UNIVERSIDAD JUAREZ AUTONOMA DE TABASCO

UNIDAD SIERRA

DIVISION CIENCIAS AGROPECUARIAS

MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

COMPARACION DE LA PROTECCION INMUNOLOGICA

CONFERIDA POR DOS TIPOS DE VACUNAS INACTIVADAS

CONTRA LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE

T E S I S

QUE PARA OBTENER EL TITULO DE :

MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

PRESENTA:

RAUL ALEJANDRO KIM GOMEZ

ASESOR:

M.V.Z.,E.P.A. JOSE J. URRUTIA LOPEZ

VILLAHERMOSA,TAB. 1988

DEDICATORIAS

A MIS PADRES:

Por todo el apoyo que me han brindado

Para la culminación de mi carrera

A MIS HERMANOS(HAS):

Con todo cariño .

A CATALINA:

Con todo mi amor,por su apoyo

y comprensión para la realizaci-

on de este trabajo.

C O N T E N I D O

RESUMEN ……………………………………………………………………………….. 1

INTRODUCCION …………………………………………………………………………. 2

OBJETIVO…………………………………………………………………………………….6

MATERIAL Y METODOS ………………………………………………………………. 7

RESULTADOS ……………………………………………………………………………….10

DISCUSION …………………………………………………………………………………..16

CONCLUSION ……………………………………………………………………………… 19

BIBLIOGRAFIA …………………………………………………………………………….. 20

R E S U M E N

Se comparo la protección inmunológica conferida por dos tipos de vacunas

inactivadas contra la enfermedad de Newcastle, una a base de virus

inactivado emulsionado en aceite (VIEA),por vía subcutánea a los quince

días de edad y la otra a base de virus inactivado adsorbido en hidróxido de

aluminio(VIAHA),por vía subcutánea a los quince días de edad.Hubo

diferencia altamente significativa entre los efectos de los tratamientos

(P<0.01),obteniéndose con la primera (VIEA) altos niveles de anticuerpos

inhibidores de la hemoaglutinación que persistieron hasta los 60 días de

edad de las aves, y con la segunda (VIAHA) se obtuvieron niveles muy

bajos de anticuerpos durante toda la fase experimental.

1

COMPARACION DE LA PROTECCION INMUNOLOGICA

CONFERIDA POR DOS TIPOS DE VACUNAS INACTIVADAS

CONTRA LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE.

INTRODUCCION

La enfermedad de Newcastle (ENC) es una infección viral altamente

contagiosa que se caracteriza por producir trastornos respiratorios, digestivos y

nerviosos a una gran cantidad de especies aviares (1,12,14).Kraneveld (1926),in

formo de una infección altamente difusible y mortal de las gallinas que pre

valecía en las indias orientales Holandesas. Doyle (1927) observo la enfermedad

cerca de Newcastle-on-tyne,dio a esta enfermedad el nombre de esta localidad y

demostró que era una entidad diferente de la peste aviar(1,6,7) La enfermedad fue

reconocida y diagnosticada por primera vez en México por Camargo y Téllez

Girón en 1946 (3).Desde 1948 en que Olvera (13) registro la muerte de 300 000

aves en el Distrito Federal, la enfermedad de Newcastle (ENC) ha sido un serio

problema para la avicultura mexicana. La enfermedad de Newcastle afecta

principalmente a las gallinas, pollos, pavos, además son susceptibles en mayor o

menor grado otras aves domesticas y silvestres, así como ciertos mamíferos --

2

incluyendo al hombre, en el que puede producir afecciones oculares (conjuntivitis)

y cefalea intensa.El agente infeccioso causal de la enfermedad de Newcastle es

un virus clasificado dentro de los paramyxovirus (1,6,7,8,10,12) pudiendo tener

cuatro diferentes formas de presentación dependiendo del patotipo (1,7,8,12).La

mayoría de los países del mundo en donde la enfermedad de Newcastle es

enzootica entre ellos México, han adoptado la vacunación como el método básico

para su control (1,15)

Dado el carácter enzootico de la enfermedad en nuestro país, es vital tener

programas de prevención y control con el objetivo de mantener un adecuado nivel

inmunitario en las aves y evitar en lo posible el contacto con el virus a temprana

edad. Para ello se necesita implantar medidas higiénico-sanitarias estrictas y

programas de vacunación adecuados (9,12).La prevención y control de la

enfermedad de Newcastle se lleva a cabo por medio de la vacunación de las aves

con vacunas elaboradas con virus activo (vivo) y virus inactivado (muerto)

