NKKAETDKSESLNDAMAEATAKKLRESDDTKDDKIKQHTEREDESDGLSFPDNEAIPSPEVASMPQWKSGRTGSAPAADKPPVRPSSDYMNIEETEEKFGVRRGNSP

KPSASPPPPKYMGTNAMPRSVPTGDSSFKMGAFDDSLVQPDADYRDYDGSRRSSEGPRRFPEGQRQTQEESEDFNEEIKKKINTIWGNVKEQTEFFGKRLNERIVPLD

DDIFSHERDDGWEDQGRQGQRQGRNATRSEYAGVNDYHEALQRAYLEDAELQSMQSRNQPRPPQPPPVEDAPENQAADPDTMELLAHFAPEVRGGSARLVAKIVS

LEVSPFAEKLITENKQAESVPRPPKPPATENTPSPAQAQAQTQTTTTNTAAAPTTNSDLVGSEQVDDDDLDLPRATTPSEPGSEATAKNTEGPASM



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

122


RRRRRtr|F9G927|F9G927_FUSOF

PRILGCELGAKLAAQRMELQEERTPPVPEVGRKERSERTEYLIPGEDEDHSITYSRVEANAWDTGHPNIVNVWDDTLFHLFGGHSVVVIEREPRESLWQRAVEARKM

LSGIAPAWKGEKIQWGPEVLGFDVPQHEFEAKIASLDSGTDCNLDSVEQVEPLAVIQLGRELHTPFALLTTQLTRRLPSSVILDVNALEPFKSLLGRAQEEGLPTLDTD

PLVLNAEGLNHVAEGHRVLHITQPM

OP2.17: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MIH1|J9MIH1_FUSO4

MTTVSPSGGQLGTVIVETPVPETEHSSGDGSPPLTLPPGDDTYATIFRPHTGPGLITQPVTITTIAPSAGQPGTVIIETPEPESGPESTPTTTSAPGHVYVTIYRPYTGTAQI

TAPITITTTAPGSDTGTVIIETLAPTTASVIYVTIHRPYTGTEHITEPTTTTIAPISGTGTVVIETPITEPTTEGPVSNSPEITIPPSNESHNSTIIRPYSGTESITGPITKYLPPTA

AGEPGTIVIETPVDATTTEAQPSDEASSHAQTNISPSDGTPNVTVVREHTGSDTITAPITLFEPPSASGQPGTVIIETPASKHTSKPVDDNVTIYTLAPPGVKTPVTSYKLP

GNSGEPGTVFIQTVPSEPAPMGANVTITREEYSGLLGPFTTYLPPGASGDPGTFIIDLPAGRPSHVTSDGPVTVSAHSGSHNVTIVRSGPGSQVTTIFMPPTGSEAGTVII

ETPTASPEQGDVAASPSPLTDDKPGVTIPPSSNSPNMTIIRPYPGTGSITEPITRYLPPTAAGEPGTVVIETNASDSPEPTTNNPEITLPPTSDSPNTTVIRPYTGPGSITQPIT

RYIPPTAAGEPGTIVIETQSTDASDTSTEAGLTDEPSAITLSASHGSPNITIIRGVTGSEVAKGPVTKYIEPTKPGEPGTILIETPVASEPDGSPESQEPAGGPPSISAVPTTPE

DSLGSTSSNPNAITVTPSDANNDVTVIEPNTRFPDAIENVTQIIPPSNGNPGTKIIYTPIDTSSVEEASPGASGTANFVTVSATVTIPGDPSTRTGVRSSPGAEPTTTGKEIN

TIIIPPSGTEPGTVVLQTSVYLDQTLAEHGNVTITRAAPAGITKILTTYAPPAVSTDPGTFIIEIPDYNVTITQQATTSIASPFTTYLPPGSQGDPGTVVIEVPSYSATTGSH

VSLPASGPPETEVAGTGPGNTTIYSGVSGNVVKTMYYPPTNSGERGTVVVQTPAKSSERTNEEETPTSAAIGGRTNTTIYTAGSGTVRTTALILASSPGEPDTVLIQTPA

TNLNEDTSSAGHYTTVFTVGTGTATRTTTISATAPGEPDTILIQTPATDSNEDTSSARHYNTTVFTGGAGTATRTTMISATEPGEPDTILVITPTGDVQETGGATTTPPP

RDVSNVTISRDGPGSALTTIYQPATASNEPGTVIIETPTGSFEAPKIAAAGTNVTVYSGGHVTATRTIYIPPTASDDAGTVIIETPDGSTASKTGAGNITIYTGVSGTATK

