Infecciones de Vias Respiratorias Altas

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Infecciones de Vias Respiratorias Altas

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FACULTAD DE

QUIMICO

FARMACOBIOLOGIA INFECCIONES DE VIAS

RESPIRATORIAS ALTAS

QFB JUAN MANUEL BARAJAS MAGALLON

ESCUELA DE QUIMICO-FARMACOBIOLOGIA

MICROBIOLOGIA II

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Vías

respiratorias

altas

Vías

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bajas

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Virus: Virus respiratorios (Adenovirus, Virus sincicial resparatorio, Virus de la Influenza y de la parainfluenza), Enterovirus, Virus del Herpes simple tipo I Hongos:Candida albicans Otros patógenos del aparato respiratorio superior:Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae y Neisseria meningitidis son mas facilmente aislados de exudados paranasales y nasofaringeos.

Gram negativos Organismo de vincent (Borrielia vincenti, Leptotrichia buccalis , Bacteroides melanoliticus)

Gram positivos Streptococcus pyogenes Otros Estreptococos Beta-Hemoliticos Corynebacterium diphteriae Corynebacterium ulcerans

PATÓGENOS POSIBLES

FARINGITIS

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Gram negativos Moraxella catarrhalis Neisseria sp Fusobacterias Coliformes Bacteroides sp Haemophilus influenzae no capsulado

Microorganismos comensales faringe

Gram positivos

Streptococcus viridans

Estreptococo no hemolítico

Streptococcus pneumoniae no capsulado

Staphylococcus epidermidis

Micrococos

Lactobacilos

Difteroides

También varias espiroquetas, actinomicetos, organismos esporulados

aeróbicos y anaeróbicos, así como algunas levaduras.

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• Coco

• Se asocia en cadenas

• Gram positivo

• B-hemolítico

• Catalasa Negativo

• Coagulasa Negativo

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La formación de cadenas es

característica de su clasificación

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Grupo A - Streptococcus pyogenes

Grupo B - Streptococcus agalactiae

Grupo C - Streptococcus equisimilis, Streptococcus equi, streptococcus

zooepidemicus, Streptococcus dysgalactiae

Grupo D - Enterococcus, Streptococcus bovis

Grupo E - Streptococcus milleri y Streptococcus mutans

Grupo F - Streptococcus anginosus

Grupo G - Streptococcus canis, Streptococcus dysgalactiae

Grupo H - Streptococus sanguis

Grupo L - Streptococcus dysgalactiae

Grupo N - Lactococcus lactis

Grupo R&S - Streptococcus suis

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FACTORES DE VIRULENCIA DE

Streptococcus pyogenes

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Factores de virulencia de S. pyogenes

Estreptoquinasa

La estreptoquinasa activa enzimáticamente al plasminógeno, una

enzima proteolítica plasmática que digiere a la fibrina (proteína que

forma los coágulos) y otras proteínas.

Hialuronidasa

La hialuronidasa rompe el ácido hialurónico, un importante

componente del tejido conectivo, facilitando la expansión de la

infección.

Estreptodornasa

Una ADNasa, la estreptodornasa depolimeriza el ADN. El huésped

produce anticuerpos contra esta enzima, que pueden ser utilizados

para el diagnóstico serológicos de las infecciones por Streptococcus

pyogenes.

Otras toxinas

Incluye la peptidasa anti-C5a y otras.

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Factores de virulencia de S. pyogenes

Estreptolisina O y S

•Tóxinas que son la base de las propiedades beta-hemolíticas del

organismo. La estreptolisina “O” genera respuesta inmune, en la cual se

pueden detectar anticuerpos en el suero.

•la antiestreptolisina O (ASLO) se usan para confirmar una reciente

infección por S. pyogenes

•La estreptolisina S es una hemolisina adherida a la célula y estable

frente al oxígeno, no es inmunogénica, es capaz de lisar eritrocitos, así

como leucocitos y plaquetas tras contacto directo.

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Erisipela y Escarlatina causadas por Streptococcus pyogenes

Toxina Piogénica

Encontrada en las cepas de S. pyogenes responsables de la fiebre

escarlatina y del síndrome de shock tóxico estreptocócico. El gen

de la toxina es proporcionado por un fago lisogénico.

