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PrácticaPrácticaAglutinación en Tubos: DeterminaciónAglutinación en Tubos: Determinación

Grupo SanguíneoGrupo Sanguíneo

MSc. Adolfo Marcelo ÑiqueMSc. Adolfo Marcelo ÑiqueProfesor Inmunología EspecialProfesor Inmunología EspecialEmail: adolfo.marcelo.n@gmail.comEmail: adolfo.marcelo.n@gmail.com

Universidad Alas PeruanasUniversidad Alas PeruanasEscuela Tecnología MédicaEscuela Tecnología Médica AglutinaciónAglutinación

•• Se utiliza para identificar bacterias y tipificarSe utiliza para identificar bacterias y tipificareritrocitos, entre otros.eritrocitos, entre otros.

•• El Antígenos usado en las Aglutinaciones son deEl Antígenos usado en las Aglutinaciones son denaturalezanaturaleza INSOLUBLEINSOLUBLE oo PARTICULADOPARTICULADO(Ags fijados sobre células o partículas de látex o(Ags fijados sobre células o partículas de látex ocarbón)carbón)

•• Por su sensibilidad se han utilizado Ag solubles,Por su sensibilidad se han utilizado Ag solubles,los que recubren la superficie de partículas.los que recubren la superficie de partículas.

AglutinaciónAglutinación

EJEMPLOEJEMPLO:: AgsAgs PARTICULADOSPARTICULADOS•• LosLos GG..RR.. hanhan servidoservido dede vehículosvehículos dede AgAg protéicosprotéicos::

HAIHAI -- TanizaciónTanización..•• EritrocitosEritrocitos dede CarneroCarnero yy dede PavoPavo..•• ElEl MétodoMétodo másmás sencillosencillo eses lala aglutinaciónaglutinación enen láminalámina..

Tipos:Tipos: Aglutinación láminaAglutinación lámina

•• Partículas inertes:Partículas inertes:-- Látex de poliestireno yLátex de poliestireno yBentonita.Bentonita.-- CarbónCarbón

•• Látex se usa con un coLátex se usa con un co--polímero de glicidilpolímero de glicidilmetacrilato y estireno quemetacrilato y estireno queproporciona un mosaicoproporciona un mosaicode dominios hidrófobos ede dominios hidrófobos ehidrófilos.hidrófilos.

•Patrón de Aglu-tinación de los G.R.

•En la tipificacióndel Sistema ABOfactor Rh

Tipos:Tipos: Aglutinación en TuboAglutinación en Tubo Grupos SanguíneosGrupos Sanguíneos

Landsteiner (1930) CompatibilidadLandsteiner (1930) CompatibilidadSanguíneaSanguínea

Levine y Stetson ( 1940Levine y Stetson ( 1940--1970)1970)Factor Rh.Factor Rh.

Las dos clasificaciones más importantes para describir grupossanguíneos en humanos son ABO y el factor Rh.Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles puedenprovocar una reacción inmunológica que puede desembocar enhemólisis, anemia, fallo renal, shock y muerte.

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Grupos Sanguíneos: Sistema ABOGrupos Sanguíneos: Sistema ABO

La clasificación admitida en la actualidad, deLa clasificación admitida en la actualidad, deacuerdo a la recomendación delacuerdo a la recomendación del Comité deComité deHigiene de la Sociedad de las NacionesHigiene de la Sociedad de las Naciones es la dees la deLandsteiner (Sistema ABO) que establece laLandsteiner (Sistema ABO) que establece laexistencia de 4 tipos:existencia de 4 tipos:

Grupo OGrupo O: no tiene aglutinógenos pero si 2: no tiene aglutinógenos pero si 2aglutininas, alfa y beta.aglutininas, alfa y beta.Grupo AGrupo A: tiene aglutinógeno A y aglutininas: tiene aglutinógeno A y aglutininasbeta.beta.Grupo BGrupo B: tiene aglutinógeno B y aglutininas alfa.: tiene aglutinógeno B y aglutininas alfa.Grupo ABGrupo AB: tiene ambos aglutinógenos y ninguna: tiene ambos aglutinógenos y ningunaaglutinina.aglutinina.