TRFIPATVTDEPGTILIETPTGSPDPQTGVSNITIYTGFAGTTVRTTFIPGTASDEPGTVMVETPTGLADSSNTGTAPGNVTIHTGYSGSVTETRYIPPTRSGEAGTIVIETP

IGDSVDKETSSDRISDSSTGTVISPQQRENTTVYTGGPNAVAQTKYIPATASDEPDTILIQTPTNGIDTGSGTSASIPGAAKPNVTIYSAGAGMDTSPIYLPPASSGEAGTI

IILTPTGSAEHDSTGVTGSRETESQSPSTRNVTVTKPAPGSITSMYTTYMPPGSPGDPGTVIVETPDYNVTITRQAPASVTSVRLSYVAPGTIGDPGTVIMETPNNAYNIT

ITRAAPASVTRMLTTYAPPDSPGDPGTVIIETPDNNITVTQQAPASITSPITRYIPPGTPGDPGTVIVETPNNDYNVTITRAAPASVTSMHTTYTPPGTPGDPGTIIVETPN

AVNNDYNVTVTRAAPASVKSLYTTYVPPGASGDPGTVIVETPAGAYNVTTTRGASVTAPFTTYIAAASPGDPGTILIETPDYNTTITREAPISVTSLRTIYSPPGDIGDP

GTVIIETPRNEYNVTVTKGASITVPTTKYSPPATPGDPGTIIVETPDYNVTVTRQGPKSVTTVFSTYLPPGSPGDPGTVIVETPVGPYNVTTTQGASTITAPLTTYLPPSSP

GDPGTVLIETPEYNVTVTRKATDSASDTVTSYDPPVTPGDPGTVAIIMPNQRVVSTSQDPSTSEPGQNTTIYRAGPRSLTGPVTSFIPPQSVGDSGTVIIETPGPATPFNV

TTTQTVRTITAIYTTFLPAGAQDDPGTVLVEVPPERNVTVTQQDTAITAAYTSYSPPGAAGDPGTVIVGIPADRSVSITSIESTRSVPYTTYLPPCQPRRSWHRLG

OP2.18: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|F9G2S6|F9G2S6_FUSOF

MASSSISHRSSSRMRRAPNADPEDASFPSAQSARPFLAQLKPSWLIPRYLKSFRWIVITLTFILVSWITYTGLFSQPLNHILPGHHGSSTLTTNELKALAVPQRSSKPSTS

RRMRLFMPADSPHINLCKTIMSAVAMGYPMPILLNWNRSHIAKLESLLGAIETLLESKSDDVGEDDVAVLVDAYDMWFQLPPSVLLERYHRLNSEADARIRKQWK

DLGIGTDSPISPPRQDIIVTTAKDCFPDSYSGSDPHYEHWPESPMPKDMYGEDTDKVPWSFDPARKYKKVRPRCVNSGLIMGSMGGLRDALKRSKEKIDTVAMKGR

QLWSDQALIGEVIGDQEIWREWMRHLGSSWNGSAAFNDRNSLDRTVRDIADAALLGKRFEFGIGLDYNFTTAPPTCSSEEDGYFVNLSNETNIREESQKAGVPGDIRI

HGIPSELRNIKDKLLSSTNWGTIPLYTDFFFGTIPIAIHHNAYINGLKGFRLKNWWHKMWYYPHLRHLITQCLQPTSSPPTLAEIDLNGDKIAYKSPQEDKLRKARVFS

PKKPNFTPIDWDAVCQKPGHAVKWLDELFGDDKGPLAV



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

123


RRRRRtr|J9MYD7|J9MYD7_FUSO4

FRPRGNPHHDFRITHLDVSFKLLLEMQNTCADSQYINDLNRSVVNWARVDALIPWMYDIYDWLYQIMRALHTPVQLMFIARNESTVGRIHHELVARANILENVWG

CIIARIAYLVDEKAPAGEKLIELPYDWDVARCPLDRIQDRMHRAFEPSLTIIDPFDPSMCTDEEHETGSRSGDMDDDVDVTEGSLAKLCGRAFTALDETWTRPSDEES

LALREREDLATLWEHHQAILDIEATTLSQIGRLRVRIRELNPELHDM

OP2.20: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9MG88|J9MG88_FUSO4

MPVDSPPPAANQAGRAIPVGLNEAALDSPTFRVTAANFGDQVDAIEKWLNGYAQSTSKLLHDILALEETINTFLVKTMPSAADGVVDNDYTFLALKRVGDGWREY