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Streptococcus pyogenes Síndromes Clínicos Generados

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FARMACOBIOLOGIA Impetigo y Fascitis

necrotizante

causadas por S. pyogenes

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Facistis necrotizante por

Streptococcus pyogenes

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FASCITIS NECROTIZANTE Paciente femenino de 7

años, con diagnostico de

varicela de 15 días de

evolución

Ingresa al hospital por

presentar dolor en el

hombro izquierdo con una

lesión necrótica, se

diagnostica como Fascitis

necrotizante

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TOMA DE

MUESTRAS

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Color de la

Faringe

Hiperémica

Color de la

Faringe Normal

Úvula

hiperemica

Pared posterior

de la faringe

FARINGITIS

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Placas Infecciosas

Amigdalinas

(Generalmente drenan

pus)

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AMIGDALITIS

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Coloque al paciente frente a sus

ojos

Tenga una lámpara a la mano

EXUDADO FARINGEO

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EXUDADO FARINGEO

Localizar las zonas lesionadas y

evaluar

Tomar la secreción de las

amígdalas o de la pared

posterior de la faringe, en un

movimiento rápido sin tocar la

úvula

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Faringe Hiperémica

con afectación

amigdalina y de la

pared superior de la

faringe

Vejigas supurativas

de la pared posterior

de la faringe

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Recomendaciones

- La muestre se toma con hisopo

de Dacrón, estéril.

-Una vez tomada la muestra se

conserva el hisopo en un medio

de transporte Amies/Cary

Blair/Stuart

-El tiempo de conservación es de

12 a 24 horas

- Se conserva a temperatura

ambiente (No refrigerar)

EXUDADO FARINGEO

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- No se requiere ayuno

- para Exudados faríngeo y nasales, no afecta si el paciente se

lava los dientes.

- Es recomendable interrogar al paciente para saber

1. Si tomo o esta tomando medicamento, particularmente

antibióticos.

2. Cuales son los síntomas presenta.

3. Cuanto tiempo tiene con el problema

4. Si hay fiebre, tos, rinorea, si arroja flemas, etc.

RECOMENDACIONES GENERALES PARA LA

TOMA DE MUESTRAS MICROBIOLOGICAS

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El cultivo primario o de Primo-

aislamiento permite cultivar la

totalidad de las bacterias presentes

en la muestra, tanto las que pueden

ser patógenas como las de Flora

normal

Es recomendable cultivar las muestras en:

- Agar Sangre de carnero al 5 %

-Agar Sangre achocolatada al 5 %

- Algún medio equivalente

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- Tamaño

- Borde

- Consistencia

- Hemolisis

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IDENTIFICACIÓN Y

CARACTERIZACIÓN

COLONIAL

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Staphylococcus aureus

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COCOS GRAM POSITIVOS

+ - Staphylococcus (cúmulos) Streptococcus (pares o cadenas)

Catalasa

Coagulasa

Nota: S. viridans es un Coco Alfa

hemolitico y todos las pruebas de

abajo son negativas

PROTOCOLO DE IDENTIFICACION

Staphylococcus

Coagulasa negativo

Staphylococcus

aureus (Manitol +)

+ - Hemolisis Prueba Resultado Microorganismo

Optoquina +Solubi l idad en bi l i s +

Bacitracina +cAMP/Hipurato -

Bacitracina -cAMP/Hipurato +

Uti l i zación de la Bi l i s -

escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio+

Uti l i zación de la Bi l i s -

escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio-

AlfaStreptococcus

pneumoniae

Beta

Streptococcus

pyogenes (EBH-A)

Streptococcus

agalactie (EBH-B)

Gamma

Streptococcus grupo D

(Enterococcus faecalis )

Estreptococcus grupo

D, (No enterococo)

Sensibilidada a

Novobiocina

S. saprophyticus

Staphylococcus spp

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IDENTIFICACION COLONIAL

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CULTIVO SECUNDARIO O

REASLAMIENTO

El objetivo es que se

obtengan colonias

aisladas para hacer

las pruebas de

identificación y de

susceptibilidad a los

antibióticos

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IDENTIFICACION DE

ESTAFILOCOCOS

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Estreptococos

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DETERMINACIÓN DE CATALASA

Objetivo de la Técnica: Detectar

la producción de la enzima

“Peroxidasa o Catalasa”, la

cual solo es producida por

Estafilococo y es negativa para

Estreptococo

Se coloca una gota de Peróxido

de Hidrógeno al 3% sobre un

portaobjetos y con un palillo de

madera se coloca la bacteria

mezclandola don el peróxido

Staphylooccus ( + )

Streptococcus ( - )

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Hemolisis Prueba Resultado Microorganismo

Optoquina +Solubi l idad en bi l i s +

Bacitracina +cAMP/Hipurato -

Bacitracina -cAMP/Hipurato +

Uti l i zación de la Bi l i s -

escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio+

Uti l i zación de la Bi l i s -

escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio-

AlfaStreptococcus

pneumoniae

Beta

Streptococcus

pyogenes (EBH-A)