(7,12).Las vacunas con virus activo se elaboran con cepas vacunales suaves

,tales como los virus tipo Hitchner: Cepa B1,Cepa La Sota (1).Las vacunas a

virus vivo pueden causar reacciones respiratoria adversas, las cuales pueden

aumentarse si se aplican en aves susceptibles o infectadas con mycoplasma

(7,12,14).Este tipo de vacunas producen un bloqueo celular a nivel de la mucosa

respiratoria que constituye la vía natural de entrada del virus (5).Las vacunas a --

3

virus muerto o inactivado generalmente no provocan reacción respiratoria

postvacunal (1,9,12).

Si la mayor parte de las vacunas a virus vivo pueden ser administradas

colectivamente, las vacunas a virus inactivado por lo contrario, deben ser

aplicadas individualmente .Esta diferencia se debe al hecho que las vacunas a

virus inactivado deben ser aplicadas por vía parenteral, mientras que las vacunas

a virus vivo pueden ser administradas por vías diversas, tanto individual

(instilación conjuntival, intranasal o intramuscular) como masiva (por aerosol o en

el agua de bebida).(1,12,21).Como se menciono anteriormente las vacunas

inactivadas requieren ser aplicadas por inyección, y mientras las vacunas

adsorbidas en gel de hidróxido de aluminio pueden ser aplicadas con seguridad

por vía intramuscular, las vacunas emulsionadas en aceite tienen que ser

aplicadas por vía subcutánea para evitar la formación de abscesos (6).

La vacunación simultanea con virus vivo y virus inactivado tiene por objeto

provocar una respuesta inmune local con el primero, así como la producción de

anticuerpos sistémicos con el segundo (5).Los anticuerpos locales protegen contra

la implantación de la enfermedad, en tanto que los segundos lo hacen contra la

infección generalizada (22).Se han usado extensamente formalina y

betapropiolactona para la inactivación del virus de la enfermedad de Newcastle.

El resultado de la inactivación es la ausencia de la multiplicación del antígeno --

3

dentro del organismo (11).

Para incrementar la respuesta inmune, las vacunas inactivadas usualmente tiene

un adyuvante a base de hidróxido de aluminio o pueden estar en la

forma de una emulsión producida por fluidos alantoideos y un aceite mineral

(11).Estos adyuvantes utilizados en las vacunas inactivadas producen una

liberación lenta del antígeno que tiene el efecto de provocar múltiples estímulos

antigénicos por periodos que llegar a alcanzar varias semanas (12,18).

5

O B J E T I V O

El objetivo de este trabajo fue comparar la protección inmunológica conferida por

dos tipos de vacunas inactivadas contra la enfermedad de Newcastle

(Emulsionada en aceite vs Adsorbida en hidróxido de aluminio) en base a los

títulos de anticuerpos conferidos, medidos por la prueba de inhibición de la

hemoaglutinación (2).

6

MATERIAL Y METODOS

Se utilizaron 120 pollitos mixtos de engorda de un día de edad de una línea

comercial, los cuales se alojaron en una nave construida con materiales propios

de la región, con piso de cemento, ubicada en el km 5 de la carretera Vi

llahermosa - Nacajuca .Durante la fase experimental las aves fueron alimentadas

con alimento comercial y sometidas a las mismas condiciones de manejo. Fueron

utilizadas dos vacunas comerciales contra la enfermedad de Newcastle, una a

base de virus inactivado emulsionado en aceite*(VIEA) y la otra a base de virus

inactivado adsorbida en hidróxido de aluminio**(VIAHA).Los pollos se dividieron en

tres grupos de 40 animales cada uno. El diseño experimental fue completamente

aleatorizado con dos tratamientos y un testigo y dos repeticiones por tratamiento.

* Lab. Pfizer

**Lab Intervet

7

Se describen los tratamientos utilizados en este trabajo:

TRATAMIENTO No.1

Los pollos de este grupo fueron vacunados a los quince días de edad con virus

inactivado emulsionado en aceite (VIEA) por vía subcutánea 0.5 ml a cada uno.