Grupos Sanguíneos : Sistema ABOGrupos Sanguíneos : Sistema ABO

Características Sistema ABO:Características Sistema ABO:

Presencia de Antígenos en membrana (factorPresencia de Antígenos en membrana (factorOmnicelular)Omnicelular)

Característica permanente e inmutableCaracterística permanente e inmutable LocalizaciónLocalización FrecuenciaFrecuencia HerenciaHerencia

Grupos Sanguíneos : Sistema ABOGrupos Sanguíneos : Sistema ABO

HerenciaHerencia

-- Los grupos sanguíneos son heredados deLos grupos sanguíneos son heredados delos progenitores.los progenitores.-- Son controlados por un soloSon controlados por un solo gengen con trescon tresalelos: i, A, B.alelos: i, A, B.

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Grupos Sanguíneos : Sistema ABOGrupos Sanguíneos : Sistema ABO

Características Sistema ABO:Características Sistema ABO:

Alelos Tipo Sanguíneo•ii O•AA A•Ai•BB B•Bi•AB AB

Factor RhFactor Rh

Factor RhFactor Rh Mono Rhesus.Mono Rhesus. Clasificación según Aglutinación:Clasificación según Aglutinación:

85% Rh positivo85% Rh positivo15% Rh negativo15% Rh negativo

Rh negativo y transfusiones. (AntiRh)Rh negativo y transfusiones. (AntiRh) El factor Rh se transmite como un genEl factor Rh se transmite como un gen

dominante simple y de acuerdo a ladominante simple y de acuerdo a lacaracterística mendeliana.característica mendeliana.

Factor RhFactor Rh Sistema diferente al ABO, peroSistema diferente al ABO, pero

complementario.complementario. Producción de anticuerpos antiProducción de anticuerpos anti--D requiereD requiere

la exposición al antígeno.la exposición al antígeno. El antígeno D es muyEl antígeno D es muy inmunogénicoinmunogénico.. Por esta razón, se debe realizar la pruebaPor esta razón, se debe realizar la prueba

AntiAnti--D, si es negativo deben recibir Rh (D)D, si es negativo deben recibir Rh (D)negativo.negativo.

Los grupos sanguíneos en el hombreLos grupos sanguíneos en el hombre

Gruposanguíneo

Antígenos en la membranade los glóbulos rojos

Anticuerpos en el plasma

A

B

AB

0

Antígeno A

Antígeno B

No antígenos

Antígenos A y B

Anti-A

Anti-B

Anti-A y Anti-B

No anticuerpos

Genotipo Fenotipo ogrupo sanguíneo

AAA0

B0

BB

AB00

A

B

AB0

A, B dominan a OA, B dominan a O

¿Qué haremos en la práctica?¿Qué haremos en la práctica?

Conocer el principio inmunológico de lasConocer el principio inmunológico de lasaglutinaciones en tubo.aglutinaciones en tubo.

Determinar el grupo sanguíneo de muestras, aDeterminar el grupo sanguíneo de muestras, apartir de paquete globular y sueros.partir de paquete globular y sueros.

Fases a desarrollar:Fases a desarrollar:Fase CelularFase CelularFase SéricaFase Sérica

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ExperimentosExperimentos

Fase CelularFase Celular Se trabaja con GR al 5% en SS.Se trabaja con GR al 5% en SS.

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3Rotular A B RhGR 5% 1 gota 1 gota 1 gotaAnti A 2 gotas - -Anti B - 2 gotas -Anti D - - 2 gotas

ExperimentosExperimentos

Fase SéricaFase Sérica Se trabaja con el suero del paciente.Se trabaja con el suero del paciente.

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3Rotular anti- A anti- B OSuero 1 gota 1 gota 1 gotaGR A 2 gotas - -GR B - 2 gotas -GR O - - 2 gotas

Interpretación de ResultadosInterpretación de Resultados

CuestionarioCuestionario

1.1. ¿Qué otros sistemas de clasificación existen¿Qué otros sistemas de clasificación existenen la determinación de Grupo Sanguíneo?en la determinación de Grupo Sanguíneo?

2.2. ¿Qué es la incompatibilidad Rh?¿Qué es la incompatibilidad Rh?

3.3. ¿Cuál es la frecuencia de Grupos¿Cuál es la frecuencia de GruposSanguíneos en el Perú? (al menos datos deSanguíneos en el Perú? (al menos datos deLima).Lima).

FinFin