Streptococcus

agalactie (EBH-B)

Gamma

Streptococcus grupo D

(Enterococcus faecalis )

Estreptococcus grupo

D, (No enterococo)

Estreptococos

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Determinación de Sensibilidad a la

Bacitracina 0.04 mg/ml, Prueba

presuntiva para identificar a S. pyogenes

SENSIBILIDAD A LA BACITRACINA

> 5 mm

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S. pyogenes

S. agalactie

Prueba de cAMP

S. aureus Se basa en que los

estreptococos del

grupo B producen un factor

llamado CAMP (factor de

monofosfato de adenina cíclica)

que aumenta la zona de

hemólisis producida por un

estafilococo productor de ßlisina.

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Prueba de cAMP

El cAMP

producido por

S. aureus

difunde en el

medio y

potencia la

acción de la

hemolisina de

S. agalactie

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La esculina contiene un carbohidrato unido a un

compuesto aromático.

Este test se usa para distinguir especies de

Streptococcus de grupo D “Enterococcus faecalis”

Se crecen las bacterias en un medio complejo que

contiene 0,01 % de esculina y un 0,05 de citrato férrico

BILIS-ESCULINA

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COCOS GRAM POSITIVOS

+ - Staphylococcus (cúmulos) Streptococcus (pares o cadenas)

Catalasa

Coagulasa

Nota: S. viridans es un Coco Alfa

hemolitico y todos las pruebas de

abajo son negativas

PROTOCOLO DE IDENTIFICACION

Staphylococcus

Coagulasa negativo

Staphylococcus

aureus (Manitol +)

+ - Hemolisis Prueba Resultado Microorganismo

Optoquina +Solubi l idad en bi l i s +

Bacitracina +cAMP/Hipurato -

Bacitracina -cAMP/Hipurato +

Uti l i zación de la Bi l i s -

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con 6.5 % de Cloruro

de sodio+

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escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio-

AlfaStreptococcus

pneumoniae

Beta

Streptococcus

pyogenes (EBH-A)

Streptococcus

agalactie (EBH-B)

Gamma

Streptococcus grupo D

(Enterococcus faecalis )

Estreptococcus grupo

D, (No enterococo)

Sensibilidada a

Novobiocina

S. saprophyticus

Staphylococcus spp

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COAGULASA Objetivo: Determinar si el

estafilococo produce la

enzima coagulasa.

Técnica: Colocar en un

tubo plasma fresco,

suspender una colonia de

la cepas aislada. Se

incuba a 37º C por 4 a 6

horas

Interpretación:

Positivo: Staphylococcus aureus

Negativo: Staphylococcus coagulasa negativa (S. epidermidis, S.

saprophyticus, S. albus, S. haemolyticus, S. dublinensis)

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UTILIZACION DE MANITOL

Objetivo: determinar si el estafilococo

tiene la capacidad de utilizar el manitol

como fuente de carbono.

Método: en un medio de CTA con

manitol, se inocula la cepa a ensayar y

se incuba a 37º C por 18 a 24 horas.

Interpretación: S. aureus fermenta el

manitol, el resto de los estafilococos no

lo hacen.

- +

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TOS FERINA

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La tos ferina es una infección respiratoria

ocasionada por la bacteria Bordetella

pertussis.

Los primeros brotes fueron descritos en el

siglo XVI.

En el año 2002 ocasionó 294,000 muertes en

el mundo.

ANTECEDENTES DE LA TOS

FERINA

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EPIDEMIOLOGÍA

Es una infección altamente contagiosa.

Su tasa de ataque secundario es de más de

90%.

En menores de 6 meses frecuentemente es

una enfermedad mortal.

Los adolescentes y adultos son

comúnmente, la principal fuente de contagio en

niños no vacunados.

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Tos Ferina

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Se alojan en el sistema respiratorio humano fijándose primeramente

al epitelio ciliado del tracto respiratorio y después en los alvéolos

pulmonares causando necrosis. La vía de contagio para la

Bordetella pertussis es por medio de gotitas nasales de aerosol de

persona a persona.

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EPIDEMIOLOGÍA

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EPIDEMIOLOGÍA

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Es una enfermedad mediada por toxinas.

Produce un proceso inflamatorio y de

parálisis ciliar, que disminuye el aclaramiento

de las secreciones respiratorias, lo que

ocasiona los accesos clásicos de tos.

PATOLOGÍA

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Periodo de incubación de 7 – 10 días (4 – 21 días).

