nal von minden GmbH

Friedenstrasse 32

93053 Regensburg

Alemania

Test NADAL Sífilis®

Tira de inmersión de detección rápida de anticuerpos Treponema Pallidum en muestras de suero, plasma y sangre - Referencia 201001

1. Uso previsto

El test NADAL® Sífilis (Sangre Total/Suero/Plasma) es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de anticuerpos (IgG e IgM) para Treponema Pallidum (TP) en sangre total, suero o plasma para ayuda del diagnóstico de Sífilis.

2. Introducción

El Treponema Pallidum (TP) es un agente que causa la enfermedad venérea sífilis. TP es una bacteria espiroqueta con una cubierta exterior y una membrana citoplasmática1. Se sabe relativamente poco sobre el organismo en comparación con otras bacterias patógenas. De acuerdo con el Centro de Control de Enfermedades (CDC), el número de casos de infecciones de sífilis se ha incrementado marcadamente desde 19852. Algunos factores claves que han contribuido a este incremento incluyen la adicción al crack, cocaína y la gran incidencia de la prostitución entre los drogadictos3. Un estudio reportó que un gran número de mujeres infectadas con VIH mostraron reactividad en las pruebas serológicas de Sífilis4. Dentro de las características de la sífilis se encuentran: múltiples etapas clínicas, largos periodos latentes e infección asintomática. La infección de sífilis primaria se define a través de la presencia de un chancro en el sitio de inoculación. El anticuerpo responde a la bacteria TP que puede determinarse entre 4 a 7 días después de que el chancro aparece. La infección permanece detectable hasta que el paciente recibe tratamiento adecuado5. El test utiliza una doble combinación de antígeno de sífilis: un antígeno de sífilis cubierto con partículas y un antígeno de sífilis inmovilizado sobre membrana para detectar anticuerpos TP (IgG e IgM) cualitativa y selectivamente en sangre total, suero o plasma.

3. Principio del test

El test para la detección rápida de sífilis está formado por un doble antígeno en un inmunoensayo cromatográfico. Está compuesto por una almohadilla que contiene antígenos específicos recombinados de T. pallidum con conjugado de oro coloidal color burdeos (conjugados rTP) y un recombinado específico de antígenos T. pallidum que han sido inmovilizados en la membrana de nitrocelulosa de la región de resultados del test. Durante el desarrollo del test, los anticuerpos de sífilis de las muestras del paciente migran a través de la almohadilla conjugada donde se unen a los rT. pallidum conjugados. Los anticuerpos rTreponema pallidum conjugados son capturados por los antígenos rTreporema pallidum inmobilizados en la membrana dando lugar a una línea de color burdeos en la región del test (T) de este modo se indica un resultado positivo. La ausencia de esta banda en la ventana sugiere un resultado negativo. El test contiene un control interno en la región de control (C) que deberá aparecer en todos los test independientemente de la presencia o no del anticuerpo de sífilis.

4. Reactivos y materiales suministrados

20 tiras envasadas individualmente con desecante

20 pipetas de transferencia desechables envasadas junto con los test

1 frasco de reactivo con cuentagotas

Prospecto

5. Otros materiales necesarios

Temporizador

Frascos de recogida de muestras

Lanceta (opcional - solo para sangre por punción digital)

Tubo capilar heparinizado y pipeta (para sangre por punción digital)

6. Almacenamiento y conservación

El kit debe permanecer refrigerado o almacenado a temperatura ambiente (2-30ºC).

Las tiras debe ser utilizadas antes de la fecha de caducidad que aparece impresa en la etiqueta.

No congelar el test.

Las tiras deben permanecer en el frasco sellado hasta su uso.

7. Advertencias y precauciones

Sólo para diagnóstico in-vitro profesional.

No coma, beba o fume en el área donde se manipulen las muestras o kits.

Seguir las instrucciones para obtener resultados precisos.

No abrir el test si no se va a llevar a cabo inmediatamente el análisis.

No utilizar test caducados o si el envoltorio está dañado.

Manipular las muestras como si contuvieran agentes infecciosos. La eliminación de las muestras y de los materiales utilizados deberá llevarse a cabo en contenedores específicos designados para ello, siguiendo la normativa local.

Utilice ropa protectora, como batas de laboratorio, guantes desechables y protector de ojos cuando realice las pruebas.

La humedad y la temperatura pueden afectar a los resultados.

