TERCER TRABAJO ENCARGADO DE BIOQUIMICAProblemas de cintica enzimtica

1. Para una enzima que sigue una cintica de Michaelis-Menten (hiperblica):a) Qu % de la Vmx se alcanza cundo? i. [S] = KM ii. [S]= 2 KM iii. [S]= 10 KMiv. 2 [S]= KMb) Qu fraccin de la Vmx se alcanza cuando el KM = 5 [S]?2. Una enzima cataliza una reaccin qumica a una velocidad inicial (v0) de 6,8x10-2 UI.a) Expresar esta velocidad en katalesb) Cunto producto se habr formado luego de 5 min y 10 min? c) Cul ser la velocidad si la [E] se duplica y se triplica?3. Los parmetros cinticos de una enzima son: KM=3 x 10-3 M y la Vmx = 230 mol/s. Calcule la velocidad inicial (v0) de la enzima cuando la [S] es:a) 5,3 x 10-4 M; b) 5 x 10-2 M; c) 1 mM4. Calcule la [S] al cual se alcanza una vo= 220 Kat, sabiendo que el KM es 3 x 10-3 M y la Vmx = 600 mol/s. 5. La Vmx de una enzima es 100 kat y la vo a una [S] = 2x10-3 mM es 30 kat. Cul es el KM de esta enzima?6. Una enzima cataliza una vo de 35 umoles/min cuando la [S] = 0.01 M. El KM para el sustrato es 2 x 10-5 M. Asuma que a esa [S] se alcanza la Vmx.a) Cul ser la vo a una [S] = 3.5 x 10-3 M ?b) Cul ser la vo a una [S] = 5.5 x 10-5 M ?c) Cul ser la vo a una [S] = 3000 mM ?d) Cul ser la vo a una [S] = 5 uM ?7. Se ha estudiado la velocidad de cierta enzima que cataliza la reaccin SP a diferentes concentraciones de sustrato, obtenindose los siguientes resultados:[ S ] (uM)vo(umoles/min)

6.2515.00

7556.25

10060.00

100074.90

10000075.00

a) Determine la Vmx y el KM.b) Cul ser la vo a una [S] = 25 uM ?c) Cul ser la vo a una [S] = 50 uM ?d) Cul ser la vo a una [S] = 0.02 M ?e) Cul ser la vo a una [S] = 0.1 mM ?f) Cul ser la vo a una [S] = 100 uM si la [E] fuera duplicada?g) Si la [S] = 100 uM Cul ser la [P] despus de 10 min?h) Si la [S] = 40000 uM Cul ser la [P] despus de 3 min?

8. La velocidad inicial de una reaccin enzimtica se determin a distintas [S], calcular KM y Vmx por los mtodos micheliano y doble recproco a partir de los siguientes datos[ S ](M)vo(UI)

2,3 x 10-30,95

3,0 x 10-31,13

4,5 x 10-31,42

12,0 x 10-32,14

38,0 x 10-32,64

9. Se aaden 25 l de una preparacin de un enzima monosustrato a 1 mL de mezcla de reaccin para el ensayo de la actividad enzimtica, utilizando diferentes concentraciones de sustrato. Las vo obtenidas en cada caso fueron las siguientes:S (M)vo(nmoles/min)

1x10-275,00

1x10-374,90

1x10-462,00

7,5x10-558,25

4x10-546,15

2x10-533,00

6x10-615,00

A partir de estos datos:a) Hacer la representacin grfica segn Michaelis-Menten y Lineawever Burk.b) Determinar el valor de las constantes cinticas: KM, y Vmx. c) Calcular la velocidad de la reaccin para una S = 1,5x10-5 M y S = 0,02 M.d) Si S = 0,04 M, Cul sera la cantidad de producto formado una vez transcurridos 3 minutos?

10. 11. La velocidad inicial (vo) de una reaccin enzimtica fue medida bajo una serie de diferentes [S]. Los datos se muestran a continuacin:[ S ](M)vo(umoles/min)

8.35 x 10-613.8

1.00 x 10-516.0

1.25 x 10-519.1

1.67 x 10-523.8

2.00 x 10-526.7

2.50 x 10-530.8

3.30 x 10-536.2

5.00 x 10-544.5

1.00 x 10-457.5

2.00 x 10-466.7

Determine grficamente el KM y la Vmx mediante el ploteo de Lineweaver-Burk (doble recproco).

12. La cintica de una enzima fue medida a diferentes concentraciones de sustrato en la presencia y ausencia de 2 x 10-3 M inhibidor (I):[ S ](M)vo (UI)sin Ivo (UI)con I

0.3 x 10-510.44.1

0.5 x 10-514.56.4

1.0 x 10-522.511.3

3.0 x 10-533.822.6

9.0 x 10-540.533.8

a) Cules son los valores de Vmx y KM en ausencia y presencia del inhibidor?b) Qu tipo de inhibicin es sta?

Utilice papel milimetrado para los grficos.