Inicio insidioso, comúnmente como cuadro catarral.

Sin fiebre o fiebre de bajo grado.

En niños se presentan las 3 fases características:

Fase catarral 1 – 2 semanas.

Fase paroxística 1 – 6 semanas.

Fase convalescencia Semanas a meses.

En adolescentes y adultos el cuadro es atípico:

Asintomático.

Tos prolongada.

Menos frecuente cuadro clásico.

CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS

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Antibiótico adecuado, dosis y duración del tratamiento

correctos.

Macrólidos:

Eritromicina

Claritromicina

Azitromicina.

Trimetoprim/Sulfametoxazol (alergia a macrólidos)

Inútil utilizar otros antibióticos.

TRATAMIENTO

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Vacunación

Medidas de higiene respiratoria

Vigilancia epidemiológica

Tratamiento adecuado de casos y contactos

PREVENCIÓN

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Hay brotes de Tos ferina en 3 Estados del norte

del país.

La población más afectada es la de menores de

6 meses de edad (86% de los casos).

El 66% de los contactos con cultivo positivo

son mayores de 14 años de edad.

En 70-75% de los casos en menores de 1 año

se logra demostrar un contacto en casa.

ESTADO ACTUAL

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DIFTERIA

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Hipócrates “enfermedad tonsilar peligrosa”

Brettoneau (difte=membrana) causada por un germen y que

se transmitía de persona a persona.

Trousseau Daño miocárdico y renal en los casos graves.

Loeffler en 1884 cultivar el germen (bacilo de Klebs-Löeffler)

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PERFIL HISTORICO

Lehmanny Newmanlo Corynebacterium diphteriae.

En 1885 Roux y Yersin purificaron la toxina produce la enfermedad.

Behring y Kitasato Describieron la antitoxina.

Schick Test cutáneo para demostrar la susceptibilidad

del individuo a la difteria

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DIFTERIA

Es una enfermedad infecciosa aguda

causada por la bacteria denominada

Corynebacterium diphtheriae

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DIFTERIA

• Corynebacterium

diphtheriae

– Bacilo pleomorfico gram (+)

– Cepas toxigénicas o no

toxigénicas

Gravis + agresivo

• 4 tipos Bellanti

Intermedius

Mitis

Centers for Disease Control and Prevention. Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases. Atkinson W, Hamborsky J,

McIntyre L, Wolfe S, eds. 10th ed. Washington DC: Public Health Foundation, 2007.

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EPIDEMIOLOGIA

• En los Estados Unidos

– < de 5 casos al año.

• En los años 90 surgieron miles de

casos en zonas de la ex-URSS

• Endémica de países en desarrollo

– Tiene una elevada morbi-mortalidad.

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EPIDEMIOLOGIA

• México

– En 1991 se presentó el ultimo caso

– Ha desaparecido como causa de

morbilidad y mortalidad en la población

infantil

Programa Nacional de vacunación

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FISIOPATOLOGIA

• Periodo de incubación de 2 a 6 días

• Toxina

– Inhibe la síntesis proteica celular

– Destrucción de los tejidos

– Formación de membranas

• Diseminar vía hematógena Holmes, Randall K. “Biology and Molecular Epidemiology of Diphtheria Toxin and the tox Gene.” The Journal of Infectious Diseases 181 (Suppl 1) (2000): S156-67.

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FACTORES DE RIESGO

• Hacinamiento

• Falta de medidas higiénicas

• No estar vacunado

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PATOGENIA

• Presencia del germen

• Acción necrotizante de la

toxina

• Paso de la exotoxina a

torrente sanguineo

• Lesiones locales

– Mucosa faringea

– Laringe

– Nariz

– Conjuntivas

– Rara vez localizadas en la

piel

• Lesiones a distancia

– Miocárdicas

– Sistema nervioso

Centers for Disease Control and Prevention. Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases. Atkinson W, Hamborsky J, McIntyre L, Wolfe S, eds. 10th ed. Washington DC: Public Health Foundation, 2007.