TRATAMIENTO No.2

Los pollos de este grupo se vacunaron a los quince días de edad con virus inacti

vado adsorbido en hidróxido de aluminio (VIAHA) por vía subcutánea 0.5 ml a

cada pollo.

TESTIGO

Los pollos de este grupo no fueron vacunados.

8

Posteriormente a la vacunación se sangraron por punción cardiaca 20 pollos de

cada grupo a los 30,45 y 60 días de edad, con la finalidad de obtener suero para

determinar los niveles de anticuerpos séricos contra la enfermedad de Newcastle.

Los sueros que se obtuvieron se sometieron a la prueba de inhibición de la

hemoaglutinación (HI).

Para el análisis estadístico de los resultados se realizo la transformación raíz

cuadrada y= √ x + 0.5 que permite utilizar la técnica de análisis de varianza en

grupos de datos en los que se presentan observaciones con valor cero (16). Para

la comparación de medias fue realizada la prueba de Tukey.

9

RESULTADOS

Los resultados de este trabajo fueron obtenidos en tres etapas: a los 30,45 y 60

días de edad de las aves. En la primera etapa a los 30 días de edad, según el

análisis de varianza para los datos transformados (cuadro 1) existió diferencia

altamente significativa (P < 0.01) entre los efectos de los tratamientos.

En la grafica 1 se observa que en esta etapa el tratamiento 1 (VIEA) fue el que

tuvo el mejor comportamiento, obteniéndose un mayor nivel de anticuerpos con

respecto al tratamiento 2 (VIAHA) que mostro un nivel muy bajo de anticuerpos,

comportándose estadísticamente igual al grupo testigo (P<0.05).

El análisis de las medias para la prueba de tukey se muestra en el cuadro 2.

En la segunda etapa a los 45 días de edad de las aves el cuadro 3 muestra el

análisis de varianza para los datos transformados, en el cual puede observarse

que existió diferencia altamente significativa (P< 0.01) entre los efectos de los tra

mientos. En esta etapa (grafica 1) el tratamiento 1 (VIEA) mostro una buena

respuesta inmunológica, alcanzando niveles mas altos de anticuerpos con los que

se obtiene una mayor protección que la conferida por el tratamiento 2 (VIAHA),con

el que se obtuvieron muy bajos niveles de anticuerpos, mostrando un comportami

ento inferior al tratamiento 1 (VIEA).En el cuadro 4 se presentan los resultados de

la comparación de medias por la prueba de Tukey.

10

En la tercera etapa a los 60 días de edad, el análisis de varianza para los datos

transformados que se presenta el cuadro 5, muestra que en esta etapa hubo

diferencia altamente significativa (P<0.01) entre los efectos de los tratamientos.

En la grafica 1 se puede observar que en esta etapa con el tratamiento 1 (VIEA)

se alcanzaron niveles mas altos de anticuerpos con los que se obtiene adecuada

protección, mostrando una respuesta inmunológica superior con respecto al

tratamiento 2 (VIAHA) que mostro niveles de anticuerpos muy bajos durante toda

la fase experimental, que no confieren suficiente protección.

El análisis de las medias por la prueba de tukey se presenta en el cuadro 6.

CUADRO 1.Analisis de varianza para los datos transformados de los títulos

de anticuerpos a los 30 días.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------

G.L. S.C. C.M. F. F.V.

Tratamiento 2 8.3954 4.10 20.37**

Error 57 11.7443 0.21

Total 59 20.1397

**Altamente significativo. (P<0.01)

11

CUADRO 3.analisis de varianza para los datos transformados de los títulos

de anticuerpos a los 45 días.

F.V. G.L. S.C. C.M. F.

Tratamiento 2 27.9327 13.97 122.45**

Error 57 6.5013 0.11

Total 59 34.4339

**Altamente significativo (P< 0.01)

CUADRO 5.Analisis de varianza para los datos transformados de los títulos

de anticuerpos a los 60 días.

F.V. G.L. S.C. C.M. F.

Tratamiento 2 30.6533 15.32 142.70**

Error 57 6.127 0.1074

Total 59 39.7803

**Altamente significativo (P<0.01)

12

CUADRO 2.Comparacion de las medias de tratamientos mediante la prueba

de Tukey a los 30 días de edad.

