DiagnóStico Molecular De Los Sarcomas De Partes Blandas

APLICACIÓN DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR EN EL

DIAGNÓSTICO ANATOMO-PATOLÓGICO:

EL MODELO DE LOS SARCOMAS HUMANOS Y

OTROS TUMORES PEDIÁTRICOS

DR. SAMUEL NAVARRODEPTO PATOLOGIA, UNIVERSITAT DE VALENCIAHOSPITAL CLINICO UNIVERSITARIO

PATOLOGÍA MOLECULAR Y SARCOMAS DE PARTES BLANDAS

• VALOR DIAGNÓSTICO

• VALOR PRONÓSTICO

• DIANAS TERAPÉUTICAS

APLICACIONES

• Tumor de Ewing/PNET

• Rabdomiosarcoma alveolar

• Tumor desmoplásico de células redondas

• Sarcoma sinovial

• Liposarcoma mixoide/ de células redondas

• Sarcoma de células claras


VALOR DIAGNÓSTICO

Ewing/PNET

TUMORES DE CELULAS REDONDAS

PATRON GENETICO-MOLECULAR Ewing/PNET

Translocación Fusión génica

t(11;22)(q24;q12) ______________ FLI-1 (1q 24)EWS (22q12)

t(21;22)(q22;q12) ______________ ERG (21q22)EWS (22q12)

t(7;22)(p22;q12) ______________ ETV1 (7p22)EWS (22q12)

t(17;22)(q22.2;q12) ____________ E1A-F(17q12)EWS (22q12)

11 22 der (11) der (22)

TUMOR DE EWING/PNET

der(11)

der(22)

t(11;22)(q24;q12) EWS-FLI 1


t(11;22)(q24;q12)

11

22der 11

der 22


Ewing/PNET

TUMOR DE EWING/PNET

EWS_7 Fli1_5

t(11;22)(q24;q12) EWS-FLI 1


Rabdomiosarcoma


PATRON GENETICO-MOLECULAR

Rabdomiosarcoma Alveolar

Translocación Fusión génica

T(2;13)(q35;q14) _____________ PAX3 (2q35)FKHR (13q14)

T(1;13)(q35;14)_____________ PAX7 (1p36)FKHR (13q14)

RABDOMIOSARCOMA ALVEOLAR

2 der(2) der(13)13

t(2;13)(q35-37;q14) PAX 3-FKHR


RABDOMIOSARCOMA ALVEOLAR

Actin

PAX7/FKHR

PAX3/FKHR

M 1 2 3 4 5 6 C

PAX 3 FKHR

PAX 7 FKHR

B

t(2;13)(q35-37;q14) PAX 3-

FKHR


TUMOR DESMOPLÁSICO DE CÉLULAS REDONDAS


11 22 der (22)der (11)

EWS exon 7 WT1 exon 8

t(11;22)(p13;q12) EWS-WT1

TUMOR DESMOPLÁSICO DE CÉLULAS REDONDAS


SARCOMA SINOVIAL


X 18 der (X) der (18)

t(X;18)(p11;q11) SYT-SSX1 SYT-SSX2 SYT-SSSX4

der(18)t(X;18)(D18Z1+;wcpX+)

SARCOMA SINOVIAL


SYT -SSX

ACTINA(Control)

Control SYT/SSX

01B9679

SYT -SSX

PBGD(Control)

Control SYT/SSX

01B9679

SYT -SSX

Control SYT/SSX

01B9679

SYT -SSX

PBGD(Control)

Control SYT/SSX

01B9679

Tejido crioconservadoTejido crioconservado Tejido en parafinaTejido en parafina

SYT SSX1

t(X;18)(p11;q11) SYT-SSX1 SYT-SSX2 SYT-SSSX4

SARCOMA SINOVIAL


LIPOSARCOMA MIXOIDE/DE CELULAS REDONDAS


12 16 der (12) der (16)

t(12;16)(q13;p11) CHOP-

TLS



t(12;16)(q13;p11) CHOP-TLS



SARCOMA DE CELULAS CLARAS


12 22 der (12) der (22)

t(12;22)(q13-14;q12-13) EWS-ATF1



t(12;22)(q13-14;q12-13) EWS-ATF1



• Tumor de Ewing/PNET

• Fusión tipo 1: EWS (exón 7)-FLI 1 (exón 6)

• De Álava E et al. J Clin Oncol 1998;161248-55

• Rabdomiosarcoma alveolar

• t(1;13) y/o fusión PAX 7-FKHR

• Kelly KM et al. J Clin Oncol 1997;151831-36

• Neuroblastoma

• Amplificación de MYCN Deleción 1p36.3

VALOR PRONOSTICO


Neuroblastoma


PATRON GENETICO-MOLECULAR

NeuroblastomaAmplificación de MYCN (d

mins, HSR)