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CUADRO CLINICO 2 a 5 días después

Coloración azulada de la piel

Rinorrea

Problemas respiratorios:

Disnea

Polipnea

Estridor

Escalofríos

Tos similar a la de crup (perruna)

Fiebre

Odinofagia

Lesiones en la piel (generalmente se observan en las

áreas tropicales)

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DIFTERIA RESPIRATORIA

• Trastornos de vías respiratorias

– Odinofagia

– Febrícula

– Membrana adherente

• Amigdalas, faringe o nariz

• Amigdalina Pseudomembranas

amigdalas

– Grave Adenopatia + edema cervical

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DIFTERIA RESPIRATORIA

• Laringea

– Ronquera

– Tos

• Nasal

– Epistaxis

– Rinorrea

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DIFTERIA RESPIRATORIA

• Maligna

– “Cuello de bisonte” con extensa

formación de pseudomembranas

– Tumefacción en amigdalas

– Linfadenopatias cervicales

– Edema submandibular

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DIFTERIA CUTANEA

• Dermatosis previa

• Lesión

– Úlcera

– Cubierta de membrana necrótica

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DIAGNOSTICO • Cultivos

– Nasal

– Faringeo

– Piel

• Reacción intradérmica de Shick

– Reacción inflamatoria si existe

antitoxina en circulación

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Corynebacterium spp

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TRATAMIENTO

• Antitoxina diftérica

• Erradicar la bacteria

– Eritromicina 40 mg/kd día durante 14

días

– Penicilina G 300 000 U durante 14 días

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COMPLICACIONES

• Obstrucción respiratoria

– Pseudomembrana extensa

– Tumefacción de la via aerea

• Cardiacas

– Miocarditis

– Endocarditis

• Transtornos de la conducción

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COMPLICACIONES

• Polineuropatia

– 3 a 5 semanas despuues

• Disfonia

• Disfagia

• Parestesias

• Paresias

• Neumonía

• Insuficiencia Renal

• Embolia pulmonar

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Coco Gram positivo

Se asocia en diplococos

Coloniza la nasofaringe

Genera: Neumonía, meningitis y artritis

séptica

Streptococcus pneumoniae

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Factores de Virulencia

Cápsulas (Antifagocitica)

Neumolisina (Dermatóxica)

Neuroaminidasa

Autolisina (Activa para la división celular de

la bacteria)

Wolfgang k, Willett H. Amos D. Zinsser Microbiología, Ed.

Panam, Argentina,1989

(Enzima activa contra

glucoproteínas y glucolípidos

celulares)

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La neumolisina es una

proteína monomérica

soluble producida en el

citoplasma de la bacteria.

Cuando S. pneumoniae se

lisa la nemolisina queda

libre y se une al colesterol

de las membranas

celulares formando

grandes arcos oligómeros

que originan lesión de la

célula y su lisis.

DERMOTOXINA

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La neumolisina es

un potente

inhibidor del

movimiento ciliar

del epitelio de las

vías respiratorias.

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La colonización de la

nasofaringe por S.

neumoniae es

usualmente

asintomática.

El microorganismo

pasa a pulmón, sangre

o SNC, como resultado

de estrés mecánico o

alteración de los

mecanismos de

defensa del huésped.

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Streptococcus pneumoniae es

uno de los principales agentes

que producen meningitis junto

con Haemophilus influenzae y

Streptococcus agalactie

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El Streptococcus pneumoniae es la causa más común de

neumonía adquirida en la comunidad en adultos mayores de

65 años y niños menores de 2 años

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Meningitis por Haemophilus influenzae y

Streptococcus pneumoniae

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EL LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

LCR - AGUA DE ROCA

LCR - PURULENTO

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Existen alrededor de 90 serotipos

clasificados en base al antígeno

capsular, de los cuales solo 30

se han asociado a infección en

el hombre y solo 15 de ellos se

encuentran en niños

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IDENTIFICACIÓN Y

CARACTERIZACIÓN

COLONIAL

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Streptococcus pneumoniae

• Se aísla en agar sangre de Borrego

• Diplococo Gram positivo

• Hemólisis alfa

• Optoquina sensible (mayor o igual a 14 mm)

• Solubilidad en bilis al 10 %

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Streptococcus

pneumoniae es

de los pocos

patógenos Alfa

Hemolíticos

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El centro deprimido en las colonias de neumococo es la

característica principal para su identificación, la autolisis

generada por la neumolisina le da su rasgo característico a la

colonia

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Cultivo de Streptococcus pneumoniae (Neumococo) en sangre

Colonias mucoides (Capsuladas), Alfa-hemoliticas, grandes

Identificación de

Streptococcus

pneumoniae

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Hemolisis Prueba Resultado Microorganismo

Optoquina +Solubi l idad en bi l i s +

Bacitracina +cAMP/Hipurato -

Bacitracina -cAMP/Hipurato +

Uti l i zación de la Bi l i s -

escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio+

Uti l i zación de la Bi l i s -

escul ina +Crecimiento en ca ldo

con 6.5 % de Cloruro

de sodio-

AlfaStreptococcus

pneumoniae

Beta

Streptococcus

pyogenes (EBH-A)

