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UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA

UNIDAD ACADÉMICA DE INGENIERÍA QUÍMICA,

BIOFARMACIA, INDUSTRIAS Y PRODUCCIÓN

FACULTAD DE BIOFARMACIA

TEMA:

“ESTUDIO DEL SISTEMA ABO Y FACTOR Rh”

Monografía previa a la obtención

del Título de Químico Farmaceuta.

INVESTIGADORA: Tlgo. Mariela Fernanda Barrera Bravo.

DIRECTOR: Q.F. Xavier Santamaría Rubio.

CUENCA – ECUADOR

2012

III

AGRADECIMIENTO

Agradezco infinitamente a Dios y a la Virgen María por colmarme de salud y darme la

oportunidad de haber terminado una de mis metas propuestas.

Mi agradecimiento a la Universidad Católica de Cuenca en la persona de su Rector el Dr.

César Cordero Moscoso, a todo el Personal Docente y Administrativo de la Facultad de Biofarmacia.

IV

DEDICATORIA

Dedico con profundo cariño y de manera especial esta monografía a mis padres como

principales forjadores de mi educación y porvenir, a mis hermanos, sobrinos y amigos que estuvieron

de una u otra manera apoyándome.

A mi esposo Well, corrector, crítico y paciente compañero de largas horas de soledad y

trabajo. A mi hijo Antonio Alonso, por ser mi estímulo para mi vida.

De igual manera dedico este trabajo a mi eterno amigo Edwin Geovanny Patiño Carrión por

todos los momentos compartidos y vividos.

V

INTRODUCCIÓN

Dentro de las amplias ciencias de la Biología y la Química, existen entre una de sus ramificaciones

aquella que es indispensable para realizar análisis de la sangre humana: Análisis Clínico o Prueba de

Laboratorio.

La indagación complementaria solicitada al laboratorio clínico por un médico para confirmar o

descartar un diagnóstico se la llama comúnmente “análisis clínico o prueba de laboratorio”. Forma

parte del proceso de atención a la salud que se apoya en el estudio de distintas muestras biológicas

mediante su análisis en laboratorio y que brinda un resultado tanto cuantitativo o cualitativo.

El resultado de un análisis clínico se interpreta mediante valores de referencia establecidos para cada

población y requiere de una interpretación médica. No deben confundirse ambos conceptos ya que

hablamos de dos cosas diferentes, por un lado esta la prueba diagnóstica realizada y su resultado, y

por el otro, la interpretación que el médico en cuestión dé a esos resultados. Algunos de los aspectos

que se emplean para tal explicación son: la especificidad, la sensibilidad, el valor predictivo, la

exactitud, precisión y validez, así como la preparación y recogida de la muestra o el rango de

referencia.

Actualmente en los laboratorios, dominan los analizadores clínicos automatizados, computarizados y

especializados en diferentes campos analíticos como: hematología, hemograma, bioquímica clínica,

urianálisis, microbiología y genética entre otras.

En el Estudio del sistema ABO, se describen los diferentes grupos sanguíneos presentes en la

población humana. Existen dos aglutinógenos A y B, que están ligados a los hematíes, y dos

aglutininas a y b que se presentan en el suero y siendo capaces de aglutinar a los aglutinógenos

respectivos.

VI

Se puede definir los grupos formados de la siguiente manera: El grupo O, no contiene ningún

aglutinógeno en sus hematíes y posee en cambio dos aglutininas sérica a y b. Sus hematíes no

pueden ser aglutinados por otros sueros, pues se trata del grupo de donadores universales. El grupo

A posee el aglutinógeno eritrocítico A y la aglutinina b. El grupo B posee la aglutinina a y el

aglutinógeno B.

El grupo AB, posee ambos aglutinógenos en sus eritrocitos, pero el suero no posee aglutininas; el

suero de estas personas, por consiguiente no aglutinan ninguna sangre humana, por lo cual pueden

recibirla indistintamente de cualquier persona, considerados como receptores universales.

Posteriormente se descubrieron subgrupos de A dependientes de la existencia de dos tipos de

aglutinógeno, dando origen a los subgrupos A1, A2, A1B y A2B. El suero de la mayoría de los individuos

del grupo B y del O, contienen variedades de aglutinina a, una de estas denominada a1, reaccionan

sólo con la sangre A1 y A1B, mientras que la otra a (a común) reacciona con todos los subgrupos A1,

A2, A1B y A2B.

La transfusión de sangre es posible cuando los glóbulos rojos del donador no son aglutinados por el

suero del receptor, es decir, que los glóbulos rojos no son portadores de aglutinógenos capaces de

ser atacados por las aglutininas homólogas existentes en el suero del receptor.

El Estudio del Factor Rh se realizo en 1939, por Levine y Stetson al hacer una transfusión con sangre

del grupo O del marido, porque en su segundo embarazó dio a luz un feto muerto de 8 meses con

pérdida de abundante sangre, a pesar de que ellos tenían el mismo grupo, se presentó una reacción

violenta, que los autores interpretaron que la madre había sido inmunizada por el hijo el cual había

recibido un antígeno distinto (Rh) por herencia paterna, y al hacerse la transfusión el anticuerpo

materno reaccionó con el antígeno del marido.

En 1940, Landsteiner y Wiener, inyectando a cobayos y conejos con sangre de macacusrhesus,

observaron que se producía un anticuerpo en el suero de aquellos animales, que no solamente

aglutinaban los hematíes del mono, sino además al 85% de la población blanca de Nueva York. Al

grupo constituido por el 85% de las personas cuyos hematíes aglutinaban con el suero antimacacus

les llamó Rh positivo, y al resto, Rh negativo.

VII

No tardó en comprobarse que el suero de ciertos individuos que presentaban incompatibilidad

transfusional, se comportaba igual que el suero antimacaco. Del factor Rh se han desdoblado una

serie de subgrupos, para los cuales pueden existir sensibilizaciones.

No obstante el grupo Rh clásico, o sea del gene D, es el que provoca la mayoría de sensibilizaciones y

sus consecuencias, aproximadamente el 96% de todo la inmunohematología grupal.

Con los valiosos conocimientos recibidos y asimilados en los cuatro años de estudios y prácticas pre-

profesionales realizadas en las aulas y Laboratorio Clínico de la Unidad Académica de Ingeniería

Química, Industrial, de Alimentos, Biomolecular, Biocombustible y Biofarmacia de la Universidad

Católica de Cuenca, obtuve la capacidad de realizar el Estudio del sistema ABO y el Estudio del

sistema RH, relacionado íntegramente con la sangre humana.

Gracias a lo indicado con anterioridad he realizado a continuación un estudio minucioso y al mismo

tiempo claro y conciso del sistema ABO y del factor Rh, también he buscado analizar y explicar las

técnicas de cómo se deben realizar esta actividad profesional.

El capitulo I se encarga de introducirnos al estudio de la determinación de los diferentes tipos

sanguíneos he bautizado a este capitulo como “Sistema ABO”.

En el capitulo II lo dedico a explicar los antígenos y anticuerpos que forman el sistema Rh, así como

los métodos para la determinación del antígenos D de dicho Sistema, en muestras de sangre de seres

humanos.

Capitulo III, este lo he dedicado a detallar pormenorizadamente la recolección, preparación,

almacenamiento y transporte de componentes sanguíneos, para evitar una posible contaminación de

las sangres.

El Capitulo IV lo he reservado para puntualizar los diferentes métodos de las pruebas pretranfusiones

para la posterior transfusión sanguínea; así como los efectos adversos que puede traer consigo dicha

transfusión.

VIII

OBJETIVO GENERAL

Realizar el estudio del Sistema ABO y del Factor Rh.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1. Describir y determinar el sistema ABO.

2. Indicar los métodos de determinación del sistema Rh.

3. Identificar los procesamientos de los componentes sanguíneos.

4. Valorar los efectos adversos a la transfusión sanguínea.


MARIELA BARRERA BRAVO 2

CAPÍTULO I

SISTEMA ABO

1.1. GENERALIDADES

Los primeros pasos en el estudio de los grupos sanguíneos fueron dados por Landois quien en

1875 señalaba que si los glóbulos rojos de una especie eran mezclados con el suero sanguíneo

proveniente de otra especie se producía un fenómeno de aglutinación o de hemólisis.

El sistema ABO fue descubierto en 1900 por Karl Landsteiner quien primero señalo la aglutinación

de los glóbulos rojos humanos por el suero proveniente de otras personas, lo que permite explicar

las causas de la incompatibilidad y prevenir sus fatales consecuencias.

En 1901, en el Instituto de Patología de Viena, toma 22 muestras de sangre de individuos y analiza

el resultado de sus combinaciones. A partir de la presencia o ausencia de antígenos, concluye que

hay tres tipos de glóbulos rojos, el A, el B y el O. El grupo A posee el antígeno A y el anticuerpo

anti-B. El grupo B, el antígeno B y el anticuerpo anti-A. El grupo O carece de ambos antígenos pero

tiene anticuerpos anti-A y anti-B.

En 1903, dos colaboradores de Landsteiner, Von Decastello y Adriano Sturly, utilizan los mismos

parámetros de clasificación y agregan un cuarto grupo, el grupo AB, que cuenta con los dos

antígenos A y B en su membrana que carecían de anticuerpos anti-A y anti-B en su suero.

“Posteriormente se supo que las células sanguíneas O poseen un antígeno denominado H el cual

resulta ser el precursor de los antígenos A y B”. (1)

Desde entonces sabemos con claridad cuál es la relación adecuada entre donantes y receptores

de sangre. En primer lugar, las personas de un mismo grupo son compatibles. En segundo

término, el tipo dador no debe incluir antígenos que rechazarían los anticuerpos del receptor. Por

lo tanto, el grupo O es considerado dador universal y el grupo AB, receptor universal.

(1) DUEÑAS, Víctor Hugo. El Banco de Sangre. Teoría, Principios y Procedimiento. 2ª edición, Universidad del

Valle Programa Editorial, Impreso en Cali, Colombia. Enero de 2003.



El descubrimiento del sistema ABO fue fundamental en el desarrollo de la transfusión sanguínea,

por cuyo impacto en medicina clínica le fue otorgado a Landsteiner el Premio Nobel, treinta años

más tarde.

Grupo Sanguíneo Antígenos Anticuerpos Genotipo

O

A

B

AB

H

A

B

A,B

anti-A y anti-B

anti-B

anti-A

Ninguno

00

AA, AO

BB, BO

AB

1.2. ANTÍGENOS DEL SISTEMA ABO

El antígeno H es la sustancia (SPH) sobre la cual se acoplan mediante transferasas residuos de

azúcares terminales, para así conformar los antígenos del sistema ABO. La sustancia H está

compuesta por tres tipos de azúcares: galactosa, N-acetilglucosamina y fucosa. Esta sustancia se

encuentra en todos los eritrocitos humanos, excepto en aquellos individuos de fenotipo Oh

(Fenotipo Bombay).

Los individuos de tipo sanguíneo O, no pueden añadir ningún azúcar, solo tienen la “sustancia H”,

por lo que se encuentra en mayor cantidad que en los grupos A, B y AB. La deficiencia de H se

halla con mayor frecuencia en los eritrocitos del grupo sanguíneo AB,que producen pocas

cantidades de SPH y en este grupo la sustancia H es utilizada tanto para la formación del antígeno

A como el B.

Para el momento del nacimiento los antígenos del sistema ABO no están completamente

desarrollados y por consiguiente, la reacción de las células fetales con los sueros reactivos puede

ser de intensidad menor a la observada en las células adultas. Ello se debe a que la cantidad de

antígeno A o B en las células rojas del recién nacido, es sustancialmente menor que el encontrado

en las células adultas, aunque los aglutinógenos pueden detectarse en hematíes de embriones de

5 ó 6 semanas.



En teoría, esta carencia podría ser debida a:

� Una baja concentración de las transferasas específicas A y B en los precursoreseritroides

del recién nacido.

� La deficiencia de la sustancia precursora de los glóbulos rojos para su conversión en

antígenos A y B.

Tilley y colaboradores, encontraron en sueros del recién nacido niveles de transferasas ABH

iguales o superiores a los hallados en adultos; por consiguiente, si las transferasas son normales,

es otra la causa del escaso desarrollo de los antígenos A y B.

Romano y colaboradores, sostienen que tal deficiencia es debida, más que a la falta de

transferasas específicas, a la carencia del substrato (sustancia H) para su conversión en los

antígenos correspondientes. Lo demostraron incubando glóbulos rojos O de adultos y de recién

nacidos con uridin-difosfato-galactosa (UDP-galactosa) y suero de grupo B, con lo cual, ambas

células se convirtieron en grupo B.

La determinación del número de puntos o sitios antigénicos en la membrana demostró, que

mientras las células O de adulto habían generado más de 200.000 antígenos B por glóbulo rojo,

las células O del recién nacido sólo habían formado entre 40.000 a 70.000.El desarrollo completo

de los antígenos del sistema ocurre entre los 2 y 4 años de edad y a partir de ese momento, su

expresión o fuerza antigénica permanece constante por el resto de la vida.

Los antígenos del sistema ABO están presentes en la membrana del glóbulo rojo en forma de

glicolípidos, mientras que dependiendo del estado secretor del individuo (Genes SeSe o Sese) se

encuentran en las secreciones acuosas como la saliva, sudor, lágrimas, leche, jugo gástrico, etc. en

forma de glicoproteínas.Las pruebas para secreciones pueden ayudar a establecer el verdadero

tipo ABO en individuos con antígeno eritrocitarios poco desarrollados.

Genes Secretores: gen SeSe, gen Sese.

Se: Carácter dominante.

se: Carácter recesivo.

No secretores: gen se.



Los individuos homocigotos para sese, no secretan antígenos A, B y H, aunque tengan los genes A,

B y H.

1.2.1. SUBGRUPOS DEL ANTÍGENO A

Los grupos más comunes de A son el A1 y el A2, los cuales comprenden el 99% de todos los

subgrupos de A.

Puesto que las células A1 y A2 reaccionan fuertemente con los antisueros anti-A comerciales su

diferencia se hace poniendo a reaccionar las células A con suero humano absorbido anti-A2 o con

la lectina anti-A1 obtenida de las semillas de la planta Dolichosbiflorus, estos reactivos aglutinan

las células A1 pero no las A2.

Un 80% de las personas que poseen el antígeno A reaccionan con estos reactivos y son

clasificadas como A1 o A1B, mientras que el 20% restante no lo hace y son clasificadas como A2 o

A2B.

No es necesario en la rutina determinar si una persona es A1 o A2, a menos que en su suero exista

un anticuerpo con especificidad anti-A1que esté causando una discrepancia en la interpretación

del grupo inverso, o que se presente incompatibilidad en la prueba cruzada.

Hasta un 8% de las personas A y 35% de las A2B pueden desarrollar anti-A1. Generalmente este

anticuerpo es natural, pues con frecuencia se encuentra en personas sin antecedentes

transfusionales o de embarazos y se considera que no tiene importancia clínica a menos que

reacciones a 37°C.

La categorización de los subgrupos de A se basa en los siguientes criterios:

� Grado de aglutinación de los hematíes con los antisueros anti-A, anti-AB y la lectina anti-A1.

� Aglutinación con la lectina anti-H.

� Presencia o ausencia de anti-A1 en el suero.

� Secreción de sustancia A y H en la saliva de las personas secretoras.



1.2.2. SUBGRUPOS DEL ANTÍGENO B

Los subgrupos de B son aun más raros que los de A. No se conoce un grupo B análogo al A2, pero

en cambio se han descrito varios tipos de B que no reaccionan o lo hacen muy débilmente con el

antisuero anti-B.

Salmon ha sugerido que la terminología empleada para los subgrupos de B debería ser paralela a

la de los subgrupos de A y propuso que los términos B3, Bx y Bel deberían ser empleados en la

siguiente forma:

B3 muestra un factor de aglutinación de campo mixto, conteniendo sustancia B la saliva de los

secretores; Bx muestra un patrón de aglutinación muy débil y en la saliva se encuentra la sustancia

B, que inhibe la actividad de anti-B, el subgrupo Bel, no es aglutinado por anti-B, el cual puede

subsecuentemente ser eluido. La saliva contiene sustancia H pero no contiene A.

“En general, los estudios para la diferenciación de los subgrupos de B son similares a los

empleados con los subgrupos de A”.(2)

1.3. ANTICUERPOS DEL SISTEMA ABO

Los anticuerpos del sistema ABO se reconocen como anticuerpos naturales, aunque estos se

producen rápidamente después del nacimiento por exposición, tras la ingestión o inhalación de

sustancias antigénicas presentes en los polisacáridos bacterianos, en los alimentos y en el polen.

Comúnmente los individuos poseen los anticuerpos anti-A o anti-B que están ausentes de sus

eritrocitos. Esto permite determinar el grupo ABO del individuo por la detección de estos en el

suero.

En los recién nacidos estos anticuerpos están ausentes y se ha observado que su síntesis comienza

entre los 3 y 6 meses de edad, se incrementan en su concentración entre los 5 y los 10 años de

edad y declinan en edades muy avanzadas.

(2) Dr. LINARES, Jesús. Inmunohematología y Transfusión Principios y Procedimientos. 1ª edición, Impreso por

cromotip C.A., Caracas, Venezuela. 1986.



Los anticuerpos de este sistema incluyen los anti-A, anti-B y anti-AB. Este último es producido por

las personas de grupo O y reacciona con estructuras comunes a los antígenos A y B, por lo que no

pueden separarse las actividades anti-A de las anti-B.

Los anticuerpos naturales anti-A y anti-B son predominantemente de la clase IgM, aunque pueden

detectarse pequeñas concentraciones de IgG. Los anticuerpos anti-AB son generalmente de la

clase IgG; por este motivo los recién nacidos de madres de grupo O tienen más riesgos de padecer

la enfermedad hemolítica por incompatibilidad ABO que aquellos de madres de grupos A o B.

“El hecho que los recién nacidos no tengan estos anticuerpos sugiere que debe existir un estímulo

persistente en el medio ambiente que induce su producción. En efecto en bacterias ubicuas en el

medio ambiente se han encontrado sustancias químicamente similares a los antígenos A, B y H,

constituyéndose en el estímulo que inicia la producción de los anticuerpos del sistema que

generalmente son de la clase de inmunoglobulina M”. (3)

En las personas de grupo sanguíneo O, aparte de la anti-A y el anti-B se encuentra otro anticuerpo

denominado anti-AB que se caracteriza porque su actividad anti-A y anti-B no puede ser separada

mediante pruebas de absorción. A este anticuerpo Wiener lo ha llamado anti-C y reacciona con

una estructura común a los determinantes antigénicos de A y B. La importancia de este

anticuerpo radica en su utilidad para evidenciar subgrupos débiles de A y B.

El anticuerpo anti-H se lo ha encontrado en personas A2 (1-2%) y A2B (25%), es generalmente un

anticuerpo frío que carece de importancia clínica. Por su parte el anti-H que se produce en los

individuos Bombay sí tiene importancia clínica, siendo un anticuerpo que reacciona a 37°C

causando destrucción de los eritrocitos in-vivo.

Los anticuerpos mencionados se encuentran también presentes en algunos líquidos orgánicos

como la leche, líquido ascítico, saliva, lágrimas, y menos frecuentemente en secreciones

cervicales.





1.4. REACCIÓN ANTÍGENO ANTICUERPO

La reacción entre el antígeno y su correspondiente anticuerpo puede producirse in vivo o in vitro.

“La reacción in vivo generalmente coincide con la invasión del organismo por antígenos extraños

contra los que reacciona por intermedio de los anticuerpos, como sucede en la reacción

hemolítica transfusional; o mediante la transferencia pasiva de anticuerpos como es el caso de la

enfermedad hemolítica del recién nacido. En estados de autoinmunidad, la reacción in vivo puede

causar enfermedades tales como la anemia hemolítica autoinmune, la púrpura trombocitopénica

autoinmune, la neutropenia inmune, etc”.(4)

La reacción in vitro tiene particular importancia porque ella permite que tanto los antígenos como

los anticuerpos puedan ser determinados y estudiados.

La mayoría de las reacciones antígeno anticuerpo ocurren en dos fases o etapas: en la primera, el

antígeno se combina con el anticuerpo y en la segunda, posiblemente a través de cambios

electroquímicos y de atracción entre fuerzas moleculares con cargas eléctricas positivas y

negativas, se producen complejos antígeno anticuerpo. Las fases generalmente se sobreponen en

tiempo, pero en la medida en que se forman los complejos antígeno anticuerpo, la reacción se

hace visible. En la formación de estos complejos intervienen ciertas condiciones de reacción

inherentes al tipo de antígeno y del anticuerpo envueltos, pero en particular, es importante el

tamaño del antígeno.

Los anticuerpos son inmunoglobulinas y por lo tanto, son solubles; su tamaño molecular, por

consiguiente, es de menor importancia en este sentido. Los antígenos pueden ser relativamente

pequeños o grandes o aun más importante, ser parte de una estructura colosal como los

eritrocitos, leucocitos, células tisulares o bacterias.

Por esta razón, el tamaño del antígeno es de importancia capital en la determinación de la

naturaleza física del complejo antígeno anticuerpo.





Una vez combinados el antígeno con su correspondiente anticuerpo, deben permanecer unidos.

Se ha señalado que esta unión no depende de la formación de enlaces covalentes entre ellos.

Pero en cambio, la naturaleza complementaria de las correspondientes estructuras en el antígeno

y en el anticuerpo, facilitan que el determinante antigénico entre en estrecho contacto con el sitio

de combinación del anticuerpo. Esta combinación es mantenida mediante uniones

intermoleculares débiles y se piensa que sean grupos iónicos con cargas eléctricas diferentes,

átomos de hidrógeno, uniones hidrofóbicas, etc., es decir, que probablemente varios factores

intervienen para mantener unido el complejo antígeno anticuerpo formado.

1.4.1. TIPOS DE REACCIONES

Las siguientes reacciones in vitro han sido aplicadas para demostrar la reacción antígeno

anticuerpo en el campo de la transfusión sanguínea:

� Aglutinación.

� Hemólisis.

� Inhibición.

� Absorción.

� Precipitación.

� Fijación de complemento.

� Radioinmunoensayo.

� Fluorescencia.

� Enzima inmunoensayo.

La aglutinación y la hemólisis son las técnicas más frecuentes usadas en la serología de los grupos

sanguíneos.