Tratamiento X Datos originales X Datos transformados

1 VIEA 2.45 1.60ª

2 VIAHA 0.45 0.87b

3 Testigo 0.1 0.76b

Medias con distinta literal son diferentes estadísticamente (P< 0.05)

CUADRO 4.Comparacion de las medias de tratamiento mediante la prueba de

Tukey a los 45 días de edad.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Tratamiento X Datos originales X Datos transformados

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1 VIEA 5.2 2.35a

2 VIAHA 1.05 1.17b

3 Testigo 0.05 0.73c

Medias con distinta literal son diferentes estadísticamente (P< 0.05)

13

CUADRO 6.Comparacion de las medias de tratamientos mediante la prueba

de Tukey a los 60 días de edad.

Tratamiento X Datos originales X Datos transformados

1 VIEA 5.25 2.38a

2 VIAHA 1.0 1.11b

3 Testigo 0 0.70c

Medias con distinta literal son diferentes estadísticamente (P< 0.05)

14

Grafica No.1

*T.A.

6 VIEA

5

4

3

2

1 VIAHA

TESTIGO

0 30 45 60

Días de edad.

*Títulos de Anticuerpos

15

DISCUSION

De las vacunas probadas, las de virus inactivado emulsionado en aceite (VIEA)

demostró mayor efectividad, alcanzando mayores niveles de anticuerpos. Después

de la vacunación, el titulo de anticuerpos fue aumentando lentamente a la primera

valoración a los 30 días, y a los 45 días de edad se encontraron altos niveles de

anticuerpos que presentaron una tendencia horizontal sin disminuir hasta los 60

días de edad de las aves que fue el tiempo de duración de este trabajo.

Aguilera y Ortega (1) realizaron un trabajo en que vacunaron por diversas vías

utilizadas con mayor frecuencia, al vacunar con virus inactivado emulsionado en

aceite (VIEA) únicamente, por vía subcutánea, obtuvieron altos niveles de

anticuerpos que persistieron por varias semanas, lo cual concuerda con los

resultados obtenidos.

En otro trabajo, Vega (20) utilizando virus inactivado emulsionado en aceite por

vía subcutánea, encontró que el antígeno mantuvo un estimulo continuo durante

50 días. En el presente trabajo la vacuna inactivada emulsionada en aceite

mantuvo un estimulo constante postvacunacion hasta los 60 días de edad de las

aves que fue la duración del periodo experimental. Téllez Girón (18) en

1968,realizo un trabajo en que comparo una vacuna en base oleosa con respecto

16

a vacunas a base de virus vivo, vacuna inactivada simple y vacuna inactivada

adsorbida en hidróxido de aluminio, los resultados que obtuvo demostraron

que la vacuna emulsionada produjo una respuesta inmunológica elevada que

perduraba por largo tiempo con respecto a las otras vacunas utilizadas. Lo

que coincide con los resultados que obtuvimos al comparar la protección

inmunológica conferida por la vacuna inactivada emulsionada en aceite

contra la vacuna inactivada adsorbida en hidróxido de aluminio,

obteniéndose una alta respuesta inmunológica con la primera.

Según Garza (5),la prolongada permanencia del antígeno viral inactivado que

se logra con el adyuvante emulsionado establece una solida base para lograr

un estimulo mas prolongado de la vacuna por periodos que llegan a alcanzar

varias semanas. Sin embargo es incapaz de estimular inmunidad en el epitelio

respiratorio (9).

Urrutia (19) en 1987 realizo un trabajo no publicado, utilizando virus

inactivado adsorbido en hidróxido de aluminio en una vacuna triple aviar,

encontró un titulo de HI de 2.36, esto nos indica que habría que realizar otros

17

trabajos con vacunas a virus muerto en hidróxido de aluminio, porque la

cantidad de antígeno (18%) puede variar de una marca a otra, para

determinar el verdadero valor de estos productos biológicos.

18

CONCLUSION

En base a los resultados obtenidos en esta prueba puede concluirse que con la

vacuna a base de virus inactivado emulsionado en aceite (VIEA) contra la

Enfermedad de Newcastle se obtiene un mayor nivel de anticuerpos inhibidores de

la hemoaglutinación que persisten por varias semanas. Se recomienda al utilizar la

vacuna inactivada emulsionada en aceite (VIEA) aplicar simultáneamente virus

vivo por vía ocular, ya que la primera (VIEA) no protege la vía natural de entrada

del virus.

19

BIBLIOGRAFIA

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