Streptococcus

agalactie (EBH-B)

Gamma

Streptococcus grupo D

(Enterococcus faecalis )

Estreptococcus grupo

D, (No enterococo)

Estreptococos

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Identificación de Streptococcus

pneumoniae

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Solubilidad en Bilis Objetivo: Detectar a los S.

pneumoniae que son disueltos por la

bilis al 10 %

Se prepara una solución al 10 % de

Desoxicolato de sodio en agua

destilada estéril, se coloca con un

asa una colonia bacteriana y se agita

ligeramente

Interpretación: Los S. pneumoniaes

después de unos segundos la

suspensión queda translucida,

mientras que los que no son

neumococos la suspensión queda

turbia.

(-) (+)

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Técnica de Quellug o hinchazón de capsula

Se coloca en una suspensión de S. pneumonia en Sol. Salina una

gota de antisuero especifico contra neumococo, se incuba por 5 min.,

se adiciona safranina y se coloca una gota sobre un portaobjetos, se

adiciona al portaobjetos una gota de tinta china y se mezcla se

observa al microscopio en el objetivo 100 X

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Haemophilus

influenzae

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Es un cocobacilo inmóvil no esporulado, pleomórfico en sus

estadios tardíos de crecimiento.

Se le encuentra con mayor frecuencia en la nasofaringe de niños

lactantes y menores de seis años.

Posee una cápsula constituida por un polímero lineal de ribosil-

ribitolfosfato (PRP) llamado polisacárido capsular b.

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Existe evidencia experimental de que las fimbrias capacitan al

microorganismo para adherirse a las superficies mucosas el

huésped, evento importante y necesario para la colonización.

La presencia de fimbrias se ha demostrado claramente en las

cepas aisladas de origen clínico de H. influenzae, tanto en las

no tipificables como en las del serotipo b.

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Los miembros del género

Haemophilus son parásitos estrictos,

tanto de humanos como de otros

vertebrados

Suelen estar presentes en las vías

respiratorias superiores de individuos

de poblaciones sanas, variando su

frecuencia en un rango de 15 al 50

por ciento.

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FACTORES DE VIRULENCIA

El polisacárido capsular, el cual actúa

como un "escudo" en contra de las

proteínas del complemento.

La actividad lítica del complemento es

mayor hacia los otros cinco serotipos

capsulares de Haemophilus infuenzae,

que para el serotipo b

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Haemophilus influenzae

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Facklam R, Richard, Isolation and identification of Streptococci, CDC

Laboratory Update, 1995

COAGLUTINACIÓN Los anticuerpos se pegan a

partículas de látex y al ponerse

en contacto con el antígeno, las

partículas que se forman son de

un tamaño mayor, esto evidencia

la presencia del antígeno mas

rápidamente y a simple vista

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COAGLUTINACIÓN

Esta técnica se emplea

además de manera

directa con el LCR en

casos de meningitis

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Serotipos México 7 valente 9 Valente 11 Valente 13 Valente

14 11 % x

6A/6B 17.8 % x

23F 17.1 % x

19F 6.6 % x

9V 3.8 % x

4 2.8 % x

18C 2.8 % x

7F 0.9 % x

3 1.9 % x

5 2.6 % x

1 1.9 % x

19A 6.6 % x

9N 0.2 %

Otros 24 %

Suma 100 % 59.1 63.6 65.4

Fuente: Sireva-Vigia Group, Evolution of Streptococcus pneumoniae serotypes and

penicillin susceptibility in Latin America, 1993 to 1999, Pediatr Infect Dis J,

2001;20-959-67

Los 13 Serotipos mas frecuentes en México 426 (1993-1999)

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Fuente: Archivo del laboratorio de microbiología, HIM

Tendencias presentadas por S pneumoniae

y H influenzae

aislados de Procesos invasivos

Hospital Infantil de Morelia

0

2

4

6

8

10

12

1996

1997

1998

1999

2000

2001

2002

2003

2004

2005

2006

2007

ca

so

s

S.pneumoniae H. influenzae b

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S. pneumoniae aislado de procesos invasivos

Hospital Infantil de Morelia

0

2

4

6

8

10

1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007

caso

s

FUENTES: ARCHIVO DE LIMP.

PROCESOS INVASIVOS: MENINGITIS, SEPTICEMIAS, NEUMONIAS,

ABSCESOS Y DERRAMES PLEURALES.

