Universidad Nacional Autnoma de MxicoFacultad de Estudios Superiores Zaragoza

Carrera: Mdico CirujanoLaboratorio de FisiologaMdulo: Aparato Digestivo Prctica: Propiedades del msculo lisoIntegrantes:Berber Guerrero NatalyCano Garca Jorge LuisEscorza Valdivia SamanthaHernndez Hernndez EduardoLpez Tolentino Monserrat RaquelMartnez Gonzlez Elideth GuadalupeMartnez Nieto Julin RicardoMayn Fonseca Jess AlejandroMoreno Islas Laura FernandaSantiago Fierro Carmen NalySilva Pineda HugoVzquez Torres Norma CristinaProfesor: Dr. Juan Carlos Trejo RodrguezMesa: 3Grupo: 1303

INTRODUCCIN

OBJETIVOS1. Demostrar la actividad mecnica del msculo liso en condiciones fisiolgicas.2. Observar las modificaciones que sufre la actividad mecnica del msculo liso, al cambiar las condiciones fisiolgicas de temperatura y oxigenacin.3. Observar las modificaciones que sufre la actividad mecnica del msculo liso, al aplicarle diferentes electrolitos: Na, K y Ca.4. Observar las modificaciones que sufre la actividad mecnica del msculo liso, al simular con agentes adrenrgicos y muscarnicos.

COMPETENCIAS

MATERIAL Y MTODO 1 Fisigrafo. 1 Migrafo A con cable de 9 vas. 1 Soporte universal con tensimetro. 1 Caja trmica. 1 Cmara hmeda. 1 Llave de bureta. 1 Pinza universal. 1 Pinza de extensin. 1 Termmetro. 1 Aguja de raquia curva con tubo de ltex. 1 Vaso de precipitado de 500 ml. 1 Caja de Petri. 4 Vasos de precipitados de 50 ml. 3 Piezas de ciruga: tijera, porta agujas, pinza de diseccin. 6 Frascos goteros con: NaCl, KCl, CaCl, epinefrina, acetilcolina, atropina.

DESARROLLO1. Con el dispositivo ya instalado, con Ringer de mamfero a 37o C y con un burbujeo de una gota por segundo, la velocidad del papel debe ser de 0.25 cm/seg. Tome un registro basal por 30 segundos al cumplirse stos detenga la velocidad del papel.2. Suspenda la oxigenacin por tres minutos, al cumplirse stos, tome un registro por 30 segundos y detenga la velocidad del papel.3. Drene el Ringer de mamfero de cmara hmeda y ahora llene la cmara hmeda con Ringer de mamfero a 20o C y obtenga un registro por 30 segundos, nuevamente detenga la velocidad del papel.4. Drene el Ringer de mamfero de la cmara hmeda y ahora llene la cmara hmda con Ringer a 40o C, obtenga un registro por 30 segundos al cumplirse stos detenga la velocidad del papel.5. A partir de este punto cada sustancia agregada a la cmara hmeda, tendr un burbujeo de una gota por segundo, Ringer de mamfero a 37o C, tomaremos registros de 30 segundos al cumplirse stos, se detendr la velocidad del papel y lavaremos dos veces la cmara hmeda.6. Las sustancias las vamos a agregar en gotas a dosis respuesta en ste orden:

Cloruro de sodio. Cloruro de potasio. Cloruro de calcio. Epinefrina. Acetilcolina. Atropina.

Al terminar la prctica, lo primero que hay que realizar es cortar con la tijera la seda que proviene del migrafo A, apagamos el botn de record, luego el botn power y finalmente el del encendido general, desarmamos el dispositivo y lavamos el material que utilizamos. Discuta con el profesor de laboratorio, si los resultados obtenidos fueron los esperados y qu mecanismos fisiolgicos influyeron en las variables aplicadas.