8. Toma de muestras y preparación

El test NADAL® Sífilis puede realizarse con sangre (venosa o digital), suero o plasma. Separe el suero o plasma tan pronto como sea posible de las sangre para evitar la hemolisis. Use únicamente muestras limpias no hemolizadas. La prueba debe hacerse inmediatamente tras la recogida de muestras. No almacene las muestras durante largos periodos de tiempo a temperatura ambiente. Se puede almacenar suero y plasma entre 2-8°C hasta 3 días. Para un almacenamiento más prolongado, las muestras deben guardarse por debajo de -20°C. La sangre puede guardarse entre 2-8°C hasta dos días. No congele la sangre. La sangre obtenida por punción digital debe usarse inmediatamente para la prueba. Las muestras deben estar a temperatura ambiente (15-30°C) para hacer la prueba. Las muestras congeladas deben descongelarse totalmente y mezclarse antes de realizar la prueba. Las muestras no deben ser congeladas y descongeladas repetidamente. Si hay que transportar las muestras, hágalo conforme a la normativa local. Sangre de la yema del dedo 1) Lave la mano del paciente con jabón y agua caliente o desinféctela

con un algodón empapado en alcohol. Seque la zona. 2) Masajee la mano en dirección al dedo corazón o anular pero sin

tocar el área de punción. 3) Pinchar la yema con una lanceta estéril. Limpiar las primeras gotas

de sangre. 4) Frotar la mano desde la muñeca hasta la palma para conseguir una

cantidad suficiente de sangre en la punción. 5) Agregue la muestra a la tira de prueba:

Con tubo capilar: a) Toque el final del tubo capilar a la sangre hasta llenar

aproximadamente 50 l. Evite burbujas de aire. b) Coloque el bulbo sobre el extremo superior del tubo

capilar, luego, oprima el bulbo para dispensar la sangre total en la almohadilla de la tira

Con sangre directa: a) Coloque el dedo del paciente de tal forma que la gota de

sangre esté justo encima del pozo de la placa (S) para la prueba

b) Deje caer dos gotas de la punción dactilar de sangre total sobre el centro del pozo (S) de la prueba o mueva el dedo del paciente de forma tal que la gota toque el pozo de la placa (S). Evite que el dedo toque directamente el pozo de la placa (S)

Muestra en plasma 1) Recoja la muestra en un recipiente anticoagulante (EDTA, Citrato o

Heparina). 2) Centrifugue la muestra y separe el plasma 3) Extraiga el plasma para la prueba. Almacene la muestra a entre 2-

8ºC (máximo dos semanas). Si no se realiza la prueba en dos semanas, el plasma debe mantenerse por debajo de -20°C.

Muestra en suero 1) Recoja la muestra en un recipiente no anticoagulante. 2) Deje que la muestra se coagule. 3) Centrifugue la sangre y separe el suero

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Tira de inmersión de detección rápida de anticuerpos Treponema Pallidum en muestras de suero, plasma y sangre - Referencia 201001

C

T

C

T

C

T

4) Extraiga el suero para la prueba (300 a 500 µl) o guárdela a entre 2-8°C (máx. 2 semanas). Si no se realiza la prueba en dos semanas, el suero debe mantenerse por debajo de -20°C.

9. Procedimiento del test

1) Permita que el test, los tampones, las muestras, y/o los controles se pongan a temperatura ambiente (15-30°C) antes de proceder al análisis.

2) Saque el test de su envoltorio y úselo tan pronto como sea posible. 3) Coloque el test en una superficie plana y limpia.

Para muestras de suero o plasma: Mantener la pipeta verticalmente y dispensar 3 gotas de suero o

plasma (aproximadamente 75 l) en el orificio del test (S). Empiece a controlar el tiempo.

Para muestras de sangre por venopunción: Mantener la pipeta verticalmente y dispensar 2 gotas de sangre (unos

50l) en el orificio del test (S). Añada 1 gota de reactivo (aprox. 40 µl) en el mismo orificio y empiece a controlar el tiempo. Para muestras de sangre por punción digital:

Deje caer 2 gotas de sangre (aprox. 50 l) en el orificio previsto para ello (S) mediante pipeta o directamente del dedo. En este caso, asegúrese de que el dedo no tenga contacto directo con el orificio.

Inmediatamente añadir 1 gota (40l) del frasco de reactivo y empezar a controlar el tiempo.

4) Espere a que la(s) línea(s) roja(s) aparezcan. Interprete

el resultado después de 10 minutos. No interpretar resultados pasados 30 minutos.