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Serotipos cubiertos por la vacuna 7.Valente

Fuente: Echaniz A, G, CISEI-INSP / LIMP-HIM

Serotipos

Vacuna 7-valent

4

6A/6B

9V

14

18C

19A

23F

No Incluidos

México

(Hasta 2000)

N = 661

16 (2.4 %)

71 (10.7 %)

30 (4.5 %)

59 (8.9 %)

23 (3.4 %)

32 (4.8 %)

113 (17 %)

317(47.9 %)

Invasivas

N=5

3

2

0

No invasivas Control

N=24 N=15

6 2

4 1

7 3

7 (29.1%) 9 (60 %)

Cobertura 52.1% 100 % 70.8 % 30 %

Hospital Infantil de Morelia

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PROCESOS INVASIVOS POR Streptococcus pneumoniae

EN EL HOSPITAL INFANTIL DE MORELIA

“EVA SAMANO DE LOPEZ MATEOS”

2005

Muestra Serotipo

LCR 14

LCR 19F

ABSCESO 19F

2006

PLEURAL 5

ABSCESO 6B

SECRECION 19f

LCR 19F

HEMOCULTIVO Y LCR 18C

2007

Muestra Serotipo

SINOVIAL 19F

LCR 7

2008

LCR 19A

LCR 6B

FUENTES: INSP. CICEI, InDRE, HIM.

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Sensibles

Resistentes

Resistencia a Penicilina

Fuente: Archivo del Laboratorio de Investigación de Microbiología y Parasitología.

70%

30%

Total de Cepas: 44

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En México como en otros países, H. influenzae

serotipo b es una de las principales causas de

meningitis y de casos severos de infecciones del

tracto respiratorio bajo.

En nuestro país, la muerte por neumonía

representa hasta un 70 por ciento de todas las

defunciones en niños menores de un año de

edad.

En otros países esta cifra varía entre 8 y 40 por

ciento. México, por lo tanto, se encuentra en el

grupo con tasas altas de mortalidad por dicha

enfermedad3

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Para su crecimiento requiere de un medio complejo que contenga

nicotinamida adenina-dinucleótido (factor v) y hemina (factor x).

Comunmente posee plásmidos de tamaño variable que codifican

para B-lactamasas y acetil-transferasas; la frecuencia con que se

aíslan estas cepas resistentes a los antibióticos de uso común ha

complicado el tratamiento de las infecciones invasivas causadas por

HINB.

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Bacilo Pleomórfico

Gram negativo

Oxidasa positivo

Facultativo

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El cultivo primario de Haemophilus influenzae

se hace en un medio altamente enriquecido

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Haemophilus influenzae

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(1) Muestras

Clínicas

(3) Agar sangre

( -)

(2) Tinción Gram

(3) Cultivo

(3) Agar chocolate

( + )

Cocobacilos

Gram Positivos

(5) Satelitismo

Agar M. Hinton

( - )

Agar Sangre

( + )

Hemocultivo

LCR

LBA

Medio Fildes

(6)

Indol +

Urea +

Ornitina +

Arginina +

(7) Serotipificación

A, b, c d, e f.

(4)

Oxidasa +

Catalasa -

(2) Tinción Gram

Cocobacilos

Gram Positivos

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Haemo = Sangre

Philus = Amor o afinidad

Requerimientos nutricionales

Grupo Hem de la Hemoglobina

y en NAD producido por S. aureus

Haemophilus

influenzae

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Clasificación de H. Influenzae en base a a su

reacción bioquímica (Indol, Urea y Ornitina)

Biovar I Biovar II

Biovar III Biovar IV

Biovar V Biovar VI

Biovar VII Biovar VIII

Kilian M, A taxonomic study of the genus Haemophilus with the

proposal of a new `species. J Gen Microb 1976, 93: 9-62

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La enfermedad inicia con la invasión bacteriana del torrente

sanguíneo, conocida como sépsis. (Existe una relación estrecha

entre el tamaño del inoculo y la sepsis)

La sepsis sostenida después de la colonización nasofaríngea

solamente ocurre con cepas de Haemophilus que elaboran

cápsula tipo b, en contraste con lo que ocurre con los serotipos

(a, c, d, e, y f), incapaces de sobrevivir e invadir el torrente

sanguíneo.

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Clasificación de Pitman, 1931 de H. Influenzae

en base a su antígeno capsular

Serotipos

a, b, c, d, e, f y NT

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Técnica para detección de

antígenos solubles:

St pneumoniae

St agalactie EBH-B

H. Influenza tipo B

Neisseria Meningitidis A

Neisseria Meningitidis B

E coli K 100

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ENFERMEDADES RESPIRATORIAS

PREVENIBLES POR VACUNACION.