OBSERVACIONES

RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS

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CUESTIONARIO

1. Cules son los receptores que observamos en el intestino?

2. Qu bacteria activa los receptores nicotnicos y muscarnicos y cul es su toxina?

Mecanismo de accin de la salmonellaEl perodo de incubacin paraS. typhiabarca de una semana a un mes, siendo principalmente de dos semanas, a partir de la ingesta de la bacteria proveniente de alimentos o agua contaminada. Se presume queS. typhiinvade a travs de las clulas M del intestino, las cuales forman parte del tejido linfoide o inmunolgico. Sin embargo, debido a que no se han podido cultivar las clulas M en el laboratorio, los experimentos de invasividad deSalmonellase han realizado con clulas epiteliales y macrfagos, los cuales, adems, constituyen otros eslabones en el proceso de invasin.No se conocen con certeza los mecanismos responsables de la gastroenteritis por salmonella, pero al igual que en la fiebre tifoidea depende del inculo, virulencia del microorganismo, acidez gstrica, peristaltismo, flora saprofita intestinal y situacin inmunolgica del paciente. Tras alcanzar el intestino las salmonellas se multiplican en la pared intestinal donde producen en su mucosa un infiltrado masivo de neutrfilos. Lo ms probable es que la diarrea sea producida por el ingreso de la salmonella en los enterocitos, por la induccin de una respuesta inmune en el intestino o por ambos mecanismos a la vez. Es poco habitual la presentacin en forma de bacteriemia, ms frecuente en pacientes inmunodeprimidos (VIH) y que son las responsables de los focos infecciosos metastsicos (artritis sptica, endarteritis, meningitis, colecistitis, absceso heptico y esplnico).

Mecanismo de accin de la shigellaShigelladesencadena su captacin por las clulas M del colon, donde las bacterias son tomadas en el inicio por las clulas presentadoras de antgenos (macrfagos, clulas dendrticas) y posteriormente invaden los enterocitos, donde se liberan del fagosoma, se multiplican en citoplasma y diseminan a clulas adyacentes. El sistema de secrecin tipo III (TTSS - siglas en ingls), un sistema de translocacin de protenas conservado en bacterias patgenas gram negativas y que est codificado en un gran plsmido, se encarga, mediante sus protenas efectoras, de los procesos de citotoxicidad de macrfagos, la invasin a enterocitos y la modulacin de la respuesta inmune celular. Durante la multiplicacin y diseminacin bacteriana en la regin basal de las clulas hospederas, el lipopolisacrido (LPS) y peptidoglicano son liberados e inducen la expresin de citocinas proinflamatorias y quimiocinas que activan la respuesta inmune innata. (Ranallo et al., 2010).

Las toxinas de Shiga (Stx) son una familia de protenas estructural y funcionalmente relacionadas que se expresan enShigella dysenteriaeserotipo 1 y en varios serotipos deEscherichia coli;penetran los enterocitos e inhibenla sntesis proteica por inactivacin cataltica de los ribososomas eucariotes, aunque tambin desencadenan apoptosis en diversos tipos celulares.

Mecanismo de accin de E. coliE. coli enteropatgena (EPEC) es una causa importante de diarrea en los lactantes, sobre todo en los pases en vas de desarrollo. EPEC se relacionaba con brotes epidmicos de diarrea en guarderas de pases desarrollados. EPEC se adhiere a las clulas de la mucosa del intestino delgado. Los factores mediados por cromosomas favorecen la adherencia. Hay una prdida de las microvellosidades (aplanamiento), formacin de pedestales de actina fi lamentosa o estructuras similares a copas y, en ocasiones, entrada de EPEC en las clulas de la mucosa. Se pueden ver lesiones caractersticas en las microfotografas electrnicas ande las lesiones de biopsia del intestino delgado. El resultado de la infeccin por EPEC es diarrea lquida, que suele ceder en forma espontnea pero puede ser crnica. La diarrea por EPEC se relaciona con mltiples serotipos especficos de E. coli. Se identifican las cepas por el antgeno O y a veces por la tipificacin del antgeno H. Se puede realizar un modelo de infeccin de dos etapas en que se utilizan clulas HEp-2. Las pruebas para identificar EPEC se realizan en laboratorios de referencia. La duracin de la diarrea por EPEC puede abreviarse y la diarrea crnica curarse con tratamiento con antibiticos.