Del 1p 36

Ganancia 17q

LOH 11q, 14q


Neuroblastoma:MYCN

p

q

22

25

24

23

21

16

1514

13

12

11.2

11.111.1

12

21

22

23

24

31

32

11.2

13

14.114.214.3

35

34

33

36

37

HSRsp

q

22

25

24

23

21

16

1514

13

12

11.2

11.111.1

12

21

22

23

24

31

32

11.2

13

14.114.214.3

35

34

33

36

37

dmins

Cromosoma 2

p

q

11.2

12

13

14

23

24.1

15

11.111.1

13

12

21

22

24.2

24.3

p

q

11.2

12

13

14

23

24.1

15

11.111.1

13

12

21

22

24.2

24.3


Neuroblastoma:MYCN

p

q

22

25

24

23

21

16

151413

1211.211.111.1

12

21

22

23

24

31

32

11.2

1314.114.214.3

3534

33

36

37

MYCN

Cromosoma 2

2p24

p

q

22

25

24

23

21

16

151413

1211.211.111.1

12

21

22

23

24

31

32

11.2

1314.114.214.3

353433

36

37

Cromosoma 2

Ganancia


Neuroblastoma:MYCN

Ganancia de MYCNMYCN no amplificado


Neuroblastoma:MYCN

36.336.2

36.1

3534.3

34.133

31.3

21

1211

34.2

32.3

32.132.2

31.2

31.1

22.3

22.122.2

13.3

13.113.2

11

12

21.1

22

23

24

25

31

32.1

41

42.1

4344

21.221.3

32.232.3

42.242.3

3534.3

34.133

31.3

21

1211

34.2

32.3

32.132.2

31.2

31.1

22.3

22.122.2

13.3

13.113.2

11

12

21.1

22

23

24

25

31

32.1

41

42.1

4344

21.221.3

32.232.3

42.242.3

17q 23-qter

1t(1;17)(p35,q23)

del 1 p36.3


Neuroblastoma:1p36

No deleción del 1p36 Deleción del 1p36


Neuroblastoma: Cr.1p36


M 23 25 1524106 IMR32

MycN

LHPCR D1S80

TN TN TN

Valor pronóstico

• Oncogenes: c-kit ras Her2

• GIST: Tratamiento con STI571

• Scappatici FA et al. Cancer Treatment Rew 2001;27:317-26

• Genes supresores/proapoptóticos: p53 Fas/FasL

• Genes reguladores del ciclo celular: p27 mdm2

• Productos de fusión génica: EWS-FLI1 CHOP-TLS

•

DIANAS TERAPEUTICAS


HE c-kit

DIANAS TERAPEUTICAS


• Fusiones génica nuevas

• Diagnóstico histológico cuestionable Escaso material

• Tumor necrótico RNA degradado

• Irreproductibilidad por diferentes laboratorios

• Diagnóstico histológico cuestionable

• Contaminacion

RESULTADOS NEGATIVOS INESPERADOS

RESULTADOS POSITIVOS INESPERADOS

LIMITACIONES


1 32 54 6 987 IMR32

LIMITACIONES


NEUROBLASTOMA: MYCN falsos negativos por PCR

CASO CLINICO (1)

Niño de 3 años, presentando una gran masa retroperitoneal ocupando la cavidad abdominal.

Niveles de ácido vanil mandélico y homovanilico

en orina normales.Captación de MIBG-I123.Se remite biopsia a cielo abierto.Tres días después el paciente fallece por

hemorragia abdominal


DIAGNOSTICO (1)DIAGNOSTICO (1)

NEUROBLASTOMA POBRE EN ESTROMA, SUBTIPO

INDIFERENCIADO.

VARIANTE: PLEOMORFICO-ANAPLASICO

HISTOPRONOSTICO: DESFAVORABLE

( CLASIFICACION INPC)


Niña de 3 años con masa retroperitoneal de rápido crecimientoNo captación de MIBG

SOSPECHA CLINICASarcoma retroperitoneal

PROCEDIMIENTO DIAGNOSTICOBiopsia exéresis

TUMORES DE CELULAS REDONDASCASO CLINICO

(2)


N-myc

Rabdomiosarcoma alveolar: Amplificación MYCN



DIAGNOSTICO ANATOMO-PATOLOGICOTumor de células redondas con diagnostico diferencial de

Rabdomiosarcoma alveolarNeuroblastoma indiferenciado

ESTUDIO MOLECULARAmplificación MYCN


Varón de 24 años con masa abdominal de crecimiento rápido con metástasis pulmonares y mediastinicas.Se practica biopsia a cielo abierto.Tras 12 meses y 2 ciclos de QT el paciente fallece

CASO CLINICO (3)


Ewing’s/PNET: Fusiones génicas atipicas EWS-FEV

Tumor de Ewing/PNET Atípico PleomorficoCon Feno-Genotipo inusual



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