La aglutinación se produce por la actuación de los anticuerpos (Acs) del suero o aglutininas sobre

los antígenos (Ags) de los glóbulos rojos o aglutinógenos.Cuando un antígeno particular reacciona

con su anticuerpo específico se observa la formación de grumos o agregados de estas partículas,

esto se conoce como aglutinación. En estas reacciones el determinante antigénico está sobre la

superficie de una partícula o de una célula.



La hemólisis es el fenómeno de la desintegración de los eritrocitos (glóbulos rojos o hematíes),

producida por la liberación de la hemoglobina contenida en el eritrocito a consecuencia de una

alteración de la pared del glóbulo o cuando el glóbulo está distendido por la acción de una

solución hipotónica (hemólisis osmótica), éste pasa por un estado de turgencia (se hincha por el

exceso de líquido) y luego esta célula estalla debido a la presión. Esto genera una menor cantidad

de células que transporten oxígeno al cuerpo entre otros elementos como los anticuerpos. En

determinadas situaciones patológicas hay un aumento de la destrucción de los eritrocitos intra o

extravascular, como consecuencia de unión antígeno-anticuerpo (reacción transfusional,

eritroblastosis fetal).

La inhibición y la absorción/elución, aun cuando no son técnicas de uso frecuente en la rutina del

banco de sangre, si son regularmente usadas en los laboratorios de referencia para la

identificación de anticuerpos y en los laboratorios forenses para la caracterización de material

sanguíneo y otros fluidos orgánicos.

La absorción es la separación de un anticuerpo en un suero, mediante su fijación a un antígeno

presente en la membrana de eritrocitos o de otras partículas. La elución es la técnica usada para

disociar o separar el anticuerpo unido al antígeno eritrocitario.

La precipitación, fijación de complemento y radioinmunoensayo son usados ampliamente en los

bancos de sangre para la detección de antígenos de la hepatitis viral y en el estudio de otras

enfermedades.

La fluorescencia se ha empleado para demostrar la presencia de antígenos de grupos sanguíneos

en tejidos y de inmunoglobulinas en células y otros componentes tisulares. Recientemente, las

técnicas de enzima inmunoensayo se han aplicado en el campo de la inmunohematología.

1.5. DETERMINACIÓN DEL SISTEMA ABO

Comprende dos partes:

a) Una prueba celular para determinar los antígenos.

b) Una pruebas sérica, para la determinación de los anticuerpos.



Las dos pruebas se practican simultáneamente porque ellas se complementan y en esta forma

una verifica los resultados de la otra. Deben realizarse a temperatura ambiente (20 a 2°C) o

menos; la incubación a 37°C debilita la reacción. En aquellos casos en que haya discrepancias

entre ambas pruebas, la investigación adicional revelará una condición que podrá ser de

importancia clínica o simplemente interesante desde el punto de vista serológico.

Los reactivos comerciales empleados en la clasificación de los antígenos, son antisueros

usualmente provenientes de individuos que han sido estimulados con sustancias de grupo

sanguíneo A y B para producir anticuerpos de altos títulos. Debido a ello, las células pueden ser

aglutinadas directamente, sin centrifugación. Los antígenos celulares son genéticamente

determinados, por lo tanto, bajo condiciones normales, los resultados son definitivos.

La clasificación del suero con hematíes A1 y B conocidos, se denomina prueba inversa o sérica. No

se debe practicar en lámina, porque generalmente la concentración de los anticuerpos no es lo

suficientemente alta para causar la aglutinación de los glóbulos rojos sin centrifugar. Los

resultados de la prueba sérica pueden variar ocasionalmente, por modificaciones ambientales o

enfermedades.

1.5.1. DETERMINACIÓN DE LOS ANTIGENOS ABO EN LA SUPERFICIE DE LOS HEMATÍES O

GRUPO HEMÁTICO

La determinación de los antígenos ABO se basa en la aglutinación directa de los hematíes con

antisueros específicos anti-A, anti-B y anti-AB.

1.5.1.1. MÉTODO POR MEDIO DE ANTISUEROS

1.5.1.1.1. PRINCIPIO DEL MÉTODO

Los eritrocitos se ensayan con tres antisueros:

� Suero anti A.

� Suero anti B.

� Suero anti AB.



Antes de usar los antisueros ver las instrucciones del fabricante. Después de abrir el frasco

guardar en el frigorífico a +4°C.

Conservar los frascos cerrados herméticamente y procurar tenerlos el menor tiempo posible a la

temperatura ambiente. Los sueros contaminados son turbios y blanquecinos. Examinar una gota

en el microscopio, usando el objetivo x40. Si se observa bacterias desechar el suero.

El estudio se puede efectuar:

� En portaobjetos o lámina.

� En Tubo de ensayo (particularmente en los casos dudosos).

1.5.1.1.2. MÉTODO DEL PORTAOBJETOS

1.5.1.1.2.1. Materiales, Reactivos y Muestra

� Tubos de 75 x 12mm.

� Pipetas de transferencia.

� Vasos para análisis.

� Una centrífuga.

� Un lápiz graso.

� Palillos o aplicadores desechables.

� Portaobjetos.

� Solución salina fisiológica 0.9%: Se coloca 8.5g de NaCl en un balón de aforo de 1000ml y

se mezcla con un poco de agua destilada. Ahora enrasar con agua destilada. Para mayor

precisión en el enrase, una vez cerca de la línea, se termina echando gota a gota el agua

destilada hasta la línea de enrase. Mezclar y etiquetar la disolución.

� Antisueros: anti A, anti B y anti AB (consérvense según las instrucciones del fabricante. Si

hay turbidez en un antisuero es probable que se encuentre contaminado por bacterias; no

se deberá usar. Los frascos que se hayan abierto se deberán conservar en el frigorífico a

4°C).

MARIELA BARRERA BRAVO

� Sangre venosa recogida

velocidad. Aspirar el plas

para clasificar grupos sang

� Sangre venosa coagulada

rápida colocar un aplicad

37°C). Centrifugar durant

Pasteur. Conservar el sue

glóbulos rojos conocidos.

1.5.1.1.2.2. Ejecución del

A) Lavado y preparación de s

� Centrifugar la mu

el suero o plasma

� Con una pipeta de

� Completar con so

� Centrifugar duran

� Extraer la solución

� Agitar el tubo par

� Repetir los paso

sobrenadante lim

� Una vez realizado

en el que se teng

Ejemplo:

B) Enumerar 3 portaobjetos:

UNIVERSIDAD CATÓLICA

gida con anticoagulante:Centrifugar durante 5 min

plasma con una pipeta de Pasteur. Este plasma se de

sanguíneos por medio de glóbulos rojos conocidos.

ada:Dejar coagular la sangre de 5-10ml (para lograr un

icador en el tubo que contiene la sangre, durante 15

rante 5 minutos a alta velocidad. Aspirar el suero co

suero para hacer clasificaciones de grupos sanguíneos

os.

del Ensayo

de suspensiones de glóbulos rojos al 10%:

muestra para separar el suero o plasma de los glóbulo

sma a otro tubo limpio rotulado.

ta de Pasteur, colocar 0.2-0.5ml de glóbulos rojos en cad

n solución salina hasta 1cm del borde.

urante 1-2 minutos para sedimentar las células.

ción salina.

para resuspender los glóbulos rojos.

pasos 3-6 tantas veces como sea necesario hasta

limpio (color sandia), sin signos de hemólisis.

zado el lavado, se realiza una suspensión de hematíes,

enga que hacer en otra cantidad se realiza una regla d

tos: N°1, N°2 y N°3.

DE CUENCA

13

minutos a alta

e debe conservar

r una coagulación

15-20 minutos a

o con una pipeta

eos por medio de

bulos rojos. Pasar

n cada tubo.

asta obtener un

íes, en dado caso

la de tres simple.



C) Depositar:

Portaobjetos N°1 Portaobjetos N°2 Portaobjetos N°3

Suero anti 1 gota suero anti A 1 gota suero anti B 1 gota suero anti AB

Suspensión de

Glóbulos Rojos 10%

1 gota

1 gota

1 gota

D) Mezclar la preparación de cada portaobjetos con un aplicador, utilizar un aplicador nuevo

en cada portaobjetos. No pasar residuos de la mezcla de un portaobjetos al siguiente.

E) Hacer oscilar el portaobjetos hacia adelante y hacia atrás para terminar de hacer la

mezcla. Se debe examinar antes de que transcurran 2 minutos, vigilando que no ocurra

una evaporación que causaría una aglutinación falsa.

1.5.1.1.2.3. Interpretación de los Resultados

� Aglutinación Positiva.- Se forman pequeños conglomerados de glóbulos rojos, que flotan

en un líquido claro.

� Reacción Negativa.- Los glóbulos rojos no se aglutinan.

1.5.1.1.3. MÉTODO DEL TUBO DE ENSAYO


� Tubos de ensayo de 75 x12mm.




� Una gradilla para tubos.

� Un espejo cóncavo para microscopio.

� Solución salina fisiológica 0.9%.

� Antisueros: anti A, anti B y anti AB.

� Sangre fresca del paciente (ver pág. 12).



1.5.1.1.3.2. Ejecución del Ensayo

A. Lavado y preparación de suspensión de glóbulos rojos al 2%. (ver pág. 12).

B. Marcar 3 tubos de ensayo con el número correspondiente.

C. Depositar:

Tubo No.1

Tubo No. 2 Tubo No. 3

Suero anti 1 gota suero anti A 1 gota suero anti B 1 gota suero anti AB

Suspensión de

Glóbulos Rojos 2%

1 gota

1 gota

1 gota

D. Incubar:

� Sin centrifugar, dejar reposar los tubos durante 1 hora a temperatura ambiente.

� Con el empleo de la centrífuga (método rápido), dejar reposar los tubos 15 minutos a

temperatura ambiente, a continuación centrifugar durante 1 minuto a baja velocidad.

E. Sacudir ligeramente el fondo del tubo de ensayo examinar el sedimento de glóbulos rojos.

Se puede usar el espejo cóncavo.


� Reacción Positiva.- Los glóbulos rojos forman uno o más conglomerados y se observa un

líquido sobrenadante claro.

� Reacción Negativa.- Los glóbulos rojos vuelven a formar una suspensión fácilmente, sin

aglutinación visible.

1.5.1.2. MÉTODO POR MEDIO DE ERITROCITOS ESTANDARIZADOS


El suero o plasma cuyo grupo se pretende identificar se ensaya con tres suspensiones de

eritrocitos conocidos:



� Eritrocitos del grupo A1.

� Eritrocitos del grupo B.

� Eritrocitos del grupo O.

Este ensayo se puede llevar a cabo:

� En portaobjetos o lámina.

� En Tubo de ensayo (particularmente en los casos dudosos).

1.5.1.2.2. MÉTODO DEL PORTAOBJETOS





� Tubos de ensayo de 75 x 12mm.


� Muestras frescas de sangre entera: A1, B y O.


� Sangre fresca del paciente (ver pág. 12).


a) Lavado de loseritrocitos de referencia en tres tubos de ensayo.

� En cada tubo mezclar:

Tubo N°1 Tubo N°2 Tubo N°3

Sangre entera

(con anticoagulante)

1ml sangre A1 1ml sangre B 1ml sangre O

Solución salina

fisiológica 0.9%

4ml 4ml 4ml

O bien,



Tubo N°1 Tubo N°2 Tubo N°3

Eritrocitos

sedimentados

0.5ml sangre A1 0.5ml sangre B 0.5ml sangre O

Solución salina

fisiológica 0.9%

4.5ml 4.5ml 4.5ml

� Centrifugar durante 5 minutos a alta velocidad.

� Desechar el líquido sobrenadante.

� Sustituir con el volumen equivalente de solución salina fisiológica 0.9%.

� Mezclar, centrifugar y desechar de nuevo el líquido sobrenadante.

b) Preservación para los eritrocitos lavados, hacer una suspensión del sedimento de

eritrocitos en una solución conservadora que puede ser, solución ACD, o solución de

cloruro sódico, siempre en las mismas proporciones:

� 4.5ml de la solución.

� 0.5ml de glóbulos rojos lavados (sedimento).

De esta manera se producirá una suspensión de glóbulos rojos de referencia al 10%, que

se puede conservar en el frigorífico a 4°C, en frascos goteros provistos de la etiqueta

correspondiente (indique en ella la fecha en que se ha hecho la preparación). Usando este

método de preservación, la suspensión puede durar 3 días en la solución de cloruro

sódico y 1 semana en ACD.

c) Preparar tres portaobjetos marcados con las identificaciones A1, B y O. Colocar:

Portaobjetos A1 Portaobjetos B Portaobjetos O

1 gota de suspensión al

10% de eritrocitos A1


10% de eritrocitos B


10% de eritrocitos O

2 gotas del suero o

plasma

2 gotas del suero o

plasma

2 gotas del suero o

plasma

d) Mezclar la preparación de cada portaobjetos utilizando un aplicador. No se haga pasar

cantidad alguna de la mezcla hecha en un portaobjetos a la de otro portaobjetos.

e) Hacer oscilar el portaobjetos hacia adelante y hacia atrás para terminar la preparación de

la mezcla.

f) Observar el tamaño de la aglutinación que varía de una persona a otra (dependiendo de la

concentración de anticuerpos anti-A o anti-B que haya en el suero).




Eritrocitos A1 Eritrocitos B Eritrocitos O Grupo del

Paciente

- + - Grupo A

+ - - Grupo B

- - - Grupo AB

+ + - Grupo O

Nota: Comparar estos resultados con los que se obtienen en el ensayo con antisueros. Deberán

ser iguales con ambas técnicas. Si no es así repetir los ensayos.






� Tubos de ensayo de 75 x 12mm.



� Eritrocitos de referencia A1, B y O.

� Sangre fresca del paciente (ver pág. 12)


a. Lavar y preparar suspensiones al 2% de eritrocitos estandarizados A1, B y O:

� A partir de las suspensiones al 10% (ver pág. 16).

� Mezclar:

Tubo A1 Tubo B Tubo O

Solución salina fisiológica 0,9% 2ml 2ml 2ml

Suspensiónde eritrocitos al 10% 10 gotas 10 gotas 10 gotas

Nota: Las suspensiones al 2% se deben usar durante el mismo día que se han preparado.



b. Marcar tres tubos de ensayo con las identificaciones A1, B y O.

c. Colocar:

Tubo A1 Tubo B Tubo O

2 gotas del suero o

plasma a ensayar

2 gotas del suero o

plasma a ensayar

2 gotas del suero o plasma

a ensayar

1 gota de la suspensión

al 2% de eritrocitos A1

1 gota de la suspensión al

2% de eritrocitos B

1 gota de la suspensión al

2% de eritrocitos O

d. Incubar:

� Sin centrifugación: Dejar los tubos en reposo una hora a la temperatura ambiente.

� Uso de la centrífuga (método rápido): Dejar reposar los tubos 15 minutos a la

temperatura ambiente. A continuación centrifugar durante 2 minutos a baja velocidad.

e. Sacudir el tubo con suavidad, observar si ha ocurrido la aglutinación.


� Reacción Positiva: Los eritrocitos forman pequeños conglomerados.

� Aglutinación Negativa: Los eritrocitos se suspenden nuevamente con facilidad, sin que se

forme conglomeración visible.

1.5.1.2.4. COMBINACIÓN DE RESULTADOS

ANTISUEROS ERITROCITOS DE REFERENCIA

Anti-A Anti-B Anti-AB A1 B O

Grupo A + - + - + -

Grupo B - + + + - -

Grupo AB + + + - - -

Grupo O - - - + + -

1.5.2. DETERMINACIÓN DE LOS ANTICUERPOS DEL SISTEMA ABO O GRUPO SÉRICO

Los individuos bajo condiciones normales desarrollan anticuerpos anti-A y anti-B cuando los

respectivos antígenos están ausentes en sus hematíes.



La determinación de los anticuerpos anti-A y anti-B del sistema ABO se fundamenta en la

capacidad del suero o plasma de la persona (mayor de 6 meses de edad) de aglutinar células de

referencia A1, A2, B y O.Para determinar los anticuerpos anti-A y anti-B se utilizan células de

referencia A1 y B correspondientemente. Las células A1 y A2 ayudan a demostrar anticuerpos anti-

A1 en aquellas personas A2 o A2B. Por su parte las células O se incluyen como un control negativo

en la determinación del grupo sérico. Las células sugeridas se obtienen comercialmente. Para

retrasar la hemólisis y la contaminación, así como una disminución de la fuerza antigénica de las

células, éstas son conservadas con sustancias certificadas por las casas comerciales.

1.5.2.1. MÉTODO EN TUBO PARA LA DETERMINACIÓN DE LOS ANTICUERPOS ANTI-A Y ANTI-B

1.5.2.1.1. Principio del Método

La reacción que producen los anticuerpos cuando se mezclan dos grupos de sangre no

compatibles destruye las células extrañas en un proceso llamado hemólisis.

La hemólisis puede causar daños en el hígado e incluso la muerte. Por esta razón es muy

importante tener en cuenta el grupo sanguíneo del donante y del paciente antes de hacer una

transfusión. Los distintos grupos de sangre, presentan anticuerpos en el plasma sanguíneo. En la

mayoría de los casos, los neonatos no poseen anticuerpos en el plasma, ya que estos se producen

con el contacto de antígenos similares al A, B y H en los primeros años de vida.

El grupo A, tendrá anticuerpos B. El grupo B, tendrá anticuerpos A. El grupo O, tendrá anticuerpos

A y B y el grupo AB no poseerá anticuerpos.

1.5.2.1.2. Materiales, Reactivos y Muestra





� Lámpara de lectura.


� Células de referencia A1, A2, B y O.



� Suero o plasma: Las muestras que no van a ser procesadas inmediatamente deben ser

refrigeradas entre 2-8°C por un periodo que no excedan las 48 horas. Las muestras que

van a ser procesadas después de las 48 horas de colección deben ser congeladas.

1.5.2.1.3. Ejecución del Ensayo

A) La prueba debe ser realizada a temperatura de laboratorio (20-25°C).

B) Para cada muestra marcar cuatro tubos así: A1, A2, B y O.

C) Colocar:

Tubo A1 Tubo A2 Tubo B Tubo O

Suero o plasma 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas

Células 1 gota de

células A1

1 gota de

células A2

1 gota de

células B

1 gota de

células O

D) Mezclar suavemente el contenido de cada tubo.

E) Centrifugar a 3.400rpm por 15-30 segundos.

F) Suavemente resuspender el botón de células para observar la presencia o ausencia de

aglutinación contra un fondo blanco bien iluminado.

G) Anotar los resultados en formatos apropiados después de cada observación.

Generalmente la aglutinación es fuerte (3+ ó 4+).

1.5.2.1.4. Interpretación de los Resultados

Suero o plasma analizado con Anticuerpo

Presente

Grupo Sanguíneo

(Fenotipo) Células A1 Células A2 Células B Células O

0 0 + 0 Anti-B A1 o A2

+ + 0 0 Anti-A B

+ + + 0 Anti-A y Anti-B O

0 0 0 0 Ninguno AB

+ 0 + 0 Posible

Anti-A1 y Anti-B

Posible

A2 con anti-A1

+ 0 0 0 Posible

Anti-A1

Posible

A2B con anti-A1

0 = No aglutinación. + = Aglutinación.



Nota: La palabra “posible” indica que deben hacerse pruebas adicionales para comprobar que

efectivamente se está ante un anticuerpo anti-A1 y ante un subgrupo A2.

1.5.2.2. MÉTODO PARA LA DETERMINACIÓN DE LOS SUBGRUPOS DE A: A1 Y A2


La determinación de los subgrupos A1 y A2 se basa en la aglutinación de los hematíes por lectinas

que reaccionan con las células A1y A1B, pero no con las A2.

“La lectina A1 es preparada a partir de extractos de las semillas de la planta Dolichosbiflorus. En

otras palabras, la lectina A1 contiene fitoaglutininas que reaccionan de manera similar al

anticuerpo anti-A obtenido de humanos”.(5)

1.5.2.2.2. MÉTODO DELPORTAOBJETOS


� Portaobjetos.





� Reactivo comercial lectina A1.

� Solución Salina Fisiológica 0.9% (SSF).

� Sangre anticoagulada clasificada como A o AB.


A. Marcar un portaobjetos con el número correspondiente.





B. Dispensar una gota de la sangre A o AB a examinar.

Portaobjetos 1

Sangre A o AB a examinar 1 gota

Lectina A1 1 gotas

C. Mezclar con un palillo o aplicador cubriendo un área de 2-4cm de diámetro.

D. Rotar suavemente la lámina y examinar la presencia o ausencia de aglutinación contra un

fondo blanco bien iluminado.

E. Anotar los resultados observados. Generalmente la aglutinación es fuerte (3+ o 4+) y

ocurre dentro de 30 segundos después de adicionado el reactivo.


� Reacción Positiva: Indica los fenotipos A1 y A1B.

� Aglutinación Negativa: Indica los fenotipos A2 y A2B.








� Reactivo lectina A1.

� Solución Salina Fisiológica 0.9% (SSF).

� Sangre anticoagulada clasificada como A o AB.


a) Marcar un tubo con la identificación de la muestra.

b) Lavar y realizar una suspensión al 2-5% con SSF de los hematíes a analizar (ver pág. 12).



c) Dispensar:

Tubo 1

Suspensión de eritrocitos al 2% 1 gotas

Lectina A1 1 gota

d) Mezclar suavemente.

e) Centrifugar a 3.400rpm por 15-30 segundos.

f) Resuspender suavemente el botón de células y examinar en una lámpara de lectura o

contra un fondo blanco bien iluminado la presencia o ausencia de aglutinación.

g) Anotar los resultados observados.


� Reacción Positiva: Indica los fenotipos A1 y A1B.

� Aglutinación Negativa: Indica los fenotipos A2 y A2B.



CAPÍTULO II

SISTEMA Rh

2.1. GENERALIDADES

El sistema Rh es después del ABO el más importante de los sistemas de grupos sanguíneos, por

sus alcances clínicas en la transfusión sanguínea y en la etiopatogenia de la enfermedad

hemolítica del recién nacido.

En su descubrimiento concurrieron dos hallazgos relevantes. El primero de ellos acaeció en 1939,

con la publicación por Levine y Stetson de su histórico trabajo descubrieron cómo una madre que

terminaba de dar a luz un feto muerto y macerado, había desarrollado una severa reacción

hemolítica por la transfusión de sangre proveniente de su esposo. Ellos encontraron que el suero

de la madre aglutinaba los glóbulos rojos de su esposo y además, del 80% de las personas de

grupo O con los cuales se cruzó. El antígeno responsable fue demostrado ser independiente de los

ya conocidos ABO.