10. Interpretación de resultados

Negativo Solo aparece una línea en el área de control C. La ausencia de la línea del test (T) indica que no se han detectado anticuerpos de sífilis. Positivo Aparecen 2 líneas, una en el área de control (C) y la otra en el área de test (T). Una línea roja en la región T indica que la muestra contiene anticuerpos de sífilis. La intensidad de la línea puede variar de rosa claro a granate intenso según la concentración de anticuerpos. Inválido Si no aparece la línea de control el test es inválido, incluso aunque aparezca una línea en el área de test (T). En este caso, la prueba deberá ser repetida con un nuevo test. Si el problema continúa, no use más test y contacte con su proveedor

11. Control de calidad

El test NADAL® Sífilis incluye un procedimiento de control interno. La aparición de una línea en la zona de control (C) es un sistema de control interno que confirma que hay un volumen de muestra suficiente y un uso del test adecuado.

Los controles estándar no están incluidos en el kit. Por lo tanto, se recomienda que se lleven a cabo controles positivos y negativos. Esto confirmará el proceso de la prueba y la validez del test.

12. Limitaciones

El test es únicamente para uso de diagnóstico in vitro. La prueba se debe utilizar únicamente para la detección de anticuerpos TP en muestras de sangre total, suero o plasma. No se pueden determinar ni los valores cuantitativos ni el incremento porcentual de anticuerpos TP a través de esta prueba cualitativa.

Este test solamente indicará la presencia de anticuerpos TP en la muestra y no debe ser utilizado como único criterio para el diagnóstico de infección TP.

Como todas las pruebas de diagnóstico, los resultados deben ser interpretados junto con la información clínica disponible y avalada por el médico.

Si la prueba resulta negativa y los síntomas clínicos persisten, las pruebas adicionales deben realizarse utilizando otros métodos clínicos. Un resultado negativo no excluye ninguna posibilidad de infección por TP. El test NADAL® Sífilis ofrece una detección cualitativa de anticuerpos TP en muestras humanas de suero, plasma y sangre.

13. Características de rendimiento

Sensitividad analítica y especifidad La precisión del test NADAL® Sífilis para la detección de sífilis identificó correctamente muestras de un panel de seroconversión y se evaluó en comparación con el test de sífilis disponible comercialmente TPHA utilizando muestras clínicas. El resultado muestra que la sensibilidad relativa del test es superior al 99,7% y la especificidad relativa es 99,6%.

TABLA: Test NADAL® Sífilis vs TPHA

Método TPHA Resultado total

NADAL®

Sífilis

positivo negativo

Positivo 384 2 386

negativo 1 493 494

Resultado total 385 495 880

Sensitividad relativa: 99,7% (98,6-100,0%)* Especificidad Relativa: 99,6% (98,6-100%)*Precisión: 99,3% Exactitud: 99,7% (99,0%-99,9%)* * 95% Intervalo de Confidencialidad

14. Precisión

Intraensayo Dentro de una precisión que ha sido determinada al utilizar 10 replicas de 4 muestras: un valor negativo, un valor bajo positivo, un medio positivo y un valor alto positivo. El valor negativo, el valor bajo positivo, el medio positivo y el valor alto positivo han sido identificados correctamente superiores al >99% de las veces. Interensayo Entre la precisión que ha sido determinada a través de 10 ensayos independientes sobre las mismas cuatro muestras: un valor negativo, uno bajo positivo, uno medio positivo y uno alto positivo. Se han probado tres diferentes lotes del test sobre un período de tres días usando especímenes negativos, bajo positivos, medio positivos y altos positivos. Las muestras fueron correctamente identificadas en un >99% de las veces.

15. Referencias

1) Claire M. Fraser. Complete genome sequence of Treponema Pallidum, the syphilis spirochete, Science 1998; 281 July: 375-381.

2) Center for Disease Control. Recommendations for diagnosing and treating syphilis in HIV-infected patients, MMWR Morb. Mortal Wkly Rep. 1988; 37: 601

3) Aral R. Marx. Crack, sex and STD, Sexually Transmitted Diseases, 1991; 18:92-101

4) J.N. Wasserheit. Epidemiological Synergy: Interrelationships between human immunodeficiency virus infection and other sexually transmitted diseases, Sexually Transmitted Diseases 1992; 19:61-77

Test NADAL Sífilis®

Tira de inmersión de detección rápida de anticuerpos Treponema Pallidum en muestras de suero, plasma y sangre - Referencia 201001

5) Johnson Phillip C.Testing for Syphilis, Dermatologic Clinic 1994; 12 Jan: 9-17.

Índice de Símbolos

Atención, ver instrucciones de uso

Pruebas por kit

Representante autorizado

Solo para uso de diagnóstico in vitro

Caducidad

No reutilizar

Almacenar entre 2-30°C

Número de lote REF Nº de

referencia

Ref.: 2012-09-14 IA

Nal von minden GmbH. Carl-Peschken Strasse 9 47441 Moers Alemania

Fabricante

958 412 886

629 636 705

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