Sistemas de Grupo SanguineoABO,Mtodos e Interpretacin,Discrepancias y resolucin.

Lic.TM. Efran Montes Hijar Hospital IV Essalud Hyo.

GRUPOS SANGUINEOS O-A-BLOS ANTIGENOS QUE LA SANGRE POSEE SON A-B QUE SE LES LLAMA AGLUTINOGENOS. TAMBIEN TENEMOS ANTICUERPOS QUE SON LLAMADOS AGLUTININAS,

ANTIGENOS Los antigenos A y B son

oligosacaridos complejos Un gen H codifica para una transferasa de fucosa Los del grupo A tienen una Nacetilgalactosamina Los del grupo B tinenen galactosa Los AB tienen ambas y los del grupo O ninguna.

REACCIONES ESPERADAS PARA ABOGlbulos RojosAnti-A Anti-B Anti-A,B Cels A1

GRUPOInterpretacin Grupo ABO

SueroCels A2 Cels B

0 4+ 0 4+

0 0 4+ 4+

0 4+ 4+ 4+

4+ 0 4+ 0

4+ 0 4+ 0

4+ 4+ 0 0

0 A B AB

ANTIGENOS A B HHEMATIES PLASMA LECHE ORINASECRECIONES SEROSAS MUCOSAS

GLUCOLIPIDOS GLUCOPROTEINAS

GRUPOS SANGUINEOS I Se

han descrito ms de 400 antgenos eritrocitarios Cada antgeno est definido por un anticuerpo especfico que reaccionan con l Existen antgenos de alta frecuencia, que no han sido identificado

SISTEMA ABH Antgenos ABH se encuentran en Hematies,

plasma, leche,secreciones,orina y mucosas La presencia de los antgenos A,B,O depende de genes allicos A, B, O. El gen H situado en un locus separado codifica la sustancia sobre la que actan los genes A y B. Estas son unas enzimas que actan como transferasas

SISTEMA ABO II El

gen H produce sustancia H

Estas enzimas(transferasas) transforman la

sustancia H en antgenos A y B

El

gen O es un alelo silencioso que no altera la estructura de la sustancia H

Los individuos que no tienen gen H (genotipo hh)

fenotipo Bombay

PRECURSOR DE TIPO IGal NaGl Unin 1,3 Gal

R

PRECURSOR DE TIPO IIGal NaGl Unin 1,4 Gal

R

H tipo IIgalNaGl

gal

H tipo Igal FucNaGl

Fuc gal 1,2 fucosiltransferasa

ANTIGENO A NaGl Gal Fuc ANTIGENO B Gal Gal Fuc NaGl Gal NaGl Gal

DETERMINACION GENETICAA

= B > 000

Genotipo

AA, A0 BB, B0 AB

Fenotipo

A

B

AB

O

GRUPOS SANGUNEOS, GENOTIPOS AGLUTINOGENOS Y AGLUTININAS

GENOTIPOS

GRUPOS SANGUNEOS

AGLUTINOGENOS

AGLUTININAS

OO OA o AA OB o BB AB

O A B AB

--A B AyB

Antina y anti-B Anti-B Anti-A ---

LOS RESULTADOS:

GRUPOS SANGUINEOS RECEPTORES

COMPATIBILIDAD

FENOTIPO BOMBAY

Fenotipo Bombay

SUBGRUPOS ABO Reactividad Diferencias Cuantitativas Cualitativas

a los antisueros

A1,

A2, Aint, Ax, Ael, etc. B3, Bx, Bel A1B, A2B

ANTICUERPOS ABO

ANTICUERPOS ABO

SISTEMA RHESUS Est constitudo por

40 antgenos distintos, 5 de ellos son importantes Existen 3 nomenclaturas: Fisher-Race, Wiener, Glicoprotena Fisher-Race plantea que se hereda 3 genes muy prximos D y d, C y c, E y e, cada gen codifica para un gen excepto el d La presencia o la ausencia del antgeno D determina si es Rh (+) o (-)

SISTEMA RHESUS II Wiener

plantea que se hereda gen de cada progenitor, y estos tendran una estructura de mosaico que comprendera un nmero variable de antgenos sanguneos. gen R1 codificara para C,D,e

El El

genr codificara para c y e, pero no para D,C ni E

Rhpositivo (85%)

Expresa el antgeno D en los Hemates

Rhnegativo (15%)

No expresa el antgeno D en los hemates ej:dCe / dce

Du Es

una variante dbil del antgeno D, poco frecuente entre los individuos caucasoides, comn en la raza negra( 22%) Los Du dan reacciones dbiles con el anti D, son detectados gracias a la prueba indirecta de la antiglobulina Du es un Rh positivo dbil pero POSITIVO

Anticuerpos del Sistema Rh Casi

siempre son IgG Su produccin es estimulada por transfusiones y por el embarazo No activan el complemento porque antgeno Rh no permite la formacin de dobletes de IgG necesarios Estos anticuerpos pueden causar reacciones transfusionales y enfermedad hemoltica del RN