“En la interpretación de estos hallazgos, postularon que la madre había sido inmunizada,

desarrollando anticuerpos contra un antígeno del cual ella carecía pero que estaba presente en

los glóbulos rojos del feto, a su vez, heredado del padre. Cuando la paciente fue transfundida con

la sangre de su esposo, el anticuerpo reaccionó con dicho antígeno causando la reacción

hemolítica”.(6)

Levine y Stetsonanunciaron este descubrimiento como “Un caso raro de aglutinación intra grupo”,

sin darle nombre al factor sanguíneo que terminaban de descubrir; si ellos le hubiesen asignado

un nombre, sería ése y no Rh la denominación de este sistema.

Un segundo descubrimiento experimental, se produce en 1940, como resultado de las prácticas

en animales, de Landsteiner y Wiener.





Ellos inmunizaron conejos y cobayos con glóbulos rojos de momos Macacusrhesus; obteniendo un

suero que aglutinaba los glóbulos rojos de los monos rhesus y del 85% de la población blanca. Las

personas cuyas células eran aglutinadas por el nuevo suero anti-rhesus fueron clasificadas como

Rh positivo y el restante 15% que no reaccionaban, como Rh negativo.

El siguiente paso fue la demostración de Wiener y Peters que el anticuerpo anti-Rh,

supuestamentees el mismo que había sido elaborado en animales contra los hematíes del momo

rhesus, podía ser hallado en el suero de algunas personas quienes habían presentado reacción

hemolítica después de haber recibido transfusiones de sangre ABO compatibles.

Hasta ese instante todo sugería que el antígeno presente en el glóbulo rojo del Macacusrhesus y

el hallado en los humanos era el mismo, por consiguiente, los correspondientes anticuerpos

deberían poseer igual especificidad. Posteriores investigaciones demostraron que dichos

antígenos eran diferentes; se determinó que la mayoría de los glóbulos rojos humanos contienen

el antígeno del rhesus y además, otro diferente pero relacionado con éste. A sugerencia de

Levine, se conservó la denominación de factor Rh para el antígeno del humano y se asignó el

nombre de LW (Landsteiner-Wiener) al antígeno común al hombre y al mono. Desde entonces, los

estudios realizados en el campo del Rh se han efectuado con el suero proveniente de humanos.

El descubrimiento del factor Rh ha significado un aporte extraordinario de la inmunohematología

a la medicina clínica, porque permitió conocer y prevenir muchas de las reacciones hemolíticas

transfusionales. Asimismo, permitió conocer la etiopatogenia y desarrollar la profilaxia de la

enfermedad hemolítica del recién nacido.

2.2. ANTÍGENOS DEL SISTEMA Rh

El sistema Rh es el grupo sanguíneo más complejo ypolimórfico de la membrana del glóbulo rojo.

Está compuestopor más de 49 antígenos definidos por métodosserológicos siendo los más

importantes D, C, c, E y e que construyen el tronco fundamental del sistema.

Estos antígenos y sus correspondientes anticuerpos, son los responsables del 99% de los

problemas clínicos que se presentan en el sistema Rh.



Estos antígenos pueden presentar alteraciones en suexpresión dando origen a fenotipos débiles y

parciales.

� El Antígeno D

“El antígeno D es después de los antígenos A y B el más importante en la medicina de transfusión.

La presencia del antígeno D está determinada por el gen d que es amorfo por lo que no se ha

podido demostrar la existencia de un antígeno d ni un anticuerpo anti-d”.(7)

Una diferenciaimportante con el sistema ABO es que cuando este antígeno no se halla en la

membrana del eritrocito, en el suero o plasma de la persona no aparecen anticuerpos anti-D en

forma natural. Para que dichos anticuerpos se formen, el individuo D negativo debe ser expuesto

a eritrocitos D positivos por medio de una transfusión de sangre o de un embarazo, que son

generalmente de la clase IgG.

Actualmente, cuando se hablade Rh positivo o Rh negativo se refiere a la presencia o ausencia del

antígeno D en la membrana del glóbulo rojo respectivamente. Se debe tener presente que el

antígeno D puede presentar variantes débiles, por ello las células que no muestran aglutinación

directa con los antisueros comerciales anti-D no deben ser clasificadas como Rh negativo hasta

que se realicen pruebas adicionales para determinar la presencia del antígeno D débilmente

expresado.

� Antígeno D-débil

Cuando se necesita de pasos adicionales para demostrar el antígeno D en la membrana del

eritrocito, se dice que se estafrente a un “D-débil” o una variante Du.

La expresión débil del antígeno D en la membrana del hematíe puede deberse a dos tipos de

situaciones:





En primer lugar, la condición puede ser heredada y es lo que se conoce como “D-débil”

o Du hereditario inicialmente conocido como de bajo grado, el cual es el producto de

un gen que codifica la síntesis de un antígeno de expresión débil. La determinación del

antígeno en este caso debe hacerse por medio de la prueba de la antiglobulina

indirecta (Coombs indirecto).

En segundo lugar, la expresión débil del antígeno D puede deberse a una supresión de

un gen perfectamente normal, por otro alelo. Por ejemplo, los genes (dCe) y (dcE)

situados en el cromosoma opuesto (posición trans) algunas veces afectan la expresión

del antígeno D. Esta forma de Du fue denominada como de alto grado, debido a la

reacción débil de aglutinación que presentan las células con algunos tipos de reactivos

anti-D.

La importancia de la expresión débil del antígeno D en transfusión, radica en la polémica que

existe entre diferentes autores sobre la situación del individuo D-débil como receptor de sangre.

“Algunos autores sostienen que el individuo D-débil debe ser transfundido con sangre Rho (D)

negativa, ya que si la causa de esa situación es la ausencia de una o más subunidades del antígeno

D, el receptor podría desarrollar anticuerpos contra esas subunidades al ser transfundido con

sangre Rho (D) positiva”.(8)

Sin embargo esta posibilidad no es tan factible como en teoría parece, sin embargo, Argall y

colaboradores reportaron en 1953 la presencia de anticuerpos anti-D en un individuo Du positivo.

Otros piensan que el individuo D-débil puede ser transfundido con sangre Rho (D) positiva sin

riesgo de ser inmunizado y que utilizar sangre Rho (D) negativa en estos pacientes es realizar un

mal uso de la escasa existencia de sangre de este tipo.

Así mismo, todo donante D-débil debe ser considerado como Rho (D) positivo y la unidad de

sangre o sus componentes debe ser transfundida a receptores Rho (D) positivo.





� Antígeno D-parcial

El antígeno D está constituido por nueve subunidades genéticamente establecidos, si alguna de

esas subunidades no se sintetiza, la molécula del antígeno D se expresa débilmente en la

membrana del glóbulo rojo.

Algunas personas que han perdido parte del complejo antigénico D, pueden desarrollar

aloanticuerpos anti-D que no reaccionan con sus propias células.

Anteriormente, la pérdida de una parte del complejo antigénico D se le denominó “D mosaico” o

“variante D”, actualmente es mejor referirse como “D-parcial”.

� Los Antígenos C, c, E, e

Después del "D" los antígenos C, c, E y e son los de mayor importancia en el Sistema, estos 5

antígenos son los responsables de más del 99% de los problemas clínicos relacionados con dicho

sistema; ya que algunos individuos que carecen de la expresión de alguno de ellos, pueden

cuando son inmunizados, producir anticuerpos contra el antígeno faltante.

Antígenos "C" y "c": El antígeno "C" tiene una frecuencia aproximada del 68% en

lapoblación general, frente a una frecuencia del 81% del antígeno "c", esteúltimo es el

más inmunógeno luego del D y como tal es causante de riesgo en la Enfermedad

Hemolítica Feto Neonatal (E.N.F.N.).

Antígenos "E" y "e": El antígeno "E" tiene una frecuencia del 27% en la población

generalmientras que el "e" ronda cercano al 98%.

En el comercio existen antisueros específicos para cada uno de estos antígenos, lo que facilita su

determinación en la membrana del eritrocito disminuyendo el riesgo de aloinmunización post-

transfusional.



2.3. NOMENCLATURA

“Tres nomenclaturas diferentes se usan para designar los antígenos del sistema Rh. La

importancia de conocerlas es que algunas publicaciones utilizan una u otra o una combinación de

ellas. Dos de las tres nomenclaturas surgen de las teorías que explican el control genético de la

síntesis de los antígenos del sistema Rh”.(9)

� Teoría de Fisher-Race

De acuerdo a la teoría de Fisher-Race, los antígenos Rh son producidos por tres pares de genes

alelos, ubicados en tres locus tan íntimamente ligados o unidos en el cromosoma, que ellos nunca

se separan y pasan de generación en generación como una unidad o complejo genético. En esta

forma, el hijo hereda un complejo genético proveniente del cromosoma paterno y otro complejo

del cromosoma materno. Por ejemplo: si el padre es DCe/dce, el hijo podrá heredar el complejo

DCeódce pero nunca una combinación tal como dCe. Tal combinación sólo podría ocurrir en caso

de entrecruzamiento cromosómico y este fenómeno no se ha demostrado que ocurra en el

sistema Rh, precisamente debido a la estrecha unión que existe entre los locus.

De los tres locus, uno estaría ocupado por los genes alelos D y d. Los múltiples estudios realizados

indican que no existe un antígeno d que pudiese ser considerado como el producto del gen d. Un

concepto reciente expresa que en este locus existen dos genes, uno de ellos produce el antígeno

D pero el otro no lo produce.

Además, se sabe de otros genes que podrían ocupar este locus, algunos de ellos serían

responsables de la producción de ciertas piezas del mosaico que conforman el antígeno D. En el

segundo locus, se encontrarían los alelos C y c, en el tercer locus estarían los genes E y e.

Una interpretación más reciente de la teoría original de los tres locus estrechamente ligados, es

que los tres grupos de genes que normalmente se comportan como alelomorfos, ocupan tres

sublocus dentro de un locus único.





� Teoría de Wiener

“Wiener sostuvo siempre que el modo de heredarse los antígenos del sistema Rh era

completamente diferente. El mantuvo la hipótesis que el control genético del sistema era ejercida

por un solo gen. La herencia de este gen resultaría en la producción de un aglutinógeno, el cual

podría estar compuesto de una variedad infinita de factores; dentro de este concepto, establecía

que un aglutinógeno y un factor sanguíneo no son la misma cosa”. (10)

De acuerdo a esta teoría, un factor es un inmunógeno y puede estimular la producción de un

anticuerpo específico con el cual puede reaccionar. Wiener no aceptó la presencia de genes alelos

que controlan la producción de factores sanguíneos. En su teoría estipula que algunos genes tales

como R1, R2 y R0 determinan la producción de un aglutinógeno, en el cual, el factor Rho está

incluido, mientras que los genes r, r´, r” conducen a la formación de otro aglutinógeno que no

incluye el factor Rho como uno de sus miembros.

En las teorías nombradas, se observa que cada autor utiliza una terminología diferente para

identificar tanto los genes como los antígenos o factores presentes en el glóbulo rojo. Fisher y

Raceutilizan la terminología CDE, que refleja el concepto de que cada gen determina la

producción de un antígeno y emplea el mismo símbolo para designar tanto el gen como el

antígeno correspondiente, aunque cuando se refiere al gen, se escribe en letra cursiva para

diferenciarlo.

Wiener, por otro lado, introduce la denominación Rh-hr, empleando símbolos diferentes con

sobrescritos y subescritos para identificar los genes, los aglutinógenos y los factores sanguíneos,

siendo difícil su entendimiento y memorización, porque los símbolos usados tratan de expresar la

máxima información.

Para el mejor entendimiento de las nomenclaturas de Wiener, Fisher-Race y su conversión mutua,

las siguientes equivalencias pueden ayudar en su comprensión.





R = D

R1 = DC

R2 = DE

r = d

r´= dC

r” = dE

Los antígenos c y e no tienen representación especial pero forman parte del complejo genético

como se expresa a continuación.

Ro = Dce

R1 = DCe

R2 = DcE

r = dce

r´= dCe

r” = dcE

En 1962 Rosenfield y colaboradores proponen una nueva nomenclatura numérica, basada en la

presencia o ausencia de los antígenos en el hematíe. Esta nomenclatura no presenta información

genética, sino el comportamiento serológico de los hematíes frente a antisueros específicos,

dándole igual importancia a los resultados positivos como a los negativos.

Para denominar los antígenos se les da un número a cada uno según el orden en que fueron

reportados y se utiliza el símbolo Rh: seguido del número para expresar la presencia del antígeno

en la membrana del glóbulo rojo. Si el antígeno está ausente se utiliza la misma denominación

pero el número va precedido del signo menos (-). Por ejemplo, si los hematíes dan una reacción

positiva frente al antisuero anti-Rh1 (anti-D), se nombra como Rh:1; por el contrario, si la reacción

es negativa indicaría la ausencia del antígeno y se anotaría Rh:-1. Las reacciones débiles tales

como las observadas en el Du se anotan como Rhw:1, en donde w (weak) equivale a débil.

2.4. ANTICUERPOS DEL SISTEMA Rh

“Los anticuerpos que se producen en este sistema, a diferencia del sistema ABO es que casi

siempre son el resultado de una isoinmunización bien sea por transfusiones, abortos o

embarazos”. (11)





Los antígenos que con mayor frecuencia causan inmunización por su alto poder inmunógeno son

los antígenos D seguidos por el c y E.

Los anticuerpos que se producen son de la clase IgG, que generalmente requieren para su

determinación de potenciadores de la reacción antígeno-anticuerpo y normalmente para su

detección es necesario realizar la prueba de la antiglobulina humana.

Los anticuerpos del sistema Rh, particularmente el anti-c y anti-E suelen presentar una reacción

más fuerte con hematíes homocigotos (cc y EE) para el antígeno que con hematíes heterocigotos

(Cc y Ee).

La importancia de los anticuerpos del sistema Rh se basa en que por ser inmunoglobulinas de tipo

G (IgG) provocan reacciones hemolíticas transfusionales severas y fatales así como la enfermedad

hemolítica del recién nacido.

2.5. Rh NULO

“En 1961, Vos y colaboradores y en 1964 Levine y colaboradores informaron el hallazgo de

muestras de sangre que carecían de todos los antígenos del sistema Rh en los hematíes. Al

realizar estudios en los familiares de uno de los casos, se observó que aunque el individuo había

recibido los complejos genómicos de sus padres y que de igual forma podía transmitirlos a sus

descendientes, algo impedía que en sus hematíes se expresaran los antígenos del sistema”.(12)

Para indicar la ausencia de todos los antígenos del sistema Rh se empleo el término Rh nulo.

En los individuosRh nulo sus hematíes presentan una vida media menor, lo cual conlleva a

diferentes grados de anemia, al observar los hematíes en un extendido periférico, éstos presentan

forma de copa (estomatocitos), lo cual pone en evidencia que la ausencia de los antígenos del

sistema Rh en el hematíe conduce a defectos de membrana y por consiguiente aladisminución de

las células rojas en la circulación.





2.6. DETERMINACIÓN DEL ANTÍGENO D DEL SISTEMA Rh

La determinación Rh positivo y Rh negativo hace referencia a la presencia y ausencia

correspondientemente del antígeno D del sistema Rh en la membrana del hematíe.

2.6.1. PRINCIPIO DEL MÉTODO

El principio se basa en la aglutinación directa de los hematíes por el anticuerpo específico. La

aglutinación de los hematíes ocurre en dos fases, en la primera el anticuerpo se une al antígeno

correspondiente en la membrana de la célula (fase de sensibilización); seguidamente en la

segunda fase se produce la aglutinación de los hematíes sensibilizados.

Cuando el antígeno está bien expresado en las células las dos fases ocurren casi simultáneamente,

viéndose la aglutinación macroscópica en pocos segundos. Cuando el antígeno se encuentra

débilmente expresado en la célula, la fase de aglutinación no ocurre y para evidencia la reacción

antígeno-anticuerpo se necesita recurrir al suero antiglobulina humana.

2.6.2. MÉTODO EN PORTAOBJETOS PARA LA DETERMINACIÓN DEL ANTÍGENO D

2.6.2.1. Materiales, Reactivos y Muestra

� Portaobjetos.

� Lámpara con temperatura de 37°C.




� Antisuero comercial anti-D.

� Control de reactivo Rh: El reactivo control de Rh, en términos generales, es una mezcla de

todos los elementos y aditivos que contiene el antisuero anti-D excepto el anticuerpo

mismo.

� Sangre anticoagulada con EDTA, heparina, ACD, CPD, CPDA-1.

� Glóbulos rojos lavados y suspendidos en SSF (ver pág. 12).



� Sangre coagulada puede utilizarse siempre y cuando del coágulo logren desprenderse

suficientes hematíes, los cuales serán lavados y suspendidos en SSF (ver pág. 12).

2.6.2.2. Ejecución del Ensayo

a. Realizar una suspensión de eritrocitos al 35-45% (ver pág. 12).

b. Marcar dos láminas portaobjetos así: Una como anti-D y otra como control.

c. Encender la lámpara, cuya temperatura deberá ser de 37°C.

d. Colocar en el calentador los portaobjetos marcados.

e. Dejar calentar los portaobjetos durante 5 minutos. Si no se dispone de un calentador

eléctrico los portaobjetos se pueden calentar sobre la llama de una lámpara de alcohol

antes de iniciar el ensayo. Probar la temperatura sobre el dorso de la mano; el calor

deberá ser soportable.

f. Depositar en los portaobjetos:

Lámina anti-D Lámina Control

Sueroanti-D 1 gota 1 gota

Suspensión de eritrocitos 35% 1 gota

Control de reactivo Rh 1 gota

g. Mezclar individualmente con un palillo o aplicador cubriendo un área de 2-4 cm de

diámetro.

h. Mover suavemente hacia delante y hacia atrás la lámpara.

i. Observar la presencia o ausencia de aglutinaciónen un tiempo no mayor de 2 minutos.

j. Anotar los resultados.

2.6.2.3. Interpretación de los Resultados

� Reacción Positiva.- Rh positivo, en el centro y la periferia de la mezcla se observa

claramente un gran número de pequeñas aglutinaciones de eritrocitos.

� Reacción Negativa.-Rh negativo. A toda muestra con resultado negativo se le debe

realizar el test para determinar la expresión débil del antígeno D (variante Du). Se

exceptúan las muestras de sangre provenientes de recién nacidos.



2.6.3. MÉTODO EN TUBO PARA LA DETERMINACIÓN DEL ANTÍGENO D






� Bañomaría o incubadora de calor seco a 37°C.


� Antisuero comercial anti-D.

� Reactivo control de Rh.

� Preparar una suspensión de eritrocitos al 2% en SSF.


A. Realizar una suspensión al 2% con SSF de los hematíes a analizar (ver pág. 12).

B. Marcar dos tubos de 75 x 12mm, uno como anti-D y otro como control Rh. Incluir la

identificación de la muestra (nombre o número de registro del paciente o donante).

C. En un tubo de ensayo pequeño colocar y mezclar bien:

Tubo anti-D Tubo Control

Sueroanti-D 1 gota 1 gota

Suspensión de eritrocitos 2% 1 gota

Control de reactivo Rh 1 gota

D. Incubar:

� Sin centrifugación, se recomienda emplear este método. Colocar el tubo a 37°C en un

bañomaría o una incubadora durante 60 minutos.

� Con el empleo de la centrífuga (método rápido), centrifugar los tubos a 3.400rpm por

15-30 segundos.

E. Observar la presencia o ausencia de aglutinación:

� Examen macroscópico, contra un fondo blanco bien iluminado.Examinar el líquido que

se encuentre en el fondo del tubo de ensayo, colocar éste en posición casi horizontal.



� Examen microscópico,en caso de duda, calentar un portaobjetos, aspirar una gota del

sedimento de eritrocitos con una pipeta Pasteur y preparar un frotis, observar en el

microscopio (empleando el objetivo x 10).

F. Anotar los resultados.


� Reacción Rh positiva.- Se observan pequeñas aglutinaciones de eritrocitos en un líquido

claro.

� Reacción Rh negativa.- Los eritrocitos permanecen suspendidos y no se observan

aglutinaciones. A toda muestra con resultado negativo se le debe realizar el test para

determinar la expresión débil del antígeno D (variante Du). Se exceptúan las muestras de

sangre proveniente de recién nacidos.

2.7. DETERMINACIÓN DE LA EXPRESION DÉBIL DEL ANTÍGENO D

Algunos hematíes presentan el antígeno D débilmente expresado en su membrana (variante Du),

razón por la cual al reaccionar con los antisueros anti-D en lámina o en tubo no muestran

reacciones de aglutinación.

2.7.1. PRINCIPIO DEL MÉTODO

Para demostrar la presencia del antígeno D débilmente expresado, es necesario realizar la prueba

de la antiglobulina indirecta.

“No todos los antisueros anti-D son apropiados para realizar la prueba de variante Du, bien sea

por que el fabricante especifique que el reactivo no muestra reacciones confiables con las células

Du, o porque el reactivo contenga otros anticuerpos que podrían reaccionar con antígenos

eritrocitarios diferentes al D y ser detectados en la fase de antiglobulina”.(13)





La prueba variante Du se realiza a todo donante o receptor de sangre que en la prueba en lámina

o en tubo arroje un resultado negativo para el antígeno D (Rho). Se excluyen las muestras de

recién nacidos.

2.7.2. Materiales, Reactivos y Muestra





� Bañomaría o incubador de calor seco a 37°C.



� Antisuero anti-D.

� Suero de antiglobulina humana.

� Reactivo control de Rh.

� Células sensibilizadas con IgG.

� Solución salina fisiológica 0.9% SSF.

� La muestra debe cumplir los mismos requisitos anotados para la determinación del

antígeno D por los métodos en lámina y en tubo.