WIQMISTMKKMEGLVVDPIRQFIVGDLRNFKECRRAMEQAQRTFDSTLARYVSQSKTKEPSALREDAFAVFETRKAYLKASMDYCQLAPQLRFSMDKLLVKICSER

WSQLRRAKEAAIDTTRWNQEMERIQGWSNEMGASEMVFRRELQSARREIGENALAGFKPSRELEDYSTSTVPFLGTRGPITVRLEEGATVVSEKQGWLFLRVLSGK

PARHTWIRRWYYCRDGIFGWLIPGPLGVLQGDEIGVLLCNAKPAVAEDRRFCFEVKTKSQTILLQAETQGELTEWLEVFEVTKKRAFETSMNRTSASLPGSVDPAFSI

SPPSIPEFSAKALDAQIGIYDESSPSIDRTNTLPIPGPDGNLSTRQSFDVNGSISRRTITALGRDLAREEGESGREHAARIIQKLDLHRKATFGTQGPEAGQGGSASTTGLA

SMMATSHTLPPGFPGSVGSTTNFRQTPSMLPSVDTQVGTLAPATLAKPPSMTGLSRIAVLTAGERQPVGNNRKLPASVVANYWGTSLWGAMNAPPQPVLPRLDED

DPIGVVVPGSTVGQGVQRKDGGEYFPRNYPPELRAQHAQFRLLFPDAPLEEKLVLVFRAAWTGSPERGPGKPDMAGDGRIYVTPDNMYFYGQQIGLVTAYSISLDII

SEVTAAPGRDCDFIFLHLNENANETGYTRITIKVFLEDLGLLHTRLNLLIDDIQAEEPMDVEAIITTLINLEIEDYDRPSPSVESWEEVSANTPMDDGTSMGRPVARRME

FSPPLRLSKSRTRHNHKLHLPARPVIYEPEGMKEMAAERHFEISAKSCFHVLFGDKSFVFPKLYFERRAQQIAQGPWVLVDQGRMRRDFQFKVDYKDVLGRSKTAD

VNDYQIIDVFSDHVTYVVTHVKTAWHLPHSSWFKVVTKIVITHVAKSKCKLAIYTKTDWSKNPALSKNLIDRQAIHDAASDAEELAEVATDQVRKLGTRSRTNRAI

QVYGQIGQQTEVVVFSPAATDSTKKQAIKPRTLTTMVFETIRSLGESAVSSLIMWAIAVLRNLFNLITAQWIILALLAFSTLTNLLLTSNETSTWWRERRAAGFMQNIG

IRPNSMMSKAIYFADLDAASGTNQGLSFPENSTCFSTFKDLLDTTDMDTPWEDAGASLATPTSRATARRLRRTRQRLGSYRHDLLVAMRVVNSIEREMLQSEWENW

LVDEKFLCDELDTMLQQQGDAKGQKKGAEAGKGSQKVMEPIPAKRRQALEQWRDTYCGSWRPKTLGLALAWRISSVIIPTFQKWAMGPVEWEQVPQDDLEEFLA

DVLSETQTVVESIPAPAKKDASSSAGRARSKTESAASAPDIKRALTLRQKAEAIGQAQDLQKEWKEIKVSAKENPLGINVYKLSAKDGRGAWFARRSVHEGLSFDD

WKKGLSVEFSETMKVQGAPGSGNIRGIGADKRVEDKQIGDHGQLQVFQLSAQFPGPTAPRDFVTLLLTSETSVKPAQGSRPLRQYMIVSKPCEHPECPPRQGIIRGYY

ESVEVIREVPVDNFASKRSLSSADLLNRDEGRIASPKPGSEGHGSMPLDEPATAVEWLMVTRSDPGGSVPRFLIEKGTPPGIVGDAGKFLKWVTSKAMHGFAEPEET

GEANKTTDVTEASITNDAKSTAPPNPTAILENTKAETAMSPNQDDPFPGSNGLYGVIAGAIGAASSYIPTSLLKTWGTGSDFVSTDGSVSDTHAIAEEQHDDDSDTSSI

RSFASALEKSVTAENKSPDSLVESQSETSRSNPQQSQQSLADKELKKLEQKKKKLDEKMARLEERRQSKLLGDKEKDAATLAKLREKHEKEVAKQEEKYRREMRK

LEEKRERDQRKAEERRRKAAEQEEKNNLSLELERVRAERDVARRQIELLEGQVGELQAQNTMLVRKLGKNGLLDSPGSPSPSIKSIQRAHTEV


RRRRRtr|F9F9A8|F9F9A8_FUSOF

VFFDLSSEGFCQDYTWSEFIDDLSFVHEFSSESGQDPFVVLDDMEYREFQRRSEENIEQALGHAWIDIDWERALSLIARISRNAWNWNVNMEYLSKVCIYLCRMAES

RGNNGTSKIHLLHIIAATFAPHVASVPMCRTTYNKRFIQLIRAMRVASDRCSKSHIDGGEPDYAISSKGPNLLQFFPQFQYVYPPSCQLSSSSIKLSKPLRDFLGVAQLH

