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VARIABILIDAD CUANTITATIVA

EN LA IDENTIFICACION

DE ANTICUERPOS,

EN FUNCION DE LA

CIGOCIDAD ANTIGENICA.

INTERPRETACION PRACTICA DEL

PANEL DE 11 CELULAS COMERCIALES

Hospital Clínico Universitario Puerto Real (Cádiz)

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INMUNOHEMATOLOGÍA

INVESTIGACIÓN DE AC IRREGULARES

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OBJETIVO

• En inmunohematología se ha desarrollado una amplia gama de técnicas para detectar e identificar Ac dirigidos contra los Ag eritrocitarios in vitro, por lo que deben de realizarse una revisión técnica de los métodos empleados, con el objetivo de:

– Capturar todos los Ac clínicamente significativos, que son aquellos que tienen actividad in vivo y se manifiestan in vitro al reaccionar a 37 ºC.

– Garantizar que la práctica de las transfusiones sean seguras sobre todo, sencillas, rápidas y de bajo coste.

– Garantizar una profilaxis en gestantes disminuyendo las posibles EHRN.

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• Se han detectado más de 600 antígenos

eritrocitarios, para los cuales la Sociedad

Internacional de Transfusión, a través de

consensos, ha logrado sistematizar los

nombres y símbolos agrupándolos en

sistemas.

• Se conocen 23 sistemas, los más

conocidos ABO y Rh. Los restantes

tienen, además de importancia en las

transfusiones sanguíneas, funciones en el

eritrocito.

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Cada Ag está definido por su Ac interactuando con él por complementariedad espacial y de forma

especifica.

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CLASIFICACIÓN DE LAS INTENSIDADES

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TARJETAS COMERCIALES

- Tarjeta liss coombs - Tarjeta Neutra

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RESULTADOS (panel 1) :Identificación correcta del AC Anti-M

• Observado claramente el efectodosis para al Ac Anti-M.

• Observado su amplio rango térmicoentre 37º C, 22º C (en muy rarasocasiones), y hasta los 4º C.

• Observado el efecto enzimático.

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EXPRESIÓN ANTIGÉNICA DEL SISTEMA MN DE LAS 4 1ª CÉL. DEL PANEL

(NN) homocigoto para el Ag N

(MN) heterocigoto para los Ag MN

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MM) homocigoto para el Ag MM

REACCIÓN INTENSA

CON CÉLULAS

HOMOCIGOTAS

(NN) homocigoto para el Ag N

(MN) heterocigoto para los Ag MN

(NN) homocigoto para el Ag N

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MN) heterocigoto para los Ag MN

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MN) heterocigoto para los Ag MN

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MN) heterocigoto para los Ag MN

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MM) homocigoto para el Ag MM

(MN) heterocigoto para los Ag MN

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CONCLUSIONES DEL PANEL 1

• En la identificación del ac de una gestante (caso nº 1) a titulo 1/2 , cuyas cél I (0) II (2+) y III (2+) han sido reactivas tanto medio liss coombs como medio neutro, el panel de 11 cél. debe ser montado en los mismos medios de incubación y temperatura, para poder evidenciarse que exista más de un anticuerpo.

• Al tratarse de un Ac tipo IgM no traspasa la barrera placentaria, rara vez producirá EHRN (ver anexo 2)

• Para la titulación, se han utilizado células Heterocigotas. En la consiguiente monitorización del Ac durante todo el embarazo, es importante utilizar siempre cél. con la misma cigocidad, para evitar errores por el efecto del genotipo.

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PANEL Nº 2 - Ac DETECTADO Anti. s

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RESULTADOS (panel 2) :Identificación correcta del AC Anti-s

• Observado claramente el efectodosis para al Ac Anti-s.

• Observado rango térmico entre 37 y4º C.

• Observado el efecto enzimático.

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S s

EXPRESIÓN ANTIGÉNICA DEL SISTEMA Ss DE LAS 4 1ª CÉL. DEL PANEL

REACCIÓN INTENSA

CON CÉLULAS

HOMOCIGOTAS

(SS) homocigoto para el Ag S

(Ss) heterocigoto para los Ag Ss

(ss) homocigoto para el Ag s

(SS) homocigoto para el Ag S

REACCION

DISMINUIDA

O INCLUSO

NEGATIVA CON

CÉLULAS

HETEROCIGOTAS

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CONCLUSIONES DEL PANEL 2• En la identificación del ac de una gestante (caso 2)

sin titulo, cuyas cél I (+) II (-) y III (2+) han sido reactivas sólo medio liss coombs y negativas en medio neutro. El panel de 11 cél. debe ser montado en el mismo medio de incubación y temperatura.

• Al tratarse de un Ac tipo IgG puede traspasar la barrera placentaria, y provocar EHRN (ver anexo 2)

• Para la titulación, (sin titulo) se han utilizado cél. Heterocigotos. En la consiguiente monitorización del Ac durante todo el embarazo, es importante utilizar siempre cél. con la misma cigocidad, para evitar errores por el efecto del genotipo.

• La titulación en gestantes y R.N. para anti-D siempre cél. Homocigotos R2R2 resto de especificidades cél. Heterocigotos.

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TITULACIÓN DEL ANTI-s

CÉLULAS HETEROCIGOTAS Y HOMOCIGOTAS

• Para la titulación de Ac es importante utilizar células que contengan la misma cigocidad, debido a la diferencia cuantitativa, definida por la concentración del Ag, ya sea en estado homocigoto ó heterocigoto. Aquí se evidencia un título a ½ con células heterocigotas Ss; y por otro lado, con células homocigotas ss, a título de ¼. Dichos efectos son evidentes en los sistemas MNSs, Kidd y sistema Rh.

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CONCLUSIONES GENERALES• Se observa un patrón de variabilidad de

intensidad en las reacciones positivas, al producirse la unión del Ac a su Ag complementario, dependiente de varios factores serológicos muy a tener en cuenta:

• Caracterización del Ag, variantes en la expresiónantigénica determinada por la cigocidad, estado homocigoto o heterocigoto, efecto dosis (en sistema MNSs, Kidd y sistema Rh).

• Impacto del método de prueba según efectos de temperatura y medios de incubación.

• Según la estructura del Ac, ya sean IgG ó IgM.

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DR EDUARDO

NAVAS ARAUZ

PONENTE

Y AUTORES

JOSEFA

BORONAT

BELTRAN

Hospital Clínico Universitario Puerto Real (Cádiz)