2.7.3. Ejecución del Ensayo

a) Marcar dos tubos de 75 x 12mm así: Du y control. Incluir la identificación de la muestra

(nombre o número de registro del donante o receptor).

b) Lavar las células a analizar 2-3 veces con SSF y hacer una suspensión al 2-5% (ver pág. 12).

c) Dispensar una gota de las células en cada uno de los tubos debidamente identificados.

d) Al tubo marcado “Du”, agregar una gota de anti-D.

e) Al tubo marcado “control” dispensar una gota del reactivo control de Rh. Si se dispone de

antisueros anti-D monoclonales de baja concentración proteica no adicione ningún

reactivo a este tubo.

f) Mezclar e incubar ambos tubos por 15-30 minutos a 37°C.

g) Centrifugar a 3.400 rpm por 15-30 segundos.



h) Resuspender suavemente el botón de células y observar la presencia o ausencia de

aglutinación contra un fondo blanco bien iluminado o una lámpara de lectura. Si se

observa aglutinación en el tubo marcado Du y no en el control en este pasó, la muestra

será clasificada como D+ (Rh positivo) y no necesitará proseguir la prueba hasta la fase de

antiglobulina.

i) Si no se observó aglutinación en el paso anterior, o las células muestran una aglutinación

dudosa, lavar 3-4 veces con abundante SSF teniendo en cuanta en el último lavado de

decantar completamente la salina.

j) Añadir a cada tubo dos gotas de suero antiglobulina humana.

k) Mezclar y centrifugar 15-30 segundos a 3.400 rpm.

l) Resuspender suavemente el botón de células y observar la presencia o ausencia de

aglutinación. Anotar los resultados. Aglutinación en la fase de antiglobulina en el tubo

“Du” indica que los hematíes poseen el antígeno D débilmente expresado (Du positivo),

mientras que la no aglutinación indica la usencia del antígeno D y de su variante Du (ver el

cuadro). El tubo “control” no debe presentar aglutinación en este paso.

m) Si no se observa aglutinación en el paso anterior, añadir una gota de células sensibilizados

con IgG a cada uno de los tubos. Recentrifugar y leer, en este paso se debe observar

aglutinación (1-2+) en ambos tubos.

2.7.4. Interpretación de los Resultados

TUBO Du

Hematíes a analizar con

anti-D

TUBO CONTROL

Hematíes a analizar con

reactivo control de Rh

INTERPRETACION

0 0 Du Negativo

+ 0 Du Positivo

+ + Prueba no válida

0 = No aglutinación; + = Aglutinación

Nota: Los hematíes Du positivo deben ser considerados como Rh positivos, sin embargo es

conveniente en el informe resaltar la condición del antígeno D débilmente expresado. Por

ejemplo, si un individuo es de grupo sanguíneo A y la prueba en lámina o en tubo para el antígeno

D arroja resultados negativos con prueba variante Du positiva, lo más conveniente será informarlo

como: A Du positivo (A Du+) o A Rh positivo débil.



2.8. DIFICULTADES EN LA DETERMINACIÓN DEL ANTÍGENO D

Estas dificultades que se presentan en la determinación del antígeno D están relacionadas a las

reacciones falsas positivas o falsas negativas debidas a diferentes causas.

En el sistema Rh no existe una prueba sérica o inversa que compruebe los resultados obtenidos

en la prueba directa, de tal suerte que el analista debe prestar especial cuidado en su

determinación para no cometer errores.

El cuadro muestra las causas de falsos positivos y falsos negativos más comunes en la práctica en

lo que tiene que ver con la determinación del antígeno D del sistema Rh.

CAUSAS DE RESULTADOS FALSOS POSITIVOS MODO DE RESOLVER LA DIFICULTAD

Cantidades anormales altas de proteínas

plasmáticas en el suero del individuo que

causan agregación espontánea (Rouleaux) de

las células.

Lavar 2-3 veces los hematíes con solución salina

fisiológica y realizar la prueba bien sea en lámina o en

tubo.

Individuos con anemia hemolítica autoinmune

cuyos hematíes están fuertemente

sensibilizados con IgG. Esta situación reduce

las cargas de superficie de los hematíes

favoreciendo su agregación espontánea.

Realizar Coombs directo a las células con el fin de

comprobar la autosensibilización.

Hacer elución del anticuerpo y repetir la prueba con

los glóbulos rojos libres del anticuerpo.

Individuos con altos títulos de aglutininas frías

que ocasionan agregación espontánea de los

hematíes.

Lavar 2-3 veces los hematíes con solución salina

fisiológica y realizar la prueba en lámina o en tubo.

Excesiva velocidad y tiempo de centrifugación

cuando se realiza la prueba en tubo.

Calibrar las centrífugas serológicas definiendo

periódicamente los tiempos de centrifugación

óptimos, así como la velocidad de centrifugación.

Contaminación bacteriana o química de las

muestras o reactivos

Solicitar muestra recién obtenida del paciente y

repetir la prueba.

Almacenar adecuadamente los reactivos controlando

periódicamente los refrigeradores.

Verificar periódicamente que los reactivos no

presente turbidez.



CAUSAS DE RESULTADOS FALSOS NEGATIVOS MODO DE RESOLVER LA DIFICULTAD

Actividad de los reactivos disminuida. Chequear al inicio del día la actividad del anticuerpo

con células apropiados D+ y D-.

Chequear el reactivo de antiglobulina con células

apropiadas (control de Coombs) cuando se realice la

variante Du.

Almacenar adecuadamente los reactivos.

No utilizar reactivos cuya fecha de vencimiento haya

expirado.

Temperatura inadecuada. Algunos reactivos anti-D necesitan de calor para que

la reacción antígeno-anticuerpo sea más evidente.

Cuando realice la prueba en lámina, precaliéntelas a

40-50°C para que la mezcla de células y reactivos

alcance rápidamente la temperatura de 37°C.

Es aconsejable leer el inserto del reactivo que el

fabricante provee.

Mala interpretación de los resultados. La reacción de aglutinación de las células D+ con los

antisueros anti-D suele ocurrir en los primeros 30

segundos. Sin embargo no se debe reportar un

resultado como negativo hasta que hayan

transcurrido uno o dos minutos.

Este tiempo de lectura lo encontrará especificado en

el inserto del reactivo.

No adición del suero anti-D o adición de otro

antisuero o reactivo.

Los antisueros anti-D no son coloreados y aunque no

es muy frecuente podría confundirse con otro

reactivo de igual apariencia; como la albúmina.

Fuente:El Banco de Sangre. Teoría, Principios y Procedimiento. 2ª edición, Universidad del Valle Programa Editorial,

Colombia. Enero de 2003.



CAPÍTULO III

RECOLECCIÓN, PREPARACIÓN,ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE

DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

3.1. SELECCIÓN DEL DONANTE DE SANGRE

La seguridad de la transfusión de sangre o de sus componentes comienza con la selección

apropiada del donante.

Uno de los objetivos principales de la transfusión es cuidar que la donación de sangre no

perjudique la salud del donante, y reducir el riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas

tanto como sea posible en el receptor.

Para lograr este objetivo, se hace necesario implementar múltiples estrategias que permitan

minimizar los riesgos de transmisión de infecciones tales como:

� Diseñar y desarrollar programas de promoción de la donación voluntaria y repetida de

sangre.

� Implementar mecanismos eficaces de selección del donante.

� Mermar las transfusiones innecesarias.

� Minimizar la exposición del receptor a múltiples donantes.

� Realizar controles biológicos de las unidades de sangre donadas (pruebas de tamizaje

para HIV, HBV, HCV, sífilis, chagas, etc.).

La selección adecuada del donante debe estar basada tanto en criterios de protección del

donante como en criterios de protección del receptor.

3.2. CRITERIOS DE PROTECCIÓN DEL DONANTE

Se refiere a todos aquellos medios y criterios orientados a certificar que la donación de sangre no

representa ningún riesgo para la salud y el bienestar del donador.Dentro de estos criterios se

incluyen:



A. Edad: Según la ley para ser donante de sangre se requiere ser mayor de 18 años y menor

de 65 años. Para los donantes menores de 18 años debe existir la autorización de la

persona responsable del menor, mientras que para los donantes mayores de 65 años

debe mediar la autorización del médico. Para los donantes de sangre autóloga no existe

límite de edad para donar.

B. Peso:“El peso mínimo para donar sangre se ha establecido en 50Kg. Un peso igual o

mayor a éste es el adecuado para donar una unidad de sangre (450 ± 45ml), además del

volumen extraído para las pruebas infecciosas y pretransfusionales requeridas (30ml

aproximadamente). Para pesos entre 45 y 50Kg se debe usar equipos para extraer menor

volumen (405 ml o menos), los cuales tienen la cantidad adecuada de anticoagulante para

el volumen de sangre a extraer. También se puede reducir la cantidad de anticoagulante

de un equipo normal transfiriéndolo a una de las bolsas piloto pero conservando siempre

la relación de sangre con respecto al anticoagulante. Para saber con precisión la cantidad

de anticoagulante que se debe remover de la bolsa primaria a la piloto se puede usar la

siguiente fórmula:

X=63 ml�peso donante �Kg�x 63 ml�

50 Kg

X= cantidad de anticoagulante a remover

Por otra parte, la cantidad de sangre a extraer con relación al peso del donante se calcula

así:

Y=peso donate �Kg�x 450 ml

50 Kg

Y= cantidad de sangre a extraer.

En el caso de la donación autóloga, no hay límite de peso estricto”. (14)

C. Temperatura: La temperatura oral no debe exceder a 37,5°C.

D. Pulso: Entre 50 a 100 pulsaciones por minuto. Debe contarse como mínimo durante 30

segundos y su percepción debe ser regular. Los deportistas pueden ser admitidos con

menor de 50 pulsaciones por minuto de frecuencia cardiaca.





E. Presión Arterial: La presión sanguínea sistólica debe estar entre 90-180mmHg y la presión

sanguínea diastólica entre 60-100mmHg. Valores por fuera de estos rangos deben ser

evaluados después de un descanso del donante. Si los valores aumentados permanecen,

el médico debe concretar si acepta o difiere la donación de sangre. Si los valores de

presión arterial se encuentran entre los rangos mencionados se debe evaluar la presión

diferencia, la cual se obtiene de la diferencia entre la presión diastólica y la sistólica. Si se

obtiene un valor menor de 30 o mayor de 90 el donante debe ser diferido y revisado por

el médico. Los donantes permitidos con historia clínica de hipertensión arterial que estén

controlados con medicamentos, pueden ser aceptados siempre y cuando su tensión

arterial se encuentre dentro de los límites permitidos y no estén recibiendo otros

medicamentos para problemas cardíacos o estén en riesgo de sufrir falla cardíaca.

F. Hemoglobina y Hematocrito: Los valores de hemoglobina y hematocrito para hombre y

mujeres son:

Hemoglobina (g/dl) Hematocrito (%)

Hombres Mayor o igual 13,5 Mayor o igual 41

Mujeres Mayor o igual 12,5 Mayor o igual 38

Estos valores indican que la extracción de sangre en las personas no va a provocar efectos

adversos como son las reacciones vasovagales. Algunos bancos de sangre han decidido en

disminuir estos valores para lograr reclutar un número mayor de donantes. Valores de

hemoglobina mayores de 17,5 g/dl o hematocrito mayor de 52% requieren ser revisor por

el médico y la donación de sangre debe ser diferida. Para los donantes autólogos, la

hemoglobina no debe ser menor a 11 g/dl y el hematocrito no debe ser inferior de 33%.

G. Ocupación: Es necesario preguntar sobre la ocupación del donante lo cual permite crear y

emplear criterios para su protección. Los deportistas, operadores de maquinaria pesada,

trabajadores de la construcción que regularmente trabajan en andamiosdeben ser

diferidos al fin de semana o a los días de descanso para realizarles la extracción

sanguínea. Además se debe pedir a estas personas que no inicien sus actividades antes de

las 12 horas después de la donación. Para los pilotos de aviones se aplica el mismo

criterio, pero sus actividades deben iniciar después de 72 horas después de la donación.

H. Intervalo ente las Donaciones: Este período oscila entre las 8 y 16 semanas entre cada

donación. Cuando se trata de donación de plasma o plaquetas por aféresis, el intervalo

entre una donación y otra debe ser de 48 horas.



Para las donaciones de sangre autóloga, el intervalo entre una donación de sangre total y

otra no debe ser inferior a 72 horas, y la última donación debe hacerse por lo menos 3 ó 4

días antes de la intervención quirúrgica.

I. Ingesta de Alimentos: Para donar sangre la persona debe evitar encontrarse en ayunas.

Algunos bancos de sangre piden no haber ingerido alimentos por lo menos dos horas

antes de la donación para impedir la obtención de plasmas lipémicos.

Aunque no se ha comprobado que el aumento de lípidos en el plasma ocasione

reacciones alérgicas al receptor, mientras que al donante sí pueden traer efectos no

deseados.

J. Trasnocho: Es conveniente tener en cuenta el ciclo de sueño-vigilia del donante. Si trabaja

en la noche (ciclo sueño-vigilia invertido) o no durmió la noche anterior, se puede aceptar

la donación si el individuo ha dormido por lo menos de 4 a 6 horas antes de ésta.

K. Embarazo: Todo donante femenino debe ser interrogada sobre si está en embarazo o lo

estuvo en las pasadas 6 semanas. Durante el embarazo no se puede donar sangre y sólo

se puede hacerlo cuando hayan transcurrido 6 semanas después del parto normal.

La excepción a esta regla sólo se hará en los casos que la sangre sea requerida para

autotransfusión o para uso en el recién nacido, siempre bajo vigilancia médica. Si el parto

fue por cesárea y ésta involucró transfusión de sangre o derivados se difiere 12 meses.

L. Terapia con Medicamentos: Si el donante toma algún medicamento, se debe indagar la

causa que lo acarreó a iniciar ese tratamiento. El interrogar sobre los medicamentos que

toma el donante es una medida para su protección, mientras que otras veces es un

criterio para la protección del receptor. Si el donante está bajo el tratamiento de drogas

para trastornos cardiovasculares, el diferirlo constituye una medida de protección para su

salud y bienestar.

Si el tratamiento que está tomando es antibacteriano el diferirlo se constituye más que

todo en un criterio para proteger al receptor. Si el individuo es consumidor frecuente de

aspirinas o las consumió en los tres días anteriores a la donación, la unidad de sangre no

debe ser utilizada para fraccionamiento de plaquetas.

Es conveniente que exista en el banco de sangre una lista en la que se incluyan los

nombres comerciales y genéricos de los medicamentos más comunes y si el donante debe

ser aceptado, esta lista debe ser actualizada.



Nombre Comercial Nombre Genérico Indicación Aceptación

Acromicina

Ampicilinas

Artane

Atromid

Coumadin

Demerol

Dabinese

Digoxina

Eritromicina

Fenobarbital

Gantanol

Gantrisin

Hidergina

Ilosone

Inderal

Indocid

Isordil

Kaon

Lasix

Lomotil

Macrodantina

Marax

Medrol

Minocin

Nembutal

Nitroglicerina

Omnipen

Orinase

Tetraciclina

Ampicilina

Trihexifenidil

Clofibrato

Warfarina Sódica

Meperidina

Clorpropamida

Digoxina

Eritromicina

Fenobarbital

Sulfanilamido-isoxazol

Sulfixoxazol

Dihidroergocornina

Dihidroergokriptina

Dihidroergocristina

Eritromicina

Propanolol

Indometacina

Dinitrato de isosorbitina

Potasio

Furosemida

Difenoxilato

Nitrofurantoína

Efedrina, Teofilina

e Hidroxina

Metilprednisolona

Minociclina

Pentobarbital

Nitroglicerina

Ampicilina

Tolbutamida

Antibiótico

Antibiótico

Antiparkinsoniano

Antilipídico

Anticoagulante

Analgésico narcótico

Normoglucemiante oral

Cardiotónico

Antibiótico

Sedante

Antibacteriano

Antibacteriano

Trast. Circ. Cerebrales

Antibiótico

Cardiovascular

Antiinflamatorio

Analgésico

Vasodilatador coronario

Hipopotasemia

Diurético

Diarreas

Antibacteriano

Asma

Corticosteroide

Antibiótico

Barbitúrico


Antibiótico

Normoglicemiante

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No



Nombre Comercial Nombre Genérico Indicación Aceptación

Ovulen

Paregórico Elixir

Penicilinas

Peritrate

Prednisona

Quinidina

Seconal

Serpasol

Tanderil

Tedral

Terramicina

Tigan

Tolinase

Vibramicina

Etinodiol y mestranol

Tintura de opio

Penicilina

Pentaeritritol

Prednisona

Quinidina

Secobarbital

Reserpina

Oxifenbutazona

Teofilina, Efedrina,

Fenobarbita

Oxitetraciclina

Trimetobenzamida

Tolazamida

Doxiciclina

Contraceptivo oral

Diarrea

Antibiótico


Corticosteroide oral

Arritmias cardiacas

Barbitúrico

Antihipertensivo

Antiinflamatorio

Asma

Antibiótico

Antiemético

Normoglicemiante

Antibiótico

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

No

M. Antecedentes Quirúrgicos: Los antecedentes quirúrgicos del donante son usados a veces

como criterio para su protección o para la protección del receptor.

ANTECEDENTES QUIRÚRGICOS TIEMPO A DIFERIR

En las cirugías menores o que no

involucraron transfusión de sangre o

hemoderivados.

En el caso de las cirugías mayores y que

involucraron transfusión.

Los tratamientos dentarios que involucran

riesgo de bacteremia.

Las cirugías dentales en las cuales se utilizó

anestesia general.

Las cirugías dentales en las cuales se utilizó

anestesia local.

Cuando al donante se le ha practicado una

biopsia.

Por tres meses o hasta la plena

recuperación del individuo.

Por 12 meses

Se difieren por una semana

Difieren por un mes

Se difiere por una semana

Se debe diferir hasta saber el

resultado, el cual deberá ser negativo

para malignidad.



N. Historia de Enfermedades: Es conveniente que el médico del banco de sangre realice una

listas de las enfermedades que impiden la donación así como el tiempo a diferir la

donación. Estos listados son útiles cuando el médico se encuentra ausente. El cuadro

muestra algunas enfermedades y el tiempo que difiere la donación para asegurar el

bienestar del donante.

ENFERMEDADES EN EL DONANTE TIEMPO A DIFERIR LA DONACIÓN

CARDIOVASCULARES

Enfermedad coronaria.

Infartos.

Enfermedad cardiaca reumática.

Insuficiencia cardiaca congestiva.

Antecedentes de by-pass coronario.

Cirugía de varices.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

6-2 meses*.

GASTROINTESTINALES

Enfermedad hepática degenerativa.

Ulcera péptica gástrica o duodenal.

Pólipos rectales.

Hemorroides.

Colitis ulcerativa.

Cáncer.

Definitivamente.

6-12 meses* después del episodio agudo.

Aceptar si está asintomático.

Aceptar si está asintomático.

Definitivamente.

Definitivamente.

HEMATOLÓGICAS

Trastornos hereditarios de la coagulación.

Alteraciones morfológicas de los hematíes.

Leucemia, Linfomas, Talasemias.

Porfirias.

Anemia de células falciformes.

Anemia aplástica.

Anemia ferropriva.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

Definitivamente.

6 meses previo control.

RESPIRATORIAS

Infecciones virales o bacterianas agudas.

TBC pulmonar activa.

TBC pulmonar tratada.

Cáncer de pulmón.

Asma.

2 meses post-tratamiento.

Definitivamente.

2 años en los cuales las radiografías sean

estables y no haya habido tratamiento.

Definitivamente.

30 días post-crisis.



URINARIAS

Infecciones vías urinarias bajas.

Infecciones vías urinarias altas.

Enfermedades crónicas (glomerulonefritis-

pielonefritis)

Litiasis.

Hasta su curación.

1 semana post-tratamiento y curación.

Definitivamente.

Aceptar si está asintomático y sin tratamiento.

REUMÁTICAS

Artritis reumatoidea.

Lupus eritematoso sistémico.

Fiebre reumática.

Crisis gotosa.

Definitivamente.

Definitivamente.

5 años post-control y sin secuelas.

2 meses.

NEUROSIQUIATRICAS

Enfermedades cerebro-vasculares.

Enfermedades mentales.

Epilepsia o convulsiones.

Mareos.

Neurocirugía con secuelas.

Neurocirugía sin secuelas.

Definitivamente.

Definitivamente.

Aceptar previo chequeo médico.

Aceptar previo chequeo médico.

Definitivamente.

1 año.

*=Dependiendo si la cirugía involucró transfusión de sangre o derivados.



3.3. CRITERIOS DE PROTECCIÓN DEL RECEPTOR

Hace hincapié a todos aquellos procedimientos que empleados al donante tienen como objetivo

disminuir el riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas e incrementar los efectos

benéficos de la transfusión en el receptor.

a. Apariencia General del Donante: El donante debe tener un aspecto general visiblemente

sano y saludable. Es normal que el donante sienta nerviosante el hecho de donar sangre,

pero si está muy nervioso es preferible diferirlo hasta que se calme. Los individuos que se

encuentren bajo los efectos del alcohol o drogas deben ser diferidos hasta que el efecto

haya pasado, pero si la persona es adicta a estas sustancias deben ser rechazados como

donantes. Es importante observar si el donante tiene señas de pinchazos en los brazos,

esto puede indicar la adicción a drogas intravenosas lo cual lo anularía como donante.



b. Temperatura:La temperatura oral no debe exceder los 37,5°C.

c. Inmunizaciones y Vacunas:Se debe preguntar al donante acerca de las vacunas que ha

recibido y la fecha de su aplicación. Algunas de las vacunas exigen diferir al donante por

períodos variables de tiempo, mientras que otras no necesitan tal precaución. El cuadro

muestra las vacunas más frecuentes y el tiempo recomendado para diferir al posible

donante de sangre.

VACUNAS E INMUNIZACIONES TIEMPO A DIFERIR

Rabia.

Hepatitis B no derivada de humanos.

Vacunas con virus vivos atenuados:

Rubéola.

Sarampión.

Paperas.

Fiebre amarilla.

Influenza.

Polio.

Vacunas con microorganismos muertos:

Cólera.

Difteria.

Haemophilusinfluenzae.

Polio.

Tétanos.

Tifoidea.

Tifo.

Inmunoglobulinas.

BCG.

Gammaglobulina especifica anti HBV.

12 Meses

No diferir

2 semanas

2 semanas

2 semanas

2 semanas

2 semanas

2 semanas

No diferir

No diferir

No diferir

No diferir

No diferir

No diferir

No diferir

No diferir

4 semanas

12 meses



d. Terapia con Hemoderivados:Ya que la sangre implica un riesgo de transmisión de

enfermedades infecciosas, los individuos que han recibido transfusiones de sangre total o

derivados plasmáticos deben ser diferidos como donantes por un tiempo no menor de un

año.



e. Enfermedades Infecciosas:El objetivo principal de la selección de donantes es disminuir el

riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas tanto como sea posible. Para

conseguir este objetivo es necesario interrogar al posible donante sobre las

enfermedades infecciosas que ha padecido o padece actualmente. De la misma forma se

debe averiguar si el donante ha estado en contacto íntimo con personas que padezcan o

que tengan alto riesgo de sufrir enfermedades infecciosas, o si ha viajado o procede de

zonas endémicas para algún microorganismo en particular.