Organizacin genmica del locus RHgen RHCE Rh(D) positivo 5 gen RHD 3

1

2 3

4 5 6 7

8 9 10

1

2 3

4 5 6 7

8 9 10

Rh(D) negativo

5

1

2 3

4 5 6 7

8 9 10

3

Cromosoma 1p34-36

Lima setiembre 2002

Rh(D) positivo

1 2

3 4 5 6 7

8 9 10

1 2 3

4 5 6 7

8 9 10

600 bp

4D1 600 bp

5D2

4D1 1200 bp

5D2

Rh(D) negativo

1 2 3

4 5 6 7

8 9 10

Mtodo de Arce para la tipificacin molecular del antgeno D

600 bp

4D1 1200 bp

5D2

Lima setiembre 2002

Mtodo de ArceDD+ D-

1200bp 600bp

Otros sistemas de grupoExisten otros sistemas de grupo sanguneo, como el sistema Duffy y el sistema Kell, cuyos polimorfismos han sido tambin caracterizados a nivel molecular. Se han desarrollado tcnicas de tipificacin molecular, basadas en estrategias de tipo PCR-ASRA o PCR-SSP, que ofrecen hoy en da una alternativa a las tcnicas de tipificacin clsicas mediante mtodos serolgicos.

Lima setiembre 2002

Aplicaciones prcticas de la tipificacin molecular de los antgenos eritrocitarios1.- La aplicacin de las tcnicas de Biologa Molecular en la enfermedad hemoltica del recin nacido (EHRN), permite determinar precozmente el genotipo Rh(D) fetal a partir de una muestra delquido amniticoo incluso a partir de clulas fetales presentes en la sangre perifrica materna haciendo posible el planteamiento , de una estrategia profilctica ms racional.Lima setiembre 2002

Aplicaciones prcticas de la tipificacin molecular de los antgenos eritrocitarios2.- Cuando el fenotipo resulta difcilmente interpretable, como sucede con los pacientes recientemente transfundidos, o cuando tcnicamente resulta imposible, como en el caso de los pacientes con anemia hemoltica autoinmune en los que no es factible la tipificacin serolgica.

Lima setiembre 2002

Aplicaciones prcticas de la tipificacin molecular de los antgenos eritrocitarios3.- En el estudio de individuos con fenotipo nulo para

ciertos sistemas de grupo sanguneo as como en el estudio de variantes poco frecuentes.

4.- En el seguimiento del quimerismo post-transplante de clulas precursoras hematopoyticas.

Lima setiembre 2002

El futuroLa posibilidad de generar hemates para deteccin de anticuerpos eritrocitarios utilizando antgenos recombinantes Aplicacin del conocimiento de los polimorfismos y su relacin con determinadas enfermedades Las tcnicas de microseries de DNA permitiran definir el fenotipo completo de un individuo a partir de una pequea muestra de DNALima setiembre 2002

DISCREPANCIAS DE GRUPO SANGUINEODISCREPANCIA DEL GRUPO ABO La interpretacin de las pruebas de determinacin del grupo hemtico no concuerda con las pruebas sericas.

D IS C R E P A N C IA S

DEL

S IS T E M A

A

N

P r u e b a C e l u l a ur e b a S e r i c a Po o I sn ivb el ar u s a s P oe ss iob l ue cs i o n d e l P Pr C es a R A n t i A An t iA- Bn t i - H eB m H- Ae 1m H- B m AO. C G r u p o A e 1 0 0 0 0 0 0 0 2 3 4 5 4+ 4+ 3+ 0 0 4+ 4+ 0 4+ 4+ 4+ 0 1 2 1 4 + + + + 4+ 0 2+ 2+ 0 0 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 0 0 0 0 2+ 0 0 0 0 0

6 0 0 2+ 7 4+ 2+ 4+ 8 1+ 1+ 1+

2+ 0 4+

DISCREPANCIAS ABO Si

Pba Globular y Serica: No Concuerdan Debe Investigarse Unidad de Sangre : No Transfundir Revisar: Historia clnica, Diagnostico, antecedentes, etc. Son Arbitrariamente clasificadas

CLASIFICACION Error

Tcnico Inherente a la clulas Inherente al suero

Grupo

I: Acs Grupo II: Ags Grupo III: Protenas Grupo IV: Mixtos

ERRORES TECNICOS Material

Sucio Contaminacin Suspensiones inadecuado rotulo y/o identificacin Hemlisis Centrifugacin

rG lme ia e ni na

Jos

PROBLEMAS : CELULAS Suspensin

G. Rojos Exceso protenas Post Transfusin Sub. grupos de A, B Expresin dbil Ags Infeccin Gram. (-) Poli aglutinacin Coombs directo

PROBLEMAS SUERO Anti-H,

Anti-A1 Acs irregulares fros Autoacs : anti-I Protenas anormales Rouleaux Expansores plasmticos Ausencia de Acs

Rouleaux.Es la alteracin y la disposicin que va adoptar los glbulos rojos en forma de moneda o en fila. A veces, es fcilmente reconocible pero en otras ocasiones los agregados son irregulables

Anormalidades en el suero que causa discrepancia