AKMVRDEREKDTWAYRQAYLQDIVESTAILLECTYMSNELIHSTPFPTSIELQHDSLLPSHQVLGKPKTTTINYEQISAPRGMGLCYFKDLVYVGWFTVNRAEVDDD

SVIYMFGLGENDITAWYLGLLATAQVTSTTPAECEYHLMTKAQAAFAEGATNADDPDTRLELRPSYRSSMALIAAMLLPTCYRGNKEVYLDRVFLERPVIYQWSNQ



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

124

WRWFIELLHDRLEDSPTIFDPMNNAAEIGRNRAQISSPVKIAHNHVISFNSSAGFYRLEGIEGLTFCGLANALDDMEEESTASNLAPQSAQTNTVFAVEEHDCNSSNK

ASDPTGVDGNRQALQKELSAVRAELANIYANTHRKRNSEAQTYECDKTRKVRCGNCAVSARKRPNPPACYVATTSM

OP2.22: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9NNF4|J9NNF4_FUSO4

MGGNSTLGTSYSPESLPWEQCWWPNQLVPFDLSKDKSSTSNSVYTQTGPLIYGPLHDYNTDLTRHWQYTGHEMNYMNTGNSHNPVVEDIPLFPVSEHGSSKESPGQ

GHWHSPSPQRTPDRKTNCYSDDLTPRKSTGRTPLGDRDINPQIKKTRKYSPIRRTSKTSSNGAHAAQQDNDRMKKIRERNRIAANKLRIKQREEQQGLESSKQDLERI

NRDLSTCVADLTVEVYELKMQLLQQSGCNCTLIQNYLAHESQRYMQTLVEEPQSTILFLQAETPMRCEQK

OP2.23: Uncharacterized protein OS=Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici/ AC: tr|J9NBU7|J9NBU7_FUSO4

MDAIKQTFRRCKEQNRSALVTYVTAGYPKPEDTPNILLALEKGGADVIEVGAPFTDPIADGPTIQTANTIALENGVTIESTLAMVKEARSRGLKAPVMLMGYYNPLL

SYGEEKLLQDCHSSGINGFIVVDLPPEEAISFRKLCNKGRLSYVPLIAPATSDTRMKILCQLADSFIYVVSRMGVTGATGTLNANLPDLLERVKKYSGNKPAAVGFGV

STREHFLSVATLSDGVVVGSQIITTIKNAAPGQALADVEKYCAYLSGRDSDENTREVGLVEAVAGAKEPSGENVTVSGTVTDADITAEEDSALVAQLAALHGKIPER

FGEFGGQYVPESLMDCLSQLEDGFNAIKDDPSFWEEYRSYYEYMGRPGHLHLAERLTEHAGGANIWLKREDLNHTGSHKINNALGQLLLARRLGKKRIIAETGAGQ

HGVATATVCAKFGMECTVYMGAEDVRRQALNVFRMRLLGAKVVAVEAGSKTLRDAVNEALRAWVVDLDTTHYIIGSAIGPHPFPTIVRTFQSVIGNETKQQMLEK

RGKLPDAVVACVGGGSNAVGMFYPFENEPTVKLLGVEAGGDGVDTARHSATLTGGSKGVLHGVRTYVLQDKHGQITETHSVSAGLDYPGVGPELSSWKDNERAK

FVAATDAEAFLGFKLMSQLEGIIPALETAHGIFGAIELAKTMKKGEDIVICLSGRGDKDVQSVADELPKLGPKIGWDLRF


RRRRRtr|F9GD21|F9GD21_FUSOF

GRAAKLEAAYWNQIARVDYSLAVTDFVDLHEKCLAGSNSLRAVWKGHKRAAAVIKDIADLFEPEDGKAPVYGLLSFALDNPGIFVMDVGPVACIADVNDVGQRS

EIQVCVITTENATKVYTAIDVNHAFGAFPSGQGRLGQPPFKSYKVVESAEEATNVQPLIIGHAGSDLARKILDPHTMRLRVLPSVGAAAIAATADHMSDDSIHGHECD

IIVADVGTSAVIQATRLSPLGLFTMIPKGNTHLANLMRLQPNRVPATITSARVM



BIBLIO

TECA D

E POSGRADO

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