ENFERMEDAD INFECCIOSA-RIESGO TIEMPO A DIFERIR

Hepatitis viral.

Ictericia de causa desconocida.

Infección por HIV, HTLV I/II, HCV.

Infección por citomegalovirus.

Dengue.

Gripe o virosis común.

Sífilis o gonorrea.

Infecciones bacterianas.

Blastomicosis.

Histoplasmosis.

Babesiosis y Chagas.

Leishmaniasis.

Toxoplasmosis.

Malaria.

Malaria por especia Malarie.

Relación íntima con persona seropositiva para HIV.

Relación íntima con persona positiva para hepatitis.

Relaciones sexuales con prostitutas.

Víctima de violación.

Tatuajes, acupuntura, perforación de orejas.

Inmigrantes de Haití y África.

Homosexuales.

Transfusión de sangre o componentes.

Internos de instituciones penitenciarias.

Inoculación accidental con sangre o fluidos corporales.

Viajeros a zonas endémicas de malaria.

Definitivamente

Definitivamente

Definitivamente

2 años

6 meses

1 semana

12 meses

Hasta su curación

Definitivamente

12 meses

Definitivamente

Definitivamente

2 años

3 años

Definitivamente

Definitivamente

Definitivamente

12 meses

12 meses

12 meses

Definitivamente

Definitivamente

12 meses

Definitivamente

12 meses

6 meses



ENFERMEDAD INFECCIOSA-RIESGO TIEMPO A DIFERIR

Originario de zonas endémica de malaria.

Originario de zona endémica de chagas.

Adictos a drogas intravenosas.

Familiares que conviven con pacientes de hemodíalisis.

Más de un compañero (a) sexual al año.

Bisexuales.

3 años

Definitivamente

Definitivamente

Definitivamente

Definitivamente

Definitivamente



f. Estilo de Vida: Es importante que el estilo de vida delapersona sea investigado ya que con

la indagación se puede emitir juicios de valor sobre si se acepta o aplazar al donante.

Cuando se averigua sobre el estilo de vida, se está en cierta forma invadiendo su

privacidad, y en tal sentido la persona tiene el derecho constitucional de no responder a

las preguntas que se le expongan. Habitualmente se pregunta sobre el abuso del alcohol y

las drogas, así como por los hábitos sexuales.

En cuanto a los hábitos sexuales, se debe interrogar sobre el número de compañeros (as)

sexuales al año, homosexualismo, bisexualismo y relaciones sexuales frecuentes con

prostitutas. Se debe interrogar sobre las enfermedades de transmisión sexual como la

sífilis, la gonorrea y el Sida entre otros. Las preguntas deben ser bien elaboradas y se le

debe dar a la persona la seguridad de que la información que suministre es de carácter

confidencial. Legalmente la persona puede rehusarse a contestar las preguntas, en tal

caso, es conveniente diferirlo poniéndole de manifiesto que sin llenar este requisito no

puede ser aceptado como donante.

3.4. INFORMACIÓN QUE DEBE PROVEER EL DONANTE DE SANGRE

La información que suministra el donante al banco de sangre es variada. Incluye desde los

resultados de las pruebas de laboratorio hasta la información confidencial acerca de la vida

privada del individuo. Esta información se obtiene a través de la realización de la historia clínica

del donante.

Para elaborar la historia clínica del donante se deben ejecutar dos pasos específicos:



A) Entrevista del Donante

Aunque en el examen físico se realizan preguntas claves al posible donante, es necesario

realizar una entrevista al donante y la información quede consignada en la historia clínica.

En la historia clínica pueden quedar registrados los resultados del examen físico así como

las respuestas que el donante dé a las diferentes interrogantes.

Básicamente la información que proporciona el donante es:

� Edad.

� Sexo.

� Nombres y apellidos.

� Dirección y teléfono de residencia y/u oficina.

� Antecedentes de donaciones anteriores.

� Antecedentes transfusionales.

� Antecedentes obstétricos.

� Antecedentes de inmunizaciones y vacunas.

� Antecedentes de enfermedades infecciosas.

� Raza.

� Procedencia.

� Ocupación.

� Escolaridad.

� Tipo de donación: si es dirigida, condicionada, autóloga.

� Estilo de vida.

B) Examen Físico del Donante

El examen físico del donante se lo debe realizar en el banco de sangre el médico presente

o en su defecto una enfermera o el analista.

� Observar la apariencia general del donante.

� Determinar la tensión arterial.



� Determinar el pulso.

� Determinar la temperatura oral.

� Determinar el peso.

� Determinar valores de hemoglobina y/o hematocrito.

� Interrogar sobre enfermedades graves que padezca o haya padecido el donante.

� Interrogar sobre terapia con medicamentos.

� Examinar el sitio de venopunción para descartar lesiones que indiquen abuso de

drogas intravenosas.

� Interrogar sobre tatuajes, acupuntura o perforaciones para aretes o pendientes.

Una vez que se le ha realizado la entrevista y el examen físico al posible donante, el

profesional de la elección decidirá de acuerdo con los resultados y respuestas obtenidas si

el individuo es aceptado como donante, se lo difiere por un tiempo determinado o se

rechaza definitivamente.

Si la persona es aceptada como donante; es obligación del bando de sangre suministrarle

información básica sobre el procedimiento de obtención de la sangre entre otros

aspectos.

3.5. REACCIONES A LA DONACIÓN DE SANGRE

Cuando la donación de sangre se realiza en personas de peso adecuado y en buenas condiciones

de salud, las reacciones adversas a la donación son muy escasas. Su frecuencia es

aproximadamente de 1% y generalmente se presentan en personas de bajo peso, en quienes la

cantidad estándar de sangre extraída representa una significativa proporción de su volemia

(volumen total de sangre circulante de un individuo humano, que es de aproximadamente de 5-6

litros en varones y en las mujeres de 4 a 5).

La reacción más común es la lipotimia (algunos de los síntomas frecuentes son vértigo, cansancio,

palidez, cefalea, trastornos visuales, sudoración excesiva, y ocasionalmente dolor estomacal),

causada por una respuesta neurofisiológica a la pérdida de sangre, agravada por factores de tipo

psíquico.



El componente psicológico está claramente demostrado en aquellas personas que se marean o

desmayan a la sola vista de la sangre y puede ser contagioso cuando ocurre en donaciones

masivas. El desmayo es frecuente también en personas quienes donan por primera vez.Es

conveniente estar alerta a cualquier síntoma asociado a una reacción adversa en el donante y

mantener en el banco de sangre un equipo de emergencia para sortear cualquier eventualidad de

este tipo.

El equipo mínimo de emergencia que se debe mantener en un banco de sangre puede observarse

en el cuadro.

EQUIPOS Y MATERIALES MEDICAMENTOS

Equipo de oxígeno.

Equipo de intubación orofaringea.

Equipos de administración de líquidos endovenosos.

Jeringas con agujas de diferentes calibres.

Bolsas de papel para los casos de hiperventilación.

Toallas.

Equipo de cirugía menor cuando no se dispone de salas

de cirugía en el hospital.

Solución salina fisiológica.

Soluciones glucofisiológicas.

Drogas:

Vasopresoras.

Vasodilatadores coronarios.

Anticonvulsionantes.

Broncodilatadores.

Antiheméticos.

Sedantes.



Los síntomas más frecuentes son: Mareo, agotamiento, palidez, arcadas, sudoración y vómito. En

otras ocasiones el donante puede llegar a desmayarse y sufrir convulsiones.

Las reacciones adversas más frecuentes asociadas a la donación de sangre pueden observarse en

el cuadro.

REACCIÓN ADVERSA MODO DE PREVENIRLA

Síncope vasovagal.

Incluye síntomas:

Palidez, sudoración, piel fría.

Visión borrosa, mareos, náuseas.

Vómitos, perdida de la conciencia.

Mejorar las condiciones del donante en cuanto a stress

emocional y ansiedad. Antes de la donación interrogar sobre

si el donante ha comido algo y ha dormido por lo menos

cuatro horas.

Distraer al donante con charla amistosa, revistas, música, tv.



REACCIÓN ADVERSA MODO DE PREVENIRLA

Hiperventilación. Invite al donante a respirar en una bolsa de papel y a que

mejore su frecuencia respiratoria.



El procedimiento ante cualquier síntoma o signo de reacción adversa a la donación de sangre es

como sigue:

a) Detener la donación retirando inmediatamente el torniquete y el equipo de flebotomía al

donante.

b) Adecuar la posición del donante de tal modo que los pies queden elevados y la cabeza

baja.

c) Aflojar las ropas del donante.

d) Verificar que respire adecuadamente, sugerir que no se hiperventile.

e) Si el donante se está hiperventilando, colóquelo a respirar en una bolsa de papel, esto

evitará que pierda CO2 y que ocurran contracciones musculares o espasmos tetánicos.

f) Tomar los signos vitales (tensión arterial, frecuencia cardíaca) periódicamente hasta que

el donante se recupere.

g) En caso de convulsiones, evitar que la persona se lastime.

h) En caso de náuseas, indicar que respire profundamente.

i) Si los síntomas persisten o son severos, es conveniente que la persona sea atendida por el

médico del servicio.

Hay que recordar que una de las funciones del banco de sangre es lograr que el donante regrese,

por este motivo se debe minimizar en lo posible las reacciones adversas en el donante.Para evitar

que se generen las reacciones adversas durante la donación se necesita en gran medida que el

ambiente del área de donación sea agradable y ventilado, que el personal seasimpático y cortés,

que el donante consiga ser distraído con elementos como música, televisión o conversaciones

agradables.Es necesario diferir a los donantes que manifiesten preocupación, fatiga o excesivo

nerviosismo, ya que es un aspirante a presentar una reacción post-donación y esto puede

contribuir a que otros donantes deserten de su intento de donar.



3.6. RECOLECCIÓN DE SANGRE PARA TRANSFUSIONES

3.6.1. ÁREA DE DONACIÓN

Se recomienda que el área de donación en un banco de sangre debe estar ubicada en el primer

piso del hospital y de preferencia debe tener acceso directo desde la calle.

Ésta área debe permanecer limpia, bien iluminada y cómodamente ventilada. El personal que se

ocupa en el área de donación de sangre debe estar bien calificado, debe ser amable y brindar la

suficiente seguridad y confianza de tal manera que la donación se convierta en una experiencia

satisfactoria y agradable.

En el área de donación deben existir por lo menos tres ambientes bien diferenciados para poder

brindar comodidad y privacidad al donante:

� Recepción del Donante: En este el donante espera ser atendido y recibe información

sobre algunos aspectos básicos de la donación.

� Área de Chequeo Médico: Puede ser un consultorio donde el médico, en su defecto la

enfermera o el laboratorista realiza el examen físico y la historia clínica del donante.

� Área de Flebotomía o Sangría: En este ambiente es donde se realiza la extracción de la

Sangre y se toman las muestras adicionales para la realización de las pruebas

pretransfusionales.

No es bueno que los donantes que esperan ser atendidos vean el proceso de extracción ya que

para algunas personas esto puede ser un motivo de deserción.

3.6.2. EQUIPOS Y MATERIALES NECESARIOS EN LA SALA DE DONACIÓN

El equipo que se emplea para la obtención de la sangre debe estar bien organizado para que

certifique un procedimiento seguro y eficiente.

� Camillas o sillas para donación.

� Balanzas.



� Tensiómetro.

� Estetoscopio.

� Tijeras.

� Pinzas mezcladoras y hemostáticas.

� Torniquetes.

� Guantes.

� Tubos de 13x100mm.

� Sistema cerrado de bolsas para extraer sangre.

� Gasas o torundas de algodón estériles.

� Esparadrapo.

� Jabón quirúrgico.

� Jabón yodado.

� Alcohol al 70%.

� Botiquín de primeros auxilios y elementos para reanimación.

3.6.3. PREPARACIÓN DE LA PUNCIÓN VENOSA

A. Preparación de la punción venosa: Visualmente se selecciona una vena firme y grande en

una zona de piel libre de lesiones, para lo cual se recomienda:

� Inspeccionar ambos brazos usando el torniquete o inflando el mango de presión

sanguínea entre 40 a 60mmHg.

� Marcar la vena más prominente. (Es útil pedir al donante que cierre y abra la mano

algunas veces).

� Retirar el torniquete y preparar el sitio de la punción.

B. Identificar la bolsa para la extracción de sangre y los tubos para las pruebas

pretransfusionales a utilizar con el número de registro del donante o con un código de

barras si dispone de equipos automatizados.

C. Invitar al donante a la camilla o silla de donación de tal modo que se sienta cómodo y

relajado.

D. Inspeccionar el sitio de venopunción (antebrazo) y elegir una vena de buen calibre.

E. Limpiar la piel del sitio de venopunción utilizando para ello jabón quirúrgico, luego jabón

yodado y por último alcohol al 70%. La limpieza debe hacerse en una área de 4-5 cm con

movimientos circulares de adentro hacia afuera y utilizando pinzas y gasas o torundas de



algodón estériles. Una vez limpio el sitio no puede volver a palparse la vena. Si la punción

no va a realizarse inmediatamente cubrir el área desinfectada con una gasa estéril.

F. Colocar el torniquete para lograr una buena presión en la vena e indicar al donante a que

abra y cierre al mano continuamente a proporcionarle una pelota de goma para que

realice el ejercicio.

G. Tomar la bolsa de plástico elegida e identificada en el paso N°1 y retirar el aditamento

que cubre la aguja. Es conveniente antes de realizar este paso sellar el conducto de la

bolsa con una pinza hemostática para evitar que penetre aire. Hacer la punción

inmediatamente, la punción debe ser limpia (en el primer intento) para evitar la

formación de coágulos.

H. Fijar la aguja a la piel del donante con un esparadrapo.

I. Retirar la pinza hemostática que se coloco en el paso N°6 para que la sangre comience a

fluir al interior de la bolsa. Mezclar suavemente los primeros mililitros de sangre con el

anticoagulante.

J. Colocar la bolsa en la balanza. Estas balanzas detienen el flujo de sangre cuando se ha

recolectado la cantidad preestablecida. Durante el proceso de llenado de la bolsa, agitar

(suavemente) varias veces el contenido para asegurar una buena mezcla del

anticoagulante con la sangre.

K. Una vez que se ha llenado la bolsa, sellar el conducto con un nudo o una grapa a una

distancia de 7-10cm por debajo de la aguja.

L. Colocar una pinza hemostática a unos 2cm de la grapa o nudo y cortar el conducto entre

ellos, liberando de esta manera la unidad de sangre del brazo del donante.

M. Cortar el conducto ente el nudo o grapa y la pinza hemostática.

N. Llenar los tubos (13x100mm) para la prueba pretransfusionales con sangre del donante

abriendo la pinza hemostática. Una vez llenos los tubos volver a cerrar la pinza par que el

flujo de sangre se detenga.

O. Retirar el torniquete.

P. Retirar la aguja y colocar en el sitio una gasa o torunda estéril. Hacer que el donante

presione por algunos minutos el sitio de punción.

Q. Con una pinza mezcladora, “exprimir” hacia la bolsa la sangre que se encuentra en el

conducto. Repetir la operación 3-4 veces hasta que la sangre se halla mezclado con el

anticoagulante.



R. Llevar la sangre inmediatamente a la sección de separación de componentes y los tubos

para las pruebas pretransfusionales a la sección de inmunohematología.

S. Registre cualquier evento anormal en la historia clínica del donante.

3.7. PREPARACIÓN DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

El donante de los sistemas de bolsas plásticas para la recolección y de aparatos de centrifugación

de alta velocidad ha permitido que la sangre pueda ser separada en sus diferentes componentes:

� Glóbulos Rojos.

� Plaquetas.

� Leucocitos.

� Plasma.

� Crioprecipitado de factor VIII y Fibrinógeno.

Para la separación de los componentes sanguíneos es necesario disponer de:

� Un área limpia y bien iluminada.

� Centrifuga refrigerada.

� Balanza.

� Material de goma para equilibrar las copas.

� Bolsas de recolección de sangre conectadas en

circuito cerrado y bolsas de transferencia.

� Extractor de plasma.

� Pinzas hemostáticas.

� Pinzas exprimidoras.

� Tijeras.

� Sellador eléctrico o grapas metálicas.

� Etiquetas e identificación de los

diversos componentes.



3.7.1. PREPARACIÓN DE CONCENTRADOS DE GLÓBULOS ROJOS

“Los concentrados de glóbulos rojos se preparan a partir de sangre total, bien sea por

centrifugación inmediata después de donada o por sedimentación después de 24 a 48 horas de

almacenada a 1-6°C.Para preparar concentrados de glóbulos rojos es conveniente que la sangre

sea extraída mínimo en bolsas plásticas dobles, lo que permite realizar la separación de los

eritrocitos dentro de un sistema cerrado”.(15)

Si la sangre que se va a utilizar para este procedimiento es fresca (no más de 4 a 6 horas de

donada), el plasma puede ser congelado a -18°C o menos, obteniéndose como subproducto el

plasma fresco congelado (PFC).

Los concentrados de hematíes deben almacenarse en neveras a temperatura entre 1-6°C.

La fecha de expiración del concentrado globular es de 35 días cuando el anticoagulante usado es

CPDA-1, siempre y cuando el sistema cerrado no haya sido quebrantado y el hematocrito no

sobrepase del 80%.

Si el hematocrito es superior a 80%, los glóbulos rojos se envejecen en forma acelerada y

sobreviven pobremente en la circulación una vez transfundidos. Este factor se puede controlar

midiendo el hematocrito de las unidades que van a ser descartadas por cualquier razón.Si la

separación del plasma se hace en circuito abierto, los glóbulos rojos deben transfundirse en un

tiempo no mayor de 24 horas. Cumplido ese período, deben ser descartados.

3.7.1.1. Técnica de Preparación

a. Centrifugar la unidad de sangre a 4.200-5.000 rpm por 5 minutos. La centrifuga debe estar

a 4-5°C, excepto cuando se desee obtener plaquetas como producto secundario.

b. Colocar cuidadosamente la unidad de sangre centrifugada en el extractor de plasma de tal

modo que no se altere la interfase eritrocitos-plasma.





c. Si la sangre fue colectada en bolsa doble, romper el sello de la bolsa primaria de tal forma

que el plasma fluya a la unidad satélite. Si fue colectada en bolsa triple o cuádruple, selle

con un nudo las bolsas restantes de tal suerte que quede una disponible para recibir el

plasma. Si la sangre fue colectada en bolsa sencilla retirar el plasma usando una bolsa de

transferencia. En este caso el sistema cerrado es violado y el concentrado de hematíes

debe transfundirse en las siguientes 24 horas. El hematocrito final del concentrado de

glóbulos rojos debe estar entre 70 y 80%, esto se logra extrayendo de la unidad primaria

225 a 250ml de plasma. Es conveniente utilizar balanzas calibradas para medir la cantidad

de plasma extraído, tomando con referencia que 1ml de plasma pesa aproximadamente

1,03 gramos.

d. Una vez extraído la cantidad adecuada de plasma, suspender el flujo haciendo un nudo o

colocando una grapa o pinza hemostática en el tubo piloto que comunica ambas bolsas.

e. Sellar el tubo piloto en dos o tres sitios cercanos, preferiblemente con un sellador

eléctrico. Si no se dispone de sellador eléctrico utilizar grapas metálicas.

f. Con una tijera hacer un corte en uno de los espacios sellados para separar la bolsa

primaria de la satélite.

3.7.2. PREPARACIÓN DE CONCENTRADOS DE PLAQUETAS

Para la preparación de concentrados de plaquetas a partir de sangre completa, ésta no debe

exceder las 8 horas desde la donación y debe permanecer a 20-24°C hasta que las plaquetas

hayan sido obtenidas.

Los concentrados de plaquetas pueden prepararse mediante dos fases de centrifugación a 22-

24°C. En la primera fase de centrifugación, a baja velocidad produce el plasma rico en plaquetas

(P.R.P.).

Posteriormente el plasma rico en plaquetas se somete a la segunda fase de centrifugación, a alta

velocidad con el fin de producir un concentrado de plaquetas más unidad de plasma pobre en

plaquetas (P.P.P), por lo que la segunda centrifugación, se realiza a mayor tiempo pero a menor

velocidad para no dañar las plaquetas (3.300rpm x 20 minutos).



Una vez conseguido el concentrado plaquetario, la bolsa debe permanecer en completo

reposospor 1-2 horas a temperatura del laboratorio (20-24°C), y sólo en aquel momento la masa

plaquetaria debe ser resuspendida en el plasma residual por inversión suave y delicada, hasta que

la suspensión sea homogénea. En ningún instante las plaquetas deben ser manipuladas con

violencia, ya que produciría elrompimiento de los grumos, lo que conduce al consiguiente daño.

La fecha de expedición de la unidad de plaquetas depende del tipo de plástico de la bolsa que las

contiene. El plástico de que están fabricadas las bolsas debe ser permeable al oxígeno. Las bolsas

plásticas de primera generación (poco permeables), permiten un almacenamiento de los

concentrados de plaquetas por un período de 72 horas.

Por su parte, las bolsas de de segunda generación de poliolefina o de cloruro de polivinilo,

permiten por el tipo de plástico, el grosor del mismo y la mayor superficie de intercambio de

gases, un tiempo de almacenamiento de los concentrados de plaquetas hasta de 5 días.


A) La sangre debe ser colectada en sistemas cerrados de bolsas plásticas, preferiblemente

bolsas triples o cuádruples.

B) Centrifugar la unidad de sangre en el menor tiempo posible después de haber sido

donada. La centrífuga debe estar a temperatura de 22-24°C. aunque existen diferentes

protocolos de centrifugación, se sugiere que se realice entre 1.800 a 2.500 rpm por un

tiempo comprendido entre 5 y 8 minutos.

C) Colocar cuidadosamente la unidad de sangre centrifugada en el extractor de plasma de tal

manera que no se altere la interfase paquete globular-plasma.

D) Hacer un nudo o poner una grapa metálica en todos los conductos que comunican las

bolsas satélites con la principal, excepto en uno de ellos, de tal modo que quede una

bolsa satélite disponible para recibir el plasma rico en plaquetas (PRP).

E) Romper el sello de la bolsa primaria para que el PRP comience a fluir al interior de la bolsa

satélite destinada para ello.

F) Sellar y cortar el conducto que comunica la bolsa primaria con las satélites, rotular el

concentrado de glóbulos rojos y almacenarlo a 1-6°C.



G) Centrifugar el PRP a 22-24°C a mayor velocidad. Se recomienda 3.600 a 4.000 rpm por un

tiempo de 8 a 10 minutos.