E. coli enterotoxgena (ETEC) es una causa frecuente de diarrea del viajero y es una causa muy importante de diarrea en los lactantes de pases en vas de desarrollo. Los factores de colonizacin de ETEC especfi cos para los seres humanos favorecen la adherencia de ETEC a las clulas epiteliales del intestino delgado. Algunas cepas de ETEC producen una exotoxina termolbil (LT) (PM 80 000) que est sujeta a control gentico de un plsmido. Su subunidad B se adhiere al ganglisido GM1en el borde en cepillo de las clulas epiteliales del intestino delgado y facilita la entrada de la subunidad A (PM 26 000) en la clula, donde la ltima activa a la adenililciclasa. Esto incrementa notablemente la concentracin local del monofosfato de adenosina cclico (cAMP), lo cual produce una secrecin intensa y prolongada de agua y cloruros e inhibe la reabsorcin de sodio. La luz intestinal se distiende con lquido y sobreviene hipermotilidad y diarrea, que persiste por varios das. La exotoxina termolbil es antignica y presenta reaccin cruzada con la enterotoxina de Vibrio cholerae. LT estimula la produccin de anticuerpos neutralizantes en el suero (y tal vez en la superficie intestinal) de personas previamente infectadas con E. coli enterotoxgena. Las personas que radican en zonas donde estos microorganismos son muy frecuentes (p. ej., en algunos pases en vas de desarrollo) tienen posibilidades de tener anticuerpos y de ser menos propensas a desarrollar diarrea al volverse a exponer a E. coli productora de LT. Los anlisis para la deteccin de LT son los siguientes: 1) acumulacin de lquido en el intestino de animales de laboratorio; 2) cambios citolgicos caractersticos en las clulas de ovario de cobayo chino en cultivo u otros linajes celulares; 3) estimulacin dela produccin de esteroides en las clulas de tumores suprarrenales cultivadas, y 4) fijacin y anlisis inmunolgicos con antisueros normalizados a LT. Estos anlisis se realizan slo en laboratorios especializados.Algunas cepas de ETEC producen la enterotoxina termoestable STa (PM 1 500 a 4 000), que est bajo el control gentico de un grupo heterogneo de plsmidos. STa activa a la guanililciclasa en las clulas epiteliales entricas y estimula la secrecin de lquido. Muchas cepas positivas para STa tambin producen LT. Las cepas con las dos toxinas causan diarrea ms grave.Los plsmidos portadores de los genes para las enterotoxinas (LT, ST) tambin pueden portar genes para los factores de colonizacin que facilitan la adherencia de las cepas de E. coli en el epitelio intestinal. Los factores de colonizacin reconocidos ocurren con especial frecuencia en algunos serotipos. Determinados serotipos de ETEC se presentan en todo el mundo; otros tienen una distribucin limitada reconocida. Es posible que casi cualquier E. coli pueda adquirir un plsmido que codifica las enterotoxinas. No hay ninguna relacin definida de ETEC con cepas de EPEC que produzcan diarrea en los nios. Asimismo, no hay ninguna relacin entre las cepas enterotoxgenas y las que pueden invadir clulas del epitelio intestinal de alimentos potencialmente contaminados con ETEC para tratar de evitar la diarrea del viajero. La profilaxis antimicrobiana puede ser eficaz pero es posible que cause incremento de la resistencia de las bacterias a los antibiticos y no siempre debe recomendarse. Una vez que sobreviene diarrea, el tratamiento con antibiticos abrevia de manera eficaz su duracin.

E. coli productora de toxina Shiga (STEC) se denomina as por las toxinas citotxicas que produce. Hay por lo menos dos formas antignicas de la toxina designadas como toxina similar a Shiga 1 y toxina similar a Shiga 2. STEC se ha relacionado con colitis hemorrgica, una forma grave de diarrea, y con el sndrome hemoltico urmico, una enfermedad que desencadena insuficiencia renal aguda, anemia hemoltica microangioptica y trombocitopenia. Las toxinas similares a Shiga tienen muchas propiedades que son parecidas a la toxina Shiga producida por algunas cepas de Shigella dysenteriae de tipo 1; sin embargo, las dos toxinas son diferentes desde el punto de vista antignico y gentico. De los serotipos de E. coli que producen toxina Shiga,O157:H7 es el ms frecuente y es el que se puede identificar en muestras clnicas. STEC O157:H7 no utiliza sorbitol, a diferencia de casi todos los dems E. coli y tiene negatividad en sorbitol. Y tiene negatividad en agar de MacConkey con sorbitol (se utiliza sorbitol en vez de lactosa). Las cepas O157:H7 tambin son negativas en las pruebas MUG (vase antes). Muchos de los serotipos no-O157 pueden ser positivos para sorbitol cuando se multiplican en cultivo. Se utilizan antisueros especficos para identificar las cepas O157:H7. Los anlisis para la toxina Shiga que utilizan inmunoanlisis enzimticos disponibles en el mercado se realizan en muchos laboratorios. Otros mtodos sensibles incluyen pruebas de citotoxina en cultivo celular usando clulas Vero y la reaccin en cadena de la polimerasa para la deteccin directa de los genes de toxina a partir de muestras fecales. Muchos casos de colitis hemorrgica y sus complicaciones relacionadas pueden evitarse mediante la coccin minuciosa de la carne molida.