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HISOPADO NASOFARINGEO

Recomendaciones

- La muestre se toma con hisopo de Dacrón

montado en un alambre de aluminio o plástico,

estéril.

-Una vez tomada la muestra se conserva el

hisopo en un medio de transporte Amies/Cary

Blair/Stuart

-El tiempo de conservación es de 12 a 24 horas

- Se conserva a temperatura ambiente (No

refrigerar)

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OTITIS

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Membrana timpánica

Normal

Membrana timpánica

Hiperémica

(Inflamada/enrojecida)

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Membrana timpánica

Hiperémica

(Inflamada/enrojecida)

y llena de pus

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OTITIS

Posibles patógenos Gram positivos Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes Otros estreptocococ Beta-heoliticos Streptococcus pneumoniae Hongos Aspergillus sp. (Especialmente A. niger) Candida sp. Ocacionalmente algunos dermatofitos y Phycomycetos

Gram negativos Pseudomonas aeruginosas Haemophilus influenzae Klebsiella sp Proteus sp Escherichia coli y otros coliformes Bacteroides sp

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Microorganismos comensales En el oído medio normalmente no se encuentran microorganismo, ya que en condiciones normales es estéril, pero en el oído externo son: Gram positivos Streptococcus viridans Bacillus sp. Staphylococcus epidermidis Corynebacterias spp

Gram negativos Escherichia coli y otros coliformes

OTITIS

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EXUDADO OTICO

Recomendaciones

-La muestras tomadas con pipeta se

colocan en un tubo estéril.

- Las muestras tomadas con hisopo

se colocan en un medio de

transporte Amies/stuart/Cary Blair

- El tiempo de conservación es de

12 a 24 horas

- Se conserva a temperatura

ambiente (No refrigerar)

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EXUDADO OTICO

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EXUDADO OTICO

Recomendaciones

Normalmente no se toman muestras a

menos que:

1. Haya ruptura de membrana evidente

(Salida de pus y ocasionalmente

sangre)

2. Aun así es conveniente

a) Retirar con ayuda de un

hisopo, la pus externa con

sumo cuidado (Nunca introducir

profundamente el hisopo)

b) Tomar con un nuevo hisopo o

una pipeta de polietileno estéril

la pus del interior.

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MASTOIDITIS Infección del conducto mastoideo

genera dolor retroauricular

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MASTOIDITIS Infección del conducto mastoideo

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SINUSITIS

SENOS PARANASALES

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LA OBSTRUCCION

DE LOS SENOS

IMPLICA LA

ACUMULACION DE

MOCO Y PUS

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Gram negativos Haemophilus influenzae Neisseria meningitidis Bordetella pertussis Bordetella parapertussis Klebsiella sp

SINUSITIS

Posibles patógenos

Gram positivos

Streptococcus pneumoniae

Corynebacterium diphteriae*

Virus: Virus respiratorios y enterovirus

En algunos casos se puede encontrar M. leprae.

* C. diphteriae es mas frecuentemente aislado de exudado faríngeo.

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CONJUNTIVITIS

Posibles patógenos Gram positivos Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Streptococcus agalactie Streptococcus pyogenes Otros estreptococos beta-hemoliticos Virus Adenovirus, Virus de Herpes, Enterovirus

Gram negativos Neisseria gonorrhoeae Haemophilus influenzae Haemophilus aegyptius Pseudomonas aeruginosa Moraxella lacunata Enterobacterias Chlamydia trachomatis

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CONJUNTIVITIS

Infección en la conjuntiva ocular, la infección inicia con

sensación de arenillas en el ojo y lagrimeo, posteriormente

hay enrojecimiento, presencia de pus (Lagaña) e

inflamación de parpados

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Si la infección avanza se puede presentar la Queratoconjuntivitis la

cual compromete la visión

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Obstrucción del conducto

lagrimal

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CONJUNTIVITIS Recomendaciones

- La muestre se toma con hisopo

de Dacrón, estéril.

-Una vez tomada la muestra se

conserva el hisopo en un medio

de transporte Amies/Cary

Blair/Stuart

-El tiempo de conservación es

de 12 a 24 horas

- Se conserva a temperatura

ambiente (No refrigerar)

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CONJUNTIVITIS Recomendaciones

- La muestre se toma con hisopo

de Dacrón, estéril.

-Una vez tomada la muestra se

conserva el hisopo en un medio

de transporte Amies/Cary

Blair/Stuart

-El tiempo de conservación es

de 12 a 24 horas

- Se conserva a temperatura

ambiente (No refrigerar)