H) Después de la segunda fase de centrifugación, colocar cuidadosamente la bolsa que

contiene las plaquetas en el extractor de plasma.

I) Aflojar el nudo o quitar la grapa del conducto que comunica las bolsas satélites y

transferir el plasma a una de ellas. Dejar en la bolsa que contiene las plaquetas un

volumen de 50 a 60 ml de plasma.

J) Sellar y cortar el conducto que comunica la unidad de plaquetas con la satélite, rotular

adecuadamente marcando el tipo de producto, la fecha y hora de preparación, al igual

que la fecha y hora de vencimiento. La unidad satélite que contiene el plasma puede ser

congelada inmediatamente a -18°C ó -30°C para la obtención de plasma fresco congelado.

K) Dejar reposar e concentrado de plaquetas sobre un mesón (la etiqueta de la unidad hacia

abajo) por 1-2 horas antes de almacenarlas en los equipos especiales de rotación de

plaquetas.

3.7.3. PREPARACIÓN DE PLASMA FRESCO CONGELADO

El plasma fresco congelado (PFC) resulta como subproducto de la preparación del concentrado de

hematíes o de las plaquetas.

El PFC se prepara a partir de sangre completa. Su preparación y posterior congelación debe

realizarse antes que la unidad de sangre complete 6 horas de haber sido recolectada, y su

congelación y almacenamiento se realiza a -18 ó -30°C. El período de almacenamiento es de un

año sin que pierda sus propiedades terapéuticas.

Para ser transfundido, el PFC debe ser descongelado entre 35 y 37°C y conservarseposteriormente

bajo refrigeración (1-6°C) hasta el momento de la transfusión.Una vez descongelado, el plasma

mantiene sus propiedades hasta por 24 horas bajo refrigeración indicada. Si el plasma no es

transfundido en ese tiempo, no debe volver a congelarse.

Los dispositivos de plasma fresco congelado que se preparen deben permanecer correctamente

identificadas con etiquetas que mencionen el tipo de producto, su fecha de preparación y

vencimiento, el grupo sanguíneo ABO y Rh, y el registro del donante a que pertenece.



Una unidad de plasma debe tener un peso bruto (bolsa y pilotos) de 236 a 288 gramos, lo que

equivale a un volumen de plasma de 200 a 250ml.


a) Recolectar la sangre en bolsas dobles o triples.

b) Centrifugar entre 1° a 6°C por 5 minutos.

c) Pasar a la bolsa satélite 225ml de plasma (232g). Usar una balanza para determinar la

cantidad precisa.

d) Sellar el tubo de transferencia en varios segmentos hasta la base de la bolsa, respetando

el número serial.

e) Identificar la unidad de plasma con la siguiente información:

� Volumen de plasma.

� Grupo ABO y Rh.

� Investigación de anticuerpos irregulares.

� Resultado de las pruebas para HBsAg, Chagas, SIDA, Sífilis, fecha de extracción y

expiración.

f) Cortar el tubo de transferencia entre dos puntos sellados. El tubo dividido en segmentos

debe enrollarse y fijarse a la unidad de plasma, los cuales pueden ser útiles par controles

posteriores que se deseen practicar.

g) Congelar inmediatamente según se especificó, asegurándose de que la congelación se

produjo dentro de las 6 horas de extraída la sangre.

3.7.4. PREPARACIÓN DE CRIOPRECIPITADO

El crioprecipitado se puede preparar del PFC en cualquier momento de su conservación, pero su

vencimiento será al término de los 12 meses desde del momento en que se efectuó la recolección

de la sangre.Cuando el PFC se descongela entre 1 a 6°C, se obtiene un precipitado de color

blanquecino, este precipitado está conformado por algunas proteínas plasmáticas que por acción

del frió precipitan.

Los estándares internacionales especifican que cada unidad de crioprecipitado obtenida a partir

de sangre total debe contener las siguientes cantidades de las proteínas que la integran:



Factor VIII o o factor antihemofílico (FAH)

Factor de Von Willebrand

Fibrinógeno

Factor XIII

80-100 IU

40-70 % del presente en la unidad de sangre

100-350 mg

20-30 % del presente en la unidad de sangre

Se ha encontrado que los plasmas de grupo A, B o AB dan mejor rendimiento de Factor VIII que

aquellos de grupo O. Puede ser obtenido de sangre recolectada en ACD, CPD y CPDA-1, pero se ha

observado que le ACD permite recuperar mayor cantidad de Factor VIII que los otros

anticoagulantes.

“Es conveniente señalar que la temperatura del plasma descongelado no debe ser superior a 2°C,

de lo contrario se perderá una cantidad importante de Factor VIII en el líquido sobrenadante,

porque éste se disuelve. Por esta razón el procedimiento debe realizarse rápidamente para

obtener el mayor rendimiento.Es beneficioso que el crioprecipitado sea congelado antes que

transcurra una hora de haberse descongelado completamente la unidad de plasma de la cual se

obtuvo”.(16)

Para ser transfundido, el crioprecipitado debe ser descongelado a 35-37°C en bañomaría,

cuidando que no se contaminen con el agua del baño. Una vez descongelado, debe conservarse a

temperatura ambiente y ser transfundido antes que transcurran 4-6 horas. Si el crioprecipitado

descongelado no es transfundido, no debe volverse a congelar.


A. La unidad de sangre debe ser obtenida en bolsa triple a través de una adecuada técnica

de flebotomía.

B. Centrifugar la unidad de sangre a 4.200-5.000 rpm por 5-8 minutos antes que transcurran

6 horas de haberse practicado la flebotomía. La centrífuga deberá estar a 4°C.

C. Colocar la unidad de sangre centrifugada en el extractor de plasma cuidando de no

mezclarla. Hacer un nudo o sellar con una grapa metálica el conducto de una de las bolsas

satélites de tal modo que quede la otra disponible para recibir el plasma.





D. Transferir el plasma a la unidad satélite elegida. La cantidad de plasma a transferir es

como mínimo 200 ml (206g), cuidando en todo caso que la unidad de glóbulos rojos

quede con un hematocrito del 70-80%.

E. Sellar el tubo piloto que comunica la unidad principal con las satélites, cortar por uno de

los sellos y refrigerar el concentrado de hematíes entre 1-6°C.

F. Congelar rápidamente las bolsas satélites (una de las cuales contendrá el plasma

obtenido) a -18°C o menos. Dado que el plasma deberá estar congelado en un tiempo de

una hora como máximo después de iniciada la congelación, es conveniente utilizar

congeladores de -30 ó -70°C. la congelación del plasma debe completarse antes que

transcurran 6 horas de haberse obtenido la unidad de sangre total.

G. Descongelar la unidad así tratada en el refrigerador (1-6°C). El proceso de descongelación

tarda aproximadamente 14 a 18 horas. El tiempo preciso para concentrar las proteínas

precipitadas es cuando en la unidad de plasma aún se observen pequeños cristales de

hielo. Una demora entre el descongelamiento del plasma y su posterior centrifugación

para concentrar las proteínas precipitadas puede producir una pérdida de la actividad del

factor antihemofílico.

H. Centrifugar rápidamente el plasma descongelado a 5.000 rpm durante 5-8minutos. La

centrífuga deberá estar a 4°C. Este procedimiento hará que las proteínas precipitadas por

el frío, se adhieran al fondo de la bolsa.

I. Colocar la bolsa que contiene el crioprecipitado sobre una superficie plana, o en forma

invertida o en el extractor de plasma y transferir todo el plasma excepto 15 a 30ml a la

otra bolsa satélite. Este plasma que se transfiere a la otra bolsa satélite es el plasma

simple.

J. Sellar el tubo piloto que comunica ambas bolsas, cortar por uno de los sellos y congelar

rápidamente el crioprecipitado (debidamente etiquetado) a -18°C o menos,

(preferiblemente a -30 ó -70°C).

3.7.5. PREPARACIÓN DE PLASMA SIMPLE

Es el plasma residual que queda después que se le ha extraído el Factor VIII; contiene albúmina,

globulinas y otros factores de coagulación a excepción de los Factores VIII, von Willebrand y

Fibrinógeno.De igual manera, se puede prepara a partir de sangre total en cualquier instante de

su almacenamiento, hasta el quinto día antes de la fecha de vencimiento.



El plasma simple se debe conservar bajo refrigeración (1-6°C) o en congelación a -18°C

adecuadamente etiquetado para no ser confundido con el plasma fresco congelado.

Puede ser usado para resuspender los glóbulos rojos y producir sangre completa. El producto

restante se ha denominado “sangre completa modificada”. En realidad, este producto cumple las

mismas funciones que la sangre completa conservada en el refrigerador por más de 48 horas, en

la cual, no hay plaquetas funcionales y el nivel de Factor VIII es muy pobre.

La mejor forma de usar el plasma simple es adicionarlo a los glóbulos rojos cuando existe la

solicitud de sangre completa, teniendo siempre la precaución de que el plasma sea isogrupo con

los glóbulos rojos, de lo contrario éstos se hemolizarán.

La fecha de vencimiento es la misma de la unidad de sangre total de la cual se consiguió.

Actualmente lo bancos de sangre preparan y guardan poca cantidad de este hemoderivado.

3.8. CONSERVACIÓN DE SANGRE COMPLETA Y GLÓBULOS ROJOS

“La integridad de los glóbulos rojos ha sido por mucho tiempo el motivo principal de la

preservación de la sangre, sin que ello haya significado el restarle importancia a los otros

constituyentes. Es esencial señalar que el depósito adecuado de los glóbulos rojos está

directamente relacionado con su metabolismo, su función en el transporte de oxígeno y su

sobrevida después de transfundidos. Los métodos de preservación requieren de la adición de

sustancias químicas, las cuales permiten conservar o mantener algunas de sus funciones”.(17)

El glóbulo rojo es una célula sin núcleo que no se divide y en efecto no puede sintetizar ácidos

nucléicos, proteínas, ni lípidos, pero, mantiene activo el metabolismo de la glucosa, el cual

suministra la energía suficiente para realizar funciones esenciales para:

a. El cambio de gases (O2 – CO2).

b. Conservar la forma y la integridad de la membrana.





c. Preservar la hemoglobina bajo la forma reducida.

d. El transporte de los iones a través de la membrana.

El glóbulo rojo maduro tiene un sistema enzimático bien desarrollado que le permite utilizar la

glucosa como fuente de energía necesaria para su funcionamiento. Contiene también,

compuestos como nucleótidos, entre los que se encuentran bases púricas y pirimídicas

combinadas con fosfatos y ribosas.

El más significativo de estos nucleótidos es el ATP, que se genera por el metabolismo de la glucosa

y tiene como función el mantener la integridad de la membrana y de esta forma, certificar la

sobrevida del glóbulo rojo. En el glóbulo rojo, el metabolismo de la glucosa se realiza casi en su

totalidad por la vía anaeróbica o de Embden-Meyerhof, el cual la convierte en piruvato o lactato.

Del metabolismo de cada molécula de glucosa se generan dos moléculas de adenosintrifosfato

(ATP), dos de ácido láctico y además, 2,3, difosfoglicerato (2,3,DPG).

Una pequeña parte de la glucosa es metabolizada a través de la vía pentosa-fosfato, que requiere

de oxígeno. Aquí la glucosa es transformada en CO2, con la generación de una coenzima

denominada nicotinamida adenina dinucleótido fosfato(NADPH). Este agregado es importante

para conservar la hemoglobina en la forma reducida y proteger los eritrocitos contra la acción

oxidante de una variedad de drogas.

Existe una estrecha interrelación entre el metabolismo de la glucosa, la producción de ATP y la

energía necesaria para mantener la viabilidad del glóbulo rojo. Por estas razones, su preservación

debe ser hecha en un medio que leproporcione suficiente glucosa como fuente energética y

prevenir todos los factores que obstruyen en el metabolismo glicolítico, con el fin de impedir el

deterioro durante el depósito y asegurar su viabilidad una vez transfundidos.

3.9. REFRIGERACIÓN DE LA SANGRE

Es primordialindicar que la temperatura de conservación juega un papel importante en el

mantenimiento del delicado balance bioquímico del eritrocito, ya que ejerce un efecto inhibitorio

sobre ciertas enzimas, vigilando de esta forma el metabolismo de la glucosa.



Por otro lado, la refrigeración adecuada disminuye la difusión de bacterias que podrían haber

ingresado en la unidad durante la punción venosa.

“La sangre completa y los glóbulos rojos deben ser depositados únicamente en refrigeradores

especialmente diseñados para este fin. La temperatura óptima para su adecuada conservación

oscila entre 1°C y 6°C, la cual debe ser mantenida en toda las áreas del refrigerador, aceptándose

fluctuaciones no mayores de 2°C dentro de estos dos extremos. Estos aparatos emplean el

sistema de ventilación y tienen espacios de circulación que permiten mantener la temperatura

dentro de los límites señalados en todas las áreas. Además, deben estar provistos de

termómetros y alarmas audiovisuales, así como de un sistema de registro permanente de

temperatura. El termómetro sensor del sistema de registro y el de la alarma audiovisual deben

estar colocados en un envase plástico que contenga una mezcla de glicerol al 10% en agua

destilada.” (18)

Cuando se produce algún cambio de temperatura fuera del rango de 1° a 6°C las alarmas deben

activarse automáticamente. La fuerza eléctrica para el sistema de alarmas debe estar separada de

la del refrigerador.

Se considera necesario utilizar además dos termómetros del tipo mercurio, los cuales se colocan

en envases plásticos que contengan entre 350 a 500ml de solución de glicerol/agua destilada al

10%. Uno de ellos, se coloca en la parte superior y el otro en la parte inferior del refrigerador; la

temperatura en ellos no debe variar en más de 2°C y deben ser controlados periódicamente.

Interiormente el aparato debe conservarse muy limpio y bien iluminado para facilitar la

observación de la sangre, de los termómetros y del sistema de refrigeración. Dentro del

refrigerador sólo puede guardarse la sangre donada, reactivos celulares empleados para la

clasificación y muestras de sangre provenientes de donante y receptores, que deben estar bien

tapadas e identificadas. Las superficies de los refrigeradores deben ser limpiadas regularmente

con soluciones germicidas. Para ello pueden emplearse compuestos fenólicos.





La sangre no debe mantenerse fuera del refrigerador innecesariamente y cuando por razones

específicas haya que hacerlo, junto con la unidad de sangre es necesario sacar uno de los

termómetros, con el fin de controlar las variaciones de temperatura. Cuandola temperatura en el

termómetro haya subido a 6°C, la sangre debe retornarse al refrigerador rápidamente.

No debe dejarse abierta la puerta del refrigerador, pues estanegligencia acarrea cambios bruscos

en la temperatura.En cuanto al espacio, el refrigerador debe estar dividido en áreas claramente

señaladas para colocar la sangre:

� Sangre no-clasificada.

� Sangre clasificada.

� Sangre en observación o cuarentena, que es aquella que ha sido regresada porque no fue

usada, o bien, sangre que muestra alteraciones en el plasma que sugieren hemólisis,

contaminación, etc.

3.10. CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE LAS PLAQUETAS

Durante los últimos años ha surgido un gran interés en el desarrollo de métodos para la

conservación de plaquetas, tanto en estado líquido como congeladas. Esta situación refleja la

necesidad de mantener un depósito suficiente de plaqueta para cubrir las crecientes demandas

clínicas.

En la medida en que se ha conocido mejor la estructura de las plaquetas y las condiciones que

inducen a cambios en su morfología, viabilidad y función, se han desarrollado procedimientos de

conservación y se han ido definiendo los parámetros que interfieren en el mantenimiento de las

características vitales de las plaquetas durante su depósito.

En la conservación de plaquetas hay dos aspectos de gran importancia que deben ser tomados en

cuenta:

� Su sobrevida después de ser transfundidas.

� La actividad hemostática, medida por su capacidad para acortar el tiempo de sangría en el

paciente trombocitopénico.



“Los estándares de la Asociación Americana de Bancos de Sangre recomiendan que se deban

hacer todos los esfuerzos para que las plaquetas se conserven durante el transporte entre 20 a

24°C. Esta temperatura se puede conseguir midiendo la temperatura ambiente y preparando un

envase que contenga algunos trozos de hielo.En el comercio existen envases especiales que

mantienen la temperatura deseada, pero requieren de una fuente de poder. Algunos autores

recomiendan que cuando las plaquetas van a ser transportadas a grandes distancias y se hace

difícil mantener la temperatura de 22°C y la aglutinación, se pueda refrigerar, pero se deben

transfundir antes de las 24 horas de su recolección”.(19)

3.11. CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DEL PLASMA FRESCON CONGELADO Y DEL

CRIOPRECIPITADO

El plasma contiene albúmina, globulinas, factores de coagulación, agua y electrolitos. Algunos de

los factores de coagulación (V y VIII) son termolábiles, por lo cual, para preservar su actividad,

deben mantenerse congelados.

El plasma fresco congelado, mantenido normalmente a -18°C o más bajo mantiene una acción

óptica hasta por 12 meses; más allá de este período el Factor VIII puede perder actividad a tal

grado que no está en condiciones para tratar la hemofilia A. Para el uso se debe descongelar a

37°C y transfundirlo en las siguientes 2 horas. No debe recongelarse pues deja de ser plasma

fresco congelado.

El crioprecipitado puede ser congelado igualmente a -18°C por 12 meses, desde la fecha de

extracción de la sangre. Su potencia se conserva mejor si se congela y mantiene a -30°C.

Para el uso debe ser descongelado rápidamente en bañomaría a 37°C, teniendo el cuidado de

resuspenderlo completamente en el residuo de 10 a 15ml de plasma. Una vez preparado, debe

administrarse lo más pronto posible. No debe ser recongelado.





Tanto para la conservación del plasma congelado como del crioprecipitado deben usarse

controles para conocer si en un momento dado, estos productos fueron descongelados y vueltos

a congelar. Los congeladores usados deben estar provistos de alarmas y registros gráficos que

permitan conocer los cambios de temperatura que se hayan producido.



CAPÍTULO IV

PRUEBAS PRETRANSFUNSIONALES Y

EFECTOS ADVERSOS A LA TRANSFUSIÓN SANGUÍNEA

4.1. PRUEBA DE LA ANTIGLOBULINA

De los sistemas serológicas usados para demostrar la presencia de antígenos o anticuerpos de

grupos sanguíneos, la prueba de antiglobulina humana o de Coombs es considerada como la más

eficiente y de mayor valor en el banco de sangre.

“Se cree que el principio de la prueba de la antiglobulina fue inicialmente descrito por Moreschi

en 1908. Sin embargo, la prueba sólo fue introducida en medicina transfusional hasta el año de

1945 cuando Coombs, Mourant y Race demostraron que por medio de ésta se podía detectar

anticuerpos no aglutinantes anti-Rh en el suero. Posteriormente los mismos autores demostraron

la utilidad de la prueba para determinar la sensibilización in-vivo de los hematíes por anticuerpos,

en niños que sufrían enfermedad hemolítica”.(20)

El suero antiglobulina se elabora inyectando colonias de conejos con gammaglobulina humana

purificada para obtener antiglobulina humana y otras colonias son inyectadas con componentes

purificados del complemento (C3), para originar anticuerpos específicos contra ellos (anti-C3 con

actividad anti-C3d y con otros determinantes de C3). El conejo así sensibilizado con las globulinas

humanas originará anticuerpos contra la IgG humana y contra el componente C3 del

complemento (C3b + C3d).

Si a los hematíes humanos sensibilizados in vivo o in vitro con IgG y/o C3d se los pone a reaccionar

con el suero antiglobulina, éstos serán aglutinados demostrando la reacción antígeno-anticuerpo.

En sinopsis, el principio de la prueba de la antiglobulina es determinar la sensibilización de los

hematíes in vivo o in vitro por anticuerpos no aglutinantes (IgG) y /o fracciones del complemento

(C3d).





La sensibilización de los glóbulos rojos se puede producir en dos formas:

a) In vivo, es decir, cuando la reacción entre el antígeno y su correspondiente anticuerpo se

efectúa en el organismo, mientras ambos están circulando, como por ejemplo, en casos

de anemia hemolítica autoinmune, enfermedad hemolítica del recién nacido.

b) In vitro, la sensibilización de los glóbulos rojos por el anticuerpo se realiza en un tubo de

ensayo en el laboratorio, donde se mezclan e incuban eritrocitos adecuados con el suero

en estudio. Si en el suero existen anticuerpos contra los antígenos presentes en los

eritrocitos, se producirá la reacción antígeno anticuerpo y los glóbulos rojos quedarán

sensibilizados.

4.1.1. PRUEBA DE LA ANTIGLOBULINA DIRECTA

4.1.1.1. Principio del Método

“Esta prueba es también conocida como Coombs directo y su principio es determinar la

sensibilización de los hematíes in vivo por anticuerpos no aglutinantes (IgG) y/o fracciones del

complemento, específicamente C3d”.(21)

La prueba es útil para confirmar el diagnóstico de la enfermedad hemolítica del recién

nacido(EHRN), la anemia hemolítica autoinmune(AHAI), la anemia hemolítica inducida por

medicamentos y en la investigación de las reacciones postransfusionales.

La prueba de antiglobulina directa es sencilla de realizar y para tener resultados de calidad sólo

basta con lavar escrupulosamente los hematíes para evitar interferencias, de igual forma es de

vital importancia seguir al pie de la letra las instrucciones del fabricante del reactivo.












� Suero de Coombs.

� Células control de Coombs

(Las células control de Coombs son hematíes sensibilizados con IgG humana sirve para

controlar la actividad del suero antiglobulina y la calidad del lavado de las células).

� Glóbulos rojos a analizar.


a. Lavar y preparar suspensiones al 2-5% de los glóbulos rojos a analizar (ver pág. 12).

b. En un tubo de 75 x 12mm dispensar:

Tubo 1

Suspensión de

hematíes 2-5%

1 gota

Suero de Coombs 2 gotas

c. Mezclar y centrifugar a 3.400rpm por 15-30 segundos.

d. Retirar el tubo y observar la presencia o ausencia de aglutinación con la ayuda de una

lámpara de lectura o contra un fondo blanco bien iluminado.

e. Si no se observa aglutinación, incubar el tubo por 5-10 minutos a temperatura de

laboratorio.

f. Centrifugar para volver a leer.

g. Colocar una gota de control de Coombs a los negativos, centrifugar y leer.

Nota: Luego de la incubación a temperatura ambiente, algunos resultados pueden volverse

positivos debido a sensibilización por complemento (C3d) óIgA. Reportar resultado en número de

(+) de aglutinación o negativo en su caso.