E. coli enteroinvasiva (EIEC) produce una enfermedad muy similar a la shigelosis. La enfermedad ocurre ms a menudo en los nios en pases en vas de desarrollo y en personas que viajan a estos pases. Al igual que Shigella, las cepas de EIEC no fermentan lactosa o la fermentan en una etapa tarda y son no mviles. EIEC produce enfermedad al invadir las clulas epiteliales de la mucosa intestinal.

E. coli enteroagregativa (EAEC) produce una diarrea aguda y crnica (mayor de 14 das de duracin) en personas de pases en vas de desarrollo. Estos microorganismos son tambin la causa de enfermedades transmitidas en los alimentos en los pases industrializados. Se caracterizan por sus pautas especficas de adherencia a las clulas humanas. EAEC produce toxina similar a ST (vase antes) y una hemolisina.

3. Cul es el plexo que mantiene el tono del msculo liso del intestino?

4. Dnde y cmo se lleva a cabo la absorcin en el intestino delgado pero en sus tres porciones diferentes?

5. Dnde se encuentran los centros de la defecacin?

Defecacin: Eliminacin de heces del tubo digestivo a travs del recto. Cuando un movimiento de masa fuerza a las heces a penetrar en el recto, surge el deseo de la defecacin, con una contraccin refleja del recto y relajacin de los esfnteres anales:*Esfnter anal interno: engrosamiento del msculo liso circular, inmediatamente anterior al ano.*Esfnter anal externo: compuesto por msculo voluntario estriado que rodea al esfnter interno; este esfnter es controlado por fibras nerviosas del nervio pudendo, quien forma parte del sistema nervioso somtico y que por lo tanto est bajo control voluntario consciente. Habitualmente se encuentra cerrado de forma subconsciente a menos que una seal consiente inhiba su contraccin y estimule su relajacin.La defecacin se inicia gracias a los reflejos de la defecacin:*El reflejo intrnseco*El reflejo parasimptico de la defecacin El reflejo intrnseco esta mediado por el sistema nervioso entrico de la pared rectal; al penetrar las heces en el recto, la distencin de las paredes rectales enva seales aferentes que se propagan por el plexo mientrico, inciando as ondas peristlticas a nivel del colon descendente, sigma y recto, para impulsar a las heces en direccin al ano.*las ondas peristlticas que se aproximan al ano promueven a la relajacin del esfnter anal interno y al mismo tiempo se relaja de forma consciente y voluntaria el esfnter anal externo.*El reflejo intrnseco es reforzado por la participacin del reflejo parasimptico de la defecacin donde intervienen los segmentos sacros de la mdula espinal.

Al estimularse las seales nerviosas del recto, las seales estimulan a la mdula espinal, quien responde regresando las seales al colon descendente, al sigma y al ano a travs de las fibras nerviosas parasimpticas de los nervios plvicos aumentando significativamente la intensidad de las ondas peristlticas y la relajacin del esfnter anal interno, es decir, el reflejo mientrico intrnseco de la defecacin de convierte en un proceso de defecacin potente y capaz de vaciar la totalidad del intestino grueso de una sola vez, desde el ngulo esplnico hasta el ano.

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFA Guyton Arthur C. , Hall John E. Tratado de fisiologa mdica, duodcima edicin, Editorial Elservier, Espaa, 2011, pg. 771 y 772