4.1.1.4. Interpretación

� Si la prueba de antiglobulina muestra aglutinación, se interpreta positiva, significa que

hubo sensibilización in vivo de los eritrocitos y se informa: prueba de antiglobulina o de

Coombs directo positiva, señalando en cruces la intensidad de la reacción, el cual va

desde débil (d) hasta 4+.

� Si no hubo aglutinación, la prueba es negativa y significa que no existe

autosensibilizacióneritrocitaria. La prueba de antiglobulina negativa será valida,

solamente, si la prueba control de Coombs es positiva. En este caso, se informa: prueba

de antiglobulina o de Coombs directo negativa.

4.1.2. PRUEBA DE LA ANTIGLOBULINA INDIRECTA

4.1.2.1. Principio del Método

El principio de la prueba de la antiglobulina indirecta, también conocida como Coombs indirecto

es determinar la presencia de anticuerpos incompletos en un suero, los cuales actúan sobre

determinados tipos de hematíes, detección de antígenos no demostrables por otras técnicas (Du).

En la practica, los hematíes y el suero que contiene los anticuerpos y el complemento son

incubados (tiempo y temperatura adecuados) bajo la acción de un potenciador que generalmente

es albúmina, soluciones de bajo poder iónico o policationes. Seguidamente los hematíes son

lavados para eliminar las inmunoglobulinas y/o el complemento no unido.Posteriormente se

hacen reaccionar los hematíes con el suero antiglobulina. Si estos hematíes son aglutinados por el

suero antiglobulina humano, demuestra que han sido sensibilizados in vitro por anticuerpos tipo

IgG y/o por complemento (C3d).









� Bañomaría.


� Suero antiglobulinapoliespecífico (anti-IgG, C3d).

� Células control de Coombs (Las células control de Coombs son hematíes sensibilizados con

IgG humana y sirven como control para la prueba. En especial controlan la actividad del

suero antiglobulina y la calidad del lavado de las células).

� Suspensión de hematíes al 2-5%: Siempre usar GR 2-5% SSF tipo “O” Rh positivo, los que

pueden ser preparadas de 5 ó 10 tipos diferentes de muestras “O” Rh positivas ó Células

Rojas del 2-5% preparadas comercialmente, también llamadas “Pantallas” (Selectogen:

nombre comercial).

� Suero fresco del paciente.


A) Lavar y preparar suspensiones al 2-5% de los glóbulos rojos a analizar (ver pág. 12).

B) Identificar dos tubos I y II, colocar:

Tubo I Tubo II

Glóbulos Rojos 2-5% I 1-2 gotas

Glóbulos Rojos 2-5% II 1-2 gotas

Suero del Paciente 2-3 gotas 2-3 gotas

C) Agregar:

Tubo I Tubo II

Albúmina Bovina 2 gotas 2 gotas

D) Mezclar, centrifugar 2000rpm durante 1-2 minutos y leer con la ayuda de una lámpara de

lectura o contra un fondo blanco bien iluminado.

E) Incubar a 37°C por 30 minutos.

F) Centrifugar y leer con la ayuda de una lámpara de lectura o contra un fondo blanco bien

iluminado.

G) Si no se observa hemólisis ni aglutinación, lavar los glóbulos rojos cuatro veces (ver pág.

12).



H) Si la prueba sigue siendo negativa, agregar:

Tubo I Tubo II

Suero Coombs 2 gotas 2 gotas

I) Mezclar centrifugar y leer.

J) En el caso que la prueba resulte negativa añadir una gota de control de Coombs,

centrifugar y leer.


�� Prueba de antiglobulina negativa + prueba control de Coombs positiva: Prueba de

antiglobulina negativa.

�� Prueba de antiglobulina negativa + prueba control de Coombs negativa: Prueba no válida.

4.1.2.5. Grado de Aglutinación de los Hematíes en la Prueba de la Antiglobulina Directa e

Indirecta

Grado de Aglutinación de los

Hematíes en la Prueba de la

Antiglobulina Directa e Indirecta

Descripción

0 No hay aglutinación visible de los hematíes macro

y microscópicamente después de agitar

suavemente el tubo.

d (w) La aglutinación de los hematíes después de agitar

suavemente el tubo es escasa y a veces dudosa.

Al observar al microscopio, se observan

eritrocitos que aglutinan mientras que otros no lo

hacen.

1+ El botón de hematíes se divide en numerosos

pedacitos después de agitar suavemente el tubo.

El fondo se observa muy coloreado (rojizo).

2+ El botón de hematíes de divide en varios trozos

pequeños después de agitar suavemente el tubo.

El fondo se observa coloreado (rojizo).



Grado de Aglutinación de los

Hematíes en la Prueba de la

Antiglobulina Directa e Indirecta

Descripción

3+ El botón de hematíes se divide en varios trozos

grandes después de agitar suavemente el tubo. El

fondo es claro (verde).

4+ El botón de hematíes permanece intacto o se

divide en dos o tres trozos después de agitar

suavemente el tubo. El fondo es claro (verde

claro si se usa suero antiglobulina coloreado).



4.2. PRUEBAS CRUZADAS

4.2.1. Principio del Método

Las pruebas cruzadas son pruebas sencillas pero de gran cuidado, que tienen como objetivo

garantizar la compatibilidad serológica (in-vitro) entre la muestra de sangre del receptor y la

unidad de sangre que se le pretende transfundir.

La eficacia de las pruebas cruzadas radica en la afinidad que existe entre las pruebas de

compatibilidad ejecutadas in-vitro y la sobrevida de los hematíes en la circulación del receptor.

El propósito de las pruebas de compatibilidad es prevenir la transfusión de sangre incompatible,

por lo tanto las pruebas cruzadas deben certificar:

� La compatibilidad ABO y Rh entre el receptor y la unidad que se pretende transfundir.

� Que en el suero del receptor no existan anticuerpos de importancia clínica contra los

antígenos eritrocitarios del donante.

� Que en el plasma de la unidad de sangre no existan anticuerpos de importancia clínica

contra los antígenos eritrocitarios del receptor.

Las pruebas cruzadas han sido divididas en dos clases:



� La prueba cruzada mayor: Es la más importante y tiene como objetivo determinar que en

el suero del receptor no existan anticuerpos de importancia clínica contra los antígenos

eritrocitarios del donante.

� La prueba cruzada menor: En esta se intenta determinar que en el suero o plasma del

donante (unidad de sangre) no existan anticuerpos contra los hematíes del receptor. Esta

prueba se puede dejar de realizar siempre y cuando el banco de sangre realice detección

de anticuerpos inesperados de todos sus donantes.

La ejecución de la prueba cruzada requiere de la realización de unos procedimientos previos entre

los cuales se cuentan:

� La clasificación hemática ABO y Rh del receptor y el donante.

� La clasificación ABO sérica o inversa del receptor y el donante.

� El rastreo de anticuerpos inesperados a los donantes.

Una vez realizados estos pasos previos, la prueba cruzada puede simplificarse a un solo tubo por

unidad de sangre a cruzar (prueba cruzada mayor).

4.2.2. Materiales, Reactivos y Muestra


� Portaobjetos.





� Reloj alarma.

� Bañomaría.

� Antisueros comerciales Anti-A, Anti-B, Anti-A,B y Anti-D.

� Potenciadores: Puede usarse albúmina bovina al 22-30%, medios de bajo poder iónico

(LISS), polietilenglicol (PEG)opolicationes (Polibreno, protamina).

� Suero antiglobulina humano monoespecífico (Anti-IgG) o poliespecífico (Anti-IgG, C3d),

según el potenciador utilizado.



� Células control de Coombs (sensibilizadas con IgG humana).

� Solución salina fisiológica 0.9% (SSF).

� Células pantalla I-II: Son células cuya composición antigénica es conocida y se usan para

determinar la presencia de anticuerpos inesperados.

� De la unidad de sangre se toman hematíes cortando un segmento del tubo piloto de que

está provista la bolsa plástica de recolección de sangre.

� La muestra del paciente debe ser:Muestra anticoagulada con EDTA la cual servirá para

rechequear los grupos sanguíneos ABO y Rh y para el autocontrol.Muestra de suero que

será utilizada para la prueba cruzada mayor y el rastreo de anticuerpos inesperados.

4.2.3. Ejecución del Ensayo

a) Marcar tubos de 75 x 12mm:

PCM = para la prueba cruzada mayor de cada unidad a transfundir.

CI = para el rastreo de anticuerpos del paciente con células I.

CII = para el rastreo de anticuerpos del paciente con células II.

Auto = para el autocontrol de las células del paciente.

Marcar además los tubos con la identificación de la unidad de sangre y del paciente

(nombre o registro).

b) Realizar una suspensión al 5% en solución salina fisiológica de las células del receptor (ver

pág. 12).

c) Realizar una suspensión al 5% en solución salina fisiológica de las células de la unidad de

sangre (ver pág. 12).

d) Verificar que el suero del receptor esté libre de células y no esté hemolizado.

e) Dispensar células y suero en los tubos marcados en el primer paso según la siguiente

tabla:

ELEMENTO TUBOS

PCM CI CII AUTO

Células del paciente suspendidas al 5% en SSF 1 gota

Suero del paciente 2 gotas 2 gotas 2 gotas 2 gotas

Células del donante suspendidas al 5% en SSF 1 gota

Células I 1 gota

Células II 1 gota



Una vez estén los elementos que van a reaccionar en cada tubo, la prueba cruzada al igual que el

rastreo de anticuerpos inesperados en el paciente se realiza en las siguientes fases:

f) Fase de salina a temperatura ambiente

� Una vez dispensadas las células y el suero en los tubos correspondientes, centrifugar

por 15-30 segundos a 3.400rpm.

� Resuspender suavemente los botones de células para evidenciar la presencia o

ausencia de aglutinación macroscópica. Utilizar una lámpara de lectura o un fondo

blanco bien iluminado. Este paso sirve para determinar la presencia de aglutininas

frías. Dado que la mayoría de aglutininas frías diferentes a las del sistema ABO carecen

de importancia clínica, esta fase puede ser omitida.

g) Fase de potenciador a 37°C

� Añadir a todos los tubos LISS en cantidad indicada por el fabricante del reactivo ó 1-2

gotas de albúmina bovina al 22-30%. Mezclar e incubar a 37°C por 30 minutos. Si utiliza

LISS incubar 10-15 minutos o el tiempo que indique el fabricante del reactivo. Este

paso se ejecuta para promover la sensibilización de los hematíes con anticuerpos no

aglutinantes (IgG).

� Una vez cumplido el tiempo de incubación, centrifugue los tubos a 3.400rpm por 15-30

segundos.

� Examinar el sobrenadante para evidenciar la presencia de hemólisis. Anotar los

resultados.


ausencia de aglutinación macroscópica. Utilizar una lámpara de lectura o un fondo

blanco bien iluminado. Anotar los resultados.

h) Fase de lavado

� Lavar las células 3-4 veces con suficiente solución salina fisiológica. Para realizar un

buen lavado tener en cuenta:

Llenar los tubos con solución salina fisiológica hasta 1cm por debajo de la boca.

Para lavar centrifugar a 3.400rpm por 1 minuto.

Decantar completamente la solución salina fisiológica entre lavado y lavado.

Resuspender suavemente el botón de células antes de iniciar un nuevo ciclo de

lavado.



i) Fase de antiglobulina humana (AGH)

� Añadir a los tubos (libres de residuo de SSF) 2 gotas de suero

antiglobulinapoliespecífico. Mezclar suavemente.

� Centrifugar los tubos a 3.400rpm por 15-30 segundos.


ausencia de aglutinación macroscópica. Utilice una lámpara de lectura o un fondo

blanco bien iluminado. Anotar los resultados. Si es necesario, verificar los resultados

observando una alícuota al microscopio.

j) Fase de control

� A los tubos en los cuales no se observa aglutinación de los hematíes añadir 1 gota de

células sensibilizadas con IgG (células control de Coombs).

� Centrifugar a 3.400 rpm por 15-30 segundos.

� Resuspender suavemente los botones y observar la presencia de aglutinación (1+ a

2+). Anotar los resultados.

Si no observa aglutinación en esta fase la prueba no es válida y debe repetirse desde el comienzo.

4.2.4. Interpretación de los Resultados

� Se considera que existe compatibilidad serológica entre el suero del paciente y los

hematíes del donante si en el tubo marcado como prueba cruzada mayor (PCM) no se

observa hemólisis y/o aglutinación en ninguna de las fases anotadas, excepto en la de

control.

� La ausencia de hemólisis y/o aglutinación en los tubos marcados CI y CII indica que el

paciente no posee anticuerpos inesperados detectables contra los antígenos expresados

en esas células pantalla. Observar aglutinación en el tubo marcado “Auto” (autocontrol)

puede indicar que el paciente posee autoanticuerpos sensibilizando sus propios hematíes.

El cuadro muestra algunas de las posibilidades de los resultados que se pueden obtener al realizar

los procedimientos de la prueba cruzada y rastreo de anticuerpos inesperados en el receptor, e

indica si la sangre puede o no ser transfundida y que otros procedimientos se deben efectuar.



Lectura de los tubos

en la fase de AGH

INTERPRETACIÓN

CONDUCTA

PCM CI CII AUTO

0 0 0 0 El suero del receptor no posee anticuerpos

contra los antígenos de los hematíes del

dónate y de las células pantalla I y II.

Los hematíes del receptor no están

autosensibilizados son IgG y/o C3d.

La unidad de sangre puede

ser transfundida.

0 0 0 + El suero del receptor no posse anticuerpos

contra los antígenos de los hematíes del

sonante y las células pantalla I y II.

Los hematíes del receptor están

sensibilizados con autoanticuerpos. El

antígeno para el cual está dirigido el

autoanticuerpo no se encuentra en los

hematíes del donante ni en las células

pantalla I y II.


ser transfundida.

Hacer elución de los

hematíes del receptor e

identificar el autoanticuerpo

a partir del eluato.

0 + + 0 El receptor tiene uno o más aloanticuerpos

en el suero dirigidos contra uno o más

antígenos presentes en las células I y II.

El receptor no posee aloanticuerpos contra

los antígenos de los hematíes del donante.


ser transfundida.

Identificar el o los

aloanticuerpos.

0 + + + El receptor tiene

autoanticuerpossenbilizando sus hematíes.

Es posible que el antígeno para el cual está

dirigido el autoanticuerpo esté presente en

las células I y II, sin embargo no se puede

descartar la presencia de aloanticuerpos

contra los antígenos de las células I y II.

El receptor no posee aloanticuerpos contra

los antígenos de los hematíes del donante.


ser transfundida.

Realizar la identificación del

autoanticuerpo y descartar

la presencia de

aloanticuerpos.

+ + + + El receptor tiene autoanticuerpos

sensibilizando sus hematíes.

Es posible que el antígeno para el cual está

dirigido el autoanticuerpo esté presente en

las células I, II y en las del donante. Sin

La unidad de sangre no

puede ser transfundida.

Realizar la identificación de

autoanticuerpos y descartar

la presencia de



embargo, no se puede descartar la presencia

de aloanticuerpos contra los antígenos de las

células I, II y del donante.

aloanticuerpos.

+ + + 0 Presencia de uno o más aloanticuerpos

dirigidos contra uno a más antígenos

presentes en las células I, II y del donante.



Realizar la identificación de

aloanticuerpos.

+ 0 0 0 En algunas ocasiones, pueden ocurrir

reacciones positivas en las pruebas cruzada

pero no en el rastreo de anticuerpos

inesperados. Esto puede deberse a

anticuerpos clínicamente significativos en el

receptor contra los antígenos eritrocitarios

del donante.

El o los antígenos para el cual están dirigidos

el o los anticuerpos no se encuentran en las

células I y II. Sin embargo, y dado que las

células I y II poseen los antígenos de mayor

importancia clínica, esta situación debe ser

investigada.



Dependiendo de la fase en

que se detecte la

incompatibilidad podría ser

necesario realizar:

a) Rechequeo de

clasificación ABO del

receptor y donante.

b) Realizar Coombs directo

a las células del

donante.

c) Identificar el

aloanticuerpo en el

suero del receptor.

PCM = Prueba cruzada mayor; CI = Células pantalla I; CII = Células pantalla II; Auto = Autocontrol; 0 = No

aglutinación; + = Diferentes grados de aglutinación.



4.3. COMPLICACIONES INFECCIOSAS DE LA TRANSFUSIÓN SANGUÍNEA

El objetivo más importante en la transfusión sanguínea es reducir el riesgo de transmisión de

enfermedades infecciosas tanto como sea posible. Sin embargo, por ser la sangre un producto

biológico obtenido de humanos, ese riesgo nunca podrá ser igual a cero.

Dentro de las complicaciones infecciosas asociadas a la transfusión sanguínea, se encuentra la

transmisión de enfermedades infecciosas virales, bacterianas y parasitarias.



Actualmente el riesgo de transmisión de enfermedades infecciosas de origen viral como la

hepatitis B y C, el HIV y el HTLV-I, ha mermado considerablemente debido a las pruebas de

tamizaje de marcadores infecciosos que se le realizan a todas las unidades de sangre donadas y a

una mejor y adecuada selección de los donantes voluntarios y repetidos.

“Otros agentes infecciosos virales como el Citomegalovirus (CMV), el virus de Epstein-Barr (EBV) y

el virus de la hepatitis D (HDV o agente delta), no son determinados de rutina en las unidades de

sangre donadas, razón por la cual la transfusión de sangre o sus derivados siempre implica un

riesgo para el receptor”.(22)

Elcontagio de las unidades de sangre donadas por agentes bacterianos, normalmente ocurre en el

momento de la recolección de la sangre debido a una incorrecta sepsia del área de venopunción.

La propagación bacteriana ocurre durante laetapa de almacenamiento, siendo mayor en los

componentes que son almacenados a temperatura de laboratorio como las plaquetas, en

comparación con los componentes que son refrigerados o congelados.

La transfusión de sangre contaminada con bacterias conlleva a una septicemia que lo puede

conducir a la muerte, o puede causar reacciones severas y fatales que son el reflejo de

endotoxinas producidas por microorganismos gran-negativos como las Pseudomonassp.,

Citrobacterfreundii, Escherichiacoli y Yersiniaenterocolitica.

La transmisión de la espiroqueta Treponema pallidum, agente etiológico de la sífilis es muy raro

que ocurra, porque para determinar su presencia se realizan rutinariamente exámenes (VDRL –

RPR) y porque este microorganismo sobrevive pocos días en la sangre almacenada entre 1 y 6°C.

La transmisión de agentes infecciosos parasitarios a través de la sangre se encuentra en los casos

de malaria y la enfermedad de Chagas.Una manera de evitar la transferencia de malaria, es diferir

temporalmente como donante de sangre a los individuos que residan o visiten zonas endémicas.





“Es conveniente recordar que los plasmodium sobreviven al menos una semana en los

hemoderivados que se almacenan a 4°C.Por otra parte, la transmisión a través de las

transfusiones sanguíneas, de la enfermedad de Chagas o Trypanosomiasis Americana, causada

por el Trypanosomacruzi debe considerarse en aquellas áreas urbanas en las que la enfermedad

es endémica. El Trypanosomacruzi es un protozoario que se ha encontrado de manera endémica

en centro y sur América”.(23)

4.4. COMPLICACIONES NO INFECCIOSAS DE LA TRANSFUSÍON SANGUÍNEA

Las complicaciones no infecciosas de la transfusión sanguínea contienen una serie de reacciones

adversas que van desde leves hasta fatales para el paciente.Las reacciones adversas a la

transfusión sanguínea pueden ser divididas en agudas y tardías.

REACCIÓN

TRANSFUSIONAL

MEDIADA

INMUNOLÓGICAMENTE

NO MEDIADA

INMUNOLÓGICAMENTE

AGUDA

Reacción transfusional hemolítica.

Reacción transfusional febril.

Reacción transfusional alérgica.

Reacciones anafilácticas.

Daño pulmonar agudo.

Inmunomodulación de la respuesta

inmune.

Hemólisis.

Sepsis.

Sobrecarga circulatoria.

Complicaciones en la transfusión

masiva (Coagulopatíadilucional, CID,

alteración en la función de la

hemoglobina, etc.).

TARDIA

Reacción transfusional hemolítica.

Aloinmunización.

Refractoriedad a la transfusión de

plaquetas.

Enfermedad del injerto contra el

huésped.

Inmunomodulación de la respuesta

inmune.

Transmisión de enfermedades

infecciosas:

HIV 1, 2.

HTLV-I.

Hepatitis B, C, D.

CMV.

Malaria, Chagas.

Sepsis bacteriana.







4.5. COMPLICACIONES AGUDAS DE LA TRANSFUSÍON SANGUÍNEA MEDIADAS

INMUNOLÓGICAMENTE

A. Reacción Transfusional Hemolítica Aguda

Se refiere al cuadro clínico que presenta el receptor debido a la destrucción de los glóbulos rojos,

secundaria a una reacción antígeno-anticuerpo con la activación del complemento in vivo.

La hemólisis sucede en el espacio intravascular y los síntomas son duros y se presentan tras la

transfusión de los primeros mililitros de sangre incompatible.Esta reacción transfusional se

presenta por la infusión de sangre ABO incompatible en el receptor. En este caso, los síntomas

son severos y pueden conducir al paciente a la muerte.

Los síntomas y signos más comunes son: Fiebre, escalofríos, hipotensión, náuseas, vómito, fatiga,

dolor en el sitio de la punción, dolor en el pecho, cefalea y hemoglobinuria. En los casos severos

se presenta sangramiento, shock y la muerte.

La activación del complemento y las plaquetas incita la producción de aminas vasoactivas

(histamina y serotonina), que contribuyen a generar hipotensión.

La hipotensióncreadaestimula una respuesta del sistema nervioso simpático, liberando

catecolaminas que causan vasoconstricción en órganos como los riñones, bazo y pulmones.

El factor de Hageman activado ejerce sobre el sistema de las kininas formando bradikinina, lo que

aumenta la permeabilidad capilar y origina una falla sistémica en la presión arterial.

La activación del mecanismo intrínseco de la coagulación a través del factor de Hageman puede

llevar a la formación de trombina en la microcirculación, lo que perjudica los tejidos y órganos. De

igual forma, se provoca un consumo de fibrinógeno, plaquetas y factores V y VII y se liberan

productos de la degradación de la fibrina lo que conduce eventualmente a una

coagulopatíaintravascular diseminada (CID).



La más importante consecuencia de la reacción hemolítica aguda intravascular (RHAIV), es la falla

renal producido por la hipotensión sistémica, la vasoconstricción y la formación de trombina

intravascular.

La principal causa de la reacción hemolítica aguda intravascular es la transfusión de sangre ABO

incompatible debido a un error en la identificación del receptor en el momento de la toma de

muestra para las pruebas de compatibilidad, o a la mala identificación en el momento de la

transfusión.

La frecuencia de las reacciones hemolíticas agudas se ha estimado en 1 por cada 20.000 unidades

de sangre transfundidas, estas reacciones transfusionales pueden ocurrir también cuando se

transfunden grandes volúmenes de plasma ABO incompatible, por ejemplo, cuando se

transfunde plasma de grupo O a un receptor A o B. Los síntomas y signos observados en este caso

son generalmente menos severos. Por otro lado, las reacciones transfusionales hemolíticas

agudas debida a anticuerpos diferentes a los del sistema ABO se caracterizan por ser menos

severas, debido a que la hemólisis por lo general ocurre en el espacio extravascular.

B. Reacción Transfusional de Tipo Febril

La fuente más frecuente de este tipo de reacción transfusional es la presencia de anticuerpos

presentes en el receptor dirigidos contra antígenos presentes en linfocitos, granulocitos y

plaquetas.

Los individuos más aptos a este tipo de reacción transfusional son mujeres multíparas y pacientes

con historia de transfusiones crónicas.

Algunas reacciones febriles han sido relacionadas a la transfusión de componentes sanguíneos en

los que se han generado citokinas durante el almacenamiento. Estaconsecuencia ha sido

demostrada en la infusión de concentrados de plaquetas.

La reacción febril puede comenzar a los minutos de iniciada la transfusión, así como horas

después de haberse completado la misma.



El incremento de la temperatura es de 1°C o más, pero puede también observarse incrementos

tan bajos como 0,5°C. La frecuencia estimada de las reacciones febriles es de 0,5-1,5% y están

acompañadas por escalofríos.Una manera eficaz para prevenir las reacciones febriles es el uso de

filtros desleucocitadores, los cuales retienen selectivamente los leucocitos de los componentes

celulares.

El tratamiento de las reacciones febriles está orientado a disminuir los síntomas, los cuales

responden a antipiréticos. Es conveniente que ante una reacción febril, se suspenda la transfusión

sanguínea, sobre todo cuando no sea posible determinar si los síntomas y signos observados

están asociados a reacciones hemolíticas o por contaminación bacteriana de la sangre.

C. Reacción Transfusional de Tipo Alérgico

Las reacciones alérgicas a la transfusión sanguínea, generalmente se presentan como un brote,

urticaria y prurito. Este tipo de reacción ocurre entre el 1-2% de todas las transfusiones.

La principal causa de las reacciones alérgicas es la presencia de anticuerpos IgE dirigidos contra

inmunoglobulinas contenidas en el plasma transfundido.

Igualmente, la presencia de sustancias solubles en el plasma transfundido (alimentos,

medicamentos, etc.) pueden ser la causa de algunas reacciones alérgicas.Para prevenir las

reacciones alérgicas de esta clase, se puede administrar antihistamínicos antes de la transfusión.

En casos severos y reincidentes es conveniente para el paciente la administración de glóbulos

rojos lavados.

D. Reacciones Anafilácticas

Este tipo de reacción comienza después de la infusión de los primeros mililitros de sangre. Los

síntomas están asociados a la afección de varios sistemas entre los cuales están el tracto

respiratorio, el sistema circulatorio, la piel y el sistema gastrointestinal.

Los síntomas más comunes son: Vómito, náuseas, broncoespasmo, fatiga, hipotensión y urticaria.



La reacción anafiláctica, aunque no muy común, acontece en individuos deficientes de IgA y que

han formado anticuerpos anti-IgA.Se ha considerado que las reacciones anafilácticas debido a la

presencia de anticuerpos anti-IgA ocurren en un caso de cada 100.000 unidades transfundidas.

E. Daño Pulmonar Agudo Asociado a la Transfusión

Es un suceso del que no se conoce con claridad su frecuencia y que probablemente poco se

reporta en la transfusión sanguínea.

Radica en una insuficiencia respiratoria aguda en el paciente, el cual muestra a los rayos X edema

pulmonar sin evidencia de falla cardíaca.Los síntomas incluyen escalofríos, fiebre, cianosis e

hipotensión.

“La etiología del daño pulmonar parece estar asociada a múltiples mecanismos entre los que se

cuenta la transfusión pasiva de anticuerpos contra los granulocitos o los antígenos HLA del

receptor. Estos anticuerpos reaccionan con los granulocitos del receptor y luego se depositan en

los capilares pulmonares causando inflamación y aumento de la permeabilidad de la

microcirculación pulmonar, lo que conduce a entrada de líquido en el espacio alveolar”. (24)

La mayoría de casos involucra anticuerpos en el plasma del donante dirigido contra los

granulocitos del receptor. El caso contrario, es decir, anticuerpos en el receptor contra los

granulocitos transfundidos muy ocasionalmente han producido daño pulmonar agudo.

4.6. COMPLICACIONES AGUDAS DE LA TRANSFUSÍON SANGUÍNEA NO MEDIADAS

INMUNOLÓGICAMENTE

a. Hemólisis

La hemólisis de los hematíes no mediada inmunológicamente sucedehabitualmente por

inadecuado almacenamiento de la sangre a temperaturas extremas.





Igualmente, la hemólisis puede ocurrir cuando la sangre a transfundir es mezclada con

medicamentos o soluciones hipotónicas, cuando es transfundida a presión son agujas de pequeño

calibre o por su mal empleo en los equipos de circulación extracorpórea.

Los síntomas y signos observados en la hemólisis no mediada inmunológicamente no son tan

característicos como las reacciones mediadas por anticuerpos. Pero, la causa de la hemólisis debe

ser investigada para corregir las fallas y para tener la seguridad de que en la hemólisis no están

involucrados mecanismos inmunes.

b. Sepsis

La sepsis asociada a la transfusión sanguínea es producida por la transfusión de sangre obtenida

de donantes con bacteriemias transitorias asintomáticas o por la contaminación bacteriana de la

sangre por inapropiada limpieza de la piel del sitio de venopunción.

Entre los microorganismos asociados a sepsis postransfusional se hallan la Yersiniaenterocolítica,

Salmonella sp., Staphylococcusepidermidis y Bacilluscereus.

Los componentes sanguíneos implicados en sepsis postransfusional son las plaquetas, debido a su

temperatura de almacenamiento la cual ayuda al crecimiento bacteriano.

Los síntomas y signos clínicos en pacientes que han recibido componentes sanguíneos

contaminados dependen del número de microorganismos transfundidos. Normalmente los

síntomas se observan entre 0-30 minutos de iniciada la transfusión e incluyen cefalea, ansiedad,

escalofríos, vómito y diarrea. En casos graves puede ocurrir shock, coagulación intravascular

diseminada, falla cardíaca congestiva y la muerte. Cuando se sospecha de un suceso de este tipo,

se deben ordenar hemocultivos al paciente y comparar los resultados con los cultivos realizados a

los componentes involucrados en la reacción.

c. Sobrecarga Circulatoria

La transfusión sanguínea puede conducir a sobrecarga circulatoria, principalmente en aquellos

pacientes con enfermedad cardíaca o renal o en pacientes normovolémicos con anemia crónica.



Los síntomas y signos clínicos incluyen: Fatiga, taquicardia, dolor de cabeza, hipertensión y falla

cardiaca congestiva.

Para evitar las reacciones por sobrecarga circulatoria, los componentes a transfundir pueden ser

divididos en volúmenes más pequeños y transfundirse a goteos lentos en un tiempo igual o

superior a 4 horas.

d. Complicaciones en la Transfusión Masiva

Se define como el reemplazo de la volemia total del individuo en un lapso de 24 horas o menos.

Diversas complicaciones pueden ocurrir durante y después de la transfusión masiva de

hemoderivados. Entre las complicaciones agudas se cuentan: La coagulopatíadilucional,

coagulación intravascular diseminada, hipocalcemia, hiperkalemia, hipotermia, disminución del

2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG), lo que conduce a una pobre liberación del oxígeno a los tejidos.



BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

� DUEÑAS, Víctor Hugo. El Banco de Sangre. Teoría, Principios y Procedimiento. 2ª edición,

Universidad del Valle Programa Editorial, Impreso en Cali, Colombia. Enero de 2003.

� Dr. LINARES, Jesús. Inmunohematología y Transfusión Principios y Procedimientos. 1ª

edición, Impreso por cromotip C.A., Caracas, Venezuela. 1986.

� Organización Panamericana de la Salud. Manual de Técnicas Básicas para un Laboratorio

de Salud. Publicación Cientifica No. 439, Tomo II, Washington, D.C.,EUA. 1983.

� Dr. LYNCH, Mattnew. Métodos de Laboratorio. 2ª edición, Editorial Interamericana, S.A.

de C.U. México. 1972.

� CISCAR, Federico y FARRERAS, Pedro. Diagnóstico Hematológico Laboratorio y Clínica.

Tomo I. 3ª edición, Editorial JIMS, Barcelona. 1972.

� IRWIN A. OPPEN HEIM. Manual para Tecnólogo de Laboratorio. Editorial Médica

Panamericana. Argentina. 1973.



CONCLUSIÓN GENERAL

Gracias al trabajo de investigación realizado se pudo comprender que la indagación

complementaria solicitada al laboratorio clínico por un médico para confirmar o descartar un

diagnóstico es denominado “análisis clínico o prueba de laboratorio”

También se logro comprender que el análisis clínico se interpreta mediante valores de referencia

establecidos para cada población y requiere de una interpretación médica. Los autores de los

libros y páginas de internet estudiados indican que algunos de los aspectos que se emplean para

tal explicación son: la especificidad, la sensibilidad, el valor predictivo, la exactitud, precisión y

validez, así como la preparación y recogida de la muestra o el rango de referencia.

La era de la globalización y tecnificación han conseguido que actualmente en los laboratorios,

dominan los analizadores clínicos automatizados, computarizados y especializados en diferentes

campos analíticos como: hematología, hemograma, bioquímica clínica, urianálisis, microbiología y

genética entre otras.

Fue de suma importancia analizar y comprender que gracias al estudio del sistema ABO, se

describen los diferentes grupos sanguíneos presentes en la población humana. Se puede definir

los grupos formados de la siguiente manera: El grupo O, no contiene ningún aglutinógeno en sus

hematíes y posee en cambio dos aglutininas sérica a y b. Sus hematíes no pueden ser aglutinados

por otros sueros, pues se trata del grupo de donadores universales. El grupo A posee el

aglutinógeno eritrocítico A y la aglutinina b. El grupo B posee la aglutinina a y el aglutinógeno B.

El grupo AB, posee ambos aglutinógenos en sus eritrocitos, pero el suero no posee aglutininas; el

suero de estas personas, por consiguiente no aglutinan ninguna sangre humana, por lo cual

pueden recibirla indistintamente de cualquier persona, considerados como receptores

universales.

Con el continuar de la investigación bibliográfica y los conocimientos recibidos en la facultad de

Bioquímica fue fácil entender la existencia de subgrupos de los tipos de sangre.



CONCLUSIONES ESPECÍFICAS

a) Describir y determinar el Sistema ABO:

Me interesé en aprender que el sistema ABO es el más importante dentro del estudio de los

grupos sanguíneos descubierto por Landsteiner, quien indico que los glóbulos rojos humanos se

aglutinaban al ponerlos en reacción con el suero proveniente de otras personas, con lo cual se

explico las causas de incompatibilidad sanguínea.

Se logró concluir que existen cuatro tipos de glóbulos rojos: A, B, AB y O.El grupo A posee el

antígeno A y el anticuerpo anti-B, dentro del antígeno A se encuentran los subgrupos A1 y el A2. El

grupo B, presenta el antígeno B y el anticuerpo anti-A, dentro los subgrupos del antígeno B se

hallan B3, Bx y Bel. El grupo Oposee el antígeno H y los anticuerpos anti-A y anti-B. El grupo AB

cuenta con los dos antígenos A y B pero carece de anticuerpos anti-A y anti-B en su suero.

Dentro de las técnicas para realizar la determinación de los antígenos ABO en la superficie de los

hematíes se encuentran los métodos por medio de antisueros y de eritrocitos estandarizados, en

tanto que los métodos para determinar los anticuerpos del sistema ABO se hallan la

determinación de los anticuerpos anti-a y anti-b y el método para la determinación de los

subgrupos de A: A1y A2.

b) Indicar los métodos de determinación del Sistema Rh.

Aprendí que el sistema Rh es el segundo más importante del estudio de los grupos sanguíneos.

Las personas cuyas células son aglutinadas por el suero anti-rhesusson clasificadas como Rh

positivo y como Rh negativo.

De igual manera conocí las diversas técnicas para realizar una adecuada prueba, dentro de estos

análisis encontramos la determinación del antígeno Dtanto en placa de hemoclasificación,como

en tubo de ensayo y la determinación de la expresión débil del antígeno D. Igualmente conocí que

todo muestra con resultado negativo en el sistema Rh se le debe realizar el test para determinar

la expresión débil del antígeno D (variante Du), exceptuando las muestras de sangre provenientes

de recién nacidos.



c) Identificar los procesamientos de los componentes sanguíneos

Aprendí las diferentes técnicas, con los que se separan los componentes sanguíneos que se

emplean en el Banco de Sangre; entre estos compuestos que se emplean para las transfusiones

encontramos concentrados de glóbulos rojos, concentrados de plaquetas, plasma fresco

congelado, el crioprecipitado, plasma simple, los que son administraddos de acuerdo a su

requerimiento.

Todos estos componentes requieren de una adecuada conservación, para evitar su

contaminación, alteración y posterior pérdida de su acción, dicha conservación se realiza

mediante refrigeración adecuada mediante un sistema de alarmas y termómetros de mercurio,

revisando y limpiando periódicamente este equipo.

Para una adecuada obtención de tales componentes es conveniente tener en cuenta que se debe

saber bien la clase de unidad sanguínea que se va a obtener, para esto es necesario realizar una

entrevista y examen físico adecuado al donante.

d) Valorar los efectos adversos a la transfusión sanguínea.

Al realizar las transfusiones sanguíneas se debe tener presente los efectos adversos que podrían

presentar los receptores, el objetivo básico en la transfusión sanguínea es reducir el riesgo de

transmisión de enfermedades infecciosas tanto como sea posible. Sin embargo, por ser la sangre

un producto biológico obtenido de humanos, ese riesgo nunca podrá ser igual a cero.

En lo posible hay que evitar que este proceso llegue a ser traumático para el paciente, para

posteriores transfusiones.

Dentro de estos efectos adversos encontramos las complicaciones infecciosas con lo cual se

puede transmitir enfermedades infecciosas virales, bacterianas y parasitarias.Las complicaciones

no infecciosas, que pueden ser agudas como son las reacciones hemolíticas, febriles, alérgicas,

daño pulmonar, hemólisis, sobrecarga circulatoria, al igual que pueden ser tardías como la

transmisión de enfermedades entre ellas HIV 1, 2; Hepatitis B, C, D;CMV,malaria, chagas, sepsis

bacteriana.

ÍNDICE

PÁGINAS

AGRADECIMIENTO………………………………………………………………………………………………………………………..III

DEDICATORIA……………………………………………………………………………………………………………………………….IV

INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………………………………………………………………….V

OBJETIVO GENERAL……………………………………………………………………………………………………………………VIII

OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………………………………………………………………………………….VIII

CAPÍTULO I

SISTEMA ABO

1.1. Generalidades………………………………………………………………………………………………………2

1.2. Antígenos del Sistema ABO…………………………………………………………………………………..3

1.2.1. Subgrupos del Antígeno A…………………………………………………………………………………….5

1.2.2. Subgrupos del Antígeno B…………………………………………………………………………………….6

1.3. Anticuerpos del Sistema ABO……………………………………………………………………………….6

1.4. Reacción Antígeno Anticuerpo……………………………………………………………………………..8

1.4.1. Tipos de Reacciones……………………………………………………………………………………………..9

1.5. Determinación del Sistema ABO…………………………………………………………………………10

1.5.1. Determinación de los Antígenos ABO en la

Superficie de los Hematíes o Grupo Hemático…………………………………………………….11

1.5.1.1. Método por Medio de Antisueros……………………………………………………………………….11

1.5.1.1.1. Principio del Método………………………………………………………………………………………….11

1.5.1.1.2. Método del Portaobjetos……………………………………………………………………………………12

1.5.1.1.2.1. Materiales, Reactivos y Muestra…………………………………………………………………………12

1.5.1.1.2.2. Ejecución del Ensayo…………………………………………………………………………………………..13

1.5.1.1.2.3. Interpretación de los Resultados…………………………………………………………………………14

1.5.1.1.3. Método del Tubo de Ensayo……………………………………………………………………………….14


1.5.1.1.3.2. Ejecución del Ensayo…………………………………………………………………………………….......15

1.5.1.1.3.3. Interpretación de los Resultados………………………………………………………………………..15

1.5.1.2. Método por Medio de Eritrocitos Estandarizados……………………………………………….15










1.5.1.2.4. Combinación de Resultados………………………………………………………………………………..19

1.5.2. Determinación de los Anticuerpos del

Sistema ABO ó Grupo Sérico……………………………………………………………………………….19

1.5.2.1. Método en Tubo para la Determinación

de los Anticuerpos Anti-A y Anti-B………………………………………………………………………20


1.5.2.1.2. Materiales, Reactivos y Muestra…………………………………………………………………………20

1.5.2.1.3. Ejecución del Ensayo…………………………………………………………………………………………..21

1.5.2.1.4. Interpretación de los Resultados………………………………………………………………………..21

1.5.2.2. Método para la Determinación de los Subgrupos de A: A1yA2………………………….22





1.5.2.2.2.3. Interpretación de los Resultados…………………………………………………………………………23





CAPÍTULO II

SISTEMA Rh

2.1. Generalidades…………………………………………………………………………………………………….26

2.2. Antígenos del Sistema Rh……………………………………………………………………………………27

2.3. Nomenclatura…………………………………………………………………………………………………….31

2.4. Anticuerpos del Sistema Rh…………………………………………………………………………..……33

2.5. Rh nulo……………………………………………………………………………………………………………….34

2.6. Determinación del Antígeno D del Sistema Rh……………………………………………………35

2.6.1. Principio del Método………………………………………………………………………………………….35

2.6.2. Método del Portaobjetos para la Determinación del Antígeno D………………………..35

2.6.2.1. Materiales, Reactivos y Muestra…………………………………………………………………………35

2.6.2.2. Ejecución del Ensayo…………………………………………………………………………………………..36

2.6.2.3. Interpretación de los Resultados………………………………………………………………………..36

2.6.3. Método en Tubo para la Determinación del Antígeno D……………………………………..37



2.6.3.3. Interpretación de los Resultados…………………………………………………………………………38

2.7. Determinación de la Expresión Débil del Antígeno D………………………………………….38


2.7.2. Materiales, Reactivos y Muestra…………………………………………………………………………39

2.7.3. Ejecución del Ensayo…………………………………………………………………………………………..39

2.7.4. Interpretación de los Resultados…………………………………………………………………………40

2.8. Dificultades en la Determinación del Antígeno D………………………………………………..41

CAPÍTULO III

RECOLECCIÓN, PREPARACIÓN, ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE

DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

3.1. Selección del Donante de Sangre………………………………………………………………………..44

3.2. Criterios de Protección del Donante…………………………………………………………………..44

3.3. Criterios de Protección del Receptor…………………………………………………………………..51

3.4. Información que debe Proveer el Donante de Sangre…………………………………………54

3.5. Reacciones a la Donación de Sangre……………………………………………………………………56

3.6. Recolección de Sangre para Transfusiones………………………………………………………….59

3.6.1. Área de Donación……………………………………………………………………………………………….59

3.6.2. Equipo y Materiales Necesarios en la Sala de Donación………………………………………59

3.6.3. Preparación de la Punción Venosa……………………………………………………………………..60

3.7. Preparación de Componentes Sanguíneos………………………………………………………….62

3.7.1. Preparación de Concentrados de Glóbulos Rojos………………………………………………..63

3.7.1.1. Técnica de Preparación……………………………………………………………………………………….63

3.7.2. Preparación de Concentrados de Plaquetas………………………………………………………..64


3.7.3. Preparación de Plasma Fresco Congelado…………………………………………………………..66

3.7.3.1. Técnica de Preparación ………………………………………………………………………………………67

3.7.4. Preparación de Crioprecipitado………………………………………………………………………….67


3.7.5. Preparación de Plasma Simple……………………………………………………………………………69

3.8. Conservación de Sangre Completa y Glóbulos Rojos…………………………………………..70

3.9. Refrigeración de la Sangre………………………………………………………………………………….71

3.10. Conservación y Transporte de las Plaquetas……………………………………………………….73

3.11. Conservación y Transporte del

Plasma Fresco Congelado y del Crioprecipitado………………………………………………….74

CAPÍTULO IV

PRUEBAS PRETRANSFUNSIONALES Y

EFECTOS ADVERSOS A LA TRANSFUSIÓN SANGUÍNEA

4.1. Prueba de la Antiglobulina………………………………………………………………………………….77

4.1.1. Prueba de la Antiglobulina Directa……………………………………………………………………..78

4.1.1.1. Principio del Método………………………………………………………………………………………….78




4.1.2. Prueba de la Antiglobulina Indirecta…………………………………………………………………..80

4.1.2.1. Principio del Método………………………………………………………………………………………….80




4.1.2.5. Grado de Aglutinación de los Hematíe

en la Prueba de la Antiglobulina Directa e Indirecta……………………………………………82

4.2. Pruebas Cruzadas……………………………………………………………………………………………….83


4.2.2. Materiales, Reactivos y Muestra…………………………………………………………………………84

4.2.3. Ejecución del Ensayo…………………………………………………………………………………………..85

4.2.4. Interpretación de los Resultados…………………………………………………………………………87

4.3. Complicaciones Infecciosas de la Transfusión Sanguínea……………………………………89

4.4. Complicaciones No Infecciosas de la Transfusión Sanguínea………………………………91

4.5. Complicaciones Agudas de la

Transfusión Sanguínea Mediadas Inmunológicamente……………………………………….92

4.6. Complicaciones Agudas de la

Transfusión Sanguínea No Mediadas Inmunológicamente………………………………….95

BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA………………………………………………………………………………98

CONCLUSIÓNE GENERAL…..………………………………………………………………………………..99

CONCLUSIONES ESPECÍFICAS.…….…………………………………………………………………….100

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